辽宁绒山羊卵泡闭锁与颗粒细胞凋亡的研究

采用TUNEL原位法和DNA梯度电泳法等方法对卵巢上闭锁卵泡中凋亡的颗粒细胞类型和分布状况等进行研究.结果表明,辽宁绒山羊闭锁卵泡是细胞凋亡引起的.DNA梯状电泳表明,不同健康程度卵泡颗粒细胞凋亡程度不同;而颗粒细胞TUNEL原位标记表明,健康卵泡、轻度闭锁卵泡及闭锁卵泡中颗粒细胞凋亡比例分别为13.21%±1.23%、32.13%±2.13%、51.31%±3.02%;不同健康程度卵泡中类固醇激素水平不同,健康卵泡中E2水平较高,孕酮浓度较低;闭锁卵泡中E2浓度较低,P4浓度较高,健康、轻度闭锁和闭锁三类卵泡中E2/P4比值分别是2.62±0.03、0.074±0.000 3、0.028±0.000 4.     

鹅卵泡颗粒细胞凋亡及其与生殖激素间的关系

采用正处于产蛋期的扬州鹅10只，取其卵泡分离颗粒层细胞，用70％乙醇固定后，应用流式细胞术分析颗粒细胞凋亡情况。同时，用连续采血的方法，每3h采血一次，分离血浆，用放射免疫分析法测定血浆促卵泡素（FSH）、促黄体素（LH）、雌激素（Ez）水平，用以分析激素水平与凋亡间的关系。结果表明：（1）无论是健康卵泡还是闭锁卵泡，颗粒细胞90％以上均处于G1期，2％～6％处于G2期，S期比例最小；（2）闭锁卵泡颗粒细胞凋亡率极显著高于健康卵泡（P〈0．01）；（3）随着健康卵泡直径的增加，颗粒细胞的凋亡呈降低趋势；（4）健康组鹅的FSH、E2水平要高于闭锁组，而LH水平要低于闭锁组。     

STAT3在介导雌二醇影响卵泡功能中的作用

本研究以猪卵泡为模型,探讨雌二醇(E2)经由STAT3调控生存蛋白(SURVIVIN)转录的非基因组途径,参与调控凋亡的分子机制。根据外观形态将卵泡分类,分别测定优势化卵泡与闭锁卵泡液中E2浓度。结果发现:E2在健康卵泡液中的含量极显著高于早期闭锁和晚期闭锁阶段(P0.01)。通过荧光定量Real time-q PCR和Western Blots检测卵泡不同发育阶段颗粒细胞中STAT3/SURVIVIN m RNA和蛋白水平,结果显示:SURVIVIN和STAT3在健康卵泡的颗粒细胞中的表达量极显著高于闭锁卵泡(P0.01),并随着闭锁程度的加剧呈现出逐渐递减的表达趋势。通过原代培养颗粒细胞中外源添加不同浓度E2(10-5、5×10-5、10-4 mol/L)检测相关基因蛋白表达水平的变化,结果显示:随着E2浓度的增加,STAT3的磷酸化水平也相应增加,其靶基因SURVIVIN的表达量却没有受到活化的STAT3影响。由此可见,E2能够通过上调STAT3的表达参与调控卵泡闭锁的发生。     

八眉猪卵泡闭锁过程的观察

为了研究八眉猪卵泡闭锁过程中卵泡颗粒细胞的凋亡情况、卵泡组织结构变化以及卵泡膜内层毛细血管变化特点,试验在体视显微镜下观察并将卵泡分为健康卵泡、早期闭锁卵泡和晚期闭锁卵泡,用Hoechst 33258对闭锁不同时期卵泡颗粒细胞凋亡情况进行检测。采用苏木精-伊红(H.E.)染色法对卵泡膜层组织结构进行观察,CD34免疫组化染色对卵泡膜上毛细血管的分布进行观察。结果表明:随着卵泡闭锁程度的加深,卵泡颗粒细胞逐渐脱落进入卵泡腔,颗粒细胞凋亡增多,分布在卵泡膜内层的毛细血管随着卵泡闭锁程度的加深逐渐消失。说明卵泡颗粒细胞凋亡和卵泡膜上微血管消失是八眉猪卵泡闭锁的重要特征。     

水牛有腔卵泡颗粒细胞凋亡的生物形态学特征

为了解水牛有腔卵泡闭锁的起因和有腔卵泡中是否存在卵泡颗粒细胞凋亡，本研究选择青春期前水牛和成年（发情间期和发情期）水牛的卵巢，采用石蜡组织切片、HE染色技术进行光镜观察，并采用DNA原位末端标记（TUNEL）技术和透射电镜观察研究了卵泡颗粒细胞凋亡的特征。结果表明：青春期前水牛的健康有腔卵泡上无或仅有极个别凋亡的卵泡颗粒细胞（GCs），而闭锁有腔卵泡上存在有多量凋亡的GCs，凋亡的形式：GCs层内出现单个或多个凋亡细胞，卵泡腔内出现凋亡小体群。在成年水牛发情间期的闭锁大卵泡上，GCs层弯曲皱折，存在多量凋亡的GCs。发情期水牛成熟卵泡的GCs层也存在GCs凋亡，排卵前的GCs层细胞全部脱落到卵泡腔内。本研究首次在同一组织切片上先后分别应用HE染色和TUNEL检查细胞凋亡，且证实了水牛有腔卵泡GCs凋亡的存在。超微结构显示了GCs凋亡的核边集化、核浓缩及凋亡小体的形态。上述结果提示：在水牛闭锁有腔卵泡中存在着GCs凋亡，GCs凋亡是启动水牛有腔卵泡闭锁的潜在机理。     

生殖激素控制卵泡细胞凋亡的研究进展

研究表明颗粒细胞凋亡是导致卵泡闭锁的重要原因，而颗粒细胞凋亡涉及许多因素，其中生殖激素，如GnRH、FSH、LH、P4、E、A、GH、Mel、inhibin、activin、follistatin等间接地和直接地对卵巢卵泡细胞凋亡发挥重要的综合控制作用，因此正确理解激素对体内、外卵泡及颗粒细胞发育和衰亡的调节网络具有很重要的理论和实践意义。     

牛卵泡闭锁与颗粒细胞凋亡基因表达研究

颗粒细胞凋亡与卵泡闭锁是颗粒细胞功能基因及凋亡相关基因的表达结果,通过手术法获取三种不同直径的牛卵泡(小型卵泡2 mm;中型卵泡2~6 mm;大型卵泡6mm),分离卵泡颗粒细胞并提取总RNA,以研究不同直径卵泡中颗粒细胞相关基因的表达。结果表明,牛卵巢上小型卵泡颗粒细胞中Fshr的表达显著低于中型和大型卵泡(P0.05),而中型和大型两者之间差异不显著(P0.05);中型卵泡和小型卵泡颗粒细胞中CYP19的相对表达显著低于大型卵泡(P0.05);中型卵泡和小型卵泡颗粒细胞中促细胞凋亡基因BAX的表达显著低于大型卵泡(P0.05),而在中型和大型卵泡颗粒细胞中抑制细胞凋亡基因BCL2的表达显著低于小型卵泡(P0.05),且随着卵泡的增大而下调;Casapase 8与Caspase3的表达模式相同,其表达量均随着卵泡直径的增加显著上升(P0.05)。随着卵泡生长与直径增加,卵泡内部分颗粒细胞虽然在继续增殖,部分颗粒细胞已经开始凋亡,卵泡逐渐进入闭锁阶段。     

性未成熟小母猪注射PMSG对卵泡闭锁及颗粒凋亡的影响

为探讨孕马血清促性腺激素（PMSG）对2－3月龄性未成熟的小母猪卵巢中卵泡发育，卵泡闭锁以及卵泡颗粒细胞凋亡的影响，就其注射PMSG后24，48，72，96h卵巢中各类卵泡数量，颗粒细胞凋亡比例及外周血浆中类固醇激素水平等进行了研究。结果如下：（1）未注射PMSG前，性未成熟小母猪卵巢表面卵泡总数（10．5个／卵巢）及各类卵泡数（小卵泡9个／卵巢，中等卵泡数1．5个／卵巢）均较少；注射PMSG后24h，小卵泡数（24个／卵巢），中等卵泡数（6．5个／卵巢）和大卵泡数（1．5个／卵巢）与对照组相比均明显增多；至注射PMSG后96h，小卵泡（4．5个／卵巢）和中等卵泡数（1．5个／卵巢）均明显减少，但大卵泡数量仍较多（4．5个／卵巢）。（2）未注射PMSG前，性未成熟小母猪中类卵泡中的颗粒细胞凋亡比例均较高，小卵泡和中等卵泡分别为24．8％和34．4％；注射PMSG事24h，颗粒细胞凋亡比例显著降低（P＜0．05），小卵泡和中等卵泡分别为10．7％和13．7％，至PMSG事72h，小卵泡和中等卵泡的颗粒细胞凋亡比例开始显著升高（P＜0．05），而大卵泡在出现后颗粒细胞凋亡比例较低且无较大波动。（2）在未注射PMSG前，血清中的雌二醇含量仅为15．3ng/L，孕酮则由于含量大低而未能检测到；在注射PMSG后，雌二醇和孕酮水平均升高，雌二醇在注射PMSG后72h时达最高值59.2ng/L，孕酮在注射PMSG后48h出现最高值1.7 μg/L。以上结果表明，在性未成熟的2－3月龄小母猪，卵泡颗粒细胞凋亡比例很高，导致卵巢表面各类卵泡数量均较少，血清类固醇激素水平也很低，而PMSG可在其尚未建立起自身下丘脑－垂体－性腺轴的激素调节机制情况,显著抑制颗粒细胞亡，从而抑制卵泡的闭锁，促进卵泡的发育，并进而提高血清中类固醇激素的水平。     

鸭异体卵巢移植后生殖激素水平变化及卵泡颗粒细胞凋亡的研究

选取健康麻鸭进行同种异体卵巢移植，移植后测定45日龄、75日龄、105日龄、开产日龄、开产后30日龄和开产后60日龄时血浆促卵泡素（FSH）、促黄体素（LH）、雌二醇㈤水平；并且在产蛋期内不同的时间获取各个级别卵泡的颗粒细胞，检测其凋亡率。结果显示，移植后FSH、LH、E2的分泌均高于对照组，在开产30日龄时差异显著，表明移植成功并且卵巢发育良好，卵巢功能正常；移植后各级卵巢颗粒细胞凋亡率显著低于对照组，并且随着卵泡直径的增加，颗粒细胞的凋亡率呈现下降的趋势，表明卵巢移植可以降低卵泡颗粒细胞凋亡率。结论：同种异体卵巢移植卵巢发育良好，具用正常的分泌功能，可以降低卵泡颗粒细胞的凋亡率。     

Bcl-2基因RNA干扰对体外培养的鹅卵泡颗粒细胞凋亡、增殖和孕激素分泌的影响

根据已发表的Bcl-2基因序列设计3对siRNA（Small interference RNA）序列，构建干扰表达载体，转染体外培养的鹅卵泡颗粒细胞，48h后利用流式细胞术（Flow cytometry，FCM）检测颗粒细胞Bcl-2蛋白表达量、凋亡和增殖情况，收集细胞培养液用放射免疫分析法检测孕激素（P）的分泌水平；此外，还检测了F1～F4卵泡、最小的排卵前卵泡（The smallest preovulatory follicle，SPF）、小黄卵泡（Small yellow follicle，SYF）和闭锁卵泡（Atresic follicle）颗粒细胞Bcl-2蛋白表达和凋亡情况。结果表明：（1）各级卵泡颗粒细胞Bcl-2蛋白的表达存在着差异，正常卵泡颗粒细胞Bcl-2蛋白表达量显著高于闭锁卵泡（P〈0．05），SPF颗粒细胞Bcl-2蛋白表达水平显著高于SYF（P〈0．05）；（2）干扰组Bcl-2蛋白表达水平显著低于所有对照组（P〈0．05），而细胞凋亡指数（Apoptosis index，AI）、增殖指数（Proliferation index，PI）和P分泌水平均高于对照组。     

碘伏毒理研究综述

碘伏是碘与表面活性剂（载体）及增强剂形成的不定型络合物，具有高效、广谱、贮存稳定、毒性低等特点。小鼠的LD50大于5000mg／kg·BW，属于实际无毒。蓄积系数均大于5，为弱蓄积作用。慢性毒性试验的最大无作用剂量为1000mg／kg。碘伏无致突变作用。过敏反应很少见，出现口腔粘膜瘙痒、肿胀和灼痛感，并伴有头痛、头昏，嗜睡等症状。碘伏有效浓度为5％时对完整皮肤和破损皮肤无刺激性，对阴道粘膜有极轻刺激性。有效浓度大于2．5％时，对角膜上皮产生明显损伤作用，用1．5％有效浓度注入前房即可产生内皮毒性作用。有效浓度小于1．0％时对角膜上皮和内皮无毒性。     

基于eNSP的VRRP研究

网络运行时如果出现故障会给企业带来很大损失,VRRP就是一种用来提高网络可靠性的协议。本文基于eNSP环境研究了VRRP的工作原理及应用。     

栗园草场牛耳大黄危害调查报道

2010年,笔者对栗园草场牛耳大黄蔓延挤占其他牧草生存空间状况进行了调查,目前该草场已处于牛耳大黄蔓延最严重阶段,危害区域集中分布在草场平坦肥沃的地块和道路附近,尤其是水肥充足的区域。该植物的空间分布格局和繁殖特征表明,它可以利用种子向外进行远距离随机扩散,占据一定位置后,再以无性繁殖方式和种子扩展侵占范围,     

猪肉品质的蛋白质组学研究及应用

近年来,随着消费者和食品加工业对肉质的要求越来越高,猪肉品质的改良问题日益受到人们的重视,世界各国学者也相继从肌肉组织学、生理生化指标和遗传学等方面对猪肉品质进行了相关研究.     

脑心肌炎病毒检测方法研究进展

脑心肌炎由脑心肌炎病毒(EMCV)引起,主要导致猪脑炎、心肌炎及母猪的繁殖障碍,该病的发生与流行严重影响我国养猪业的发展。论文综述了各种EMCV检测方法及其优缺点,为更有效的EMCV检测方法的建立提供参考。     

Tensions used on girths on thoroughbred racehorses

OBJECTIVE: To determine commonly used girth tensions in Thoroughbred racehorses in the Melbourne metropolitan area. DESIGN: A prospective industry survey. METHODS: Strappers were instructed to tension girths, using the same saddle, under-saddle packing and girth, sufficiently to hold the saddle for racing. These tensions were continuously recorded by an in-line load cell in the girth. Seventeen strappers from five stables participated in the study, which was conducted on 91 horses. RESULTS: Resting girth tensions varied considerably. The mean tension on inhalation was 13 +/- 0.4 kg. Male strappers recorded higher tensions than females for all indices measured. Age and girth size of the horse did not significantly influence results. CONCLUSION: This study confirms that there is no standard for application of a girth and saddle in the Thoroughbred racing industry and the range of tensions applied was large. Strappers were unable to reliably apply the same tensions between horses. Values recorded at the extremes of the range seem inappropriate for racing conditions as low values would result in slippage of the saddle and higher values may result in girth galls and possible reduction in athletic performance. Further work is necessary to determine the point at which girth tension affects performance.     

骨形态发生蛋白在动物繁殖上的研究进展

骨形态发生蛋白(BMPs)家族是转化生长因子超家族的一大类,它们与两类特异受体结合组成信号传导通路诱导细胞内的一系列生理活动。研究表明它们对雌性繁殖性能有重要作用,特别是对卵巢的作用尤为显著。已在多种动物(鸡、牛、猪、羊、鼠等)卵巢中检测到了编码BMP 2,3,3b,4,6,7和15的mRNA。在不同品种绵羊中已发现了几个控制多胎性状的主基因,如FecB、FecX1、FecXH、FecXG、FecXB和FecGH基因,它们都是BMPs家族蛋白及相关蛋白基因突变而产生的。文章从生化背景、表达研究、对卵巢与排卵的作用,以及对生殖内分泌的调节等几个方面,对BMPs在动物繁殖方面的研究进展做了阐述。     

配方羊奶粉对小鼠免疫功能影响的研究

选用雄性BALB/c小鼠,通过腹腔注射环磷酰胺,构建免疫功能低下小鼠模型,评价益生菌+益生元配方羊奶粉和高钙富硒配方羊奶粉对小鼠免疫功能的影响。结果显示,益生菌+益生元配方羊奶粉和高钙富硒配方羊奶粉均可明显增强免疫低下小鼠脾淋巴细胞增殖能力（P<0.05）、自然杀伤细胞（NK）活性（P<0.01）以及碳廓清试验吞噬指数（P<0.01）。表明益生菌+益生元配方羊奶粉和高钙富硒配方羊奶粉对环磷酰胺致免疫力低下模型小鼠具有增强免疫力作用。     

益生菌对仔猪作用机制研究进展

在规模养殖过程中,断奶诱发仔猪肠道疾病进而导致生产性能下降,益生菌可降低肠道病原菌感染,提高仔猪生产性能和降低腹泻的发生率。该文主要从益生菌对仔猪胃肠道微生物群、机体免疫系统、炎症调控、抗氧化调控、肠道发育和营养消化调控等方面探讨其作用机制,旨在为益生菌在仔猪上的应用提供理论依据。     

苜蓿蛋白质分组测定初探

采用连续提取法对苜蓿Medicago sativa样品进行蛋白质分组测定,结果表明：苜蓿蛋白组份随提取剂的种类而变化,蛋白组份含量由大到小依次为40%(v/v)异丙醇>2%(m/v)氯化钠>3.85%（v/v)乳酸>0.5%(m/v)氢氧化钾;其中鲜苜蓿样品中醇溶蛋白占14.50%(m/v);盐溶蛋白占12.55% (m/v);酸溶蛋白占7.73%(m/v);碱溶蛋白占3.11%(m/v),其他蛋白占总粗蛋白的63.11%(m/v)。根据蛋白质组份含量及提取成本确定稀盐溶液为苜蓿叶蛋白适宜的提取剂,盐溶液浓度为0.5%(m/v)。