不同鸡新城疫疫苗免疫鸡血清HI抗体的测定

将试验鸡分成3个试验组和1个对照组。A组鸡接种鸡新城疫系疫苗,B组鸡接种油乳剂灭活苗,C组鸡接种鸡新城疫系疫苗,并在接种疫苗后第3、4、5、6、7、9、11、13、15、20、25d采取各组鸡血并分离血清,检测HI抗体。结果表明,接种系疫苗的组,HI抗体效价均值从4.67log2上升到10log2,接种后第5d开始上升,接种后第11d达到峰值,持续6d保持高滴度抗体水平。接种系疫苗的组,HI抗体效价均值从4.67log2上升到7log2,接种后第4d开始上升,接种后第9d达到峰值。接种油乳剂灭活苗的组,HI抗体效价均值从4.67log2上升到9.33log2,接种后第5d开始上升,接种后第11d达到峰值,持续16d保持高滴度抗体水平。系疫苗HI抗体效价上升快,效价高,较适合于紧急接种,油乳剂灭活苗HI抗体效价可在高水平维持较长时间,较适合于预防接种。     

鸡新城疫－传染性支气管炎－传染性法氏囊病三联灭活疫苗对不同日龄雏鸡的免疫效力研究

为评估鸡新城疫（ND）-传染性支气管炎（IB）-传染性法氏囊病（IBD）三联灭活疫苗对不同日龄和不同水平母源抗体雏鸡的免疫效力和持续期,本试验用该疫苗免疫7、14、21日龄SPF雏鸡和有母源抗体的普通雏鸡,免疫后采血测定ND血凝抑制抗体（HI Ab）、IB血凝抑制抗体（HI Ab）及IBD中和抗体（NA）,并用传染性法氏囊病病毒（IBDV）强毒攻击。结果显示,7日龄SPF雏鸡免疫后21 d ND HI抗体、IB HI抗体及IBD中和抗体效价分别为7.9log2、6.9log2和14.1log2,SPF鸡日龄越大,抗体水平越高;28日龄SPF鸡免疫后3个月,0.3 mL免疫剂量组试验鸡ND HI、IB HI及IBD中和抗体效价分别达6.5log2、6.1log2和13.6log2,IBDV攻毒保护率均为100%（10/10）;不同日龄普通雏鸡免疫效果与SPF鸡试验一致,抗体水平随鸡日龄增大而升高,IBD攻毒保护率也都达到100%（10/10）。试验结果证实,鸡新城疫-传染性支气管炎-传染性法氏囊病三联灭活疫苗可使7、14及21日龄SPF雏鸡和普通雏鸡产生良好的免疫力,对雏鸡的免疫期至少为3个月。     

鸽新城疫油乳剂灭活疫苗免疫期的试验研究

用四批鸡胚尿囊液制备的鸽新城疫(ND)油乳剂灭活疫苗(0601、0602、0603、0604)分别免疫30日龄非免疫鸽,不定期采血,连续检测HI抗体的动态变化。这四批疫苗免疫后9 d均可检测出抗体,21 d达到最高峰(平均为9.1 log2),6个月的平均HI抗体滴度均在6.1 log2以上。因此,该苗对鸽的ND免疫保护期至少为6个月。。     

鸡新城疫油乳剂灭活疫苗免疫抗体消长规律的测定

将5000余只7日龄地方麻鸡随机分为2组,第一组肌肉注射山东泰丰生物制品公司生产的鸡新城疫(La Sota株)灭活苗0.25ml,同时滴鼻点眼鸡新城疫(La Sota株)一鸡传染性支气管(H120)二联冻干活疫苗各两滴;第二组只滴鼻点眼鸡新城疫(La sota株)一鸡传染性支气管(H120)二联冻干活疫苗各两滴,定期进行ND抗体检测.结果表明,第一组接种疫苗7d后产生ND抗体滴度为4.6log2,14d可达到高峰(9.6log2);整个试验期间第一组试验鸡免疫后所产生的ND抗体效价普遍高于第二组,抗体水平持续期较长,到175d时仍然能达到7.62log2.     

鸡新城疫-传染性支气管炎-传染性法氏囊病三联灭活疫苗对不同日龄雏鸡的免疫效力研究

为评估鸡新城疫(ND)-传染性支气管炎(IB)-传染性法氏囊病(IBD)三联灭活疫苗对不同日龄和不同水平母源抗体雏鸡的免疫效力和持续期,本试验用该疫苗免疫7、14、21日龄SPF雏鸡和有母源抗体的普通雏鸡,免疫后采血测定ND血凝抑制抗体(HI Ab)、IB血凝抑制抗体(HI Ab)及IBD中和抗体(NA),并用传染性法氏囊病病毒(IBDV)强毒攻击。结果显示,7日龄SPF雏鸡免疫后21 d ND HI抗体、IB HI抗体及IBD中和抗体效价分别为7.9log2、6.9log2和14.1log2,SPF鸡日龄越大,抗体水平越高;28日龄SPF鸡免疫后3个月,0.3 mL免疫剂量组试验鸡ND HI、IB HI及IBD中和抗体效价分别达6.5log2、6.1log2和13.6log2,IBDV攻毒保护率均为100%(10/10);不同日龄普通雏鸡免疫效果与SPF鸡试验一致,抗体水平随鸡日龄增大而升高,IBD攻毒保护率也都达到100%(10/10)。试验结果证实,鸡新城疫-传染性支气管炎-传染性法氏囊病三联灭活疫苗可使7、14及21日龄SPF雏鸡和普通雏鸡产生良好的免疫力,对雏鸡的免疫期至少为3个月。     

禽流感灭活疫苗(H5N2,N28株)和重组禽流感灭活疫苗(H5N1,Re-1株)免疫鸡和鸭后抗体消长规律的比较研究

禽流感灭活疫苗（H5N2，N28株）和重组禽流感灭活疫苗（H5N1，Re-1株）各3批，以重组禽流感灭活疫苗（H5N1，Re．1株）推荐的免疫程序和剂量分组免疫5周龄SPF鸡和5周龄非免疫鸭。免疫后定期采集血样，测定血清HI抗体效价，分别计算各免疫组鸡和鸭HI抗体效价的几何平均数，绘制各批疫苗免疫鸡和鸭后HI效价消长曲线，并分别对两种疫苗免疫鸡和鸭后各时期的HI抗体效价进行t检验。结果为：①免疫后1周，各免疫组均未测到HI抗体；②鸡免疫后4～5周，HI抗体效价达到峰值1：2^6.0～1：2^7.0，随后2周下降相对较快，平均每周下降0．3—0．7个滴度，之后HI抗体效价缓慢下降，直到试验结束，平均每周下降0．04～0．17个滴度；③鸭首次免疫后第3周各免疫组HI抗体效价达到1：2^4.0～1：2^5.3，加强免疫（首次免疫后第3周）后，HI抗体效价迅速升高。加强免疫后第3周（首次免疫后第6周）HI抗体效价达到最高值1：2^10.6-1：2^11.7，且在峰值水平维持3周，之后1周下降相对较快，平均下降1．2～2．7个滴度，然后缓慢下降，到首免后24周平均每周下降0．28～0．39个滴度，24周除049H5N2批疫苗免疫组外，其他各批免疫鸡HI抗体效价均小于1：2^4.0；④免疫后3周内，两种疫苗刺激鸡产生的HI抗体效价均高于相应批次疫苗免疫鸭产生的HI抗体效价，免疫后第2周相差1．9—2．3个滴度，免疫后第3周相差1．6～2．0个滴度；⑤两种疫苗免疫鸡和鸭后，各时期HI抗体效价t检验差异均不显著（P〉0．05）。以上结果表明，两种疫苗免疫SPF鸡和非免疫鸭后，HI抗体效价消长规律一致，两种疫苗免疫后各个时期的HI抗体效价在统计学上差异均不显著（P〉0．05）。     

缓释复方免疫增强剂对鸡ND—IB二联弱毒疫苗免疫增强效果研究

80只30d龄蛋鸡随机均分成试验组和对照组,分别皮下注射ND—IB二联弱毒疫苗2头份／只,同时给试验组鸡投服缓释复方免疫增强剂1粒／只,对照组不投服。在免疫前、免疫后10d、20d、30d和40d,采血测定发现免疫后不同时期鸡ND、IB抗体效价和T淋巴细胞ERFC形成率试验组显著或极显著高于对照组,表明缓释复方免疫增强剂可以提高鸡体液免疫功能和细胞免疫功能。     

新流二联浓缩疫苗的应用效果

通过使用新城疫和禽流感的二联浓缩疫苗免疫生产鸡群，分别在免疫后的不同时间进行翅静脉采血，检测鸡群中ND、AI（H9）HI的血清抗体水平。结果显示，免疫组鸡的抗体效价3周达到高峰，ND达到8log2以上，AIH9达到9log2以上，维持在较高水平达20周以上。结果表明浓缩疫苗在肉种鸡上的应用效果较好。     

缓释复方免疫增强剂田间免疫试验研究

选择24000只蛋用雏鸡，分4组进行田间免疫试验，每组设50只雏鸡作为对照，所肴雏鸡按常规免疫程序免疫，在20日龄肌注鸡ND—IB二联苗时，试验组雏鸡投服缓释复方免疫增强剂1丸／只，对照组免疫时不投丸，分别在投丸前、投丸后15d和30d呆血测定血清中ND、IB抗体水平和IBD抗体阳性率。结果投丸前雏鸡血清中ND、IB抗体水平及IBD抗体阳性率试验组与对照组差异不显著（P〉0．05），投丸后15d雏鸡血清中ND、IB抗体水平试验组分别比对照组高1．1和1．3个滴度，IBD抗体阳性率提高10％，差异显著（P〈0．05）。30d雏鸡血清中ND、IB抗体水平试验组分别比对照组高1．2和1．2个滴度，IBD抗体阳性率提高10％，差异显著（P〈0．05）。分别减少鸡发病率和死亡率6．7个百分点和5个百分点。表明缓释复方免疫增强剂能够提高鸡的免疫力，增强蛋鸡体液免疫功能，提高抗体水平，延长疫苗免疫保护期，减少发病率和死亡率，具有显著的经济效益。     

鸽新城疫四元材料油乳剂灭活苗的试制

采用鸽新城疫ND-GS 01株毒为种毒.通过种子毒在非免疫健康鸡胚上增殖动态的试验研究表明,ND病毒在羊水、尿囊膜(包含羊膜)、尿囊液中含量较高、增殖动态趋于一致,而在胚体及卵黄中含量较低.因此,在此基础上,研制出四元材料(尿囊液、尿囊膜、羊膜、羊水)混合油乳剂灭活苗.经急性毒性试验,安全性检验,最佳免疫剂量测定,效力试验综合分析,表明该疫苗抗原性良好,对健康鸽都很安全.每鸽皮下注射0.5 mL疫苗后用红细胞凝集抑制试验(HI)检测抗体,免疫后9 d抗体效价开始上升(平均为3.1 log2),21 d达到峰值(平均为9.2 log2).180 d仍可维持较高水平(平均为6.7 log2).免疫后30 d、90 d、180 d用强毒株200ELD50/0.1 mL攻击,其保护指数均为100%.疫苗在11℃～20℃下保存30 d、60 d、90 d,4℃～8℃下保存30 d、60 d、90 d、120d、180 d,疫苗的性状和免疫特性不变.     

兽用抗体制品制造技术与应用

重点介绍了目前我国兽用抗血清、卵黄抗体和单克隆抗体等方面的发展情况,并以实例对制品的理论、制造技术和应用作以简要说明。     

抗体在动物医学中的研究进展

自抗体被发现以来，人们有计划地对抗体基因序列进行改造，使抗体及其相关产品在多种动物疾病诊断和治疗中发挥着重要的作用。抗体工程技术随着现代生物技术的发展而不断发展，将在动物医学领域占有越来越重要的地位。     

基因工程小分子抗体及其在动物疾病研究中的应用

利用基因工程方法构建的小分子抗体,不仅具备亲本抗体可与抗原特异性结合的特征,更因其分子量小、组织穿透性强、免疫源性低、血液清除快、可经济方便地生产等优点在疾病的诊断和治疗中凸显出重要价值。文章对基因工程小分子抗体结构、抗体功能、在动物疾病研究中的应用等方面的进展情况进行了简要综述。     

Development and validation of an improved enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of thyroglobulin autoantibodies in canine serum samples

An enzyme-linked immunosorbent assay to detect thyroglobulin autoantibodies (TGAB) in canine serum was developed and validated. The test result for each sample was derived from the optical density readings (OD) and expressed as an Ab-score(%) calculated from three in-house calibrators. The assay specifically detected TGAB as judged from lack of response in the assay after samples had been incubated with specific antigen. Intra- and interassay coefficients of variation ranged from 2.0–4.9% and 4.6–9.9%, respectively. The detection limit, an Ab-score of 5.6%, was close to the median Ab-score of 10% observed in healthy dogs (n = 132). The median Ab-score of dogs with primary hypothyroidism and lymphocytic thyroiditis (n = 11), skin diseases (n = 35), and non-thyroidal diseases (n = 63) was 340%, 12%, and 8%, respectively. The prevalence of TGAB in hypothyroid dogs with lymphocytic thyroiditis (sensitivity) was 91% (95% confidence limits: 59%–99%). In dogs with dermatological diseases without lymphocytic thyroiditis the prevalence of TGAB was 3% corresponding to a specificity of 97% (95% confidence limit: 85%–100%). In dogs with non-thyroidal diseases and healthy dogs the prevalence of TGAB was 5% and 6%, respectively. The diagnostic accuracy of serum TGAB was evaluated by subjecting the data from 11 dogs with lymphocytic thyroiditis and 35 control dogs without lymphocytic thyroiditis to receiver-operating characteristic curve analysis. The area under the receiver-operating characteristic curve (W = 0.966; 95% confidence limit 87%–100%) was significantly higher than that of a worthless test (0.5) (P < 0.0001), thereby indicating that serum TGAB measurements distinguished between dogs with and without lymphocytic thyroiditis.     

鸡抗大肠杆菌血清抗体和卵黄抗体变化规律研究

用猪源大肠杆菌四价(K88、K99、987P、F41)灭活疫苗免疫蛋鸡,微量凝集法定期检测蛋鸡血清抗体和卵黄抗体的效价。结果表明,血清抗体比卵黄抗体出现早,免疫蛋鸡血清中和卵黄中4种抗体的消长规律基本相似,但不同抗体水平之间存在明显的差异,整个试验期间血清抗体水平均比卵黄抗体水平高。     

Indirect fluorescent antibody techniques for demonstration of trout viruses and corresponding antibody

Two variations of the indirect fluorescent antibody technique (FAT) have been utilized in the work concerning two important virus diseases of trout, viral haemorrhagic septicaemia (VHS) and infectious pancreatic necrosis (IPN). A “two layer” indirect FAT allowed demonstration of the respective viruses in cell cultures and a “three layer” indirect FAT allowed demonstration of trout antibody to the viruses. Antibody, by means of the latter technique, could be demonstrated only in artificially immunized trout.     

乙肝表面抗体和抗人红细胞单克隆抗体的F(ab′)_2偶联与鉴定

制备人红细胞非凝集型单克隆抗体,形成双功能抗体试剂,用于临床诊断。用人O型红细胞膜蛋白作为抗原免疫Balb/c小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合,制备非凝集型单克隆抗体,通过化学偶联法将非凝集性单克隆抗体和乙肝表面抗体的F(ab′)2片段偶联,制备出双功能抗体,用直接凝集法检测乙肝表面抗原。获得5株分泌非凝集型杂交瘤细胞,利用戊二醛一步法制备出双功能抗体,形成全血凝集检测试剂,并进行了初步鉴定。     

蓝舌病Ⅰ型灭活疫苗免疫绵羊后中和试验和cELISA检出抗体的特点与关系

为比较蓝舌病病毒(BTV)cELISA和血清中和试验(SNT)检测方法的特点与关系,通过灭活、浓缩,制备抗原含量为1、5、10、50、100μg/mL的BTV-1型灭活疫苗。每个含量为1组,并设对照组,每组6只绵羊,分别在0、3周免疫。每周采血1次,共采血6次。对所采血样分别用cELISA和SNT方法进行抗体检测。cELISA检测结果显示,免疫后第1周,抗体阳性率达到80.00%,第4周全部免疫羊转为抗体阳性,抗体产生较为迅速;SNT检测结果显示,中和抗体阳性率从免疫后第1周的6.67%持续上升至第3周的36.67%,至第4周达到70.00%,中和抗体产生持续而缓慢。随着时间延长,2种检测方法的符合率由23.33%增加到76.67%。当绵羊同时产生中和抗体和cELISA抗体时,中和抗体效价与cELISA抑制率间有显著的线性相关关系(r=0.63),相关方程为y=0.38+0.05χ。分析认为,中和抗体出现的时间之所以晚于cELISA抗体,可能是因为与宿主细胞识别并吸附的主要部位VP7蛋白位于病毒衣壳的中间位置,其主要表面抗原位点暴露需要时间。     

Survivability,immunity, growth and production traits in indigenous and White Leghorn breeds of chicken

ABSTRACT

1. The survivability, innate and adaptive immunity, growth and production traits up to 72 weeks of age were determined in Ghagus, Nicobari (unimproved indigenous) and White Leghorn (WLH) breeds and the study investigated links between innate and adaptive immunity and survivability and production traits.

2. At 20 and 40 weeks of age, there was a significant effect of breed on innate immunity assessed by measuring titres of natural antibody (NAb) binding to rabbit red blood cells (RRBC) and adaptive immunity assessed by measuring specific antibody titre (SpAb) to Newcastle disease virus.

3. Highest survivability was in WLH (91.6%) followed by Nicobari (87.1%) and Ghagus (82.9%) breeds. Growth traits at different ages were higher (P< 0.001) in Ghagus followed by WLH and Nicobari breeds. Egg production up to 72 weeks was higher (P < 0.001) in WLH followed by Nicobari and Ghagus breeds, whereas egg weight at different ages was higher (P < 0.001) in WLH than Ghagus and Nicobari breeds.

4. NAb titres measured at 20 weeks were significantly (P = 0.002) associated with the survivability of hens during 20 to 72 weeks of age. Breed-wise analysis showed a significant (P = 0.019) association between NAb titres at 20 weeks and survivability in the Ghagus breed. Furthermore, NAb titres at 20 weeks were higher in hens which survived to 72 weeks compared with those that died (P = 0.002).

5. Measuring NAb titres to RRBC is quick, economical and simple. This method has potential to be used in a breeding programme to increase survivability of laying hens.     

单链抗体及其在肿瘤诊断和治疗中应用研究进展

单链抗体(ScFv)是将抗体重链可变区和轻链可变区通过一段连接肽连接而成的重组蛋白,也是目前报道最多的基因工程抗体。ScFv具有分子质量小,免疫原性低,无Fc端,不易与具有Fc受体的靶细胞结合,对肿瘤组织的穿透力强,可以与其他效应分子连接成抗肿瘤融合蛋白等特点,是保持抗体亲和性和特异性的最小功能性抗体片段,广泛应用于医学和生物技术研究领域。文章介绍了ScFv的特点、基因来源、构建、表达及其在肿瘤的诊断和治疗中的应用研究进展。