3种不同柑桔中间砧在树体矿质营养含量上的双重效应 ——Ⅱ

以纽荷尔脐橙/3种不同中间砧/枳为试材进行田间试验研究不同中间砧对基砧根系矿质营养含量的影响。结果表明，3种中间砧对基砧根系P、K、Mg和Fe含量年变化趋势的基本特征无明显影响；而对叶片N、Ca、Mn和Zn含量的年变化趋势特征有明显影响。在年周期的不同时期里，基砧根系K、Ca和Mn含量在3种不同中间砧之间存在显著或极显著差异；而其余矿质营养含量在3种不同中间砧之间只在部分时期里存在显著或极显著差异；而在各矿质营养含量存在显著或极显著差异的不同时期间，该矿质营养含量在3种不同中间砧之间的相对高低差异趋势不全相同。     

3种不同柑桔中间砧在树体矿质营养含量上的双重效应

以纽荷尔脐橙/3种不同中间砧/枳为试材进行田间试验研究不同中间砧对接穗叶片矿质营养含量的影响。结果表明，3种中间砧对接穗叶片N、P、Ca、Fe和Zn含量年变化趋势的基本特征无明显影响；而对叶片K、Mg和Mn含量的年变化趋势特征在一定变化阶段上有明显影响。在年周期的不同时期里，叶片K和Mn含量在3种不同中间砧之间存在显著或极显著差异；而其余矿质营养含量在3种不同中间砧之间只在部分时期里存在显著或极显著差异；而在各矿质营养含量存在显著或极显著差异的不同时期间，该矿质营养含量在3种不同中间砧之间的相对高低差异趋势不全相同。     

基于16SrRNA/DNA分析的土壤微生物生态学效应

基于16SrRNA/DNA分析的实验技术为微生物生态学的研究提供了新的研究方法,从而在微生物多样性、微生物种群分析、重要基因的发现以及遗传物质在微生物之间或微生物与植物之间的水平转移对生态系统的影响等方面都取得了很好的研究进展。     

3种不同柑桔中间砧在树体矿质营养含量上的双重效应—I不同中间砧对纽荷尔脐橙叶片矿质营养含量年变化的影响

以纽荷尔脐橙／3种不同中间砧／枳为试材进行田间试验研究不同中间砧对接穗叶片矿质营养含量的影响。结果表明，3种中间砧对接穗叶片N、P、Ca、Fe和Zn含量年变化趋势的基本特征无明显影响；而对叶片K、Mg和Mn含量的年变化趋势特征在一定变化阶段上有明显影响。在年周期的不同时期里，叶片K和Mn含量在3种不同中间砧之间存在显著或极显著差异；而其余矿质营养含量在3种不同中间砧之间只在部分时期里存在显著或极显著差异；而在各矿质营养含量存在显著或极显著差异的不同时期间，该矿质营养含量在3种不同中间砧之间的相对高低差异趋势不全相同。     

‘晶瑶’草莓高效再生及遗传转化体系的建立

以草莓‘晶瑶’为试材,研究不同激素种类和浓度配比对叶片诱导愈伤、愈伤分化出芽的影响,建立‘晶瑶’草莓叶片的高效离体再生体系。结果表明,‘晶瑶’叶片在MS+2,4-D 0.05 mg/L+TDZ 2.0 mg/L的诱导培养基上不定芽再生率达到79.18%。在‘晶瑶’草莓遗传转化试验中,叶盘对卡那霉素的敏感性最适筛选浓度为30 mg/L,羧苄青霉素的最适抑菌浓度为400~500 mg/L,150μmol/L乙酰丁香酮的加入可提高GUS的瞬时表达率;10 min是最适合农杆菌侵染‘晶瑶’叶片的时间;共培养48 h对叶片转化较适宜,得到抗卡那霉素并呈GUS阳性的抗性芽频率为2.38%,获得了转化阳性植株。     

苎麻遗传转化再生体系的建立

苎麻(BoehmerianiveaL.Guad)是荨麻科苎麻属宿根型草本植物,主要分布在热带和亚热带地区,为我国特产,是重要的纺织纤维和饲料作物。由于苎麻为杂合体,其遗传背景十分复杂,有性杂交等常规方法难以取得育种上的突破,因此,探讨利用基因工程技术改良苎麻品种具有重要意义。本研究以苎麻品种圆叶青叶盘为外植体,选用MS培养基为基本培养基,附加激素BA、IAA、GA3和NAA,通过研究不同激素浓度组合对外植体愈伤诱导及不定芽分化的影响以及不同激素配比对生根的作用,建立了较好的遗传转化再生体系。试验结果表明圆叶青叶盘最适诱导愈伤培养基为MS 6-BA2.0mg/L GA30.4mg/L IAA0.2mg/L 蔗糖30g/L 琼脂7.5g/L;分化培养基为MS 6-BA2.0mg/L GA30.4mg/L 蔗糖30g/L 琼脂7.5g/L;小苗的最佳生根培养基为MS NAA0.2mg/L IAA0.1mg/L 蔗糖30g/L 琼脂7.5g/L。在抗生素浓度梯度筛选实验中获得50mg/L卡那霉素可以抑制叶盘的分化;40mg/L卡那霉素可以抑制再生植株的生根。筛选出的遗传转化再生体系,为进一步利用基因工程技术对苎麻进行遗传改良打下基础。     

沙田柚遗传转化再生体系的建立

以沙田柚的实生苗不同外植体为对象,进行了沙田柚遗传转化再生体系建立研究。研究结果表明：以实生苗上胚轴作为外植体,以MS无机盐＋100 mg/L肌醇＋0.2 mg/L维生素B1+1 mg/L维生素B6+1 mg/L烟酸+3％蔗糖＋0.8％琼脂（pH5.8）＋5 mg/L 6-BA为不定芽诱导培养基,暗培养7 d后,转移至光/暗周期16/8 h的条件下培养,不定芽的分化率高达91.1%;不定芽在1/2MS基本培养基＋3％蔗糖＋0.7％琼脂＋1.5 mg/L IBA＋0.2%活性炭的生根培养基,生根率高达80％;以卡那霉素作选择剂时,选择浓度为50mg/L。     

普那菊苣高效再生体系建立和遗传转化研究

普那菊苣为菊科多年生草本植物,从国外引种后已在我国得到广泛种植。普那菊苣草质柔嫩,适口性优良,营养丰富,牛、羊、猪、鱼、兔极喜食,是一种非常优良的牧草,具有广阔的发展前景。本研究通过对不同激素浓度配比实验,建立普那菊苣的高频再生体系,结果表明MS 6-BA2.0mg/L IBA0.1mg/L培养基可高效诱导愈伤组织和芽的分化,1/2MS培养基可快速诱导根的生成,形成再生植株。通过构建植物表达载体pBI121-GFP,利用农杆菌介导转化普那菊苣以探寻高效的普那菊苣转化体系,结果显示以农杆菌LBA4404为介导菌株、以叶片为转化受体、3d预培养时间和3d共培养时间以及350mg/L羧苄青霉素和40mg/L卡那霉素筛选浓度转化效果较好,为利用普那菊苣生产动物口服型疫苗建立了初步的技术基础。     

番茄遗传转化体系的建立

研究以番茄（Lycopersicon esculentum Mill.）栽培品种“中杂9号”、“毛粉802”和“合作908”为试材,通过对番茄茎段的离体培养,研究不同基因型以及不同激素组合对植株再生的影响。结果表明：以茎段为外植体时中杂9号和毛粉802更适合诱导再生植株形成;IAA与IBA比较,IAA利于芽的形成及正常芽的发育。其中中杂9号最适宜诱导愈伤组织和芽分化培养基为MS＋6-BA2.0mg/L＋IAA0.1mg/L、MS＋6-BA2.0mg/L＋IAA0.4-0.5mg/L,分化率均高达100%,毛粉802最适宜诱导愈伤组织和芽分化培养基为MS＋6-BA2.0mg/L＋IAA0.4-0.5mg/L,分化率高达100%。茎段外植体适宜的生根培养基为MS＋IAA0.5mg/L＋6-BA0.6mg/L,生根率高达80.8%。     

罗汉果遗传转化体系的建立

本研究以罗汉果(Siraitia grosvenorii(Swingle)C.Jeffery)子叶为外植体,通过农杆菌介导法,探讨影响罗汉果转化的几个重要因素,建立罗汉果稳定的遗传转化再生体系。结果表明:农杆菌转化前对子叶进行预培养可以促进细胞分裂,预培养的最佳时间为1d,侵染时间以为20～30min为宜,共培养最佳时间为4d,附加100μmol/L的乙酰丁香酮(AS)可促进转化。通过潮霉素抗性不定芽分化和抗性不定根分化的两轮筛选及PCR检测,获得56株PCR阳性植株,阳性转基因植株频率为6.86%,初步证明目的基因已经整合到罗汉果基因组中。     

芥菜转基因再生体系的建立

以叶用和茎用芥菜的子叶、叶片及下胚轴为外植体,通过筛选12种含不同种类和浓度激素的培养基,综合分析与确定影响芥菜转基因再生体系各因素的最佳值,以及对再生抗性苗的PCR、Southern、Northern及抗虫鉴定,筛选到了能稳定表达外源基因的转基因植株,建立了芥菜转基因再生体系。     

木纳格葡萄组织培养和再生体系的建立

稳定、高效的再生体系是进行木纳格葡萄遗传转化的必要条件。本研究对影响不定芽诱导的外植体类型、基本培养基种类、激素组合和暗培养时间进行了测定。结果表明,叶片和叶柄是适合木纳格葡萄组培的外植体,NN69基本培养基适用于不定芽的诱导。叶片和叶柄不定芽诱导的最佳激素组合分别为TDZ(4 mg/L)+IBA (0.2 mg/L)和TDZ (1 mg/L)+IBA (0.2 mg/L),诱导率分别为4.81%和16.30%。在培养初期,3周暗培养明显促进不定芽的生长,且将不定芽转接到1/2MS+IBA (0.1 mg/L)的生根培养基上能够产生不定根,生根率为100%。本研究建立的木纳格葡萄再生体系,可为其后续遗传转化等研究提供技术参考。     

鞑靼忍冬再生体系的建立

以鞑靼忍冬的成熟种胚作为外植体,建立再生植株体系,结果表明:成熟种胚采用2%的NaClO溶液处理时,最佳消毒处理时间为6 min,存活率为75%。诱导愈伤组织以及诱导不定芽的最佳培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,愈伤组织诱导率为74.85%;不定芽诱导率为69.35%。增殖的最佳培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,增殖率为76.58%。诱导生根最佳培养基为1/2 MS+0.5 mg/L IBA,生根率为76.45%,平均根长为4.25 cm。通过组织培养再生植株,对其快速繁殖、种质资源保存和改良及规模化生产利用以及工厂化育苗技术研究提供理论基础。     

罗汉果遗传转化受体再生体系的建立及发根农杆菌转化初探

以罗汉果品种“青皮果”试管苗的茎段和叶片为外植体,研究适合于遗传转化的受体再生系统,并进行了发根农杆菌转化的初步研究。试验结果表明茎段的再生能力强于叶片,且对农杆菌敏感,是进行遗传转化合适的受体材料。在MS基本培养基附加BA 1mg/L、KT 1mg./L、NAA 0.2mg./L、蔗糖30 mg/L培养基中,20d龄的茎段不定芽诱导率为100%,平均每个外植体诱导的不定芽数达到9.7个,移苗成活率90%以上;外植体培养前的割伤处理有利于提高出芽数;发根农杆菌转化茎段诱导出毛状根。罗汉果毛状根的诱导和培养将为罗汉果药用成分的研究和开发提供新的途径。     

石蒜属植物再生体系与鳞茎花卉遗传转化体系研究进展

石蒜属是我国重要的观赏植物资源,其再生体系和遗传转化体系的建立对于解决种球繁育及种质创新难题具有重要意义.我国一些科研单位对石蒜属的组织培养进行了研究,但目前尚未建立成熟高效的再生体系,石蒜属的遗传转化也鲜有研究报道.本研究综述了我国近年来有关石蒜属植物组织培养的研究进展,主要包括外植体选择与处理、培养基激素配比与培养条件,以及再生体系建立可能遇到的问题.最后,概述了百合、水仙等鳞茎类花卉的转基因研究现状,以期为今后的石蒜遗传转化研究工作提供借鉴.     

3个杨树品种叶片再生体系的建立

以中林2001杨、南林95杨、南抗杨等3个杨树品种叶片为材料,选用15种诱导愈伤组织培养基、9种分化培养基和7种生根培养基,研究不同基因型、激素组合以及外植体状态对再生体系建立的影响。结果表明：3个品种的愈伤组织诱导、分化效果与NAA/6-BA比值有一定相关性,在愈伤组织诱导中NAA/6-BA比值在4:1~5:1之间,愈伤组织分化中NAA/6-BA比值大体在1:4~1:10之间;不同品种在上下表皮气孔数、诱导愈伤、分化再生培养上都存在一定的基因型差异;接种叶片的不同放置方式、叶片上的不同部分对愈伤组织诱导具有显著影响。     

葫芦科植物的遗传转化研究进展

葫芦科植物中包括多种以采收果实为主的蔬菜作物，对其进行品质改良、延迟成熟和抗病虫害的遗传转化研究具有重要的理论和实践意义。目前，在葫芦科植物中已建立了子叶、茎尖、胚轴、茎段、原生质体和子叶节等的再生体系；用于遗传转化的方法有农杆菌介导法、基因枪法、花粉管通道法、DNA浸泡法等；用于转化的目的基因多为抗病毒病基因和延迟成熟的基因；NPTII基因为最常用的筛选标记基因。主要对以上几个方面进行综述，并讨论了葫芦科植物遗传转化过程中的影响因素及存在的问题。     

唐菖蒲子球茎直接分化再生体系的建立

本研究以唐菖蒲子球茎为外植体,采用二次回归正交旋转组合设计唐菖蒲芽分化数学模型,获得了最优化的唐菖蒲芽分化培养基(MS NAA0．2 BA2．0 KT0．8)和生根培养基(MS IBA0．5),研究结果还显示单芽发育成的植株的移栽成活率显著高于丛生芽发育而成的植株。初步建立了唐菖蒲利用外植体直接分化再生体系。     

直接诱导不定芽的矮牵牛再生体系的建立

以矮牵牛的叶片作为外植体,研究了不同浓度的激素配比对叶片直接诱导不定芽、诱导愈伤组织分化不定芽及生根的影响。得到了最适的直接诱导不定芽培养基的激素配6-BA1.5mg/L+IBA0.5mg/L、诱导愈伤组织分化不定芽的培养基的激素配比6-BA1.5 mg/L+NAA0.3~0.5 mg/L及生根培养基IBA0.03~0.05 mg/L。并在时间上,从芽的长势、芽的生根情况进行比较,结果表明：直接诱导的不定芽比诱导愈伤组织分化的不定芽所需的时间短、长势好、生根快。