鹿流行性出血热病毒

鹿流行性出血热病毒陈志飞李树清（上海动植物检疫局２０００３２）鹿流行性出血热病毒（ｅｐｉｚｏｏｔｉｃｈｅｍｏｒｒｈａｇｉｃｄｉｓ－ｅａｓｅｖｉｒｕｓｏｆｄｅｅｒ，ＥＨＤＶ）又叫鹿流行性出血病病毒，是呼肠孤病毒科环状病毒属的一种虫媒病毒，能引起白尾鹿严...     

鹿流行性出血热病毒核酸的提纯

鹿流行性出血热病毒又叫鹿流行性出血病病毒（epizootichemorrhagicdiseasevirusofdeer，EHDV）是呼场孤病毒科环状病毒属的一个群，具有双胜RNA，由10个片段组成，主要感染家养和野生反刍动物，鹿特别是白尾鹿最为敏感，并表现出体温升高、呼吸困难、休克、舌水肿呈青紫色、唾     

鹿流行性出血热病毒研究进展

鹿流行性出血热病(EHD)是一种在全世界野生及驯养的有蹄动物中广泛存在的虫媒病毒病。以白尾鹿、糜鹿、大角羚羊等多种驯养和野生反刍动物体温升高、呼吸困难、黏膜和浆膜面出血、常处于昏迷状态下死亡为特征的严重致死性传染病,牛和羊也可以感染发病,导致怀孕牛流产、死产。我国虽然尚无鹿流行性出血热暴发的报道,但从全球范围看其对养殖业的危害不容小觑。本文从流行与分布情况,病原学,流行病学,临床症状和病理变化等进行综述,为牛羊鹿流行性出血热病毒病的诊断与控制提供参考。     

新疆牛群中鹿流行性出血热血清学调查

本研究采用鹿流行性出血热(EHD) cELISA诊断试剂盒分别对2014年和2015年6、7月份从新疆10个地(州、市)随机采集的662份牛血清进行了EHD检测。结果检出阳性48份,阳性率为7.25%;检出地区有:哈密市、巴里坤县、伊吾县、尉犁县、岳普湖县,其中哈密市和岳普湖县的阳性率较高,在20%左右。这是首次对新疆部分地区进行EHD血清学调查,检测结果为今后新疆地区的EHD研究,特别是病原学方面研究提供了科学依据。     

猪流行性腹泻病毒SDbz株的分离与鉴定

取病死仔猪十二指肠、空肠及肠内容物制成匀浆,应用套式RT-PCR检测呈现猪流行性腹泻病毒(PEDV)阳性,经处理将其接种到含终浓度50μg/mL胰酶的Vero细胞上进行病毒分离传代,盲传到10代左右开始出现局灶性细胞病变(CPE),20代以后特征性CPE稳定出现。将病毒Vero细胞培养物应用毒价测定及病毒中和试验、套式RT-PCR和间接免疫荧光进行检测鉴定,证明所分离到的病毒为PEDV,并将其命名为PEDVSDbz株。     

猪流行性腹泻病毒SDbz株的分离与鉴定

病料应用套式RT-PCR检测呈现PEDV阳性,经处理将其接种到含终质量浓度50 mg/L胰酶的Vero细胞上进行病毒分离传代,盲传到10代左右开始出现局灶性CPE,20代以后特征性CPE稳定出现.将病毒Vero细胞培养物应用毒价测定及病毒中和试验、套式RT-PCR和间接免疫荧光进行检测鉴定,证明所分离到的病毒为PEDV,并将其命名为PEDV SDbz株.     

猪流行性腹泻病毒SD株的分离与鉴定

利用Vero细胞自安徽合肥腹泻仔猪小肠内容物中分离到一株病毒,经胶体金、PCR方法和攻毒试验,确定为猪流行性腹泻病毒,命名为SD株。SD株在Vero细胞上传代,第8代(F8)开始出现稳定的细胞病变(CPE),F8代的毒价(TCID50)为10-6.25/0.1 m L,F8代细胞培养物接种未吃初乳仔猪,接种仔猪均出现典型腹泻症状,死亡仔猪3头(50%),未死亡猪生长严重发育不良,说明SD株具有较强的致病性。     

鹿粘膜病病毒的分离鉴定

本研究首次应用MDBK传代细胞从腹泻幼鹿粪样中分离获得一株病毒(MDV N71).该毒株可使培养细胞出现明显的空泡变性,电镜负染观察接毒细胞培养物见有典型的粘膜病病毒粒子.MDV N71在MDBK传代细胞上的TCID50为10-5.4,对乙醚、氯仿和胰蛋白酶敏感,56℃ 70 min被灭活.对酸的耐受力较弱,在pH3.0环境下毒力明显降低.对碱有较强的耐受力,在pH9.0环境下依然稳定.不凝集绵羊、猪、兔和鸡红细胞.用MDV长春184毒株的特异性免疫荧光抗体染色(IFA),可以在感染细胞浆内见有特异性荧光.该毒株的致细胞病变作用,可被MDV长春184毒株抗血清所中和.提取病毒感染细胞的总RNA进行反转录聚合酶链反应(RT-PCR),结果扩增出的片段大小为400 bp.根据MDVN71的理化特性、形态学、生物学、免疫学和RT-PCR鉴定结果,确证MDV N71株为粘膜病病毒,这为深入探讨鹿MD的诊断和防制以及进行分子生物学研究奠定了基础.     

一株猪流行性腹泻病毒的分离鉴定

为了解山东地区猪流行性腹泻病毒(PEDV)的流行情况及为该疫苗的研发提供理论依据,采集山东省某猪场疑似爆发PEDV猪群的仔猪腹泻粪便,利用Vero细胞进行病原分离,经过盲传4代后Vero细胞上出现了典型病变,经多次传代后获得一株猪流行性腹泻病毒山东地方流行毒株,该分离毒经RT-PCR鉴定及测序分析为变异毒株.     

猪流行性腹泻病毒SZ株的分离与鉴定

从资阳某猪场发生腹泻症状的猪肠道内容物中分离得到一株病毒,经荧光检测、RT-PCR检测及序列分析鉴定后,证实该分离株为猪流行性腹泻病毒,命名为SZ株。PCR方法克隆S基因的部分片段,序列分析结果表明PCR扩增的部分S基因与其他毒株比对,结果表明与CH/XJUrumqi及韩国AF500215 S1的亲缘关系较近。     

2019年云南省景洪市哨兵动物多种虫媒病毒的分离鉴定

本研究旨在了解云南省景洪市虫媒病毒的流行情况。2019年在景洪市勐罕镇设立了3头哨兵动物牛,定期采血进行虫媒病毒的分离与鉴定,共获得7株病毒分离物。经病毒核酸的RT-PCR鉴定,分离到2株血清型分别为6型和7型流行性出血热病毒（epizootic haemorrhagic disease virus,EHDV）,2株血清型分别为4型和5型的蓝舌病病毒（bluetongue virus,BTV）,1株帕利亚血清群病毒（palyam serogroup virus,PALV）中的D’Aguilar virus（DAV）血清型病毒和2株未鉴定出的环状病毒。经病毒Seg-2、Seg-3序列ORF区的比对和进化分析显示,7株病毒的地域型均为Eastern型,与日本、澳大利亚和印度毒株具有最近的亲缘关系。3头哨兵动物的血液和血清,经病毒核酸及血清中和试验检测,证明3头动物均被相应的病毒感染。动物感染病毒后,血清中的特异性抗体迅速上升,3~4周后达最高点并能够在该水平维持较长时间,而血液中病毒核酸含量2~4周到达最高点后则呈迅速下降趋势。本研究报道了景洪虫媒病毒的分离、毒株序列特征以及在动物上的感染特性,研究结果为进一步了解当地的牛虫媒病毒提供数据支撑,同时3头牛分离获得7株病毒,提示当地可能还存在更多种类的虫媒病毒。     

Isolation and Identification of Arbovirus from the Sentinel Herds in Jinghong City,Yunnan Province,China in 2019

The purpose of this study was to understand the prevalence of arboviruses in Jinghong city,Yunnan province.Three sentinel cattle were set up in Menghan township of Jinghong city in 2019,blood samples were collected regularly for isolation and identification of arboviruses,a total of 7 virus isolates were obtained.Viral nucleic acid were identification by RT-PCR,and the results showed that two strains of epidemic hemorrhagic fever virus (EHDV) with serotypes of 6 and 7,two strains of bluetongue virus (BTV) with serotypes 4 and 5,D’Aguilar virus (DAV) serotype in one strain of PALV and two unidentified circoviruses were isolated,respectively.The ORF region of virus Seg-2 and Seg-3 sequences was compared and analyzed,all the 7 regional strains of the virus were Eastern,which was most closely related to strains in Japan,Australia and India.The blood and serum of three sentinel animals were tested by viral nucleic acid and serum neutralization test,which proved that all three animals were infected with the corresponding virus.When animals were infected with the virus,specific antibodies in the serum rise rapidly,it reached peaks 3 to 4 weeks later and could remain at this level for a long time.However,the content of viral nucleic acid in the blood decreased rapidly after reaching the peak from 2 to 4 weeks.The isolation,sequence characteristics and infection characteristics of Jinghong arboviruses in animals were reported in this study,the results provided data support for further understanding of local bovine arboviruses.At the same time,7 strains of virus were isolated from 3 cattle,suggesting that there might be more arboviruses in the area.     

蛋鸡新城疫病毒的分离与初步鉴定

采用鸡胚接种法从河北一些蛋鸡场分离到3株病毒,分别标号为WJ1、WJF2和WJF3.经血凝、血凝抑制试验及血清学中和试验鉴定3株分离毒株均为新城疫病毒;鸡胚半数致死量测定,WJ1株毒价为107.3ELD50/0.1 mL,WJ2株和WJ3株毒价分别为107.9ELD50/0.1 mL.动物回归试验鸡的临床表现与自然病例基本一致.再用分离毒攻ND Ⅳ系疫苗免疫鸡,显示ND Ⅳ系疫苗可以保护WJ1和WJ3分离毒株,而不能保护WJ2分离毒株.     

兔出血症病毒西藏野毒分离株的鉴定

对西藏农牧学院分离的一株兔出血症病毒(RHDV)西藏野毒进行血凝性、特异性和致病性进行鉴定。结果表明,此株RHDV野毒血凝价高达10240以上;RHDV抗血清可特异性抑制该株病毒对人“O”型红细胞的凝集;西藏株RHDV的最小致死量为10^-5／mL,是一株具有高致病力的RHDV强毒株。     

鹅源新城疫病毒的分离鉴定及其致病性

从吉林省某发病鹅场分离到1株病毒,经血凝、血凝抑制试验和RT-PCR鉴定证实,该毒株为新城疫病毒,命名为MHK-1株.毒力测定结果表明,该病毒的鸡胚平均死亡时间(MDT)为43 h,1日龄雏鸡脑内接种致病指数(ICPI)为1.63,鸡胚半数致死量(ELD50)为10-8.3/0.2 mL,表明该毒株为新城疫病毒强毒株.经致病性试验表明,该病毒对鹅有很强的致病性.分子病毒学分析表明,MHK-1株F基因裂解位点的氨基酸序列为112R-R-Q-K-R-F117,符合强毒株氨基酸序列特点.     

一株鸽新城疫病毒的分离鉴定

对广东地区疑似发生鸽新城疫感染的鸽病料进行病毒分离,通过血凝试验(HA)、中和试验、F基因扩增及序列测定.结果分离到1株血凝效价为4log2,且能被NDV阳性血清中和的病毒;用针对NDV F基因设计的特异性鉴定引物对该分离株进行PCR扩增,可扩增出相应的目的片段;测序及Blast分析表 明其与山东分离株chicken/...     

兔出血症病毒分子生物学研究进展

兔出血症是由兔出血症病毒引起的一种急性、高度致死性传染病，病死率可高达100％，给养兔业带来了巨大的经济损失。近年来，随着对其研究的不断深入，在病毒分子生物学方面取得了很大的进展。文章主要从基因组结构及功能、编码的结构蛋白与非结构蛋白、基因疫苗等方面系统阐述了兔出血症病毒分子生物学方面的研究进展，同时，提出了存在的问题和展望。为进一步研制兔出血症病毒基因工程疫苗及诊断试剂提供理论基础，以期能更有效地防治此病。     

一株传染性法氏囊病病毒强毒株的分离与鉴定

鸡传染性法氏囊病是由传染性法氏囊病病毒引起的一种急性传染病。本研究从江苏某疑似发生传染性法氏囊病的鸡场采集病料,通过观察临床症状、病理变化、RT-PCR检测、基因测序、SPF鸡胚接种、琼脂扩散试验和雏鸡攻毒等试验,证实了该鸡群发生了传染性法氏囊病,且分离到一株传染性法氏囊病病毒(JSXY株),该病毒有较强的致病力,VP4基因比较分析发现其与变异株亲缘关系最近,序列同源性为95%。本研究为江苏地区传染性法氏囊病的防治提供了有益的参考。