柱层析法分离纯化血橙花色苷

 【目的】研究适合分离纯化血橙花色苷的柱层析法,并对血橙中的花色苷进行初步鉴定。【方法】分别采用12种不同类型树脂对血橙花色苷静态和动态吸附解吸试验进行比较,优化了大孔树脂提取分离血橙花色苷的工艺,采用Toyopearl TSK HW-40S柱层析对血橙花色苷提取物进一步分离纯化。同时,利用高效液相色谱-电喷雾质谱联用（HPLC-ESI/MS）对血橙花色苷进行定性分析。【结果】大孔树脂NKA-9对血橙花色苷的分离效果最好,最佳工艺条件为：50%乙醇用柠檬酸调pH为2.5时洗脱效果最好;Toyopearl TSK HW-40S柱层析分离纯化条件为：35%甲醇（经2%甲酸酸化）为洗脱液,流速0.6 ml?min-1,可得到3个单一花色苷组分和1个混合花色苷组分。HPLC-ESI/MS分析表明,血橙花色苷主要是为矢车菊素-3（3″-丙二酰）葡萄糖苷和矢车菊素-3（6″-二乙二酰）葡萄糖苷（组分1）,矢车菊素-3-葡萄糖苷（组分2）,矢车菊素-3（6″-丙二酰）葡萄糖苷（组分3）及矢车菊素-3-葡萄糖苷加成物4-乙烯基儿茶酚（组分4）。【结论】NKA-9大孔树脂与Toyopearl TSK HW-40S凝胶柱层析相结合,可以有效分离纯化血橙中花色苷,HPLC-ESI/MS分析可以方便、快捷、有效地为花色苷的鉴定提供依据。     

Thermal Degradation Kinetics of Three Kinds of Representative Anthocyanins Obtained from Blood Orange

Cyanidin-3-glucoside, cyanidin-3-(6″-malonyl)-glucoside, and cyanidin-3-glucoside-derived pyranoanthocyanins which were three major anthocyanins of blood orange, were obtained using a Toyopearl TSK HW-40S column chromatography. Then, thermal degradation kinetics of the three major anthoeyanins was studied at selected temperatures (70, 80, and 90℃). Degradation parameters such as k and t1/2 values were determined. The activation energy (Ea) values for cyanidin3-glucoside, cyanidin-3-(6″-malonyl)-glucoside and cyanidin-3-glucoside-derived pyranoanthocyanin were 75.4, 79.5, and 81.7 kJ mol-1, respectively. Ea values suggested that cyanidin-3-glucoside-derived pyranoanthocyanin had the highest stability, followed by cyanidin-3-(6″-malonyl)-glucoside and cyanidin-3-glucoside. However, t1/2 values indicated cyanidin3-glucoside-derived pyranoanthocyanin degraded faster than cyanidin-3-(6″-malonyl)-glucoside and cyanidin-3-glucoside at selected temperature.     

大孔吸附树脂对蓖麻变应原的分离纯化研究

为了提高蓖麻变应原的纯度,采用不同型号的大孔树脂对变应原进行了分离研究。通过静态吸附和解吸实验,对9种大孔树脂进行了筛选。结果表明：AB-8型大孔树脂表现出最好的吸附性能与解吸效果,是较好的分离、纯化蓖麻变应原的树脂;选择AB-8树脂柱层析,其较佳动态吸附条件为：蓖麻变应原提取液浓度2．0g／L,pH5．0,流速2．0mL／min;较佳洗脱条件为：乙醇浓度25％,洗脱流速1．8BV／h,洗脱体积9BV。     

荔枝多酚柱层析纯化工艺条件研究

通过吸附、解析试验,筛选适合纯化荔枝多酚的大孔吸附树脂,确立柱层析纯化工艺.结果表明,大孔吸附树脂XDA-7对荔枝果皮多酚具有良好的吸附和解析性能,柱层析纯化条件为:上样液质量浓度为3.5mg/mL,样液pH≤4.5,上样速率为2～4BV/h;洗脱液质量浓度6mg/mL,洗脱速率6BV/h.在此条件下,荔枝多酚纯化样品的多酚含量为70.6%.     

基于计算机视觉的血橙成熟度检测

利用血橙表面着色比例判断其成熟程度,通过血橙成熟度判断其最佳采摘时间,为血橙的最佳贮藏、运输与销售时间提供依据。使用CCD相机采集血橙正反两面的图片,运用数字图像处理技术对血橙正反两面图片进行全局阈值分割,通过imclearborder函数将分割后血橙区域外的背景处理成黑色,统计分割图像中的黑白像素点。数字图像处理技术能有效处理CCD相机采集的血橙图片,计算出血橙的着色比例。试验方案适用于血橙成熟度检测,通过统计出的数据能判断血橙是否成熟。     

四川水稻纹枯病菌分离、纯化及致病力鉴定

在四川特殊的生态条件下,通过对四川省东、南、西、北、中5个区域的55个具有代表性的县(市)水稻纹枯病样本进行分离、纯化与致病力鉴定.田间致病力鉴定研究发现,各菌株间致病力差异显著.通过对这些来自不同县(市)的病原菌与不同抗性水平水稻品种之间致病力差异比较,了解纹枯病菌的分布特点和致病力差异,为有效控制其流行、减少水稻纹枯病对水稻、玉米等农作物的危害打下基础,也为筛选到高抗纹枯病的育种材料和基因资源提供条件.     

大孔树脂法纯化红枣色素工艺研究

以吸附率和解析率为指标,通过静态吸附研究,从9种不同型号的大孔树脂中筛选出对红枣(Zizyphus jujube)皮红色素选择性良好的材料,并考察工艺参数对树脂吸附及解析枣皮红色素的影响,优化枣皮红色素的纯化条件。结果表明,X-5对红枣皮红色素具有良好的选择性,动态吸附及解析特性研究显示其最佳的纯化工艺参数为上样液浓度1.0 mg/mL,流速1.0 mL/min,pH 3.0,洗脱液采用60%乙醇,流速2.0 m L/min。采用此工艺条件,枣皮红色素的色价从12.8提高到32.4。综上所述,X-5型大孔树脂对枣皮红色素有良好的吸附与解析性能,适用于枣红色素的批量纯化。     

����-��������ȡ���޿�Ѫ��Ƥ�й����Ĺ���

为更好地利用塔罗科血橙资源,研究乳酸-超声波提取血橙皮中的果胶工艺,考查超声波功率、提取时间、提取pH、料液比、提取温度等对果胶产率的影响,利用正交试验设计得出果胶提取的最佳工艺条件.结果表明:在料液比为1∶35,提取液pH 2,超声波时间50 min,超声波功率280 W的条件下,其果胶的产率为30.53％,产品果胶总半乳糖醛酸含量为68.76％,脂化度为72.49％,含水率为8.01％,总灰分为3.25％,酸不溶灰分为0.26％.     

大孔树脂纯化酸石榴汁中花青素的研究

【目的】筛选分离纯化酸石榴汁花青素的最佳树脂,优化酸石榴汁纯化的工艺条件,为石榴汁花青素的工业化生产提供参考。【方法】从AB-8、X-5、D101、D101A和NKA-9等5种大孔树脂中,通过静态吸附-解吸试验,筛选适合酸石榴汁花青素纯化的大孔树脂,分析花青素质量浓度、温度、pH及解吸液乙醇体积分数和pH对树脂静态吸附-解吸的影响,并在静态试验的基础上,通过动态吸附-解吸试验,确定最佳的吸附流速和解吸流速。【结果】AB-8树脂是纯化酸石榴汁花青素的最佳树脂,其对酸石榴汁花青素静态吸附-解吸的最优工艺条件为:室温25℃、pH 2.5、花青素质量浓度0.131 2mg/mL,解吸液采用体积分数70%酸化乙醇(pH 2.0);动态吸附-解吸的最适工艺条件为:吸附流速1.5mL/min,解吸流速2.0mL/min。【结论】AB-8大孔树脂对酸石榴汁花青素的纯化效果最佳,适用于酸石榴汁中花青素类物质的纯化。     

大孔吸附树脂分离纯化小蓟多糖的工艺研究

试验以吸附率与解析率为考察指标,比较4种大孔吸附树脂D101、D4020、AB-8、X-5对小蓟(Cir-sium setosum)多糖的纯化效果.采用分光光度法测定小蓟多糖的含量,用静态与动态吸附-解析方法从4种树脂中筛选出最适树脂,采用单因素试验和正交试验优化其纯化工艺.结果表明,AB-8型大孔树脂为纯化小蓟多糖的最佳树脂;其纯化最佳工艺条件为:上样液浓度2.0 mg/mL,上样量30mL,流速1.0 mL/min,洗脱剂pH 7.0.在此工艺条件下,AB-8对小蓟多糖的解析率可达77.93％.     

枯草芽孢杆菌WH-5的分离鉴定及净水研究

从湖南长沙淡水养殖场取得水样和底泥,通过富集分离得到一株高效降解有机物的芽孢杆菌,通过形态学、生理生化特征及16sRNA测序,结果表明该菌株是枯草芽孢杆菌。在实验室条件下,枯草芽孢杆菌WH-5对COD、氨氮、亚硝酸盐、硫化物的去除率分别是:88.01%、80.89%、61.72%、47.19%。在鱼塘的应用试验中,对COD、氨氮、亚硝酸盐、硫化物的去除率分别是:51.16%、75.54%、78.21%、71.42%,枯草芽孢杆菌WH-5能够有效的改善淡水养殖水体的水质。     

比较免疫磁珠法与A蛋白亲和层析法纯化兔抗血清中的IgG

优化了免疫磁珠分离法纯化抗血清的实验条件,并与A蛋白亲和层析法比较纯化效果,以求得到一种简便、快速、高效的纯化IgG方法.结果表明：从5只新西兰兔获得210 mL试管凝集效价高达1∶5 120的兔抗鳗弧菌抗血清,磁珠与IgG结合10 min达到平衡,其最大结合量为0.227 mg/mL;免疫磁珠分离法与A蛋白亲和层析法得到的IgG纯度都很高,经过SDS-PAGE电泳都只得到25 ku和55 ku左右的两条带;免疫磁珠分离法得到的抗体ELISA效价高于A蛋白亲和层析法;免疫磁珠分离法反应所需时间（10 min）小于A蛋白亲和层析法所需的20 min,其得率（11.5 mg/mL）也高于A蛋白亲和层析法的10.25 mg/mL.     

AB-8大孔树脂分离纯化爵床总黄酮的研究

用AB-8大孔吸附树脂对爵床总黄酮进行分离纯化.结果表明,静态分离纯化的最佳工艺参数为提取液中总黄酮量在2.0～3.5 mg/mL范围,AB-8树脂与提取液以1:20(W/V)的比例,于25℃,在酸性或碱性的条件下恒温振荡24h后,用90%的乙醇洗脱.此条件下总黄酮的得率可达38.24%.动态分离纯化的最佳工艺参数为流速1.0mL/min,粗提液中总黄酮量在1.5～2.5 mg/mL范围,在pH值为2的条件下总黄酮的得率为42.72%.     

大孔吸附树脂柱色谱分离桔梗总皂苷

为研究桔梗总皂苷的提取分离工艺，采用ZTC－1大孔吸附树脂，利用水和20％、30％、40％、50％、95％的乙醇溶液洗脱提纯桔梗总皂苷，结果平均得率为2．055。该法操作简单，得率高，成本低，为桔梗总皂苷的工业化生产提供了依据。     

响应面法优化蓝莓花青素提取工艺研究

为优化蓝莓(Vaccinium Spp)提取工艺,试验选用水浴回流提取方法,研究了乙醇体积分数、提取温度、提取时间和液料比等因素对蓝莓花青素提取的影响,并用Box-Behnken法进行了响应面优化。结果表明,蓝莓花青素水浴回流提取的最优工艺参数为乙醇体积分数59%、提取温度62℃、提取时间62 min、液料比8∶1,在此优化条件下蓝莓花青素的提取量为8.444 7 mg/g,与理论值8.453 1 mg/g相差不大。     

超声波辅助提取三华李花青素及其抗氧化活性研究

以三华李为原料研究三华李花青素的提取工艺及其抗氧化活性.首先将三华李切成厚度为2 cm的薄片,然后采用单因素和正交试验确定了三华李切片花青素最佳提取工艺参数:以pH值2的70％乙醇溶液作为提取剂,料液比1∶12(W/V),超声波温度55℃,超声波时间50 min,超声波功率400 W.在此条件下,提取液的花青素含量最高,达到21.98 μg/L.提取完花青素的三华李切片组织结构完整,可以作为三华李凉果的原料.三华李花青素提取液经AB-8大孔吸附树脂纯化并进行冻干处理,得到三华李花青素粗提物.花青素粗提物含量为2.4 mg/mL时,对羟自由基清除率为51.21％;花青素粗提物含量为0.4 mg/mL时,对超氧阴离子清除率达到48.70％.     

东北枸杞多糖分离纯化及鉴定

研究了东北枸杞多糖的提取、分离纯化及其组分和结构的鉴定,结果表明:枸杞多糖水提的最佳条件为提取温度100℃,pH值11,料液比1:20,浸提2h;通过DEAE-SephadexA-50柱层析得到纯度较高的LBP-4,薄层分析LBP-4主要是由鼠李糖、木糖、葡萄糖、甘露糖和半乳糖醛酸组成.红外光谱和刚果红实验分析LBP-4具有糖类的特征吸收峰,是多种单糖通过α糖苷键及β糖苷键连接组成的杂多糖,不具有三股螺旋结构.     

紫花芸豆胰蛋白酶抑制剂的分离和纯化

[目的]从紫花芸豆中分离纯化胰蛋白酶抑制剂。[方法]以紫花芸豆为材料,采用脱脂、酸抽提、热变性、硫酸铵分级沉淀及离子交换层析和凝胶过滤层析等方法,分离纯化胰蛋白酶抑制剂。[结果]胰蛋白酶抑制剂经PAGE和IEF电泳显示单一条带。凝胶过滤法测定其表观分子量约为59kD。SDS电泳结果显示它有3个亚基,分子量分别为34、16、15kD。等电聚焦法测定其等电点为5．25。动力学的方法检测PVTT与胰蛋白酶发生不可逆抑制作用。[结论]离子交换层析和凝胶过滤层析法能快速地分离纯化紫花芸豆中的胰蛋白酶抑制剂。     

茶树RNA的提纯与鉴定

研究了一种可有效排除茶树叶片细胞所富含的茶多酚、茶多糖等杂质污染的茶树总RNA提取方法.即在Trizol法的基础上,于提取的初始阶段,重点防止褐化效应,用水不溶性聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和β-巯基乙醇(β-Me)排除茶多酚干扰,同时用低含量乙醇去除茶多糖;在最后阶段,55-60℃热水浴10min,低温离心进一步去除茶多糖的干扰.利用这一方法提取的茶树总RNA,经琼脂糖电泳鉴定,可见清晰的18s和28sRNA的2条带型,证明RNA完整,无弥散或降解.