冷应激对猪的影响及其预防

简述应激及冷应激的概念与生理学机制;综述冷应激对猪的影响;并提出预防措施。     

猪精液稀释液中不同水质对精子活力的影响

通过对猪精液稀释液采用不同水质的试验研究，结果表明：无污染的高山矿泉水和质量好的蒸馏水作稀释用水的精子存活时间最长，而用天然河水作稀释用水的精子存活时间最短。     

褪黑素对热应激猪精子质量的影响

为研究褪黑素(Melatonin,MLT)对热应激引起的猪精子质量下降的缓解作用及其机制。首先用免疫荧光方法检测MLT受体在猪精子上的存在和分布;然后将稀释后的精子分为对照组(ck)、热应激组(H)、MLT组(M)、热应激+MLT组(H+M)、热应激+MLT受体拮抗剂Luzindole组(H+L)和热应激+MLT受体拮抗剂Luzindole+MLT组(H+L+M)6个组,处理结束后检测各组精子活率、活力、线粒体活性、钙离子水平以及顶体完整率。结果显示:猪精子中存在MLT受体MT1和MT2,且均分布于精子头部;与对照组相比热应激组各项指标显著下降,MLT组精子活率没有显著改变(P0.05),但精子活力、线粒体活性、钙离子水平和顶体完整率显著升高(P0.05)。添加MLT受体拮抗剂Luzindole后精子活力、线粒体活性和钙离子水平显著下降(P0.05),顶体完整率呈一定程度下降,但差异不显著(P0.05)。以上结果表明:热应激会导致猪精子质量显著下降,并且MLT能通过受体途径改善热应激对猪精子质量的影响,但同时也存在非受体介导的作用。     

钙离子对猪精子蛋白酪氨酸磷酸化及活力影响

研究主要探究钙离子(Ca2+)对猪精子蛋白酪氨酸磷酸化及活力的作用。利用计算机辅助精子活力分析仪(CASA)检测、蛋白免疫印迹测定不同Ca2+浓度对精子活力指标及蛋白酪氨酸磷酸化水平的影响,并对精子样品的酪氨酸磷酸化蛋白的分布情况进行观察。结果显示,当Ca2+浓度≤1.0mmol/L时,精子活力和蛋白酪氨酸磷酸化水平增高;然而,当Ca2+浓度≥3.0mmol/L时,则明显抑制精子活力和蛋白酪氨酸磷酸化水平,尤其分子量约为27和34kDa的高丰度蛋白磷酸化程度明显降低(P0.05)。高浓度Ca2+(4.0mmol/L)明显抑制鞭毛处蛋白酪氨酸磷酸化。因此,细胞外钙离子对猪精子活力和蛋白磷酸化起到重要调节作用,低浓度Ca2+促进精子活力及蛋白酪氨酸磷酸化,高浓度Ca2+(≥3.0mmol/L)抑制精子活力及蛋白酪氨酸磷酸化。本研究初步明确了Ca2+浓度对猪精子蛋白磷酸化及精子活力的影响,为进一步研究精子获能提供参考。     

不同稀释液对猪精子活力与保存时间的影响

通过研究不同配方的稀释液在相同的稀释倍数及同一保存条件下,对猪精子活力的影响来选择合适的猪精稀释液。试验选用灌南县家畜改良站内的4头成年公猪的精液作为材料,采用4种稀释液配方,分别进行稀释,观察精子活力和保存时间。结果表明,用葡—柠—乙液稀释的精液,在32h内精子活力平均数显著高于葡萄糖液和葡—柠液,精子存活时间也长于其它稀释液。     

精浆浓度对17℃保存下猪精子活率和活力的影响

为了解精浆浓度对精子常温保存的影响,对含不同浓度精浆的商业化CXM稀释剂和自制稀释剂的精液于17℃下的保存效果进行比较.结果表明:当稀释剂为CXM时,25％精浆获得了最好的保存效果,含0、5％精浆也有较好的保存效果;而使用自制稀释剂时,含50％、75％精浆获得了较好的保存效果,其次是含25％精浆.说明在常温保存中一定浓度的精浆有利于维持精子的活力和活率,但这与稀释剂组成有关.在实际生产应用中,在稀释剂中约添加25％精浆对维持精子在常温保存中的活力和活率可能有较好效果.     

猪精子内阳离子在保存、冷休克和快速冷冻中的变化

在37℃保存过程中,猪精子内K~ 、Ca~( )、Mg~( )和Zn~( )的水平有所下降,而Na~ 则有所升高。冷休克和快速冷冻都能使精子内的K~ 水平降低而Na~ 、Ca~( )和Zn~( )水平升高,Mg~( )的变化不大。分析结果表明:(1)精子内离子的变化同精子膜受损伤的程度有关;(2)猪精子内似乎具有在某些低温状态下与Zn~( )和Ca~( )结合的成分。     

稀释液配方和稀释倍数对猪精子活力及运动参数的影响

为研究稀释液配方和稀释倍数对猪精子活力及运动参数的影响,筛选了5个稀释液配方,设计了6个稀释倍数,采用CASA系统检测精子活力、活动率、运动速度及运动方式等参数指标,利用SPSS 19.0软件中GLM程序进行分析表明,5个配方精子活力(PR)或精子活动率(PR+NP)中,F_2最高,F_3次之,但两者间差异不显著,与其他3个配方比较差异极显著;精子速度方面,同样以F_2最快,仍与F_3差异不显著,与其他配方差异显著或极显著;精子运动形式参数方面,WOB指标中,5个配方间差异均不显著;其他指标,F_2和F_3较高。稀释倍数上,就PR、PR+NP而言,两者均随稀释倍数的增大而表现出先上升后下降的趋势。因此,稀释液配方中,经典的猪稀释液配方为最优,确定配方为:葡萄糖5.0 g、柠檬酸钠0.3 g、乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na);稀释倍数PR、PR+NP中,D_(0.5)最优,但从经济效益来看,D_1为最佳。     

猪精子冷冻技术的研究

 采用手握法采集健康成年的长白公猪猪精子，室温离心后，采用液氮熏蒸法细管冷冻猪精子。以精子活力为判定指标，比较了平衡时间和甘油浓度对猪精子冷冻的影响。结果表明:(1)Ⅱ组精子冷冻复苏后精子活力（35.83±5.38）%要高于其他组（P＜0.05）；(2)Ⅰ组和Ⅱ组冷冻复苏精子的活力［（29.75±4.38）%，（28.40±8.55）%］要高于其他组（P＜0.05），由此得出最佳平衡时间和甘油浓度。     

鲇精子超微结构及pH、温度对其精子活力的影响

为了解鲇Silurus asotus精子的结构特征,应用扫描电镜和透射电镜技术,对体质量为320⁵50 g的鲇成熟精子结构进行了观察。结果表明:鲇精子由头和尾两部分组成,无明显颈部;精子头部近球形,直径为1.85550 g的鲇成熟精子结构进行了观察。结果表明:鲇精子由头和尾两部分组成,无明显颈部;精子头部近球形,直径为1.85².51μm,头部无顶体,头部内有高度密集的细胞核染色质,头部后方凹陷形成植入窝,植入窝内有近端中心粒和远端中心粒,细胞核后方与质膜的间隙较大(称袖套),其内富含细胞质、线粒体和囊泡等细胞器;尾部细长,无主段和尾段之分,长为44.32.51μm,头部无顶体,头部内有高度密集的细胞核染色质,头部后方凹陷形成植入窝,植入窝内有近端中心粒和远端中心粒,细胞核后方与质膜的间隙较大(称袖套),其内富含细胞质、线粒体和囊泡等细胞器;尾部细长,无主段和尾段之分,长为44.3⁵0.7μm,横切面呈圆形,直径为0.26950.7μm,横切面呈圆形,直径为0.269⁰.308μm,透过横断面可见,鲇精子尾部由轴丝和附属纤维构成,外有一层质膜包裹,轴丝与远端中心粒形成9+2微管结构。研究表明,精子活力的适宜pH为7.00.308μm,透过横断面可见,鲇精子尾部由轴丝和附属纤维构成,外有一层质膜包裹,轴丝与远端中心粒形成9+2微管结构。研究表明,精子活力的适宜pH为7.0⁸.5,适宜温度为258.5,适宜温度为25²9℃,当pH为8.0、温度为28℃时,精子活力最强。     

不同温度对瓶装公猪精液品质影响的探讨

以杜洛克公猪塑料瓶装精液为试验材料,研究了25、28、30、32℃共4个不同温度对公猪精液的影响,结果表明:在不同温度的影响下,精液的色泽没有明显的变化;猪精液在温度达到25℃和28℃时的气味较浓,明显散发出腥味,猪精液外观品质性状表现较好;当温度>25℃时,精子密度降低、畸形率逐渐增高、活率降低。各温度处理间的精子活率变化差异均极显著(P<0.01),当温度达到30℃时,精子活率降至7级以下,且活率下降很快。25℃时精液的各项指标表现最好。     

猪精液冷冻保存试验效果初报

六种常温保存液对猪精液进行预处理后,再利用三种冷冻液进行冷冻保存试验,研究常温保存液和冷冻液对猪精液冷冻保存的影响及它们之间的配合效应,以冷冻-解冻后精子活力作为评定标准。结果表明:六种常温保存液对冻后精子的影响存在显著差异(P=0.003);三种冷冻保护液对冻后精子活力的影响无明显差异(P=0.585),但与常温保存液之间表现出明显的配合效应(P=0.0001),可能与常温保存液和冷冻液的成分及它们之间的相互关系有关。试验说明所选用的三种冷冻基础液对精子活力的影响不大,但与常温保存液配合后却能表现出很强的影响力;就单独分析两种因素对精子活力影响而言,常温保存液的预处理占主导地位。     

猪精液冷冻技术研究进展

概述了猪精液冷冻的研究历史、冷冻损伤机理,并从稀释液添加剂、冷冻保存承载工具、精子密度、精子冷冻种间差异和个体差异等方面阐述了影响猪精液冷冻的因素,介绍了解冻后精子质量的检测方法,探讨了猪精液冷冻中存在的问题并进行了展望。     

猪精液中式稀释液筛选研究

为克服基层单位设备不足 ,药品不全、称量不准、配制工序繁琐等精液稀释液的缺点 ,继吴永孝等用全天然中草药制备牛冻精解冻液获得成功后〔1〕,我们开展了中式精液稀释液的研究课题 ,现将有关猪精液中式稀释液的研究结果报道如下。1　材料与方法1 .1　试验组中式稀释液的制备供试的 4个方剂依次编号为 1号、2号、3号和 4号 ,均由市售常用中药组成。溶剂是天然饮用水。为了验证天然中草药复杂成分的整体效应和便于在生产中应用 ,本试验所用中药一律不用“提纯”工序 ,只按中药的常用水剂方式制备。1 .2　对照液对照液配方为葡萄糖 5g、柠檬酸…     

不同稀释剂对猪冷冻精液的影响

手握法采集12月龄大约克种公猪精液,在37℃下离心,弃去精清,收集浓缩段富含精子部分,用7种不同的稀释液进行稀释,应用液氮熏蒸法制作颗粒冻精。结果表明,在7种稀释液中,7号稀释液优于其他6种稀释液(p<0.05);与其他的冷冻保护剂相比,甘油的冷冻保护性能较好(p<0.01),其适宜浓度为2~4ml/l;干解冻(40~45℃)效果优于湿解冻,解冻后精子活率达0.46~0.49(p<0.05);稀释液中添加安钠咖可有效地延长精子的冻后存活时间(p<0.01)。     

干旱胁迫对黑米花青素含量和PAL活性的影响

以＂龙井一号＂黑米为试验材料,研究干旱胁迫对黑米中花青素含量和PAL活性的影响。结果表明：随着干旱胁迫程度的加重,花青素含量和PAL活性呈上升的趋势;当干旱程度超过一定限度时花青素含量开始下降,而PAL活性仍然上升。     

不同冷源对民猪精液冷冻保存效果的影响

用干冰和液氮作为冻源对民猪精液冷冻效果进行研究,包括对精子活率及顶体完整率的影响.结果表明,以干冰为冻源进行民猪精液冷冻,解冻后精子活率为43.5％,顶体完整率为52.2％;以液氮为冻源进行民猪精液冷冻,解冻后精子活率为41.8％,顶体完整率为51.5％,二者差异不显著.     

猪精液冷冻保存的剂型及品种效应

为了评价细管类型在不同品种公猪精液冷冻中的效果,为猪精液冷冻的实际生产中冷冻细管的选择提供理论依据,试验将长白、大约克与杜洛克3种美系公猪(每品种7头次)精液进行不同细管类型(5.00、0.50、0.25 mL)的分装冷冻,比较各种细管类型下不同品种公猪之间和同一品种公猪不同细管类型精液冻后质量(冻后精子活力、畸形率及顶体完整率).结果表明,①相同剂型下,除了0.25 mL细管分装时杜洛克公猪冻后精子顶体完整率显著(P＜0.05)高于长白公猪外,3种公猪之间在3个指标上差异均不显著(P＞0.05);②3种公猪冻后精子活力最高的剂型均为0.50 mL细管,冻后精子畸形率及顶体完整率最好的剂型均为5.00 mL细管.总之,3种细管类型中,仅0.25 mL剂型存在品种效应,而3个品种公猪却存在着基本类似的剂型效应.     

(冷应激对伊褐红公雏鸡外周血淋巴细胞数目变化的影响

本实验采用80只5日龄雄性伊褐红雏鸡进行急性(24 h以内)、慢性冷应激(3 d ,10 d)实验(比常温低8 ℃),通过脂酶染色法观察外周血T淋巴细胞数目的变化和甲苯胺蓝改良染色法观察法氏囊中肥大细胞数目的变化。结果表明:急性冷应激期间,T细胞数目明显减少(P<0.01),在应激12 h后,细胞数量最低(0.30±0.04 个/视野),应激24 h后,淋巴细胞又有所升高,但还是明显低于对照组。 淋巴细胞总数明显升高(P<0.01),在应激24 h后数值最高(1.29±0.08个/视野);冷应激3 d后,T细胞减少不明显,淋巴细胞总数明显增加。冷应激10 d后淋巴细胞数目极显著减少(1.12±0.12个/视野对1.65±0.09个/视野,P<0.001)、T淋巴细胞数目也极显著增加(0.65±0.08个/视野对0.44±0.02个/视野,P<0.001)。结果提示较正常饲养温度低8 ℃冷应激使雏鸡细胞免疫水平增加。