Freezing preservation technique of honeybee semen

中华蜜蜂精液在液氮(－196 ℃)中贮存121 d,精液与含有8％二甲亚砜的三羟基氨基甲烷缓冲稀释液以1∶1.5混合,不用平衡,在广口保温瓶中距液氮面2 cm或5 cm处预冻,在35～39 ℃水浴中解冻,可产生较好的解冻后活力比率(超过60％).当室温高于20 ℃时(4月份),样本必须于13 ℃下平衡0.5 h左右,其解冻后活力比率可达30％.春季采集并冷冻的样本,其解冻后活力不如冬季采集并冷冻的.用在液氮中贮存了1～121 d的精液分别以4～5 μL的剂量给24只处女王人工授精,4只开产但首先产的不是受精卵.解冻后的精液能够于13 ℃下保存46 h.磺胺不能用于精子冷冻.     

不同解冻温度对精子活力的影响

温度是精子最敏感的外界因素之一。人们的注意力多集中在稀释液和冷冻方法的研究,对冷冻精液的解冻方法和技术的研究不足。但实践证明,牛精液冷冻效果好坏与解冻温度有很大关系。长期以来,人们沿用冷冻精液的解冻温度38～40℃解冻冷冻精液。为此,可以通过本试验了解不同解冻温度对牛冷冻精子复苏的影响,找出适宜牛细管冷冻精液的最佳解冻温度。     

不同温度解冻精液对母牛受胎率影响的试验

近年来,颗粒精液逐渐被细管精液所取代,细管精液携带方便,解冻操作简单,便于上门服务,故我们用70℃、90℃、40℃和体温不同温度的解冻细管精液对母牛情期受胎率作了试验,试验表明,体温解冻受胎率为34%,40℃解冻受胎率为44%,70℃与90℃解冻差异不大,但比40℃解冻受胎率提高34%和36%,比体温解冻提高44%和46%,差异极显著,现将试验结果报道如下:     

布尔山羊细管冷冻精液研制初报

首次在国内建立了布尔山羊的细管精液冷冻程序。试验证明,选用３０ｇ／Ｌ的葡萄糖、１３ｇ／Ｌ的柠檬酸钠和１ｇ／Ｌ的乙二胺四乙酸钠（ＥＤＴＡ）作基础稀释液,乙二醇作保护剂,精液冻前经１００ｍＬ／Ｌ卵黄处理,离心除去精清。精液稀释并经冻前处理后装入０．５ｍＬ细管,在４℃下平衡１．５ｈ,再以１１～３０℃／ｍｉｎ的速率降温至－８０℃以下（３～５ｍｉｎ）投入液氮,可获得良好的冷冻效果。用乙二醇作保护剂的冷冻精液,解冻后在１２～１５℃的常温下放置２４ｈ,其活力仍可满足输精的要求。     

波尔山羊细胞冷冻精液保护保存效果研究

通过对4种波尔山羊细管冷冻精液保护液保存效果对比试验，筛选出稀释后精子活力，解冻后精子活力及解冻后室温保存12h精子活力较好的保护液，并且用于细管冷冻精液的批量生产和推广。     

猪精液冷冻与常温保存技术的研究

为研究冷冻保存和常温((17±0.5)℃)保存后猪精子活率、活力和顶体完整率,比较了猪精液冷冻稀释液中2种甘油含量细管法的快速冷冻效果,以及不同解冻温度对冷冻精液的影响,采用细胞计数法、FDA-PI双重染色法与Giemsa染色方法检测精子的活率、活力和顶体完整率。结果显示:3%(体积分数,下同)甘油冷冻解冻后精液的活率、活力(38.54%、52.24%)显著(P<0.05)高于2%甘油组(15.63%、28.22%),但3%甘油组顶体完整率(11.55%)显著(P<0.05)低于2%甘油组(21.71%)。38℃水浴解冻后的精子在39℃培养箱中4 h内活率高于0.3,而50℃水浴解冻后1 h后的活率低于0.3。精液稀释液Anderohep和BTS在常温((17±0.5)℃)保存新鲜猪精子的活率与顶体完整率上效果相似,保存3 d内精子活率达0.6以上,保存6 d内精子活率为0.3以上。结果表明,使用3%甘油冷冻保存及2种常温保存稀释液均可以较好地保存精子。     

猪精液0.5 ml细管快速冷冻和解冻方法的优化

 【目的】优化冷冻-解冻方法,提高0.5 ml细管快速冷冻保存猪精液的质量。【方法】冷冻方法：分别将细管水平置于液氮面上方3、5、7、9和11 cm处,每一水平位置细管分别熏蒸3、5、10、15和20 min后投入液氮保存,37℃×30 s水浴解冻,确定最优冷冻方法;在选择最优冷冻方法的基础上,分别采用37℃×30s(对照组)、42℃×25 s、47℃×20 s、52℃×15 s、57℃×10 s和62℃×5 s共6种方法水浴解冻,确定最佳解冻方法。【结果】采用3 cm×10 min冷冻方法,解冻0、8 h精液中精子活率、质膜完整率和顶体完整率均最高。采用相对“高温短时”解冻,精子活率、质膜完整率、顶体完整率和线粒体膜电位均较高,同时丙二醛浓度降低;57℃×10 s和62℃×5 s解冻的精子各项指标无显著差异（P＞0.05）,但前4项指标显著高于对照组（P＜0.05）,丙二醛浓度显著降低（P＜0.05）。【结论】优化猪精液0.5 ml细管快速冷冻的冷冻和解冻方法可以显著提高解冻质量,采用3 cm×10 min冷冻、57℃×10 s或62℃×5 s解冻方法效果最佳。     

牛细管冷冻精液的解冻研究近况

<正> 牛冷冻精液的解冻方法,因颗粒、安瓿和细管法的不同差别很大(如1977Olar等)对安瓿冷冻精液的研究,1979 A.A.EI—Men—ufi和B.等关于颗粒冷冻精液的研究)。随着冷冻精液在养牛业中的普及率不断提高,细管冷冻精液的应用比重越来越大,据1977—1978年37个国家统计,细管法占90％。关于细管冷冻精液冷冻前的处理和受胎率的关系等方面的资料很多。细管冷冻精液的解冻方法,解冻后的处理和精液品质与受胎率的关系等也有不少研究。但是作为一个完整的解冻程序     

藏獒精液冷冻技术的研究

以藏獒为试验材料,对藏獒精液冷冻过程中的几个主要技术环节进行研究,旨在确定适合于藏獒精液冷冻保存的方法.对藏獒精液冷冻过程中降温平衡时间、不同液氮面高度和解冻温度进行研究,结果表明精液用200 Ml水进行降温平衡,距液氮面3 am熏蒸,用40℃解冻时精液的冷冻效果最好.     

山羊精液冷冻保存技术研究

[目的]探索山羊精液的冷冻方法。[方法]以甘油为冷冻保护剂,采用细管法冷冻保存山羊精液,探讨甘油浓度和添加时间、冻结方法和解冻温度对山羊精液冷冻效果的影响。[结果]在稀释液中添加6%和7%甘油的处理组中,冻后精子活率与复苏率均显著高于添加3%、5%甘油的处理组。配液时添加6%甘油的处理组中冻后精子活率与复苏率均显著低于在4℃平衡后添加的处理组。把平衡的山羊精液分别在离液氮面3 cm处熏蒸9 min和-80℃冰箱中冻结9 min,前者的精子复苏率显著低于后者。在解冻温度分别为40、45和50℃的处理组中精子冻后活率与复苏率显著高于解冻温度为55和60℃的处理组,说明解冻温度以40～50℃为宜。[结论]在山羊精液冷冻保存中,甘油的最佳添加时间为4℃平衡后冻结前。     

中华蜜蜂精液的冷冻贮存技术(英文)

中华蜜蜂精液在液氮（－ １９６ ℃） 中贮存１２１ ｄ,精液与含有８％ 二甲亚砜的三羟基氨基甲烷缓冲稀释液以１∶１．５ 混合,不用平衡,在广口保温瓶中距液氮面２ ｃｍ 或５ ｃｍ 处预冻,在３５～３９ ℃水浴中解冻,可产生较好的解冻后活力比率（超过６０％ ）．当室温高于２０ ℃时（４ 月份）,样本必须于１３ ℃下平衡０．５ ｈ 左右,其解冻后活力比率可达３０％ ．春季采集并冷冻的样本,其解冻后活力不如冬季采集并冷冻的．用在液氮中贮存了１～１２１ ｄ 的精液分别以 ４～５ μ Ｌ的剂量给 ２４ 只处女王人工授精,４ 只开产但首先产的不是受精卵．解冻后的精液能够于１３ ℃下保存４６ ｈ．磺胺不能用于精子冷冻．     

DMA和甘油对公鸡精子冷冻保护作用的比较

比较了6%的DMA和11%的甘油冷冻洪山公鸡精液后精子在存活率、顶体完整率方面的差异.结果表明,用DMA做冷冻保护剂的颗粒型冷冻精液解冻后的精子存活率和顶体完整率分别为0.320±0.041和0.600±0.049,用甘油做冷冻保护剂的颗粒型冷冻精液解冻后的精子存活率和顶体完整率分别为0.313±0.036和0.597±0.040,两者差异不显著.用DMA做冷冻保护剂的细管型冷冻精液解冻后的精子存活率和顶体完整率分别为0.388±0.034和0.652±0.042,用甘油做冷冻保护剂的细管型冷冻精液解冻后的精子存活率和顶体完整率分别为0.433±0.054和0.750±0.048,前者在精子存活率(P＜0.05)和顶体完整率(P＜0.01)方面都显著低于后者.     

圆筒形贮存管对猪精液冷冻保存效果的影响

试验研究了用圆筒形贮存管冷冻猪精液时不同漂浮时间和解冻时不同解冻温度、时间对冷冻保存效果的影响。猪精液冷冻时,圆筒形贮存管在放入液氮罐前,先置液氮面上3 cm处,分别漂浮熏蒸5、10、15、20 min后投入液氮中保存。精液解冻时,分别在37℃＋1.5 min、52℃＋1.0 min、70℃＋0.5 min解冻处理。结果表明,漂浮15 min处理可显著提高猪精液冷冻后的精子活率、质膜完整率和顶体完整率。52℃＋1.0 min处理组的猪精液冷冻后精子活率、质膜完整率和顶体完整率显著高于其它2个处理组。试验结果还证实,用圆筒形贮存管冷冻猪精液是可行的,所获得的冷冻后最高精子活率与用0.25 mL麦管获得精子活率无显著差异。     

不同解冻方法对猪精液冷冻效果的影响

以姜曲海种公猪冷冻精液为研究对象,观察了使用2种不同解冻方法对精液品质及体外受精胚胎发育的影响.试验结果表明,冷冻精液从液氮取出后,使用37℃水浴30s解冻在精子运动度、质膜完整率、顶体完整率和体外受精胚胎发育率方面均显著优于在室温放置20s后迅速投入37℃水浴10s解冻(P＜0.05).而与新鲜精液体外受精卵裂率和4细胞胚胎发育率相比,37℃水浴30s解冻方法与对照组无显著差异(P＞0.05).表明37.C水浴30s解冻方法优于室温放置20s后迅速投入37℃水浴10s解冻方法.     

不同解冻方法对奶牛冻精活力的影响

将 5头荷斯坦种公牛细管冻精在不同温度、不同时间下进行解冻 ,对解冻后的精液品质进行检测。结果表明 :解冻后顶体正常率、精子活率随解冻温度升高而升高 ,而畸形率随解冻温度升高而降低 (P<0 .0 1) ;高温(37℃ ,75℃ )下随着解冻时间延长 ,活率增高 (P<0 .0 5 ) ;低温 (5℃ )、室温 (15℃ )下解冻 ,活率与解冻时间长短没有明显关系 (P>0 .0 5 ) ;精子顶体正常率、畸形率、存活时间与解冻时间无显著关系。在实践中建议使用 75℃ 2～6 s解冻。     

母牛发情鉴定与适时输精技术(下)

三、细管冻精解冻方法 解冻时首先把水浴锅(保温杯)内的水温调至37℃～40℃,取1支细管冻精迅速泡人温水中并且轻微晃动,待溶解后立即取出,用纱布或消毒纸擦干细管上水珠,用细管剪剪掉机器封口端(注意:剪口要正,左面要平整,剪口不能偏,否则输精时会发生精液倒流而影响输精效果),装入输精枪内,然后在恒温的显微镜下检查精子的活力,取一小滴精液放在载玻片上再压上盖玻片,在显微镜上检查精子活力,解冻后的精子活力必须在0.35以上才能使用.用消毒的纱布或毛巾包好,在1小时之内给母牛输精.     

肉羊细管冷冻精液的制作

该文详细介绍了肉羊细管冷冻精液的制作过程,重点强调了稀释液的配制,冷冻温度以及最佳解冻温度。     

牛冷冻精液人工授精技术的优点和要点

<正>牛冷冻精液人工授精技术是指利用器械以人工方法采集种公牛精液,经过特殊加工制作成细管冻精贮存在零下196℃的液氮中,输配前将其解冻稀释成液体,然后用输精枪将精液输入发情母牛子宫内使其受孕的一种操作技术。近年来,牛冷冻精液人工授精技术作为一项低成本、高效益的实用技术,在畜牧业生产中发挥着越来越重要的作用,普及广大农村,深受广大养牛户青睐。笔者根据实践经验,对牛冷冻精液人工授精技术的优点和要点进行阐述,为人工授精人员提供参考依据。1、息烽县牛冷冻精液人工授精概述1.1牛冷冻精液人工授精输配站(点)建设息烽县辖4镇6乡,161个行政村,9个居民委员会,县级     

浅谈奶水牛冻精输精配种的关键技术

印度摩拉水牛是较好的乳用水牛品种,它与我国本地水牛杂交的杂种较本地水牛体型大,生产发育快,役力强,产奶量高.细管冷冻精液是目前一种理想的剂型,具有冷冻时受冻均匀、解冻时受热一致、解冻方便、输精时不易污染、避免精液和液氮的直接接触、精子活力好、受胎率高的优点.笔者长期从事印度摩拉水牛与本地母水牛的杂交改良工作,积累了奶水牛细管冻精人工授精经验,本文总结母牛发情时间、细管冻精的解冻与装枪、适时输精和输精等关键技术环节,供参考.     

使用细管冷冻精液提高授胎率的几个问题

目前，我们所使用的细管冷冻精液较过去用的颗粒精液在应用上更方便、更卫生、更快捷、受胎率更高。为冷冻精液配种提供了优越的条件。但是，在现时实际操作过程中，由于家畜人工授精操作技术人员的技术水平等级差异，改良配种设施不齐备，一家一户串门或是上门配种输精方式，不同程度的降低了细管精液的优势，就此，作者就从事改良配种工作的切身体会，对细管冷冻精液使用方法，提出自己的看法。