孝顺竹愈伤组织诱导及植株再生

利用孝顺竹小穗和种胚为外植体,诱导出胚性愈伤组织并成功实现植株再生.对影响愈伤组织诱导和分化的基本培养基、激素种类及质量浓度等进行筛选,结果表明:愈伤组织诱导以NB,N6基本培养基附加4 mg·L-1 2,4-D较好;外植体在NB+500 mg·L-1脯氨酸+500 mg·L-1谷氨酰胺+300 mg·L-1水解酪蛋白+30 g·L-1蔗塘+8 g·L-1卡拉胶(Carrageenan)+4 mg·L-1 2,4-D的诱导培养基上经20 d培养,小穗愈伤组织诱导率达87.30%,种胚愈伤组织诱导率为76.27%.愈伤组织预分化及分化的基本培养基以MS较适宜,经MS+30 g·L-1蔗糖+10 g·L-1卡拉胶+4 mg·L-1 KT培养基预分化7 d后,转入无激素的MS培养基上分化14 d,小穗愈伤组织仅个别长出绿色芽头;但种胚愈伤组织芽分化率可达80.0%.分化芽中有8%左右的白化苗,并伴有花叶苗出现.优化后的种胚愈伤组织预分化最佳培养基是MS+3 mg·L-1 6-BA+3 mg·L-1 KT.分化芽苗在添加2mg·L-1 NAA的MS培养基上生根良好,移栽成活率可达70%以上.     

假叶树组织培养植物激素应用筛选试验

采用假叶树的幼嫩茎段为外植体组织培养,对加入适合的植物激素作筛选试验,结果表明:MS+ZT 2.0 mg·L-1+IBA 0.5 mg·L-1培养基愈伤组织的诱导率最高;MS+ZT 1.5 mg·L-1+IBA 0.2 mg·L-1培养基分化不定芽效果最佳,并且在MS+ZT 1.0 mg·L-1-1.5 mg·L-1+IBA 0.2 mg·L-1培养基上继代增殖培养增殖系数可达4⁵倍;不定芽在1/2MS+NAA 1.0+1.5 g·L-1活性炭的培养基上,生根率达100%;生根小苗移栽珍珠岩与泥炭土(1∶1)基质上,成活率达95%以上。     

心叶球兰组织培养与快速繁殖试验

以心叶球兰叶片为外植体,愈伤组织诱导和继代增殖培养基MS+6-BA2.0mg.L-1+NAA0.5mg.L-1+2,4-D1.0mg.L-1+GA1.0mg.L-1+白糖3%,诱导的愈伤组织多,生长旺盛,增殖倍数为2～3倍;丛芽诱导培养基MS+KT0.5mg.L-1+NAA0.5mg.L-1+GA1.0mg.L-1+白糖3%,芽的诱导率为79.3%;在丛芽增殖及复壮培养基1/2MS+IBA1.0mg.L-1+白糖2%上,有20%～30%玻璃化丛芽转为绿色苗,玻璃化单芽经复壮培养长成绿色苗;诱导生根培养基为1/2MS+IBA0.5mg.L-1+白糖2%,玻璃化生根率为56.4%,淡绿色苗生根率达91.1%。瓶苗移栽基质泥炭土∶珍珠岩∶甘蔗渣(1∶1∶1)的成活率最高,达91.4%。     

马先蒿无性系建立的研究

为满足马先蒿观赏栽培对种苗的需要,以生长点为材料,采用组织培养的方法,进行了愈伤组织诱导与分化、试管苗的生根与生根继代增殖培养,以及移栽和定植的研究。结果表明:MS+6-BA0.6mg·L-1+2,4-D1.0mg·L-1+NAA0.3mg·L-1是生长点愈伤组织诱导和分化培养的理想培养基;1/3MS+ABT2号10mg·L-1是不定芽生根培养和试管苗生根继代增殖培养的理想培养基;试管苗移栽和定植的成活率分别为93.4%、98.5%,定植的试管苗保持了马先蒿的植物学性状和观赏性状。     

巨桉无性系EG5叶片高效再生体系的建立

以巨桉栽培无性系EG5无菌苗的叶片为外植体进行愈伤组织诱导与植株再生研究。结果表明:愈伤组织高效诱导和不定芽分化的最适培养基为改良MS+0.12 mg·L-1TDZ+0.25 mg·L-1NAA;硝酸铵对EG5叶片愈伤组织生长及植株分化的影响较大,最适宜质量浓度为0.412 5 g·L-1;最佳伸长培养基配方为改良MS+0.3 mg·L-16BA+0.05 mg·L-1IBA+0.3 mg·L-1IAA;暗培养10 d能促进不定芽分化,延缓愈伤组织老化和褐变速度。生根培养基为改良MS+0.4 mg·L-1NAA时生根率最高,为65.47%,移植成活率为90%以上。     

地被菊间接体细胞胚发生途径的转基因受体体系的研究

采用三步培养法建立了地被菊花品种‘玉人面'间接体细胞胚发生途径的转基因受体体系.试验以地被菊花品种‘玉人面'茎段(节间)为外植体,研究了生长调节剂、光照强度等因子对其间接体细胞胚诱导和分化的影响,同时进行了抗生素敏感性试验.结果表明:胚性愈伤组织诱导培养基为MS KT 2.0 mg·L-1 2,4-D 2.0 mg·L-1 NAA 0.5 mg·L-1,诱导15 d后,将获得的黄绿色致密颗粒状胚性愈伤组织转入胚性愈伤组织分化培养基MS KT 2.0 mg·L-1 2,4-D 1.0 mg·L-1 NAA 0.5 mg·L-1中,诱导15 d后再转入MS KT 2.0 mg·L-1 NAA 0.5 mg·L-1的分化培养基中培养20 d,光照强度为1 000～2 000 lx,胚性愈伤组织诱导率、分化率分别为95.3%、92.7%,平均每个外植体分化的芽数为17.8个,获得的再生芽的稳定性为99.5%.抗生素敏感性试验表明:地被菊花品种‘玉人面'间接体细胞胚发生途径的转基因受体体系中,卡那霉素选择压为20 mg·L-1;头孢霉素在胚性愈伤组织诱导时的选择压为300 mg·L-1,在胚性愈伤组织分化培养时选择压为100 mg·L-1.     

沟叶结缕草的组织培养和无性系的建立

通过研究不同基本培养基及植物生长调节组合对沟叶结缕草丛生芽诱导、增殖和愈伤组织诱导、分化的影响,建立起沟叶结缕草试管无性系。以地下匍匐根状茎的顶芽为外植株,在MS 6-BA 2 mg.L-1 NAA 0.1 mg.L-1培养基上诱导丛生芽形成,以MS KT 3 mg.L-1 NAA 0.1 mg.L-1作为继代增殖培养基,建立起丛生芽苗→不定芽发生→丛生芽苗速生试管无性系;以丛生芽苗基部为外植体,以MS 2.4-D 4 mg.L-1作为愈伤组织诱导培养基,以MS基本培养基作为愈伤组织分化培养基,建立起丛生苗→愈伤组织→愈伤组织分化→丛生苗试管无性系。试管无性系室外移栽成活率达95%以上。沟叶结缕草试管无性系的建立为细胞工程育种和基因转化的研究奠定了基础。     

南蛇藤愈伤组织的诱导和植株再生

以南蛇藤无菌苗子叶、上胚轴及幼根为材料,比较研究不同激素配比条件下不同外植体愈伤组织的诱导、分化及植株再生。结果表明:上胚轴是诱导产生胚性愈伤组织的最佳外植体;愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA(0.5mg/L)+NAA(0.5¹.0mg/L);愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA(0.5mg/L)和MS+6-BA(2.0mg/L)+IBA(0.11.0mg/L);愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA(0.5mg/L)和MS+6-BA(2.0mg/L)+IBA(0.1⁰.5mg/L);芽增殖最佳培养基为MS+6-BA(1.00.5mg/L);芽增殖最佳培养基为MS+6-BA(1.0².0mg/L)+NAA(0.1mg/L),增殖系数平均达7.05;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.1mg/L,生根率达88%。     

桃幼胚及幼胚子叶再生的研究

以玉露桃和湖景蜜露桃幼胚及幼胚子叶为试材,研究基本培养基类型、激素、损伤方式等因素对再生的影响。结果表明:培养基是影响幼胚诱导愈伤组织的最重要因素,MS适合供试材料诱导愈伤组织;激素诱导愈伤组织因品种而异,NAA1.0mg·L-1对45d、0.5mg·L-1对55d玉露,BA0.5mg·L-1对55d湖景蜜露效果较好,在试验浓度范围内2,4-D对供试幼胚均无明显效果;幼胚的发育状态是影响诱导愈伤组织的另一因素,玉露桃45d愈伤组织诱导率最高,达96.6%,而55d诱导率为81.6%。愈伤组织可在MS 0.05mg·L-1NAA 1.0mg·L-1BA培养基上分化成芽,再生芽在1/2MS 1.0mg·L-1IBA培养基上生根。幼胚子叶不定芽再生培养基的激素配比为NAA0.50mg·L-1 BA10.0mg·L-1、NAA0.05mg·L-1 TDZ3.0mg·L-1;带胚芽子叶纵向刻伤再生率高;不定梢(芽)在1/2MS 2%蔗糖 7.5g·L-1琼脂 IBA1.0mg·L-1 Ad20mg·L-1的培养基上能生根。     

矮牵牛茎段植株再生体系的建立

将矮牵牛Petunia hybrida Vilm的茎段接种在MS附加不同激素的培养基上进行愈伤组织诱导.结果表明:在MS BA1.0 mol.L-1 NAA1.0 mol.L-1的培养基上可以形成愈伤组织,而且经过继代培养仍可形成愈伤组织;茎段或愈伤组织接种在MS BA1.0 mol.L-1 NAA0.1 mol.L-1的培养基上可以形成不定芽,且诱导率达100%;健壮的高1.5~2.0 cm的不定芽接种在1/2MS IBA0.5 mol.L-1 AC1.0 g.L-1的培养基上,其生长根状况良好,生根率达100%.     

利用悬浮培养和培养基选择改善火炬松的体细胞胚胎发生和植株再生(英文)

三个基固型的火炬松成熟合子胚被培养在附加 8mg·L-12 ,4 D ,4mg·L-1BA ,4mg·L-1KT ,5 0 0mg·L-1水解酪蛋白和 5 0 0mg·L-1谷氨酰胺的愈伤组织诱导培养基上诱导愈伤组织 .来自于子叶、胚轴和胚根的愈伤组织在附加 1 6mg·L-12 ,4 D ,0 8mg·L-1BA和 0 8mg·L-1KT的愈伤组织增殖培养基上培养 9周后 ,可获得 16 9%的胚性愈伤组织 .通过建立胚性细胞悬浮系和研究ABA、PEG和活性炭对体细胞胚成熟的促进作用 ,优化的体细胞胚胎发生体系被建立 .71棵再生小苗被用于移栽试验 ,2 3棵小苗在田间移栽成活     

甜椒抗菌蛋白基因(harp)转化桉树的研究

用不同浓度的2,4-D与IAA对桉树叶盘进行了愈伤组织的诱导及植株再生的试验,建立了新的桉树再生体系.进一步用含甜椒抗菌基因(hrap)的农杆菌侵染桉树叶盘,发现侵染后对愈伤组织诱导率无明显影响,却抑制了桉树的植株再生.对再生苗的PCR和Sou thern杂交检测证实已将hrap基因已转入桉树植株的基因组中.     

Somatic Embryogenesis and Plantlet Regeneration in Callus Cultures Derived from Mature Zygotic Embryos of Slash Pine

1TheworkwassupportedbyChineseNationalHighTechnologyDevelopmentProgram"863project"IntroductionSomaticembryogenesishasagreatpotentiaIforrapidProPaationofsuPCriorconifcrspccics.ThefirstreportonsomaticembryogenesisandplantlctrcgencrationinconifersPeCieswasach…     

陈山红心杉胚性愈伤组织的增殖培养

研究不同激素对胚性愈伤组织生长的影响,实验结果表明,陈山红心杉胚性愈伤组织在诱导阶段和增殖培养阶段,NAA对愈伤的增殖效果存在较大差异。在诱导阶段,2,4-D的效果比NAA强得多,但是,在继代培养阶段,NAA也表现出较好的效果,6-BA对胚性愈伤组织的生长显现抑制作用。     

脯氨酸对杉木愈伤组织超低温冷冻保存的影响

为探索脯氨酸在杉木胚性愈伤组织超低温冷冻保存过程中的作用,本试验以继代14 d的杉木愈伤组织为材料,在预处理阶段设置不同浓度的脯氨酸,采用TTC法测定相应的细胞存活率。结果表明：预处理阶段,脯氨酸浓度为0.5 g·L-1时,细胞存活率相对最高。说明了在预处理阶段添加适宜浓度的脯氨酸可提高超低温冷冻保存的存活率。     

红千层愈伤组织诱导及植株再生

以茎段、芽和叶片为材料,研究了红千层愈伤组织诱导及植株再生的方法。结果表明:红千层的茎段、芽和叶片均可诱导出愈伤组织,通过继代培养愈伤组织可发育成绿色和粉红色2种类型,其中绿色、致密的愈伤组织可以分化出不定芽。培养基1/2M S 6-BA 1.0 m g/L NAA 0.1 m g/L适宜愈伤组织不定芽的诱导,在培养基1/2M S IBA 0.25 m g/L上试管苗的生根率可达95%。     

外植体及培养基对欧洲白桦器官再生的影响

白桦再生不定芽以通过愈伤组织再生不定芽的间接方式为主,无菌试管苗的茎段、根、叶片均可作外植体诱导不定芽再生。不同的基因型其不定芽再生的难易程度不一样。无性系2/86比G1、4N容易诱导愈伤组织进而诱导不定芽发生。诱导无性系2/86茎段不定芽分化的适宜基本培养基为WPM,根段为MCM,叶片为MS。不同外植体不定芽再生能力也不同,叶柄和茎段最容易诱导愈伤组织和不定芽分化,根较难诱导。     

火炬松胚性愈伤组织诱导和植株再生的研究

火炬松胚性愈伤组织诱导和植株再生的研究唐巍欧阳藩（中国科学院化工冶金研究所生化工程国家重点实验室北京１０００８０）郭仲琛（中国科学院植物研究所北京１０００９３关键词火炬松,体细胞胚胎发生,植株再生本文于１９９６年１０月２８日收到。国家“８６３”资...     

Selection, regeneration and protein profile characteristics of NaCl-tolerant callus ofRobinia pseudoacacia L.

Changes in callus growth, differentiation potency and protein profile induced by salt stress were investigated in the calli induced from a hypocotyl ofRobinia pseudoacacia L. The NaCl treatment evidently obstructed the callus growth and the influences seemed to continue to be present in the selected calli even after they were restored in NaCl-free medium that could partially recover the callus growth, and some polypeptides were found to restore. The calli selected and restored intermittently every two weeks for one year completely lost their differentiation potency. The NaCl-tolerance test of the regenerated plantlets revealed that part of the plantlets that directly regenerated from the selected NaCl-tolerant calli were able to survive in 0.2 M NaCl, while most of the plantlets regenerated from the NaCl-nonselected calli or from restored calli were obviously damaged by this treatment. The SDS-PAGE assay indicated that a 54 kDa polypeptide increased distinctly to a very high level while a 41 kDa polypeptide decreased to a lower level in almost all the NaCl-tolerant plantlets. This observation led to the suggestion that the changes may play an adaptive role in allowing plantlets to survive under saline conditions.     

Efficient embryogenic callus induction and plant regeneration from embryonic axis explants inQuercus acutissima

Embryogenic callus ofQuercus acutissima was successfully induced from embryogenic cultures, and plants were regenerated from the callus. The development of the techniques involved will allow mass propagation and gene transformation in this species. Embryogenic cultures were formed from embryonic axis explants (i.e., embryos without cotyledons) excised from immature embryos, after culture on Murashige and Skoog (MS) medium containing indolebutyric acid and benzyladenine. Attempts to induce embryogenic cultures from cotyledon explants were unsuccessful. Embryogenic calli were induced at high frequency from embryogenic cultures on MS medium containing 2,4-dichlorophenoxyacetic acid. However, benzyladenine inhibited embryogenic callus formation. Somatic embryo development from embryogenic calli occurred on MS medium in all of the seven cell lines tested. Germination of somatic embryos was induced on half strength MS medium without plant growth regulators. Finally, acclimated plants growing in soil were obtained.