2020—2022年湖北省生猪屠宰场伪狂犬病病毒的分离鉴定及遗传进化分析

旨在监测湖北省生猪屠宰场中伪狂犬病病毒(pseudorabies virus, PRV)的流行情况。采集2020—2022年湖北省4个区域(鄂东、鄂北、鄂西、鄂中)共9个县市不同规模屠宰场的1 795份血液样品和2 081份肺样品(肺、肺门淋巴结),分别使用靶向PRV gE基因的ELISA和PCR方法检测血清中的抗体和肺样品中的病原，同时对阳性样品进行病原分离鉴定、全基因组测序和遗传进化分析。血清学检测结果显示，共有104份样品为阳性，平均阳性检出率为5.79%。病原学检测结果显示，共有82份样品为阳性，平均阳性检出率为3.94%。按不同因素对检出率进行分析，显示抗体和病原都在春季检出率最高，分别为18.57%和9.74%;湖北省东部的抗体检出率最高(10.77%),中部的病原检出率最高(4.93%);A类小型屠宰场的病原和抗体检出率都显著高于其他3个类型，分别为16.28%和6.01%。从病原阳性样品中共分离到PRV 17株，经全基因组和gB、gC、gE基因遗传进化分析结果显示均属于基因Ⅱ型变异株，与Bartha、NIA-3、Becker等早期国外分离株处于不同的遗传进化分支。其中H...     

国内羊胃肠道寄生虫流行病学调查及捻转血矛线虫系统进化分析

为更好地掌握我国部分地区羊胃肠道寄生虫病的流行情况以及捻转血矛线虫ZJ株近年来的系统进化关系,从而为捻转血矛线虫病的防治提供科学依据,于2014年9—12月采集了来自山东、吉林、黑龙江、内蒙古、辽宁、河北、江苏、天津和青海9个省(市)的490份羊粪样品,对其进行了寄生虫虫卵分类鉴定,对羊寄生虫病的流行病学特征进行总结分析;此外实验室于2004—2013年采集了来自浙江省嘉兴地区的15份捻转血矛线虫ZJ株成虫样品,设计特异性引物对样品ITS-2和ND4基因进行分子克隆测序鉴定比对,对该虫近10年来的系统进化进行分析。结果表明,全国各地羊体内肠道寄生虫的感染情况均较为严重,其中感染虫种的严重程度依次为原虫(83.27%)、线虫(64.29%)和绦虫(49.80%),感染相对最为严重的3个地区分别为天津、青海和内蒙古,而相对较轻的3个地区为江苏、黑龙江、山东。对捻转血矛线虫ZJ株的15份样品进行系统进化分析显示,ITS-2和ND4基因在10年间均有不同程度的遗传变异发生,变异范围分别为0.0%~3.9%和0.4%~4.8%,而ND4突变程度较大可能是由于虫种固有差异引起的。而2种基因都有部分位点突变后与H.placei(Haemonchus pacei)相同,说明嘉兴地区可能存在捻转血矛线虫和H.placei交叉感染的情况。调查分析结果将为制定更合理的羊寄生虫病防控方案提供参考依据,并为寄生虫系统进化分析研究奠定基础。     

2020—2022年玉溪市猪流行性腹泻病毒分子流行病学调查及遗传进化分析

为了解近年玉溪市猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)流行及遗传进化情况，本研究采集了2020—2022年间玉溪市4个养猪场的临床腹泻样品33份，采用RT-qPCR方法调查PEDV的流行情况，再用RT-PCR方法扩增PEDV阳性样品的M基因，分析病毒的遗传进化。流行病学调查结果显示，33份腹泻样品中，RT-qPCR检测PEDV阳性率为39.39%(13/33)。PCR扩增13份阳性cDNA样品M基因，测序结果证实为PEDV M基因片段。基于M基因遗传进化分析结果显示，玉溪市猪群流行的PEDV均属于基因2型，与其他代表毒株基因同源性为97.06%～99.56%,氨基酸同源性为96.48%～99.56%。结果表明，玉溪市PEDV以基因2型为主，提示需要选择更有效的疫苗来控制PEDV的流行。     

湖北省部分规模猪场猪繁殖与呼吸综合征流行病学调查

为探究猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）在规模猪场的流行特征,2021年从湖北省7个规模猪场疑似PRRSV感染猪群以及所有种公猪群中,共收集样品3 324份,采用三重巢式RT-PCR法进行PRRSV病原学检测,分析不同养殖类型、不同生长阶段、不同季节及不同感染毒株的流行特点,并将阳性产物进行测序和遗传进化分析。结果显示：3 324份样品中共检测出PRRSV阳性样品323份,阳性检出率为9.72%（323/3 324）。育种场阳性检出率最低,为2.66%（20/752）;商品猪扩繁场与育肥场阳性检出率相近,分别为11.82%（169/1 430）与11.73%（134/1 142）;保育猪群阳性检出率最高,为17.23%（152/882）;其余依次为生长育肥猪、哺乳仔猪和母猪,阳性检出率分别为11.30%（121/1 071）、5.26%（30/570）和3.24%（20/618）;种公猪中未发现PRRSV感染。PRRSV一年四季均可流行,春、夏、秋、冬季的阳性检出率分别为18.16%（148/815）、6.94%（60/864）、6.10%（34/557）、7.44%（81/1 088）,春季阳性检出率显著高于其他季节（P＜0.05）,而夏、秋、冬季节间差异不显著（P≥0.05）。3种PRRSV毒株均有流行,类NADC30毒株、经典毒株和高致病性变异毒株的占比分别为49.54%、21.36%、29.10%,类NADC30毒株检出占比显著高于其他类型毒株（P＜0.05）。结果表明：PRRSV在所调查的7个规模猪场中流行普遍,尤其是商品猪扩繁场与育肥场;保育猪群PRRSV感染风险较高,种公猪感染风险较低,春季是高发季节,类NADC30毒株为优势流行毒株。结果提示,规模养殖场应根据PRRSV的流行特征,加强免疫和监测,有针对性地制定防控措施。     

我国出口观赏鸟血液原虫的调查与分析

通过显微镜检查对来源于全国各地的37种出口观赏鸟进行了血液原虫调查。共检查血样1144份，结果为：血液原虫的检出率为2．1％，主要是血变原虫和／或疟原虫。感染季节以秋冬两季为主，易感鸟品种主要是白腰文鸟、红喉歌鸲、蓝歌鸲、暗绿绣眼鸟、豆冠、白燕、情侣鹦鹉。     

云南省新发猪圆环病毒3型感染状况调查与全基因进化分析

为了解猪圆环病毒3型(PCV3)在云南省不同地区猪群中的流行情况,针对PCV3基因保守区域设计特异性引物,优化反应条件,建立PCR快速检测方法,并采用该方法对采自云南省不同地市431份样品进行检测,将获得的部分毒株全基因序列进行遗传进化分析。结果显示:本研究成功建立了一种快速、特异和灵敏的PCV3检测方法;云南省12个地(市)29县(区)中,8个地(市)12个县(区)检测出阳性样品;431份样品中有43份PCV3阳性样品,阳性率为9.98%;获得的3株PCV3全基因组序列与参考毒株之间的核苷酸同源性为98.6%~99.5%,进化树显示3株云南毒株形成一个小的进化分支,属于PCV3a基因型。本研究结果表明,PCV3在云南省多个地区呈一定的流行趋势,流行毒株以PCV3a基因型为主,有必要进一步开展云南地区PCV3流行病学调查,并提出防控对策。     

夏秋养鸡要防白冠病

鸡白冠病又叫卡氏住白细胞原虫病,发病鸡在临床上以贫血、消瘦、鸡冠苍白为主要特征。雏鸡、育成鸡死亡率可高达91%,成年鸡发病后可使产蛋率下降30%～50%。该病多发生于高温多湿的6～10月份,呈明显的季节性流行。发病原因夏秋季节高温多雨,河沟水库存水较多,对蠓、蚋等吸血昆虫     

广东粤北山区耕牛伊氏锥虫病诊治

<正>耕牛伊氏锥虫病是由锥虫属的伊氏锥虫感染引发的一种寄生虫性血原虫病,是乳源县耕牛的一种常见多发病,临床上其症状表现各异,且不易察觉。该病主要是由吸血昆虫——虻、蝇叮咬带虫家畜,通过机械传播所引发。这种血原虫除寄生于水牛、黄牛和奶牛外。还可寄生于其他一些家畜和一些野生动物。本病最     

入秋谨防蛋鸡白冠病

白冠病的发生、流行与库蠓等吸血昆虫的活动有密切的关系,具有明显的季节性、地方性。今年天气炎热,雨水较多,给库蠓等吸血昆虫的生长繁殖提供了优良的环境,因此要谨防经它们吸血而传播的住白细胞原虫病(即白冠病)。     

2009年～2011年新疆雁形目野生鸟类禽流感血清流行病学调查与分析

本研究采集了新疆野鸟血清样品260份,进行了禽流感H1～H16亚型的血清学监测,结果显示,野鸭类血清样品2009年检出5个血清亚型,其中H8检出率高达15.38%,H13为9.62%;2010年检出11个血清亚型,H5亚型的阳性率最高,达14.29%;2011年检出12个血清亚型,其中H9检出率最高,达15.79%。不同品种野鸭的禽流感阳性检出率分析表明,绿头鸭禽流感抗体阳性率58.82%,赤麻鸭为68.66%,赤嘴浅鸭为34.09%,凤头浅鸭为44.44%。灰雁的血清样品检测结果表明,H13亚型的阳性率最高,为40.91%。1份天鹅血清样品检测出H13抗体阳性。对乌鸦、斑鸫、野鸽和红隼等野鸟血清样品检测,全部为阴性。本次在覆盖新疆边境的野生鸟类栖息地开展的禽流感血清学调查,掌握了新疆地区野生鸟类禽流感血清学监测数据,为新疆地区乃至全国的禽流感预警预测提供了科学依据。     

肺炎克雷伯氏菌致白颊长臂猿脓肿一例

白颊长臂猿是中、老、越三国交界地区的特有种,属于国家Ⅰ级重点保护动物。目前我国白颊长臂猿主要分布于西双版纳自然保护区和绿春黄连山自然保护区。北京动物园目前共饲养了十几只白颊长臂猿,繁殖状况良好。2009年9月我园1只白颊长臂猿体表出现多处脓肿。后抽取脓液,分离到1株革兰氏阴性小杆菌。该白颊长臂猿经治疗无效后死亡。剖检时发现其体内有亦有大量脓液,经分离培养,与体表分离到的是同一株细菌。该菌株经鉴定是肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种（Klebsiella pneumoniae ssp pneumoniae）。并对其进行了药物敏感试验。     

中国麋鹿种群发展现状及其研究进展

麋鹿(Elaphurus davidianus)是国家Ⅰ级重点保护动物,为中国特有种。由于人类的猎捕和环境的变迁,在1900年左右该种群在中国基本灭绝。麋鹿重引入是中国第一个重大物种重引入项目,目前已经建立了北京南海子麋鹿苑、江苏大丰麋鹿国家级自然保护区和湖北石首麋鹿国家级自然保护区,分别代表了中国麋鹿的人工圈养、半人工圈养和自然放养3种方式。作者从麋鹿的生物学特征、生境、种群、遗传繁殖、饲养管理及药用价值等方面进行了归纳分析,详细阐述了中国麋鹿种群发展现状及其研究方面取得的成果,为促进麋鹿种群的健康繁衍和保护提供理论依据。     

新疆褐牛产奶性状变化规律的研究

本研究通过对2017年478头新疆褐牛累计8879条产奶性能数据进行分析,研究了不同月份、胎次下新疆褐牛产奶性状的变化规律。结果表明,新疆褐牛不同胎次和月份间的平均日产奶量有差异,第2胎次的平均日产奶量最高,夏季(6、7、8月份)平均日产奶量在一年中最高,冬季(1、2、12月份)最低。胎次对乳成分影响不显著(P>0.05),不同测定月份乳成分间存在显著差异(P<0.05)。7月份乳脂率、干物质比例和尿素氮含量最低,但是体细胞评分在四个测定月份中最高。本研究结果表明管理水平对新疆褐牛产奶性能有很大影响,建议加强管理,夏季提高营养水平,冬季注意改善畜舍环境。     

德州驴NCAPG-DCAF16基因区域多态性与生长性状的关联分析

旨在探讨NCAPG-DCAF16基因区域在德州驴群体中的遗传多态性以及与生长性状的关联性,进而得到显著相关的遗传标记,为德州驴的分子标记辅助选择提供理论基础。本研究采用DNA混池测序技术对NCAPG-DCAF16基因区域的多态性进行检测;基于DNA混池测序结果,运用质谱分型技术对227头德州驴群体中的SNPs位点进行基因型检测,分析基因型与初生、3月龄、6月龄3个时期相关生长性状的关联性。结果表明:1)通过DNA混池测序发现,NCAPG基因上的SNPs位点包括第9内含子上rs1(T>C),第11内含子上rs2(A>G),第19内含子上rs4(C>G),第8内含子上rs5(C>G);DCAF16基因第2外显子发现一个同义突变,即位点rs008(A>G)。2)初生时期的关联分析显示,rs1位点基因型CC个体的平均尻长显著高于CT型个体(P<0.05);3月龄时期各基因型的表型平均值无显著差异(P>0.05);在6月龄阶段,基因型为TT个体的平均胸宽与CC个体相比差异极显著(P<0.01),TT和CT基因型个体的平均管围均显著高于CC个体(P<0.05)。3)rs4位点的关联分析揭示了GG基因型个体在初生时期的平均胸深显著高于GC基因型(P<0.05),3月龄时期各基因型之间的平均表型值无显著差异(P>0.05);CC基因型个体6月龄时期的平均胸宽和管围显著高于GG基因型(P<0.05)。4)rs008位点关联分析结果表明,各基因型之间初生时期的表型值无显著差异(P>0.05);AA、GA基因型个体3月龄时期的体重、体高和尻高都显著高于GG基因型(P<0.05);AA、GA基因型个体6月龄时期的体高和胸围都极显著高于GG基因型个体(P<0.01),GA基因型与GG基因型个体间的胸深、尻高的差异达到极显著水平(P<0.01),GA基因型个体的尻宽显著高于GG和AA基因型(P<0.05)。5)根据连锁不平衡分析结果,rs1、rs2、rs4和rs5的组合基因型在德州驴群体中有5种。关联分析结果揭示了TTAACCCC组合基因型个体6月龄时期的平均胸宽显著高于CCGGGGGG组合基因型(P<0.05)。综上,德州驴群体中NCAPG-DCAF16基因区域5个SNPs位点对生长性状均有显著影响,特别是rs008位点与德州驴体重、体高等重要生长性状极显著相关,可用于德州驴的分子标记辅助选择,提高德州驴育种效率。     

自由牧马对草甸草地群落结构及牧草品质的影响:以新疆昭苏夏马场为例研究

为探明自由牧马对草甸草地群落结构及牧草品质的影响,在新疆昭苏夏马场设置放牧试验,采用控制笼进行对照,分析了2013-2015年草地群落结构及牧草营养品质的动态变化。结果表明:(1)无芒雀麦(Bromus inermis)、羊茅(Festuca ovina)等一些马喜食的禾本科牧草的相对密度降低,狼毒(Euphorbia fischeriana)、龙胆(Gentiana scabra)等一些毒性植物和马不食植物的相对密度升高,但主要优势植物变化不大;(2)在3年夏场放牧中,草甸草地多样性指数(Simpson指数)维持在0.74～0.81;不同植物种类重要值变化趋势不同,白三叶(Trifolium repens)、草地早熟禾(Poa pratensis)和龙胆在群落中重要值增加,而细果苔草(Carex stenocarpa)和羊茅的重要值显著降低;(3)牧草中的中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)总体呈现上升趋势;粗蛋白(CP)含量随着放牧年限的增加从13.4%下降到11.3%,仍可达到马对粗蛋白含量(8%)的基本要求。由试验可知:目前的放牧强度(5匹马·ha-1)基本维持了草地的可持续性,但一定程度上降低了牧草的品质。     

基肥类型及配比对沙地种植紫花苜蓿生产力和品质的影响

本研究评估了不同基肥类型（尿素、磷酸二铵或美可辛、红钾或晶体钾肥）及配比（NPK配比12-17-18,10-20-24,不施肥CK和仅施N肥TN）对沙地土壤种植紫花苜蓿（Medicago sativa L.）的生长状况、生产力和品质的影响,旨在探索苜蓿沙地栽培的最佳基肥配方。结果表明14和15年单株根系干重在NPK配比为10-20-24且用晶体钾时表现最好,分别较CK显著增高161.16%和77.93%。不同的施肥类型及配比之间的产量干重变化在832.95~1 663.5 kg·hm^-2。次年生物量在NPK配比10-20-24且用晶体钾时表现最好,干产重较CK显著增高29.61%。相对CK,基肥能提高苜蓿中的粗蛋白含量,但在NPK的各配比处理间,粗蛋白含量无显著性差异。NDF和ADF在TN处理中最低为37.02%和24.20%。试验结果表明在沙地种植苜蓿较好的基肥施肥配比是NPK配比为10-20-24且钾肥最好选用可溶性更高的晶体钾。     

生物炭对土壤的影响及在草地生态系统中应用的研究进展

生物炭是生物质材料在无氧条件下经高温热解而成的富碳固态物质,具有含碳率高、孔隙结构丰富、比表面积大、理化性质稳定等特点,是一种优质的土壤改良材料。本文总结归纳了近年来生物炭在影响农田土壤理化性质、土壤养分和土壤微生物方面的研究进展,同时也对生物碳在草地系统中的零星应用研究进行了概述,最后对生物碳在草地生态系统中有待深入的研究重点和发展进行了展望,以期为生物炭在草地修复中科学应用提供可借鉴的理论依据与实践参考。     

猪瘟病毒Erns蛋白在杆状病毒系统中的表达及纯化

采用杆状病毒表达系统表达并纯化猪瘟病毒E^rns蛋白,并对其反应原性进行鉴定。将猪瘟病毒的E^rns 基因克隆至pFastbac-HT-A 载体上,构建了pFA-E^rns重组质粒;经转座、转染后构建重组杆状病毒rBac-E^rns;通过优化接毒时间和接毒量等参数,最终确定表达条件。将表达产物采用亲和层析法纯化后,采用Western Blotting 鉴定E^rns 蛋白的反应性,并采用间接ELISA 方法对其应用进行了初步探索。结果显示,获得了重组杆状病毒rBac-E^rns,经Western Blotting 和间接免疫荧光(IFA)鉴定,该重组病毒能够与猪瘟阳性血清和E^rns 单抗发生特异性反应。纯化后的E^rns 蛋白纯度较好,浓度为0. 2 mg/ mL,经Western Blotting 方法鉴定证明,纯化后的蛋白与E^rns单抗和猪瘟阳性血清能够发生特异性反应;初步建立了间接ELISA 方法检测猪瘟抗体,证明表达的蛋白可以区分猪瘟阳性血清和阴性血清。表明本研究利用杆状病毒表达系统成功表达并纯化了猪瘟病毒E^rns蛋白,纯化后的E^rns蛋白具有良好的反应性,可以作为开发鉴别诊断试剂的备选蛋白以及用于E^rns 蛋白的结构和生物学功能研究。     

牛背梁国家级自然保护区羚牛种群状况及濒危原因分析

陕西牛背梁国家级自然保护区是中国目前唯一以羚牛及其栖息地为主要保护对象的森林和野生动物类型自然保护区。调查表明,保护区内分布有羚牛206～224头,呈片段化分布在6个生境斑块内,以210国道为界,保护区内羚牛的分布格局为西多东少。虽然保护区内羚牛种群数量和分布区均呈缓慢增长的趋势,但频繁的人为干扰,尤其是保护区内公路、铁路建设和由此导致的生境分割,仍威胁着保护区内羚牛种群的持续生存。     

用于牛奶分析的中红外光谱标准化及其在模型传递中的作用

随着越来越多的模型被开发,依据牛奶傅里叶变换中红外光谱(FT-MIRS)来提供关于牛奶成分、奶制品特性以及奶牛生理状况等信息,使得MIRS技术得到广泛应用。但是由于各种中红外光谱仪器之间存在一定的差异,在主机上建立的模型往往难以直接应用于从机,而重新建立稳定而可靠的模型需要花费大量的时间和精力。目前,主要通过光谱标准化的方法来对光谱进行预处理,以消除不同仪器对样本信息的反应差异,实现在不同中红外光谱仪器之间的模型传递。