恩诺沙星壳聚糖纳米粒的制备及其体外释药特性研究

建立了离子交联法制备恩诺沙星壳聚糖纳米粒的方法,并优化了工艺条件,以低温超速离心法评价了恩诺沙星壳聚糖纳米粒包封率.利用透射电子显微镜分析了恩诺沙星壳聚糖纳米粒的显微形态,以透析法测定其体外释放度.结果表明:恩诺沙星壳聚糖纳米粒呈球形,外观形态饱满,表面光滑,分散性良好,平均粒径为(131.1±10.2) nm,平均包封率51.2%±2.9%.相比恩诺沙星原料药,恩诺沙星壳聚糖纳米粒在1 h内减少约60%药物的释放,24 h总释放度为79.9%.说明利用离子交联法制备恩诺沙星壳聚糖纳米粒快速、简便、操作性强,恩诺沙星壳聚糖纳米粒制剂缓释性能强,适于作为新剂型在水产药物中应用.     

β-胡萝卜素壳聚糖纳米粒制备工艺优化

以β-胡萝卜素为试验材料,通过离子交联法构建β-胡萝卜素纳米粒,在不同药载比、温度、pH下研究其载药率和包封率的变化趋势,并对其进行优化设计.结果表明:β-胡萝卜素壳聚糖纳米粒的载药性能最佳工艺条件为药载比6:1、温度30℃、pH 5,在此条件下包封率为61.74％,载药率16.42％.由此可见,通过离子交联法构建β-胡萝卜素纳米粒具有良好的包封率和载药率.     

迷迭香精油壳聚糖纳米粒的制备及其对冷藏草鱼保鲜效果研究

为探讨迷迭香精油壳聚糖纳米粒对冷藏(4℃)草鱼肉的保鲜效果,利用离子交联法制备迷迭香精油壳聚糖纳米制剂(CS-NP-REO)并优化其制备工艺。通过超滤离心法测定纳米粒包封率和载药量,在扫描电镜下观察其粒径大小和外观形态,进一步测定其对冷藏草鱼肉的保鲜效果。结果表明:在壳聚糖(CS)、三聚磷酸钠(TPP)和迷迭香精油(REO)质量浓度分别为2、1.5和2mg/mL,体积比5∶2∶1,pH 4的条件下制备的CS-NP-REO纳米粒包封率为84.52%,载药量为10.56%,粒径约200nm,颗粒饱满,大小均一;用CS-NP-REO处理过的冷藏草鱼肉片,在贮藏第7天时菌落总数为3.55×10~6 CFU/g、硫代巴比妥酸值(TBARS)为0.61×10~(-3) mg/g、挥发性盐基氮值(TVB-N)为18.74mg/hg,货架期为8d以上,相比对照组延长3～4d,其保鲜效果优于迷迭香精油和壳聚糖纳米粒的单独使用。说明迷迭香精油壳聚糖纳米粒具有抑制微生物生长及脂肪氧化、延长冷藏草鱼肉货架期的作用。     

肉桂精油壳聚糖纳米粒在冷却肉保藏中的应用

【目的】制备肉桂精油壳聚糖纳米粒,以扩大肉桂精油(CEO)在冷却肉保鲜中的应用范围,克服其易挥发的缺陷。【方法】采用离子凝胶法制备肉桂精油壳聚糖纳米粒。通过透射电镜(TEM)、扫描电镜(SEM)对肉桂精油壳聚糖纳米粒的形态进行表征,测定其包封率。分别配制质量分数为3%和6%的肉桂精油壳聚糖纳米粒保鲜剂(CEO质量分数分别为0.2%和1.0%),用其处理冷却猪肉,检测其对肉样色泽(L值、a*值、b*值)、TBARS值、pH和菌落总数的影响。【结果】制备的肉桂精油壳聚糖纳米粒颗粒大小均匀、形态饱满、呈规则球形,冻干后形态仍较为均匀,包封率为(37.5±2.1)%。通过对冷却肉色泽、TBARS值、pH及菌落总数的分析得知,包埋质量分数1.0%肉桂精油的肉桂精油壳聚糖纳米粒试验组的冷却肉在(4±0.5)℃时储藏期可达到6d。【结论】制备的肉桂精油壳聚糖纳米粒表征良好,可在一定程度上延长冷却肉的贮藏期。     

AHLL纳米粒制备工艺的研究

以活性降压肽丙氨酸-组氨酸-亮氨酸-亮氨酸(Ala-His-Leu-Leu,简称AHLL)为包载物,采用乳化溶剂挥发法技术制备AHLL的聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly(lactic-co-glycolic acid),简称PLGA]纳米粒,以包封率为评价指标,优化试验条件,测定目标产物的粒径及电位,并通过扫描电镜观察纳米粒的表面形貌。结果显示,最佳制备条件为乳化剂聚乙烯醇浓度0.02%,聚合物PLGA浓度25%,AHLL浓度2.0%,水油相体积比15∶1,该条件下制备的AHLL纳米粒包封率高,平均粒径小,纳米粒为表面比较光滑的球形。与空白纳米粒相比,载有AHLL的PLGA纳米粒平均电位增大,纳米粒体系更加稳定。     

离子交联法制备壳聚糖纳米颗粒

[目的]探讨离子交联法制备壳聚糖纳米颗粒的最佳条件。[方法]先采用专一性壳聚糖内切酶酶法制备低分散度壳聚糖,再采用多聚磷酸钠间静电作用的离子交联法制备壳聚糖纳米颗粒,探讨了反应体系pH、超声时间、壳聚糖浓度、多聚磷酸钠(TPP)浓度及二者体积比对壳聚糖纳米颗粒平均粒径的影响。[结果]在采用离子交联法制备壳聚糖纳米颗粒的过程中,当反应体系的pH为6.0,壳聚糖浓度为0.7 mg/ml,TPP浓度为0.5 mg/ml,壳聚糖溶液与TPP溶液的体积比在3∶1～7∶1,超声时间为2 min时,所制备的壳聚糖纳米颗粒分散性好,平均粒径为141.3 nm。[结论]离子交联法制备壳聚糖纳米颗粒过程简单,作用时间短,不使用有机溶剂,得到的壳聚糖纳米颗粒粒径小,分布均匀,且结果重现性较好。     

卡瓦脂质体纳米颗粒制备及其稳定性的研究

目的制备包载卡瓦的脂质体纳米颗粒并研究其稳定性。方法采用旋转薄膜蒸发法制备卡瓦纳米制剂,并对其形貌、大小等进行表征,考察纳米颗粒的稳定性。结果卡瓦脂质体纳米颗粒平均粒径为（99．7±7．6）nm,多分散系数为0．321±0.011,Zeta电位为（-33．9±2．3）mV,包封率为（83．32±0．34）％;纳米溶液于4℃下放置60d,其纳米粒外观、粒径及包封率无明显变化,差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论卡瓦脂质体纳米颗粒的包封率较高,粒径分布均匀,稳定性良好,为卡瓦的新剂型开发提供了实验依据。     

长春碱纳米粒的制备及其抗肿瘤活性

以右旋糖苷为稳定剂,通过乳化聚合法制备长春碱聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒,检测其基本性质（形态、粒径分布、包封率和载药量）。通过MTT法检测长春碱纳米粒对神经胶质瘤细胞BT325的细胞毒性作用、经倒置显微镜观察和HE染色,探讨了长春碱纳米粒对神经胶质瘤细胞BT325形态的影响。结果显示,长春碱纳米粒平均粒径为74．4am,包封率为78．47％,载药量为39．24％。与长春碱原料药组相比,长春碱纳米粒组细胞吸光度显著降低,细胞数量明显减少,凋亡细胞增多。聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒可作为长春碱进入胶贡瘤细胞的有效载体。     

包载盐酸小檗碱的磷脂/壳聚糖自组装纳米粒构建及表征

磷脂/壳聚糖自组装纳米粒(lecithin/chitosan nanoparticles,L/CS NPs)是通过磷脂与壳聚糖的静电作用而自组装形成的一种特殊聚电解质复合物,可作为药物载体,有利于提高难溶性药物的口服利用度。本研究中,以难溶性药物盐酸小檗碱为目标递送药物,构建了包载盐酸小檗碱的磷脂/壳聚糖自组装纳米粒,并建立了包封率测定方法。通过正交设计,以包封率为指标,筛选出制备载药自组装纳米粒的最优处方,其中水相pH值为8.0、V_(乙醇)∶V_水=8∶92、m_(磷脂)∶m_(壳聚糖)=20∶1。在优选处方下,制备的载药自组装纳米粒的平均粒径为(214.8±9.3)nm、Zeta电位为(24.3±3.1)mV、包封率为(82.4±5.2)%,4℃下可稳定存放3个月。该研究为后期实际应用奠定了基础。     

载HarpinXooc蛋白纳米粒的制备及生物学效应测定

为了评价载HarpinXooc蛋白纳米粒的性状及其在农业领域的应用效果,利用静电聚合原理,以壳聚糖为载体,多聚磷酸钠为交联剂制备载HarpinXooc蛋白纳米粒,测定其粒径、zeta电位、包封率、载药量和释放情况,考察振荡时间对纳米粒的影响.结果显示:载HarpinXooc蛋白纳米粒形态均一,粒径、zeta电位、包封率和载药量分别为(270.0±3.0)nm、(16.5±0.9)mV、62.7%±1.8%和12.6%±2.4%,具有缓释效应,可以诱导烟草产生过敏性反应和更好地促进植物生长.表明:此方法制备条件缓和,工艺简单,包封率较高,制得的载HarpinXooc蛋白纳米粒生物学效应好.     

除虫菊素热稳定性分析

[目的]分析除虫菊素的热稳定性。[方法]研究了除虫菊素原药、5%除虫菊素丙酮液、不同含水量的5%除虫菊素丙酮液及不同pH条件下的5%除虫菊素丙酮液分别在（0±1）℃、25℃（室温）、（54±1）℃条件下保存的热稳定性。[结果]除虫菊素原药和除虫菊素丙酮液在热贮条件下都不稳定;水分是促进除虫菊素分解的一个重要因素;酸碱条件对除虫菊素的分解均有影响。[结论]为开发和合理应用除虫菊素产品提供了理论依据。     

Peatl蛋白及其3个缺失突变体的表达与热稳定性分析

从极细链格孢菌中提取出一种植物激活蛋白,后命名为Peatl,其分子量为35 kD。该蛋白具有良好的热稳定性。生物信息学分析显示,Peatl含有2个保守结构域,即NAC（Nascent polypeptide-associated complex）和UBA（Ubiquitin-associated）结构域。该文将Peatl在E.coli中进行克隆和表达,并构建3个缺失突变体,拟对赋予Peatl热稳定性的区域进行初步定位。     

Peat1蛋白及其3个缺失突变体的表达与热稳定性分析（英文）

[Objective] The research aimed to reveal the functions of NAC and UBA domains in Peat1's thermal stability.[Method] Fusion expression vectors of Peat1 protein and the 3 deletion mutants were constructed.The recombinant plasmids were induced by IPTG and the target proteins(Peat1,Peat1-△CD99,Peat1-△ND49 and Peat1-△ND108)were expressed obtained by AKTA and its thermal stability was analyzed.[Result] The research found that 3 deletion mutants have good thermal stability like Peat1.[Conclusion] The research demonstrated that the coexistence of NAC or UBA domains is not necessary to thermal stability of Peat1 protein,and they may give the protein particular stability structure seperately.     

重金属镉螯合物人工抗原的合成与鉴定

[目的]合成并鉴定重金属镉螯合物抗原。[方法]以乙二胺四乙酸(EDTA)或二乙烯三胺五乙酸(DTPA)为双功能螯合剂,合成了半抗原,并将半抗原与载体蛋白钥孔戚血蓝素(KLH)或卵清蛋白(OVA)偶联制备完全抗原,对其进行浓度测定、紫外分光光度计扫描、SDS-PAGE电泳定性鉴定和石墨炉原子吸收光谱法检测。[结果]利用二喹啉甲酸(BCA)法检测分离纯化后的的Cd-DTPA-OVA、Cd-EDTA-KLH、DTPA-OVA和EDTA-KLH中蛋白的实际浓度依次为1.862±0.038、5.121±0.024、25.155±0.014和8.459±0.018mg/m l,紫外扫描和电泳鉴定证明,抗原合成成功;用吸收光谱法检测的上述抗原中的镉离子含量依次为34.6±0.3、96.5±0.5、0和0μg/m l,表明半抗原确实偶联到蛋白质上,进一步证明抗原合成成功。[结论]该研究为重金属螯合物单克隆抗体的制备和建立快速检测方法奠定基础。     

臭柏枝叶精油的体外抑菌活性

[目的]探讨臭柏精油在抑菌、抗菌领域应用前景。[方法]采用纸片扩散法、连续稀释法和自然沉降法对臭柏精油体外抗菌活性进行了测定。[结果]臭柏精油对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、黑曲霉、酵母菌的抗菌圈直径分别为（16．2±2．3）、（8．4±1．3）、（26．2±5．1）、（16．7±2．1）、（18．0±2．4）mm;最低抑菌浓度（MIC）分别为0．50％、10．00％、0．25％、7．50％和0．50％。对室内空气中菌类的平均抑菌率达43．3％。臭柏精油对5种菌的抑菌活性强度为枯草芽孢杆菌〉大肠杆菌、酵母菌〉黑曲霉〉金黄色葡萄球菌。[结论]臭柏精油有较强的抑菌活性,是一种很有价值和开发前景的芳香油植物资源。     

5种中药对茄二十八星瓢虫孵化、产卵的影响

[目的]为有效防治茄二十八星瓢虫提供试验依据。[方法]通过孵化率试验和强迫取食试验测试黄连、黄柏、丹皮、百部、野菊花的水提取物对茄二十八星瓢虫卵的孵化、成虫产卵的影响。[结果]黄柏提取物处理的卵的孵化率为(48.7±4.7)%;野菊花和丹皮提取物的分别为(54.6±10.1)%和(61.7±24.5)%;黄连和百部提取物的分别为(89.7±4.3)%和(94.6±4.8)%。黄连提取物处理的成虫的产卵量为(89.3±7.6)粒;丹皮和野菊花提取物的分别为(106.7±12.1)和(110.3±11.2)粒;百部和黄柏提取物的分别为(154.2±9.8)和(165.3±20.3)粒。[结论]这5种中药水提取物对茄二十八星瓢虫卵的孵化、成虫产卵均有不同程度的影响,黄柏水提取物对其孵化率影响最为显著,黄连水提取物对其成虫产卵的抑制作用最为显著。     

苗药大果木姜子总黄酮与糖类成分含量测定

[目的]建立测定大果木姜子中总黄酮、总糖、还原糖、多糖含量的方法。[方法]以芦丁和葡萄糖为对照品,采用紫外分光光度计测定大果木姜子中总黄酮、总糖、还原糖、多糖的含量并进行方法学考察。[结果]大果木姜子中总黄酮含量为(8.02±0.19)mg/g,总糖含量为(35.26±0.96)%,还原糖含量为(4.78±0.95)%,多糖含量为(30.53±0.69)%。[结论]该方法快速、简便、准确,可以用于大果木姜子中总黄酮、总糖、还原糖、多糖的含量测定。     

糖基转移酶基因sm-Ngt1对水稻株高的影响

[目的]研究烟草中受甲基茉莉酸和水杨酸双重诱导的糖基转移酶基因sm-Ngt1过表达对水稻生长的影响。[方法]构建sm-Ngt1的植物表达载体,采用农杆菌浸染法转化籼稻粤泰B,对获得的阳性转基因植株进行高度检测。[结果]共获得117株阳性转sm-Ngt1植株。在成功转入sm-Ngt1基因后,水稻植株出现了不同程度的矮化,其中37%的转基因植株高度为（71.4±9.8）cm,27%的转基因植株高度为（65.1±4.6）cm,而未转基因的对照YTB平均高度为（130.0±4.3）cm。[结论]该研究为研究sm-Ngt1的功能奠定了基础。     

中草药免疫增强剂的稳定性研究

[目的]了解温度、湿度、光照对中草药免疫增强剂稳定性的影响。[方法]用索氏提取器提取免疫增强剂的主要成分,将提取液分别放置于-15、60℃的75%±5%、90%±5%的湿度环境中(、4 000±1 000)lx强光照射下,分别于第5、第10天进行取样分析,观察颜色变化、测pH值及其在220~400 nm的吸光度曲线,应用分光光度法分析了中草药免疫增强剂在低温、高温、高湿、强光照射的条件下处理后其化学和物理性质的变化。[结果]免疫增强剂提取液中的主要成分(生物碱、甙类、多糖)在低温、高温、高湿条件下没有明显变化。在强光照射条件下提取液颜色变淡,pH值降低。[结论]免疫增强剂提取液在低温、高温、高湿条件下比较稳定,但应避光保存。     

南疆冬枣的营养及挥发性成分分析

[目的]客观揭示南疆地区鲜食冬枣的品质。[方法]采用HPLC、GC-MS等方法对冬枣的营养及挥发性成分进行分析。[结果]冬枣含有VC含量（161.859 3±13.509 2）mg/100 g鲜枣,总糖（55.384 5±2.539 2）%,总酸（1.384 7±0.115 5）%,粗脂肪（4.275±0.191）%,cAMP（0.228±0.020）mg/g,检出15种氨基酸（包含6种必需氨基酸）。挥发性成分中鉴定出40种化合物,其主要成分为酯类、烷烃类、醇类和胺类。[结论]冬枣是一种有较高营养价值的水果。