5种复合藏药对西藏牦牛源大肠杆菌抗菌活性的研究

为了解石榴健胃丸、仁青芒觉、十五味黑药丸、仁青常觉等5种复合藏药对西藏牦牛源肠出血性大肠杆菌的抑菌情况。利用药敏试验的研究方法,对近几年来实验室分离保存的14株西藏牦牛源肠出血性大肠杆菌进行了药物敏感性检测的研究。结果表明:14株牦牛源肠出血性大肠杆菌对仁青芒觉表现为中度敏感;对石榴健胃丸、十五味黑药丸、仁青二十五味马宝丸、仁青常觉均表现为耐药;14株牦牛源肠出血性大肠杆菌对常用抗生素均敏感。通过动物试验表明,只接种牦牛源肠出血性大肠杆菌没有注射仁青芒觉的分离菌株均能引起大多数小鼠死亡,均具有高致病性,致死率达到95%,而注射了仁青芒觉复合藏药的试验组,死亡情况明显降低。结论提示:5种复合藏药中仁青芒觉对肠出血性大肠杆菌具有一定的治疗价值,目前对于肠出血性大肠杆菌的治疗没有有效的方法,特别是在耐药性泛滥的形势下,大肠杆菌病的治疗方面除了临床上常用的抗生素,复合藏药也是一个良好的选择。     

38味中药对猪大肠杆菌的体外抑菌活性

筛选对临床分离多重耐药猪大肠杆菌有抑菌、杀菌作用的中药,并分析部分中药的联合抑菌效果。选用标准菌株ATCC83707作为对照菌株,采用纸片法测定分离菌株对临床常用抗生素的敏感性。微量2倍稀释法和平板法测定各味中药的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。微量棋盘稀释法测定2种中药的联合抑菌效果。结果表明,临床分离大肠杆菌对阿米卡星、庆大霉素、左氟沙星、青霉素G、链霉素、阿莫西林都耐药,仅对多黏菌素B呈现敏感。临床分离大肠杆菌对黄连等12味中药表现为中度敏感,对其他中药表现为不敏感;ATCC83707对黄连等10味中药中度敏感,对其他药物不敏感。黄连-芦荟、黄连-诃子、山楂-芦荟、山楂-诃子、山楂-诃子、芦荟-乌梅、诃子-白头翁等联合应用时,对临床分离大肠杆菌菌株呈现协同作用;黄连-山楂、黄连-乌梅、黄连-白头翁、山楂-香薷、芦荟-五味子、乌梅-香薷、乌梅-诃子、黄芩-诃子、诃子-五味子等联合应用时,对临床分离大肠杆菌菌株呈现相加作用;黄连-香薷、黄连-五味子等联合应用时,对临床分离大肠杆菌菌株呈现无关作用;其余药物联合应用时,对临床分离大肠杆菌菌株呈现拮抗作用。临床分离大肠杆菌对常用抗生素呈现了多药耐药趋势,但对中药仍然保持一定的敏感性;抗菌方面,中药之间存在着复杂的相互作用,部分中药间有协同作用,临床用药时须谨慎筛选。     

22味中药对犊牛腹泻大肠杆菌的体外抑菌试验

开展了乌梅、白头翁、黄连、穿心莲等22味中药对犊牛腹泻大肠杆菌的体外抑菌试验。按照常规法制备中药水提物,采用平板打孔法和微量稀释法测定了22味中药对犊牛腹泻大肠杆菌的抑菌圈直径、最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果显示,22味中药中有10味中药对犊牛腹泻大肠杆菌有抑菌作用,其中乌梅、诃子、五倍子和半边莲对犊牛腹泻大肠杆菌的抑菌作用最佳,抑菌圈直径为15 mm以上,为高度敏感;其次是黄连、秦皮、穿心莲、连翘、金银花、石榴皮,抑菌圈直径均大于10 mm,为中度敏感;黄柏、紫花地丁等12味中药对犊牛腹泻大肠杆菌无抑菌作用。对五倍子、乌梅、诃子和半边莲等抑菌作用较好的中药可进一步开展研究。     

24味中药水提物对宠物犬源致病性大肠杆菌NJ-1株体外抑菌试验研究

为了研究24味中药水提物对吕梁地区宠物犬源致病性大肠杆菌(Escherichia coli)流行株NJ-1的体外抑菌效果,利用水提法提取24味中药有效成分,使其浓度为1 g/m L;利用牛津杯法和试管二倍稀释法分别测定24味中药水提物抑菌圈直径大小和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明:宠物犬源致病性大肠杆菌NJ-1株对黄连、诃子、五倍子、五味子、苦参5味中药水提物高度敏感,抑菌圈直径在18.1~20.0 mm之间,MBC在7.80~15.63 mg/m L之间;其余的中药水提物对宠物犬源致病性大肠杆菌NJ-1株存在不同程度的敏感性。说明中草药可应用于犬源致病性大肠杆菌病的治疗。     

50味中药对8种畜禽病原菌抑菌对比研究

50味中药煎剂对常见畜禽8种病原菌抑菌对比研究,结果表明：对禽巴氏杆菌,大青叶极敏感,乌梅高敏;对金色葡萄球菌,茵陈、石榴皮、没药极敏感,凤尾草、大叶桉、凤参高敏;对猪溶血性大肠杆菌,射干、大青叶、黄连、乌梅、商陆极敏;对链球菌,防风高敏;对炭疽杆菌,乌梅,栀子、秦皮、没药极敏,诃子、山楂、大黄、丹参、独活、葛根、射干、苦参、丹皮高敏;对猪丹毒杆菌,当归、乌梅高敏;对猪和禽大扬杆菌无极敏高敏药,50味中药仅金银花、山楂对禽大肠杆菌中敏,石榴皮对猪大肠杆菌中敏,11味微弱作用,绝大部分毫元作用,同时发现中药抑菌效果普遍降低。     

中药对藏香猪源致病性大肠埃希菌地方流行株体外抑菌效果试验

为了分析20味中药对藏香猪源致病性大肠埃希菌地方流行株SCCD201712体外抑菌效果,试验采用水提法制备了中药药液,浓缩为1 g生药/mL;采用牛津杯法和微量二倍稀释法分别测定20味中药对藏香猪源致病性大肠埃希菌地方流行株体外抑菌圈直径和最小杀菌浓度(MBC),采用微量肉汤棋盘稀释法测定两种敏感中药组合的联用抑菌指数(FICI)。结果显示,藏香猪源致病性大肠埃希菌地方流行株SCCD201712对黄连、诃子、白头翁、五味子、五倍子5种药物高度敏感;其抑菌圈直径在16.3 mm～19.8 mm之间,MBC在15.65～31.25 mg/mL之间;诃子+黄连、诃子+白头翁2种中药组合具有协同作用,诃子+五倍子、五味子+黄连、五味子+白头翁3种中药组合具有相加作用,五味子+五倍子中药组合有拮抗作用。为中药防治藏香猪源致病性大肠埃希菌病提供研究基础。     

虎源大肠杆菌耐药性的检测与分析

对黑龙江省哈尔滨市东北虎林园虎源大肠杆菌进行分离培养,开展大肠杆菌耐药性调查。采用纸片扩散法测定各分离菌株对14种抗生素的敏感性,结果表明:虎源大肠杆菌各分离株对各抗生素的敏感性不同。对氨苄西林高度耐药,耐药率为100%;对四环素、复方新诺明的耐药率也均在80%以上;对氨曲南、阿莫西林/克拉维酸钾敏感率为70%以上。     

平邑地区猪源大肠杆菌敏感药物筛选试验

本研究采用纸片扩散法，检测从平邑7家生猪养殖场分离的21株大肠杆菌对庆大霉素、恩诺沙星、阿莫西林、氟苯尼考、多四环素、黏菌素6种抗生素的敏感性。结果显示，平邑7家生猪养殖场的21株猪源大肠杆菌对恩诺沙星的耐药率为14%，敏感率为57%；对庆大霉素的耐药率为14%，敏感率约为72%；对阿莫西林的耐药率为100%；对氟苯尼考的耐药率为71%，敏感率为0；对多四环素的耐药率为43%，敏感率为29%；对黏菌素的敏感率100%。不同生猪养殖场猪源大肠杆菌耐药性不同，个别养殖场猪源大肠杆菌耐药性很高，出现了多重耐药性（对5种抗生素耐药）。建议该养殖场根据药敏结果，采用精准用药和轮换用药方式来防治猪源型大肠杆菌疾病，避免抗生素乱用，进一步推进兽用抗菌药减量化使用和兽用抗菌药综合治理。     

西藏班戈县牦牛源肠产毒性大肠杆菌的毒力基因检测

为调查西藏班戈县奶牛场大肠杆菌病的流行情况,本试验从西藏班戈县奶牛场采集90份牦牛腹泻粪样,采用分离鉴定、PCR检测、药敏试验以及生化试验等方法。其结果表明,本次试验共分离鉴定得到18株牦牛源大肠杆菌,其中疑似肠产毒素性大肠杆菌的有6株(B13、B4、B7、B27、B29、10)。药敏试验结果表明:6株产肠毒素性大肠杆菌对青霉素和红霉素不敏感外,其余药物均为高度敏感;生化试验结果表明:6株疑似肠产毒性大肠杆菌均能发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖均能产酸并产气;吲哚、硫化氢、硝酸盐、明胶、M-R试验均为阳性;肌醇、山梨醇、V-P、柠檬酸、尿素试验均为阴性,其结果跟大肠杆菌的有关生化特性基本一致,在牦牛源肠产毒素性大肠杆菌22对基因中,只检测出2对(STP和CS8)毒力基因,检出率为33.33%。本次试验结果指示西藏班戈县牦牛源肠产毒性大肠杆菌基因的确存在,应引起高度重视,并根据实际情况急需加强以及重视肠产毒性大肠杆菌引起的牦牛腹泻,采取相应的防治措施,以减少肠产毒性大肠杆菌的感染和流行,并合理选药治疗该病。     

中藏药对西藏牦牛源沙门氏菌抑菌效果研究

为了探究藏药合剂、中药及藏药对西藏牦牛源沙门氏菌的抑菌效果，试验以1株西藏牦牛源沙门氏菌H42为研究对象，选择5种藏药合剂、11种中药、14种藏药，采用超声波处理、煎煮浓缩等方法制备药物水煎剂；利用纸片法制备各种药物的药敏纸片，初步检测药物敏感性；采用微量肉汤稀释法测定中藏药的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC);并利用肉汤稀释棋盘法检测中藏药联合后对菌株的抑菌效果；同时选取部分效果较好的中藏药进行动物保护性试验和肝脏、盲肠载菌量测定试验。结果表明：H42菌株对诃子表现为极敏，对仁青芒觉、坐珠达西、肉桂、藏木香表现为高敏，对荜茇、石榴、岩白菜、草红花、干姜、地榆、黄连、白术表现为中敏，对其他中药、藏药表现为不敏感，对丁胺卡那、庆大霉素、环丙沙星均表现为敏感。仁青芒觉、诃子的MIC和MBC均为31.25 mg/mL,坐珠达西、藏木香的MIC和MBC均为62.50 mg/mL,地榆、黄连的MIC和MBC均为31.25 mg/mL。仁青芒觉与诃子联合用药效果最好，其联合抑菌指数(FICI)为0.5。灌胃中藏药组的小鼠死亡率明显降低，保护率均达50%及以上。灌胃中藏药后小鼠盲肠和肝脏...     

26味中药对狐源致病性大肠埃希菌地方株体外抑菌试验

为了研究五味子等26味中药对狐源致病性大肠埃希菌(Escherichia coli)HL2(O1)地方流行株的体外抑菌活性,采用水提法制备了单味中草药药液,浓缩为生药含量为1g/mL,利用平板打孔法和微量二倍稀释法分别测定26味中药对狐源致病性E.coli HL2(O1)的抑菌圈直径和最小杀菌浓度(MBC)。结果显示,五味子、诃子对狐源致病性E.coli呈极度敏感,抑菌圈直径在21.3mm~20.3mm之间,MBC均为7.825mg/mL;金银花、黄连、苦参3味药物高度敏感,抑菌圈直径在16.4 mm~19.3 mm之间,MBC在15.65mg/mL~31.25mg/mL;板蓝根、黄芩、五倍子等10味药物中度敏感,抑菌圈直径在11.3mm~14.2mm之间,MBC在62.5mg/mL~250mg/mL;连翘、地丁、白头翁、穿心莲4味药物为低度敏感;其余药物无明显的效果。筛选出了五味子、诃子、黄连、金银花、苦参5味对狐源致病性E.coli HL2(O1)地方株敏感的中药,可为狐源致病性E.coli的防治提供基础。     

西藏牦牛源大肠杆菌毒力基因检测与分型

为了了解西藏地区牦牛源肠产毒性大肠杆菌毒力基因分布情况,本试验对西藏林芝、拉萨等不同地、市107株牦牛源大肠杆菌进行了大肠杆菌毒力基因的PCR检测和基因分型。结果显示,利用22对肠产毒性大肠杆菌毒力基因引物进行检测,只检出STp以及CS8基因;对所检测到的16株牦牛源肠产毒性大肠杆菌进行克隆测序,经系统发育分析发现牦牛源肠产毒性大肠杆菌菌株内同源性达到99.9%左右,与GenBank中所录其他菌株的同源性达到95%~100%。按照系统发育进化分型的方法,对16株大肠杆菌中有3株属于D群,其余均属于A群。结果表明,西藏牦牛源大肠杆菌中肠产毒性大肠杆菌基因确实存在,其毒力基因主要为STp以及CS8基因;西藏林芝、拉萨、山南和日喀则均有分布,那曲和阿里地区未检出,通过对小鼠的致病性试验,致死率为95%,说明致病性很强,应引起重视。     

猪致病性大肠杆菌耐药质粒检测及其中药消除作用研究

为探讨中药对河南省规模化养猪场致病性大肠杆菌(E.coli)耐药质粒消除的效果,本研究在对87个猪致病性E.coli分离株进行耐药质粒检测的基础上,将各分离株分别于含有不同浓度的石榴皮、黄芩、黄连等中药提取液的培养液中培养,进行耐药质粒消除试验;并采用影印培养法和纸片扩散法进行耐药性消除菌落筛选及其对抗菌药物敏感性恢复的检测.结果表明:各分离株均含有2个～8个质粒,大小约为1.0 kb～87.0 kb;经石榴皮、黄芩、黄连作用后,各分离株均可以获得数量不等的耐药性消除菌落,消除率为0.34％～16.2％,以黄连的平均消除率最高,为9.33％;在耐药性消除的各分离株中,有25个分离株未发生质粒消除,其余均消除了1条～3条质粒,并且对7种抗菌药物的平均敏感率由消除前的5.39％分别提高至60.4％、75.2％和76.5％.表明石榴皮、黄芩、黄连对猪致病性E.coli具有质粒消除和耐药性逆转作用,其中黄连作用效果最好.     

石榴皮水提物对猪源多重耐药大肠杆菌的抑菌作用研究

【目的】筛选腹泻仔猪中携毒力基因且多重耐药的大肠杆菌菌株,评估中药水提物对该菌株的抑菌活性,并探索中药抑菌机制。【方法】通过PCR方法与Kirby-Bauer(K-B)药敏纸片法评估临床大肠杆菌菌株的肠毒素基因携带情况和耐药性;通过微量肉汤稀释法评估中药水提物对多重耐药大肠杆菌菌株的抑菌活性,确定最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration, MIC)和最小杀菌浓度(minimal bactericidal concentration, MBC);通过电导率仪以及相关试剂盒检测评估石榴皮水提物对多重耐药菌株作用不同时间后菌液电导率、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, AKP)含量及菌体内ATP含量的变化;通过SDS-PAGE和蛋白含量检测评估菌体内可溶性蛋白的含量变化;通过扫描电镜观察大肠杆菌形态变化。【结果】PCR检测14株临床大肠杆菌中肠毒素基因携带率达到78.57%,抗生素药敏试验结果显示,所有菌株至少对2种抗生素耐药,均属于多重耐药菌株。中药药敏试验结果显示,黄连、黄芩、石榴皮水提物对多重耐药菌株抑菌活性较好,其中石榴皮水提...     

鸡源大肠杆菌多重耐药性的监测

为了了解和掌握鸡群中大肠杆菌耐药菌株的产生情况和耐药程度,了解其对各种抗菌药物的敏感程度,自哈尔滨地区部分鸡场分离、鉴定出80株鸡源大肠杆菌临床株,采用纸片扩散法测定30株分离菌株对18种抗菌药物的敏感性。结果表明:鸡源大肠杆菌分离株对各抗生素的敏感性不同,且多重耐药现象严重;分离的菌株对阿莫西林/克拉维酸钾、氨苄西林、环丙沙星的耐药率为100%,但对氨曲南、安普霉素、多黏菌素B高度敏感,对庆大霉素、新霉素较敏感。     

西藏林芝地区藏猪源大肠杆菌耐药表型及耐药基因检测

本文采集西藏林芝地区藏猪养殖场和散养藏猪腹泻物,采用细菌学方法分离鉴定藏猪源大肠杆菌后,检测抗菌药物的敏感性及耐药基因。结果显示:林芝地区藏猪源大肠杆菌分离菌株对各种抗生素存在不同程度的耐药性,其中对诺氟沙星、阿奇霉素、复方新诺明极敏感;对氯霉素、头孢唑林、链霉素、丁胺卡那霉素、四环素、庆大霉素、头孢西丁高度敏感;呋喃妥因中度敏感;而对万古霉素、青霉素、红霉素耐药。并检测出P基因,其检出率为100%。根据实验结果,提出了科学用药措施,为西藏林芝地区藏猪养殖业的健康发展提供理论依据。     

3种动物源大肠杆菌分离株的耐药性分析

为了解川渝地区养殖场中致病性大肠杆菌的耐药情况,试验采用K-B药敏纸片法对2016年西南大学荣昌校区动物疾病快速诊断及防治中心分离鉴定保存的鸡源(5株)、鸭源(3株)和猪源(2株)大肠杆菌菌株进行了药敏试验,同时选取对3种不同动物源大肠杆菌均有抑制作用的抗生素进行了最低抑菌浓度检测。结果表明:鸡源和鸭源大肠杆菌对链霉素、青霉素G、庆大霉素、克拉霉素、红霉素、四环素、林可霉素、复方新诺明、氨苄西林、头孢噻吩、万古霉素均耐药;猪源大肠杆菌对恩诺沙星、青霉素G、克拉霉素、红霉素、林可霉素、复方新诺明、头孢噻吩、万古霉素均耐药;鸡源和鸭源大肠杆菌对卡那霉素、米诺环素敏感性高,最低抑菌浓度均为16μg/mL;猪源大肠杆菌对哌拉西啉、米诺环素、头孢吡肟敏感性高,最低抑菌浓度均为8μg/mL。说明这些抗生素针对大肠杆菌有良好的治疗作用,可为临床防治大肠杆菌感染用药提供依据。     

东北地区动物源粪肠球菌耐药性监测与分析

采集了东北地区26个养殖场的猪肛门或鸡泄殖腔棉拭子共780份,分离、鉴定得到289株粪肠球菌,分离率为37.05%。同时,对289株粪肠球菌进行了17种13类抗菌素的药物敏感性试验。结果显示,粪肠球菌对13类测试抗生素普遍耐药,猪源粪肠球菌和鸡源粪肠球菌的耐药状况没有明显区别,均对截短侧耳素类、头孢菌素类、大环内酯类和林可胺类高度耐药,对万古霉素高度敏感。     

7味蒙药对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌体外抑菌试验研究

为筛选出对金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,S. aureus）和大肠杆菌（Escherichia coli,E. coli）具有良好抑菌作用的蒙药,试验采用打孔法测定S. aureus和E. coli对石榴皮、诃子、小白蒿、黄芩、黄芪、苦参、铁线莲7味蒙药敏感程度,微量稀释法测定蒙药的最小抑菌浓度（minimal inhibitory concentration,MIC）,棋盘法测定敏感蒙药对S. aureus和E. coli的协同指数（fractional inhibitory concentration index,FICI）。结果显示：石榴皮、诃子、黄芩3味蒙药对S. aureus的抑菌圈直径为23.30~32.60 mm,MIC为0.98~7.80 mg/mL;石榴皮、诃子、黄芩3味蒙药对E. coli的抑菌圈直径为5.20~12.50 mm,MIC为7.80~31.50 mg/mL;石榴皮与诃子联合用药对S. aureus的FICI为1.00,为相加作用;诃子与黄芩、石榴皮分别联合用药对E. coli的FICI都为0.75,为相加作用。综上所述,石榴皮、诃子、黄芩3味蒙药对S. aureus综合抑菌效果达极度敏感或高度敏感;石榴皮、诃子、黄芩3味蒙药对E. coli综合抑菌效果达极度敏感或高度敏感;在抑制S. aureus的配方中石榴皮、黄芩、诃子可被优先考虑;在抑制E. coli的配方中黄芩、诃子、石榴皮可被优先考虑。     

15味中药对猪致病性大肠艾希氏杆菌的体外抑菌试验

采用常规中药敏感试验打孔法,用15味中药及所组方剂对2种不同血清型的致病性猪大肠艾希氏杆菌进行体外抑菌试验。结果 O_8血清型菌株对丹皮呈高度敏感;O_8血清型和 O_(141)血清型对黄芩、连翘、五味子、地榆呈中度敏感;丹皮、诃子、藿香和黄连分别对 O_(141)血清型和O_8血清型均有中度抑制作用;诃子、藿香、肉桂和黄连分别对 O_8血清型和 O_(141)血清型有轻度抑制作用;而板蓝根、当归、赤芍、甘草、木通、桂枝等6味中草药和方剂均无抑菌作用。