犬腹主动脉瘤模型的快速建立

用弹力蛋白酶直接破坏犬腹主动脉管壁中膜的弹力板结构,快速构建一种适用于腔内治疗研究的犬腹主动脉瘤疾病模型.手术分离犬腹主动脉2 cm左右,将5 mL弹力蛋白酶(100 U/mL)注射到犬腹主动脉管壁中膜,导致犬腹主动脉管壁中膜结构和负荷失衡,不能抵抗管腔内血流压力而发生阶段性扩张.超声每天观察并记录犬腹主动脉瘤样扩张情...     

有氧运动对兔骨关节炎软骨细胞凋亡及相关基因蛋白表达的影响

探讨有氧运动对兔骨关节炎软骨细胞凋亡及Bcl-2、Bax、MMP-2、MMP-13、β-catenin、GSK-3β蛋白表达的影响。建立兔骨关节炎(OA)模型,试验分为空白对照组、模型对照组、低强度运动组、中等强度运动组。TUNEL标记法检测不同强度有氧运动对关节炎软骨细胞凋亡的影响;Western blot检测Bcl-2、Bax、MMP-2、MMP-13、β-catenin、GSK-3β蛋白表达。模型对照组、低强度运动组、中等强度运动组关节炎软骨细胞凋亡率均显著高于空白对照组,低强度运动组、中等强度运动组关节炎软骨细胞凋亡率均显著低于模型对照组,中等强度运动组关节炎软骨细胞凋亡率显著低于低强度运动组(P0.01);模型对照组、低强度运动组、中等强度运动组关节炎软骨细胞Bcl-2、MMP-2、MMP-13、β-catenin、GSK-3β蛋白表达均显著高于空白对照组,Bax蛋白表达显著低于空白对照组;低强度运动组、中等强度运动组关节炎软骨细胞Bcl-2、MMP-2、MMP-13、β-catenin、GSK-3β蛋白表达均显著低于模型组对照组,Bax蛋白表达显著高于模型对照组;中等强度运动组关节炎软骨细胞Bcl-2、MMP-2、MMP-13、β-catenin、GSK-3β蛋白表达均显著低于低强度运动组,Bax蛋白表达显著高于低强度运动组(P0.01)。不同强度有氧通过调节Bcl-2和Bax蛋白表达降低关节炎软骨细胞凋亡,并下调MMP-2、MMP-13,降低软骨细胞的损伤,其机制与下调Wnt/β-catenin信号通路有关。     

去甲肾上腺素对犬腹主动脉瘤的影响

探讨不同剂量去甲肾上腺素(norepinephrine, NE)对犬腹主动脉瘤(abdominal aortic aneurysm, AAA)的影响。选取健康成年比格犬12只,雌性,体质量(11±1.5) kg,随机分为4组,每组3只,分别设NE低剂量组(0.2μg·kg^-1·min^-1)、中剂量组(0.4μg·kg^-1·min^-1)和高剂量组(0.8μg·kg^-1·min^-1),对照组每次只给予5%葡萄糖氯化钠注射液60 mL。手术分离腹主动脉并做血管插管,将弹力蛋白酶注射到腹主动脉插管段中膜,使注射部位形成AAA。在AAA形成后,静脉滴注不同剂量NE和5%葡萄糖氯化钠注射液,速度为60 mL/h,每天1 h,连续用药14 d。BL-420 N生物信号采集器监测AAA内血压变化,B超监测AAA直径及血流速度变化,计算机数值模拟血管壁面剪切应力(wall shear stress, WSS)变化;停药21 d后,牺牲试验犬,做HE和EVG切片染色观察AAA...     

原花青素对动脉粥样硬化模型家兔MMP-9表达的影响

探讨原花青素对家兔动脉粥样硬化模型基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。将24只新西兰白兔随机分为对照组(n=8)、模型组(n=8)和原花青素组(n=8)。模型组给予高脂日粮,原花青素组在模型组的基础上加用原花青素。采集试验前及喂食12周后试验兔的耳缘静脉血,检测静脉血中血脂水平的变化,观察主动脉病理形态学变化情况,用免疫组织化学方法检测MMP-9的表达。结果显示,在高脂日粮喂养的模型组中MMP-9表达明显升高,主动脉的病理形态学变化严重;而原花青素组主动脉病变明显减轻,MMP-9蛋白表达明显下降(P0.05)。表明原花青素对于动脉粥样硬化的发展具有抑制作用,这一作用可能是通过抑制MMP-9的表达来实现。     

兔腹主动脉粥样硬化模型的建立

为建立兔腹主动脉粥样硬化模型,将60只新西兰大耳白兔随机分为高脂饲料和普通饲料两组喂养每组30只,定期测量体重和血脂类指标,18周处死动物,观察腹主动脉形态结构。结果表明,高脂饲料兔血脂类指标升高,血管内壁脂质沉积,镜下见内皮细胞脱落缺失,多层泡沫细胞堆积,平滑肌细胞减少或增生,弹力蛋白和胶原糖蛋白基质成分增多等改变,表明动物模型建立成功。     

山羊MMP-9基因cDNA的克隆及生物信息学分析

为了克隆山羊基质金属蛋白酶-9(MMP-9)基因的cDNA片段,分析其基因序列,试验于无菌条件下采集泌乳期奶山羊乳腺组织并提取总RNA。根据已知其他物种的MMP-9基因保守性区域设计特异性引物,采用RT-PCR方法扩增MMP-9基因的CDS区,测序后对核苷酸和推导的氨基酸序列进行分析,并对8个物种进行聚类分析。结果表明:得到长度为2 245 bp的MMP-9基因cD-NA片段(GenBank登录号为JQ670877),其中包含2 130 bp的CDS全长;核酸序列分析结果显示,该基因编码709个氨基酸,与人、小鼠和牛的核苷酸序列进行比对,相似性分别为84%、80%、96%,氨基酸相似性分别为79%、73%、94%。     

频谱仪照射对兔创伤愈合及生理指标的影响

频谱仪照射对兔创伤愈合及生理指标的影响陈钟鸣邓雯秦翠丽时庆华＊王荣（河南省洛阳农业高等专科学校，４７１００３）频谱仪是近年来在我国医疗保健方面广泛使用的一种光谱仪，据报道，对人的炎症、风湿病、消化系统和呼吸系统疾病及其它一些疾病均有一定的疗效。我们拟...     

肉牛血清基质金属蛋白酶2、9、13浓度与血清抗氧化指标及肉品质指标的相关关系

本研究旨在揭示肉牛血清基质金属蛋白酶(MMP)2、9、13浓度与血清抗氧化指标和肉品质指标的相关关系.试验选取健康状况良好、体重相近的杂交育肥公牛[西门塔尔牛×延边黄牛,初始体重(436±35)kg]52头,饲喂相同的全混合日粮(TMR).饲养试验结束前1天在晨饲前采集每头牛的血液,制备血清,测定MMP2、9、13浓度...     

寡果糖诱导瘤胃急性酸中毒对山羊瘤胃发酵、蹄组织结构及炎症因子、金属蛋白酶表达的影响

本试验旨在研究寡果糖诱导瘤胃酸中毒对山羊瘤胃发酵、蹄组织结构、蹄部炎症因子及金属蛋白酶表达的影响。采用随机区组设计,将8头健康装有永久性瘤胃瘘管的波杂山羊(波尔山羊×长江三角洲白山羊)随机分为对照组和诱导酸中毒的试验组,每组4头。其中试验组山羊瘤胃寡果糖灌注量为21 g/kg BW。分别于灌注前(0 h)和灌注后4、8、12、24和48 h采集瘤胃液,同时分别在0、4、8、24和48 h通过颈静脉采集血液,灌注后48 h屠宰2组山羊,采集蹄组织。结果表明:与对照组相比,试验组山羊瘤胃液p H、挥发性脂肪酸浓度平均值显著降低(P0.05),血液和瘤胃液中乳酸和脂多糖浓度平均值显著提高(P0.05);组织形态学结果显示,与对照组相比,试验组山羊蹄组织中次级表皮蹄小叶和次级真皮蹄小叶的长度变短,蹄小叶形状不规则;实时定量PCR检测结果显示,较对照组比较,试验组山羊蹄组织中基质金属蛋白酶组织抑制物-1的mRNA的相对表达量显著降低(P0.05),白细胞介素-6、膜型基质金属蛋白酶-1和基质金属蛋白酶-2的mRNA的相对表达量显著升高(P0.05)。结果提示,寡果糖诱导山羊急性瘤胃酸中毒可导致山羊瘤胃发酵紊乱,提高瘤胃液和血液中脂多糖与乳酸浓度,导致山羊蹄组织相关炎症因子与金属蛋白酶表达改变,最终引发山羊急性蹄叶炎。     

大豆胰蛋白酶抑制因子对力克斯青年兔血液生化指标及器官重的影响

选择健康、平均体重为1 544.2±114.8g的美系力克斯青年兔50只(公母比例为1:1),按性别、体重随机分为5组,每组10只,单笼饲养.5个组日粮中分别添加25%的生大豆、25%化学钝化大豆、25%热处理大豆、25%豆粕和13%生大豆 12%豆粕,试验期为6周.试验结束时,从每组随机选出3只公兔进行屠宰,宰前称其活重,心脏采血,用于测定血清生化指标;测定有关内脏器官重量,计算器官重与体重之比.结果表明:生大豆及不同加工处理大豆饲喂力克斯青年兔,血液生化指标在5个组间无显著差异(P＞0.05);胰腺重、肝脏重、肾重、脾重及其与体重之比,各组间差异不显著(P＞0.05).     

大肠杆菌及脂多糖对奶牛乳腺上皮细胞基质金属蛋白酶表达的影响

为研究大肠杆菌(E.coli)及脂多糖(LPS)对奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)基质金属蛋白酶(MMPs)表达的影响,以及MMPs与基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)、尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)系统在调控细胞外基质(ECM)代谢中的作用,分别以106 CF U/mL热灭活E.coli菌液、7.5μg/mL ...     

异氟烷麻醉对波兰兔相关生理指标及血流动力学影响的研究

为了探究不同浓度异氟烷麻醉对波兰兔血浆肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)及血流动力学的影响,试验将18只健康波兰兔随机分为异氟烷低浓度组(L-ISO组,1%异氟烷麻醉)、异氟烷中浓度组(M-ISO组,3%异氟烷麻醉)、异氟烷高浓度组(H-ISO组,5%异氟烷麻醉),持续麻醉20 min,观察对波兰兔的麻醉效果,分别于异氟烷麻醉前(0分钟)、麻醉后(5,10,15,20分钟)及苏醒后(10分钟)监测各组波兰兔体温(T)、心率(HR)、血氧饱和度(SpO₂)、呼吸频率(RR)、收缩压(SAP)、舒张压(DAP)、平均动脉压(MAP);并同步采集股动脉血液,检测血浆肾素、血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)和醛固酮(ALD)含量,分析肾素、ANG-Ⅱ和ALD含量与SAP、DAP和MAP的相关性。结果表明：各组在麻醉后15,20分钟T显著低于麻醉前(0分钟)(P<0.05);各组HR和RR在麻醉后5,10,15,20分钟显著低于麻醉前(0分钟,P<0.05);H-ISO组SpO₂在15,20分钟显著低于麻醉前(0分钟,P<0.05)。各...     

日粮铜水平对兔血铜含量及两种酶活性的影响

在含铜10.56mg/kg的基础日粮中添加0、10、20、100、200mg/kg铜，分别饲喂五组90日龄的安哥拉兔，研究日粮铜水平对兔血铜含量及两种酶活性的影响。结果表明，不同铜处理组间，兔体内SOD酶和铜兰蛋白酶的活性以及兔血浆铜含量差异不显著（P＞0.05)；但血浆铜兰蛋白酶的活性明显地随铜添加量的增加而增加，试验期末高铜E组该酶活力平均比对照组提高60％；肝SOD酶活力也有随日粮铜水平增加而增加的趋势；血浆、红细胞中的含铜量及红细胞中SOD酶活性没有明显的变化规律。     

肌抑素对PK15细胞MMP-2/7/9表达的影响

本研究旨在揭示肌抑素（MSTN）与基质金属蛋白酶（MMPs）的调控关系,探明MSTN对PK15细胞MMP-2/7/9表达的影响。对MSTN单等位基因敲除猪背膘组织进行转录组测序分析,复苏前期制备的MSTN基因敲除PK15细胞系：单等位基因敲除的PK3108细胞系和双等位基因敲除的L18细胞系,通过实时荧光定量PCR和Wesrern blotting分别检测PK15、PK3108和L18细胞系中MSTN、MMP-2/7/9基因的mRNA和蛋白表达水平。结果发现,与野生型猪相比,MSTN单等位基因敲除猪背膘组织转录因子C/EBPδ、MMP-2/7基因mRNA表达量均极显著下调（P < 0.01）;细胞外基质中纤连蛋白（FN）和层连接蛋白（LN）含量均极显著增加（P < 0.01）。复苏的PK3108和L18细胞呈现绿色荧光。实时荧光定量PCR结果显示,PK3108和L18细胞中MSTN、MMP-2/7/9的mRNA表达量均极显著低于PK15细胞（P < 0.01）;Western blotting结果显示,PK3108和L18细胞中MSTN、MMP-2/7/9的蛋白表达量均明显低于PK15细胞。本研究结果表明,在MSTN基因敲除的PK15细胞中,MSTN功能缺失能显著降低MMP-2/7/9的表达,且MMP-2/7/9蛋白表达降低的趋势与MSTN蛋白表达的趋势相一致。     

饲用酶制剂对布列塔尼亚兔部分生理指标及内分泌的影响

62只28日龄断奶布列塔尼亚兔用按窝配对法分为3组,各组性别比例与体重相近,C组为对照组,A组日粮中添加0.75%饲用复合酶制剂,B 组日粮中添加0.1%饲用复合酶制剂,测定各组血清胰岛素(Ins)、胰高血糖素(GG)、甲状腺素(T3、T4)以及血糖和血尿素氮含量。A组、B组的T3含量均高于C组(P>0.05);A组、B组的T4含量均显著低于C组(P<0.05),两组胰岛素含量也比C组低(P<0.05);A组、B组的GG含量与C组相比均有下降趋势(P>0.05);A组、B组的血尿素氮含量分别比C组低3.3%和1.67%(P>0.05);A组、B组的血糖含量与C组相比也有下降趋势(P>0.05)。提示饲用酶制剂对血清激素和部分生理指标有一定影响。     

猪带绦虫丝氨酸蛋白酶抑制分子Ts-serpin-2对人THP-1细胞炎性细胞因子的表达影响

为了深入研究猪带绦虫丝氨酸蛋白酶抑制分子（Ts-serpin-2）对THP-1细胞炎性细胞因子分泌的调节作用,本实验通过RTPCR从猪带绦虫成虫扩增获得Ts-serpin-2(Ts M＿000807300)的编码序列CDS,利用毕赤酵母表达Ts-serpin-2重组蛋白。利用发色底物特异性反应检测Ts-serpin-2蛋白对猪胰蛋白酶、胰弹性蛋白酶、牛α-糜蛋白酶、猪胃蛋白酶、木瓜酶、凝血酶和组织蛋白酶G的抑制效果。重组蛋白Ts-serpin-2处理THP-1细胞24 h,应用q RT-PCR和ELISA方法检测各炎性细胞因子差异表达水平。结果显示,真核酵母表达的重组蛋白Ts-serpin-2分子量约为48 kDa,具有蛋白酶抑制活性,对牛α-糜蛋白酶、猪胰弹性蛋白酶及猪胰蛋白酶的活性均有明显的抑制作用。重组蛋白Ts-serpin-2可抑制LPS活化的THP-1细胞促炎性细胞因子IL-1β、IL-6、IL-12α、IFN-γ和i NOS2m RNA的转录水平,促进IL-4刺激的THP-1细胞抗炎性细胞因子IL-10的表达。ELISA结果显示,Ts-serpin-2能够抑制巨噬细胞分泌致...     

饲用酶制剂对布列塔尼亚兔部分生理指标及内分泌的影响

62只28日龄断奶布列塔尼亚兔用按窝配对法分为3组,各组性别比例与体重相近,C组为对照组,A组日粮中添加0.75%饲用复合酶制剂,B组日粮中添加0.1%饲用复合酶制剂,测定各组血清胰岛素(Ins)、胰高血糖素(GG)、甲状腺素(T3、T4)以及血糖和血尿素氮含量.A组、B组的T3含量均高于C组(P＞0.05);A组、B组的T4含量均显著低于C组(P＜0.05),两组胰岛素含量也比C组低(P＜0.05);A组、B组的GG含量与C组相比均有下降趋势(P＞0.05);A组、B组的血尿素氮含量分别比C组低3.3%和1.67%(P＞0.05);A组、B组的血糖含量与C组相比也有下降趋势(P＞0.05).提示饲用酶制剂对血清激素和部分生理指标有一定影响.     

复合免疫增强剂对兔血液免疫指标影响的研究

２８只加州兔，于注射免疫增强剂前和注射后第１、３、７、１０天心脏采血，分别进行白细胞总数、白细胞分类计数和淋巴细胞转化试验。结果表明，注射免疫增强剂后第７天，白细胞总数增加２５．３９％（Ｐ＜０．０１），至第１０天有所下降。淋巴细胞转化率在注射后第１０天升高１４．３２％（Ｐ＜０．０１）。其中，７只兔注射前淋巴细胞和嗜中性白细胞百分率为６７．５０％和２６．８％，注射后第１０天达到４８．２９％和４７．８６％（正常值分别为３６～５２％和３０～５２％）。证明该免疫增强剂不仅具有一定程度的免疫增强作用，而且可能还具有免疫调节作用。     

烟碱对LPS诱导的兔子宫内膜上皮细胞炎症因子及前列腺素分泌的影响

试验旨在探索α7烟碱乙酰胆碱受体（α7 nicotinic acetylcholine receptor,α7nAChR）的高亲和力激动剂烟碱对脂多糖（lipopolysaccharides,LPS）诱导的兔子宫内膜上皮炎症的作用机制。分离发情后期兔的子宫内膜上皮细胞,用100 ng/mL LPS对细胞进行炎性刺激12 h。用CCK8法检测不同浓度烟碱（5、10和20 μg/mL）对细胞存活率的影响,筛选合适浓度的烟碱进行后续试验。将细胞分为对照组（CON）、LPS、LPS+烟碱、LPS+烟碱+甲基牛扁碱（MLA）（α7nAChR的特异性颉颃剂）组,通过ELISA法检测细胞培养上清液中白细胞介素-1β（interleukin 1β,IL-1β）、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor,TNF-α）、前列腺素E₂（prostaglandin E₂,PGE₂）和前列腺素F_2α（PGF_2α）的含量。试验成功分离兔子宫内膜上皮细胞,且传至第5代仍保持良好的生长状态。CCK8检测结果显示,20 μg/mL烟碱组细胞存活率显著降低（P<0.05）,10 μg/mL烟碱对细胞存活率无显著影响（P>0.05）,所以选择10 μg/mL烟碱进行后续试验。ELISA结果显示,与对照组相比,LPS组IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、PGE₂和PGF_2α的含量显著增加（P<0.05）;与LPS组相比,LPS+烟碱组显著降低IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、PGE₂和PGF_2α的含量（P<0.05）,LPS+烟碱+MLA组炎性因子和前列腺素的含量差异不显著（P<0.05）。以上结果表明,烟碱对LPS诱导的兔子宫内膜上皮细胞分泌IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、PGE₂和PGF_2α具有下调作用,推测烟碱通过α7nAChR介导炎性因子和前列腺素分泌下调而发挥抗炎作用,该结果可为研究α7nAChR作为子宫内膜炎治疗靶点的药物选择提供参考。     

抗兔球虫中药对球虫感染兔血液生化指标的影响

选取40日龄左右的32只日本大耳白封闭群实验用兔,随机分成4组,分别设为感染不给药组、中药组、地克株利组和不感染不给药组。每只试验兔分别在感染前（0 d）和感染后7 d、14 d和21 d通过耳静脉采血,测定TP、ALB、TG等17项血清生化指标。研究结果表明,抗球虫中药复方制剂对TG、ALT、ALP生化指标具有一定的调节作用。