山东鲜食葡萄主要类病毒的鉴定及序列分析

【目的】通过对山东省鲜食葡萄主产区采集的149份疑似感病葡萄叶片进行RT-PCR检测,明确本地区类病毒的发生情况及种类,并进行序列分析。【方法】提取叶片总RNA后,用目前国内报道的葡萄黄斑类病毒1(Grapevine yellow speckle viroid 1,GYSVd1)、葡萄黄斑类病毒2(Grapevine yellow speckle viroid 2,GYSVd2)、澳大利亚葡萄类病毒(Australian grapevine viroid,AGVd)、啤酒花矮化类病毒(Hop stunt viroid,HSVd)和柑橘裂皮类病毒(Citrus exocortis viroid,CEVd)的特异性引物对采集的具有黄化、斑驳、皱缩和畸形症状的葡萄叶片进行RT-PCR检测并测序,同时建立系统进化树。【结果】GYSVd1、GYSVd2、AGVd和HSVd均得到了预期大小的目的片段。测序表明,山东省鲜食葡萄主产区GYSVd1、GYSVd2、AGVd和HSVd的分离物序列与Gen Bank已报道分离物序列一致性均超过90%。【结论】山东省鲜食葡萄主产区受到上述4种类病毒的侵染,并且在自然条件下常发生复合侵染。其中GYSVd2为山东首次报道。     

柑桔裂皮类病毒研究进展

<正>柑桔裂皮病是柑桔的主要病害之一,严重影响世界范围内柑桔的生产。起初认为柑桔裂皮病是由病毒引起的,但是进一步的研究表明该病的病原是类病毒。柑桔裂皮类病毒(citrusexocortis viroid,CEVd)属于马铃薯纺锤块茎类病毒属(Pospiviroid),大小一般为370-375nt(核苷酸),1994年Semancik等报道了一个大小为463 nt的该类病毒突变株,具有棍棒状二级结构。它的热钝化温度高,110℃下保持10-15分钟,仍不丧失其侵染力,到140℃热致死点时,感染性才呈线性下降。     

柑橘黄龙病、裂皮病和衰退病病原的多重RT-PCR检测

 建立了一种同时检测柑橘黄龙病病原类细菌(Candidatus L iberibacter asiaticus, HLB) 、柑橘裂皮类病毒(Citrus exocortis viroid, CEVd) 、柑橘衰退病病毒(Citrus tristeza virus, CTV) 的多重RT-PCR技术体系。运用根据3 种病原核苷酸保守区序列设计的特异性引物, 成功的对同一样品中的HLB、CEVd、CTV进行多重RT2PCR扩增, 得到1 160 bp、371 bp、273 bp 3条特异性大小与试验设计相符的条带。就影响多重PCR 的主要因素引物浓度和退火温度进行了一系列优化, 建立了能同时检测HLB、CEVd、CTV的多重RT2PCR技术体系。该体系最低能从10 pg总RNA中检测出黄龙病类细菌和柑橘裂皮类病毒, 从1 pg总RNA中检测到柑橘衰退病毒。对采自田间37份材料的实际检测表明: 存在两种或3种病原的复合侵染。     

杏和李树啤酒花矮化类病毒的检测与序列分析

 从无明显症状表现的24个杏样品, 37个李样品的1年生枝条表皮中抽提低分子RNA进行DIG-cDNA斑点杂交、RT-PCR、正反向聚丙烯酰胺凝胶电泳(Return-PAGE) 和生物学检测。结果表明: 杏有3个样品, 李有6个样品带有啤酒花矮化类病毒(Hop stunt viroid, HSVd) 。从这9个样品中选a5、a17、p6、p16 进行克隆和测序分析。所得序列与GenBank中已报道的HSVd序列同源性达99.0% ～99.7% , 且序列变异与地域、寄主等无明显相关性, 说明HSVd的序列是比较保守的。     

苹果锈果病的发生途径与预防措施

苹果锈果病（Apple scar skin viroid ASSVd）又称“花脸病”,是苹果生产中毁灭性的类病毒病害之一。类病毒（Viroids）是一种具有传染性的单链RNA病原体,它比病毒要小,并且没有病毒所有的蛋白质外壳。类病毒为典型的寄生物,感染性很强,感染苹果植株后整合到植株的细胞核内进行复制,并能通过种子或花粉传播。该病属于苹果锈果类病毒属（Apscaviroid）,基因组大小为329或330bp,可引起果实变扁、花脸、畸形和裂果,枝干和叶片感病后一般不出现症状。幼树期不易出现病症,结果后出现病症,目前尚无有效的药物防止该病的发生。不同的品种感染该类病毒的程度不同,早生富士、富士王、红将军品种发病较重。近几年该病害有发生上升的趋势。     

类病毒

一、前言新型病原体类病毒的发病过程和传染方法与一般病毒十分相似,但远较病毒为小,并且它仅由核糖核酸(RNA)构成,1971年首先发现。病毒在核酸之外还包有蛋白质外壳,类病毒则是裸核酸,外面没有蛋白质外壳,其重量也只有最轻病毒重量的1/20;因为它和病毒都带有遗传子核酸,所以命名为类病毒。世界各地已经发现的类病毒共有8种,它们都是核糖核酸性(RNA)的,还没有发现过脱氧核糖核酸(DNA)构成的类病毒。其分子量为10—12万道尔顿,沉降系数为6—10     

新发现的柑桔类病毒

很早以前知道柑桔裂皮病的病原是类病毒(柑桔裂皮类病毒CEV),可用埃特洛枸橼(Etrog citron)和爪哇三七的嫁接,汁液及伤口接种进行鉴定。根据这些指示植物的反应,知道在所谓的裂皮病植株中存在着弱毒系。Schlemmer等(1985)从表现裂皮病症状的枸橼中分离出类病毒状核糖核酸,命名为枸橼类病毒变株(CVaV)。日本佐佐木(1985)和加纳(1985)也报道埃特洛枸橼的反应是柑桔裂皮病的弱毒系。 作者等与广岛县果树试验场的佐佐木笃共同研究,探讨这种弱毒柑桔裂皮病的症状与类病毒的关系。从强毒系、弱毒系症状和健康的埃特洛枸橼的叶中提取低分子量的核     

云南省苹果主要病毒与类病毒的调查与检测

系统调查了云南省昭通、马龙与丽江3个苹果产区主栽品种叶部病毒病与果实锈果病的发生情况。结果表明,苹果叶部病毒病与果实锈果病在云南省3个产区都有发生,不同产区与品种发生有明显差异。应用ELISA与RT-PCR方法检测来自以上3个产区苹果主栽品种的主要病毒与类病毒带毒率,结果显示:苹果花叶病毒(ApMV)、苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)与苹果锈果类病毒(ASSVd)分布普遍,在昭通、马龙与丽江3个产区均检出,检出率最高的是苹果锈果类病毒(ASSVd),苹果茎沟病毒(ASGV)只在昭通、丽江产区检出;不同品种对不同病毒与类病毒具有不同的检出率,苹果锈果类病毒检出品种最多,检出率也最高,苹果花叶病毒次之,苹果茎沟病毒与苹果褪绿叶斑病毒分别只在少数品种检出,检出率不高。研究结果为云南省建立无病毒种苗检测体系、指导病毒病防控提供参考。     

RNA分子在植物韧皮部长距离运输的研究进展

 RNA分子存在于植物韧皮部筛分子中,且能进行长距离运输,这是植物界一个突破性的发现。现已发现有3类RNA存在于韧皮液内,包括外源类病毒或RNA病毒,植物内源mRNA和非编码小RNA。韧皮液内RNA分子的长距离移动可作为系统信号分子介导植物生长发育的调控。本文就韧皮液的取样方法,韧皮液内存在的RNA分子及其介导的信号调控和运输机制等进行了综述。     

常见易混淆园林植物的识别

在园林绿化工程中很可能因不能准确识别植物种类而造成工程质量不符合合同要求,从而带来巨大损失。工程中出现品种混乱的原因很多,文章着重论述华中地区一些常见易混淆园林植物的分辨要点。     

越橘葡萄座腔菌枝枯病的病原菌鉴定

 通过形态学观察、诱导产孢、致病力测定和分子生物学研究,对引起辽宁地区越橘枝枯病 的病原菌进行鉴定,确定其为葡萄座腔菌（Botryosphaeria dothidea）。病原菌在越橘植株上接种后表现枝 条枯萎、木质部变色等症状,与田间自然发病植株一致;在PDA 培养基上菌落初期为白色,后转为灰黑 色,分生孢子纺锤形或梭形,无色,单胞,内含多个油滴;水琼脂 + 麦芽提取物、苹果枝条和苹果幼果 3 种病原菌培养方法均可诱导产孢,苹果幼果是诱导病原菌产孢的最佳基质。供试菌株LB1 的rDNA-ITS 和β-tubulin 基因序列与GenBank 中已有的Botryosphaeria dothidea 序列相似性分别达到99%与100%。     

浙江省代料香菇病虫害调查

上世纪八十年代以来,浙江省代料香菇产业快速发展。随着代料香菇栽培技术在该省推广应用年限的延长,一些传统的当家品种抗性逐年下降,而适应这种特殊栽培环境的杂菌、病原微生物、害虫基数却在不断积累和增加,使得香菇生长和发育的各个阶段均受到不同程度的危害,造成香菇产量与     

苹果抗轮纹病机制研究进展

在中国引起苹果轮纹病的病原菌为葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea),其主要通过自然孔口直接侵染苹果,并分泌细胞降解酶等使苹果组织降解以促进病菌的进一步侵染,而苹果可通过增强细胞壁的木质化、释放抗菌化合物以及产生免疫蛋白等抑制病菌。通过对苹果轮纹病的危害及病原菌种类、病菌侵染机制、苹果的抗性机制等方面的详细综述,为有效防治苹果轮纹病提供理论依据。     

苹果主要害虫的演变及原因分析

苹果园内植食性昆虫种群数量的上升和主要种类的变替,原因是多方面的.其主要虫害会随着农药的施用、品种的替换、不同的农事而发生变化,因此不同年代主要的虫害并不恒定,随着时间而变化.对我国苹果主要产区过去50多年重要害虫的发生及种类演替进行综述,并分析其原因.导致演替的主要原因有以下几种:不合理使用农药;新的管理措施的应用,如套袋技术、生草果园及生态苹果园的推广等;新害虫的入侵等.     

诱木引诱剂不同浓度防治松褐天牛试验

诱木引诱剂防治松褐天牛试验结果表明3倍液是最佳经济浓度。松褐天牛是一种危害较大的蛀干类害虫,在印江县主要危害马尾松、华山松,该虫1年发生1代,以老熟幼虫在蛀道内越冬,翌年3月下旬开始化蛹,4月下旬开始羽化,5月中旬开始产卵。它危害严重防治困难,任其发展,必将猖獗成灾。松材线虫病,一旦传入,将能以极快速度扩散蔓延,对印江...     

枸杞采后病害及主要病原真菌的分离与鉴定

本文对枸杞采后病害进行了分离、鉴定的研究。从病害的枸杞中分离得到了5株真菌菌株,回接后,发现病害与自然发病症状一致,而且从接种的枸杞果实上又得到了此病病原真菌,经鉴定和致病性确定,确定为真菌：青霉属、链格孢属、曲霉属中的黑曲霉、木霉属、黄曲霉,它们都是该品种枸杞的主要致腐病原真菌。     

山东省芍药红斑病病原菌鉴定

从山东菏泽和泰安两地感病芍药（Paeonia lactiflora Pall.）植株的叶片上进行了红斑病病原分离纯化和致病力检测,并对致病菌进行了形态学鉴定及rDNA-ITS 序列分析。研究结果表明,病样组织中可分离到两种疑似病原菌,分离比例为4.8︰1,初步鉴定为链格孢（Alternaria alternata）和细极链格孢（A. tenuissima）。进一步rDNA-ITS分析结果表明,两种病原菌5.8S rDNA及其两侧ITS区序列分别与GenBank中序列号为KF380822.1、HM467832.1的同源性最高,均为99%,由此确定两种病原菌分别为链格孢Alternaria alternata和细极链格孢A. tenuissima,其序列已在GenBank登录,登录号分别为KR912224和KR912225。因此,确定山东省芍药红斑病是由链格孢A. alternata和细极链格孢A. tenuissima两种病原菌引起的复合侵染。     

茎瘤芥（榨菜）黑斑病菌的分离与鉴定

对茎瘤芥黑斑病进行分离鉴定,以明确其分类地位。通过致病性测定、形态学观察及PCR鉴定,试验结果表明,茎瘤芥黑斑病的病原菌为半知菌亚门链格孢属芸薹链格孢Alternaria brassicae。