鸡源金黄色葡萄球菌噬菌体分型的研究

本试验应用噬菌体分型的方法,对主要来源于我国京津地区葡萄球菌病鸡的207株金黄色葡萄球菌进行了分型。 应用国际金黄色葡萄球菌噬菌体分型系统分型的结果为:常规检验稀释度(R.T.D.)时分型率71.12％,其中属噬菌体第Ⅰ裂解群的最多,Ⅲ群次之,混和群和Ⅳ群(又不定群)再次之,属Ⅱ群者最少(分别占可分型总株数的48.98％,18.24％,14.12％,12.84％和5.41％)。在可分型菌株中,不同分离部位(主要为皮肤病灶、内脏和眼)的菌株均以属噬菌体裂解群Ⅰ群的居多;来源自不同日龄(主要为雏鸡、育成鸡和成鸡)的菌株也以属噬菌体裂解群Ⅰ群者居多。同时发现,鸡源金黄色葡萄球菌菌株中仅能被52A型噬菌体强烈裂解的占可分型总数的44.22％。 试验说明,自我国京津地区分离的鸡源金黄色葡萄球菌菌株与人源株有一定差异,但具有较好的同源性,文中讨论了两者间交叉感染的可能性。     

柴胡皂苷a对金黄色葡萄球菌基因转录表达谱的影响

探讨柴胡皂苷a对金黄色葡萄球菌的抑菌活性,确定亚抑菌浓度的柴胡皂苷a对金黄色葡萄球菌基因转录表达谱的影响。按NCCLS推荐的试管肉汤倍比稀释法测定柴胡皂苷a对32株临床分离的金黄色葡萄球菌和标准菌株ATCC25923的最小抑菌浓度(MICs),绘制标准菌株ATCC25923的生长曲线,用定制的Affymetrix基因芯片检测1/2×MIC(4mg.L-1)柴胡皂苷a对标准菌株ATCC25923基因表达谱的影响。结果表明,柴胡皂苷a对33株金黄色葡萄球菌的MICs为1～32mg.L-1;基因表达谱分析有26个上调基因,68个下调基因,其中1个编码超氧负离子压力反应蛋白基因被大幅度地上调,13个毒力基因被诱导,并且都被抑制;这表明柴胡皂苷a对32株临床分离的金黄色葡萄球菌及标准菌株都有抑菌活性。基因芯片分析表明,柴胡皂苷a的抗菌作用能够同时影响金黄色葡萄球菌不同的途径基因。     

金黄色葡萄球菌耐药性及肠毒素分型研究

为了解从生鲜乳中分离得到的31株金黄色葡萄球菌的耐药性和肠毒素分布情况,用微量肉汤稀释法进行药敏试验,用PCR方法进行肠毒素的检测和分型。结果表明,31株金黄色葡萄球菌耐药率在50%以上的抗菌药有7种,药耐药率小于10%的有3种;敏感率大于50%的抗菌药有6种,敏感率小于10%的有5种。31株金黄色葡萄球菌毒素基因携带率为93.5%,同时携带2种及以上毒素的菌株占67.7%,有SEA基因的占38.7%,含其他传统的毒素基因类型SEB、SEC、SED和SEE基因的菌株只占40.4%,携带新发现的毒素基因SEG、SHE、SEI和SEJ的菌株占67.7%。说明本次试验中的31株金黄色葡萄球菌对6类13种抗菌药都有不同程度的耐药性,且多重耐药现象比较严重。生鲜乳中分离的金黄色葡萄球菌带毒率高,且携带新发现的肠毒素基因较多。     

金黄色葡萄球菌基因分型方法研究进展

金黄色葡萄球菌是引起医院和社区感染的重要致病菌之一,也是引起奶牛乳房炎的重要致病菌。为有效控制其感染及流行,并为临床采取控制措施提供理论依据,需要对菌株进行分型。本文就金黄色葡萄球菌的基因分型方法研究进展作一综述。     

动物源性金黄色葡萄球菌耐药性的检测

用K—B法对52株动物源性金黄色葡萄球菌进行了17种抗生素耐药性检测。结果，试验菌对16种抗生素的耐药率达19．2％～84．6％，耐药率最高的为氨苄青霉素，最低的为头孢曲松；其中对12种抗生素的耐药率在50．0％以上；在52株金黄色葡萄球菌中最少的耐2种抗生素，最多的耐15种抗生素，表明临床分离的金黄色葡萄球菌株均表现高水平耐药和多重耐药；受试菌均对万古霉素敏感。     

牛奶中金黄色葡萄球菌的耐药性及其肠毒素分型研究

为了解我国部分生鲜牛奶中金黄色葡萄球菌污染状况和耐药情况,为指导奶牛场安全合理用药和保障消费者食品安全提供依据.采集3个省共6个奶牛场及挤奶站的新鲜牛奶进行金黄色葡萄球菌的分离鉴定、药敏试验以及分离菌肠毒素PCR分型.结果从338份生鲜牛奶中共分离鉴定金黄色葡萄球菌共39株,分离率为11.54％;所有分离菌株都有不同程度的耐药,尤其对磺胺类药物和青霉素类的耐药性非常严重;92.3％的菌株含SEA SAJ基因肠毒素.     

5种中药提取物对金黄色葡萄球菌抑制作用的研究

采用水提,水浴加热的方法提取黄芩、黄连、黄柏、鱼腥草和五倍子五味中药的有效成分,通过二倍稀释法测出各个药的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),采用肉汤稀释棋盘法测定五味中药的联合抑菌情况。结果显示,金黄色葡萄球菌对黄连高度敏感;对黄芩、黄柏、五倍子和鱼腥草为中度敏感。黄芩、黄连和五倍子的杀菌作用较强,鱼腥草和黄柏的杀菌作用较弱。通过联合抑菌指数(FLCL)可知五倍子与黄芩、五倍子与黄连联合用药为协同作用。五倍子与鱼腥草、黄连与鱼腥草、黄连与黄芩的联合作用,表现为相加作用。黄连与黄柏、黄芩与鱼腥草、黄芩与黄柏、五倍子与黄柏的联合作用,表现为无关作用。鱼腥草与黄柏表现为拮抗作用。     

金黄色葡萄球菌gyrA、gyrB、grlA、grlB和norA基因突变与环丙沙星耐药性的关系

采用药敏纸片法测定了临床分离的160株金黄色葡萄球菌对14种抗菌药物的耐药性，同时进行了MRSA的检测，并采用琼脂稀释法测定纸片法筛选出的45株金黄色葡萄球菌对环丙沙星的最低抑菌浓度（MIC）。根据金黄色葡萄球菌gyrA、gyrB、grlA、grlB和norA基因的核苷酸序列设计引物、以筛选出的45株金黄色葡萄球菌染色体DNA为模板．对gyrA、gyrB、grlA、grlB和norA基因片段进行PCR扩增，回收PCR产物．并与pMD18-T载体连接．转化DH5a感受态大肠杆菌．提取质粒并测序。进一步分析考查金黄色葡萄球菌gyrA、gyrB、grlA、grlB和norA基因及其启动子区突变与环丙沙星耐药性的关系。结果表明．grlA中的2个突变（位于80和84密码子）及gyrA中的2个突变（位于84和88密码子）与环丙沙星耐药性明显相关。     

牛源金黄色葡萄球菌凝固酶基因的分型

为了了解我国不同地区奶牛场金黄色葡萄球菌基因型的分布情况,采用凝固酶基因（Coa）扩增的分型方法,对在奶牛乳房炎奶样中所分离到的26株金黄色葡萄球菌进行了分型。结果显示,26株金黄色葡萄球菌共分为5个基因型,黑龙江省分离株以PCR 3型为主（10/16）。发现在同一牛群中的分离株可以存在相同的基因型,也可以存在不同的基因型;而不同牛群中的分离株也可属于同一基因型。这种结果提示,在某个或某些牛群中存在某一金黄色葡萄球菌的流行型,但也可能存在多个金黄色葡萄球菌的克隆。     

上海地区奶牛的乳房炎金黄色葡萄球菌耐药性

为调查上海地区奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的耐药性,采集上海地区乳房炎患病乳样60 份,进行金黄色葡萄球菌的分离鉴定及药敏实验。结果表明：经分离鉴定,共检出8 株金黄色葡萄球菌,分离率为13.33%;药敏实验结果表明,分离得到的金黄色葡萄球菌对青霉素G和氨苄西林的耐药率最高,均为100.00%,对磺胺甲恶唑的耐药率次之,为50.00%,对头孢克洛、头孢唑肟、洛美沙星、诺氟沙星、四环素、庆大霉素、红霉素、克林霉素和氯霉素的耐药率均为37.50%,对环丙沙星和氧氟沙星的耐药率均为25.00%,对头孢噻肟、头孢他啶     

Phage typing of Staphylococcus aureus strains isolated in Sweden from bovine milk.

Both the human and the bovine international sets of phages were used for typing of 372 bovine Staphylococcus aureus (Sa) strains, whereas the bovine set alone was used for typing of a further 1183 strains. In addition, 338 of the strains were tested for antibiotic sensitivity. Out of 372 Sa strains 85.5% could be typed with the human and 89.8% with the bovine phage set. Of all the 1555 Sa strains used 92.4% were lysed by the bovine phage set. Several phage types can be present in one and the same herd and some of them can predominate. Resistance to most of the tested antibiotics was very low. The incidence of resistance to penicillin and ampicillin was 10.0% and 4.4% respectively.     

我国部分地区奶牛乳房炎病例中金黄色葡萄球菌血清型及毒力调查

为了解我国奶牛乳房炎病例中金黄色葡萄球菌(S.aureus)流行血清型和不同血清型菌株的毒力情况,本研究采用玻板凝集和双重PCR方法分别对北京、山西、内蒙古、山东、浙江和新疆奶牛乳房炎乳样中分离的191株S.aureus进行血清分型并从各血清型中随机选取100株菌以小白鼠进行毒力测定.结果表明:这些地区牛源S.aureus中,336PS型为流行血清型,占60.2％(115/191),CP8型占19.4％(37/191),CP5型占11.5％(22/191),未分型菌株占8.9％(17/191).毒力测定显示:336PS、CP8和CP5型菌株中强毒力菌株分别占65.1％、62.9％及61.9％,未分型菌株中强毒力菌株为22.2％.该调查为我国奶牛乳房炎S.aureus疫苗菌株的筛选提供了依据.     

奶牛乳房炎病原菌金黄色葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析

为研究江苏某奶牛场金黄色葡萄球菌的耐药特点,本试验通过MALDIBiotyper系统对8株金黄色葡萄球菌疑似株进行鉴定和耐药性试验。结果显示,8株金黄色葡萄球菌疑似株均为金黄色葡萄球菌,其对青霉素、链霉素、环丙沙星的耐药率均为100%;其次,对阿莫西林的耐药率为75%;极少数对头孢氨苄、庆大霉素、丁胺卡那、卡那霉素耐药;而对四环素、多西环素、克林霉素均敏感。结果表明,该奶牛场金黄色葡萄球菌的分离率为14.55%(8/55),且均呈现多重耐药。     

spa typing and enterotoxin gene profile of Staphylococcus aureus isolated from bovine raw milk in Korea

Staphylococcus aureus is a major etiological pathogen of bovine mastitis, which triggers significant economic losses in dairy herds worldwide. In this study, S. aureus strains isolated from the milk of cows suffering from mastitis in Korea were investigated by spa typing and staphylococcal enterotoxin (SE) gene profiling. Forty-four S. aureus strains were isolated from 26 farms in five provinces. All isolates grouped into five clusters and two singletons based on 14 spa types. Cluster 1 and 2 isolates comprised 38.6% and 36.4% of total isolates, respectively, which were distributed in more than four provinces. SE and SE-like toxin genes were detected in 34 (77.3%) isolates and the most frequently detected SE gene profile was seg, sei, selm, seln, and selo genes (16 isolates, 36.3%), which was comparable to one of the genomic islands, Type I νSaβ. This is a first report of spa types and the prevalence of the recently described SE and SE-like toxin genes among S. aureus isolates from bovine raw milk in Korea. Two predominant spa groups were distributed widely and recently described SE and SE-like toxin genes were detected frequently.     

牛源金黄色葡萄球菌16SrRNA分子鉴定与随机多态性扩增分型

利用16S rRNA保守序列对引起内蒙古地区奶牛乳房炎的金黄色葡萄球菌进行分离鉴定,并且建立引物随机多态性扩增(RAPD)体系对金黄色葡萄球菌分离株进行基因分型研究.结果表明,共分离出金黄色葡萄球菌35株,RAPD结果显示这35株菌均可得到清晰的RAPD指纹图谱,扩增产物在1～8条带之间,产物大小在350～4 500bp之间.菌株分为6个基因型,Ⅳ型为该地区的流行优势菌群.不同牛场各基因型菌株分布有明显差异,这与牛场的环境和病原菌在牛场间流行传播情况有关.研究结果为地区性奶牛乳房炎的防治及新疫苗的研制提供了可靠的理论依据.     

新疆部分地区奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌荚膜多糖分型的研究

为调查新疆奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌主要流行血清型,本研究采用玻板凝集和双重PCR方法对不同地区奶牛乳房炎乳样中分离的117株金黄色葡萄球菌进行血清分型.结果表明荚膜多糖5型占10.26％(12/117),8型占13.68％(16/117),336型占64.96％(76/117),未分型菌株占11.11 ％(13/117).该研究为新疆奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌疫苗菌株的筛选提供了依据.     

新疆、内蒙古部分地区乳房炎奶样中金黄色葡萄球菌的流行性与耐药性分析

为确定患乳房炎奶牛乳中金黄色葡萄球菌的流行性和耐药性状况,试验自2018年4月至2018年5月采集了新疆地区70例和内蒙古地区50例患乳房炎奶牛生鲜乳样。通过对奶样中金黄色葡萄球菌进行增菌培养、分离纯化,KB纸片扩散法药敏试验及PCR耐药基因检测发现,新疆和内蒙古地区奶样中金黄色葡萄球菌分离率分别为28.6%和54.0%;新疆地区分离的金黄色葡萄球菌菌株对青霉素G的耐药性最高(75.0%),其次是磺胺异噁唑(60.0%)、林可霉素(55.0%);内蒙古地区的金黄色葡萄球菌菌株同样对青霉素G高度耐受,耐药率为70.4%,其次为林可霉素(63.0%)、克林霉素(51.9%);两地区所分离菌株中,88.9%以上携带多种耐药基因,呈现多重耐药性;两地区所检出的高频耐药基因分别是新疆地区的ermA(30.0%)、dfrS1(30.0%)基因和内蒙古地区的lnuA(46.2%)基因。