培育健壮马铃薯试管苗试验

我们在马铃薯茎尖脱毒和试管苗繁殖过程中发现，马铃薯试管苗生长细弱、茎叶嫩黄与带有高浓度的马铃薯纺锤块茎类病毒（PSTV）及几种主要马铃薯病毒有关。用双向聚丙烯酰胺凝胶电泳法和酶联夹心法检测筛选出无病毒的试管苗作为试材，排除类病毒和病毒侵染的干扰，以提高培养基中营养元素含量作为培养健壮试管苗的措施，试验结果表明，2倍MS液体培养处理的试管苗生长茁壮、浓绿，加速了干物质累积、使继代培养周期从3～4周缩短为2～3周。     

马铃薯纺锤块茎类病毒不同株系及不同接种方法对产量的影响

马铃薯纺锤块径类病毒(Potato spindle tuber viroid)是危害黑龙江省马铃薯生产的一种重要病害。为了查明不同类病毒变株对主栽品种克新1号和4号所引起的产量损失和症状反应,应用往复聚丙烯胺凝胶电泳法(Peturn-Polyacmdegel electophoresis)鉴定类病毒。试验结果表明,接种当年,接种类病毒的处理平均减产37%,按商品产量计算减产达47%。当年表现症状的植株平均为59.6%,块茎产生症状的植株平均为57.4%。用于接种的3个马铃薯纺锤块茎类病毒变株的致病力,以当地的类病毒弱系为最强,其次为北美的类病毒强系,北美的类病毒弱系的致病力较弱。类病毒对产量的影响与马铃薯品种和类病毒变株的组合有极为密切的关系。克新1号接种当地的类病毒弱系时薯块严重畸变,商品产量只为不接种对照的21%。用往复电泳法检测各个试验处理被类病毒侵柴的情况,芽接种处理,于出苗后1周即可检测到类病毒,叶接种处理,于接种后2周即能检测到类病毒。出苗后7周,植株中类病毒浓度达到高峰,随即急剧下降,到出苗后10周,大部分接种植株已检测不到类病毒。块茎直径达1厘米时,即能检测到类病毒,随着块茎膨大,类病毒浓度也相应增高,到收获前,块茎中的类病毒含量只略低于植株含类病毒高峰期的浓度。用于本试验的克新1号、4号无类病毒和主要马铃薯病毒的核心材料,在1988年已交付给省内外的良种场繁殖使用。于当年秋季抽样检测克山第二良种场连续种植二年的种薯,当年种植试管苗生产的种薯,以及试管苗等,均未检测到类病毒。     

马铃薯高淀粉资源试管苗抗盐性鉴定

本用０．３％Ｎａｃｌ处理的ＭＳ２基协迫马铃薯高淀粉品的试管苗的方法，鉴定马铃薯品种的抗盐性。结果表明，盐协迫和对照两处理对各品种试管苗生长影响差异显，盐协迫下各品种生物产量明显下降，而抗盐品种在处理中变化较小。     

脱毒马铃薯试管苗营养液栽培试验

对马铃薯试管苗液体培养过程中所需的温度、光照、营养液浓度等条件进行了研究。结果表明:马铃薯试管苗适应用清水生根,在无机盐离子浓度0.05%～1.25%营养液中生长。在昼夜温度变幅为20～35℃的智能温室中,采用自然光照,脱毒马铃薯试管苗3d开始生长,5d根生齐,在适合的营养液培养条件下,7d达到根长4.5～5.0cm,根数15～22根,茎长6.0～8.0cm,茎粗1.4～2.2cm,叶片数7片,一株可剪顶,切段扦插2～3株,母苗可在侧芽生长后移栽结薯。该法繁殖速度快,成本低,省人力,对技术人员要求不高,是脱毒马铃薯试管苗繁殖的最为有效的途径。     

马铃薯脱毒试管苗壮苗培育初探

１　前　言脱毒马铃薯试管苗在无菌条件下利用人工培养基培养,并进行切段繁殖及脱毒种薯的生产,已大量应用于实践。在我省每年４月份以前必须培育出数以万计健康茁壮的试管苗。为此,于１９９５～１９９６年,在我们马铃薯中心实验室以ＭＳ革新培养基为基础,进行钾离子、生长延缓剂Ｂ９、光照对试管苗生长壮苗的影响试验,并去掉了培养基中一部分成分,找到了适合自己培育壮苗的一些措施,降低了成本。２　材料与方法２１　脱毒马铃薯试管苗培养基的组成及处理方法培养基组成以ＭＳ革新培养基为基础,去掉其中的生物素、酪蛋白水解物、…     

中国马铃薯2000年总目次

香豆素对马铃薯试管微型薯诱导的影响…………………石 瑛，秦 昕，王凤义等（１）１高温下马铃薯试管薯的诱导………………………………罗 玉，田 洪，张 铁（１）４冀西北高寒区微型薯高效生产技术研究………………………孟兆军，尹 江，崔红军（１）９马铃薯脱毒试管苗无土栽培高产机理研究…………………谢庆华，吴毅歆，张勇飞等（２）６７通过农杆菌介导将菜豆几丁质酶基因导入马铃薯…………………周思军，李希臣，刘昭军等（２）７０碳源浓度对不同光源培养的马铃薯脱毒试管苗生长的 影响……………仲乃琴，王一航，齐恩芳（２）７…     

用NASH方法检测马铃薯纺锤块茎类病毒

利用荧光素标记制备马铃薯纺缍块茎类病毒（PSTVd)特异性探针，采用核酸斑点杂交（NASH）技术对大田马铃薯和马铃薯试管苗进行检测，经放射自显影表达检测结果，结果清晰，重复性好，该方法可检测类病毒最低为0．33pg，灵敏性很高。     

利用山梨醇长期保存马铃薯试管苗

试验以缓慢试管苗生长为策略，建立合理使用山梨醇保存试管苗慢性生长体系，通过适宜的培养温度和合理的山梨醇浓度使用，使试管苗培养周期由原来的2~3个月延长至1年，为大规模保存马铃薯试管苗提供技术基础。试验结果表明：添加40 g/L山梨醇的培养基结合10℃培养室温度，能够使多数马铃薯试管苗保存延长至1年，从而能有效节省成本，减少由于频繁转接所引起的污染及品种混杂的发生。     

多效唑在马铃薯试管苗上的应用研究

以MS为基本培养基,以中薯3号、中薯4号和东农303的试管苗为实验材料,研究多效唑在马铃薯试管苗快繁、壮苗及种质保存中的应用.结果表明:(1)多效唑能有效抑制马铃薯试管苗的腋芽萌发,推迟腋生枝条萌发的时间,保持马铃薯试管苗的正常生长,便于试管苗的切段繁殖;(2)试管苗在切段繁殖中,附加0.2～0.5 mg/L的多效唑可使试管苗增殖与壮苗同步进行,得到的试管苗健壮,大大提高移栽成活率;(3)在MS 1.0 mg/L多效唑的培养基中,生长正常的马铃薯试管苗种质常温保存可延长至2个月.     

矮壮素(CCC)在马铃薯试管苗上的应用研究

以MS为基本培养基,以大西洋、东北白和克新1号的试管苗为试验材料,研究矮壮素在马铃薯试管苗快繁、壮苗及种质保存中的作用。结果表明,在MS培养基中加入0.3～0.8mg·L-1的矮壮素能有效抑制马铃薯试管苗的腋芽萌发,推迟腋生枝条萌芽的时间,保持马铃薯试管苗的正常生长,便于试管苗的增殖,能使马铃薯试管苗种质常温保存达2个月,降低了生产成本。     

马铃薯主要病毒保毒植物试管保存技术及其效果的研究

本文报道了１９８７～１９９０年对马铃薯主要病毒毒源试管封闭保存的研究结果．保毒植物为普通烟草、心叶烟、德伯尼烟、番茄、千日红，洋酸浆等．在无菌条件下，温度为２０～２５℃，２０００～３０００ｍ烛光照，取其０．５～１ｃｍ大茎尖消毒后扦插在试管培养基上培养，因保毒植物种类不同，其成活率为５７．６％～１００％，平均为８７．１％，进管２０～２６天生根发育正常．在试管内发育成株时，可进行单节切段更新繁殖，其生长发育比大茎尖初次进管时速度快，一般６～１２天生根发育正常，并保持试管毒源纯度和含毒量．     

不同处理方法对马铃薯茎尖成苗率的影响

试验以带马铃薯病毒的N88为材料,分别在40℃/25℃(4 h/20 h)的变温环境中,培养2、3、4周处理后茎尖剥离;以N88和D575试管苗为材料,在加入0,20,30 mg·L-1病毒唑的培养基中处理40 d后茎尖剥离。茎尖培养基为MS+0.05 mg·L-1 NAA+0.1 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 GA3+4 g·L-1琼脂粉+30 g·L-1白砂糖的改良固体培养基,30 d后开始调查成苗率,每隔10 d调查1次,直到60 d,统计茎尖成苗率。结果表明:2周变温处理的茎尖成苗率和对照接近,但脱毒率有所提高;4周变温处理剥离茎尖成苗率最低,60 d成苗率仅为15%,脱毒率为100%;病毒唑浓度对不同材料的茎尖成苗率影响不同,其中D575经过20 mg·L-1病毒唑处理,茎尖培养60 d后成苗率最高达到83.3%,PVS脱除率为40%;材料N88在加入20 mg·L-1和30 mg·L-1浓度病毒唑的培养基中培养40 d后茎尖剥离,60 d成苗率分别为40.0%和41.7%,PVY、PLRV的脱毒率为100%。     

碳源浓度对不同光源培养的马铃薯脱毒试管苗生长的影响

就培养基碳源浓度对不同光源培养的马铃薯脱毒试管苗生长的影响进行了系统的研究 ,分析了自然光照培养的优势。结果表明 ,利用自然光照培养马铃薯脱毒试管苗 ,培养基最适宜的碳源浓度为 12 5g/L ,较人工灯光培养的最适宜碳源浓度 2 0g/L减少了三分之一 ,降低培养基成本 3% ,移栽成活率提高 8 91% ,总体降低试管苗生产成本 2 6 5%。     

马铃薯组培苗液体静置培养微繁技术研究

在固体组织培养研究的基础上，改进培养基组成成分进行液体静置培养。本文从水、糖、琼脂对组培苗生长、增殖及培养成本三个方面进行研究。作者认为马铃薯组培苗块繁阶段培养基可以简化为液培。此法同时省去琼脂，以自来水代替蒸馏水，以食用白绵糖代替蔗糖，规模化应用效果良好，培养基成本降低了７２．９％。组培苗生长健壮，月增殖系数６．３～６．７，结薯正常。     

马铃薯茎尖脱毒效果影响因素的研究

以克新2号、克新16号和克新17号等8个马铃薯品种为试验材料,对马铃薯茎尖脱毒效果的影响因素进行了研究。结果表明:不同种类的植物生长调节剂对茎尖的生长有不同的影响,茎尖在⑤号培养基(MS+1.0mg·L-1KT+0.5mg·L-1IAA+0.5mg·L-1GA3)上可不产生愈伤组织,直接成苗,是最适宜的培养基;6～8℃低温预处理和37℃热空气处理对茎尖脱毒有利;茎尖取材来源对成苗率没有影响,对脱毒效果影响较大,但脱毒效果依品种而异;为避免造成损失,需在15个月内准备出用于更换的基础苗。     

A Reexamination of the Effectiveness of Ribavirin on Eradication of Viruses in Potato Plantlets in vitro Using ELISA and Quantitative RT-PCR

The potato plantlets singly infected by PVA, PLRV, PVS, PVX and PVY and mix-infected by PVM, PVS and PVY were cultured on MS medium with different concentration of ribavirin. The effects of ribavirin on growth of the plantlets and efficiency of virus elimination were investigated. Results showed that the plant height and fresh weight obviously decreased with increase of ribavirin concentration from 0 mg/L to 150 mg/L, and most of the plantlets could not survive when the concentration reached 200 mg/L. According to the ELISA tests, ribavirin was more efficient for eradicating PVA, PVM, PVS and PVX than PVY and PLRV, and healthy plantlets could be obtained with high frequency (up to 100 %) by culturing with 75?~?150 mg/L ribavirin after 2?~?3 subcultures. Whereas, only 33?~?66 % PVY and PLRV infected plantlets were found to be virus-free after 3 subcultures with 75?~?150 mg/L ribavirin. The results of quantitative RT-PCR (qPCR) indicated that ribavirin could obviously reduce virus content in the plantlets. Except PLRV was detected positive after 3 subcultures with ribavirin, the healthy seedlings were obtained from infected stocks at the first or end of propagation and no viruses could be detected at the post-eradication stage. No apparent difference of genetic variation resulted from ribavirin treatment was found by SSR analysis between the control and the treated plantlets. All of these results above proved that ribavirin treatment in vitro was an effective method to eliminate viruses in the propagation of potato.     

嘧啶醇在马铃薯试管苗长期保存中的作用

为研究植物生长抑制剂嘧啶醇在马铃薯种质资源试管苗长期保存中的作用,本文对添加嘧啶醇影响试管苗长期保存及其后期存活情况进行了分析。结果表明,17℃保存条件下,添加≥15μmo·lL-1嘧啶醇均可显著降低试管苗的株高。恢复生长研究证明,17℃保存条件下添加≥20μmo·lL-1嘧啶醇可以显著提高试管苗的存活率,保存12个月的试管苗可全部存活,保存18个月后Solanum chacosense和CE76品系仍有70%以上的试管苗可以存活。     

Elimination of bacterial ring rot (Corynebacterium sepedonicum [Spieck. and Kotth.] Skapt. and Burkh.) by in vitro culture of sprout tissue

Summary Apical explants from sprout tissue, cultured in vitro, of potato tubers (cv. Russet Burbank) infected withCorynebacterium sepedonicum were demonstrated to be free of the pathogen. The material remained free of the pathogen through three in vitro generations and through two tuber generations produced from the in vitro plantlets. Contribution 3878878.     

离体培养条件下植物生长物质对马铃薯块茎形成的影响

在全黑暗诱导结薯培养条件下,培养基（MS＋8．0％蔗糖）中添加5．0BA、5．0B9、500CCC或5．0BA＋500CCC（mg／L）对诱导马铃薯（cv．Mira）试管苗或其茎段结薯所需的时间,结薯率和结薯数量没有促进作用;它们虽能略微提高试管薯的平均鲜重,但与对照比较,此影响未达到显著水平（LSD0.05）。在16h／d光周期或8h／d光周期加暗期光间断诱导结薯培养条件下,无论培养基中蔗糖含量为2．0％或8．0％,外源添加2．0NAA、2．0ABA、5．0BA、5．0B9、500CCC或5．0BA＋500CCC（mg／L）等植物生长物质均不能诱导试管苗茎段结薯（cv．I－1085）。由此表明,离体培养条件下,外源添加上述植物生长物质不是诱导马铃薯块茎形成的必需因子。对此试验结果作了比较详细的讨论。     

马铃薯种质资源保存试验

通过低温保存,添加渗透调节剂及生长抑制剂和微型薯诱导的方法,对马铃薯种质资源试管苗的保存效果进行了研究。结果表明,使用低温(4℃)保存和在MS培养基基础上添加浓度为50mg·L-1的生长抑制剂比久(B)9,可以使试管苗保存时间长达8～10个月,且苗茎叶健壮,有试管薯形成,保存效果较好;MS基础上添加浓度为0.01%～0.1%渗透调节剂甘露醇也能达到较好的保存效果;通过微型薯诱导保存得到试管薯的诱导率为15%～80%,但保存后期易造成试管苗死亡。