菠萝蜜EST-SSR标记开发及其种质资源遗传多样性分析

[目的]分析菠萝蜜EST-SSR标记的稳定性和多态性揭示能力,并将其用于菠萝蜜种质资源遗传多样性研究。[方法]利用已获得的菠萝蜜c DNA文库中的EST序列,通过搜索SSR序列,设计引物,PCR扩增后,银染检测扩增结果。[结果]设计开发出479对EST-SSR引物,其中399对能在菠萝蜜上扩增出产物,282对具有多态性,多态性扩增引物占58.87%;从中选择60对能够清晰扩增的多态性引物,对64份菠萝蜜种质资源进行遗传多样性分析,60对EST-SSR引物共扩增出188条带,不同引物的扩增条带数在2~11,平均3.13条;其中有168条为多态性条带,多态率为89.36%;每对引物的多态信息含量(PIC)为0.407 7~0.958 9,平均PIC为0.792 2,这说明供试材料具有较高的遗传多样性。系统聚类分析结果表明,在相似系数0.688 1处,可将64份菠萝蜜种质资源分成二大类群,在相似系数0.732 5处,第二大类群又可分为4个亚群。[结论]EST-SSR标记的多态性揭示能力强,用于分析菠萝蜜种质遗传多态性的能力强,其应用前景广阔。     

分子标记在果树种质资源研究中的应用

果树童期长、树体大、多数农艺性状为数量性状且个体基因高度杂合,传统的研究方法受到很大限制。分子生物学的发展为果树研究工作开辟了新途径,基因转化和分子标记辅助选择育种成为培育更新、更好栽培品种的有效手段。本文对果树分子标记的研究现状及发展前景做了简要综述。     

遗传标记在植物种质资源研究中的应用

遗传标记作为识别遗传物质的标识,是检测植物种质资源遗传多样性的有效工具,其在个体、细胞和分子水平上有形态标记、细胞标记、生化标记和分子标记四种形式。本文综述了四种遗传标记技术的优缺点及其在植物种质资源研究中的应用,并对发展趋势进行展望。     

RAPD标记在植物种质资源研究中的应用

通过阐述ＰＡＰＤ标记的原理及其特点,综述了该技术在大田作物、蔬菜作物、果树、树木等的遗传多样性及物种进化、品种鉴定、分类等种质资源研究中的应用,并对其在应用过程中存在的问题进行了分析、提出了解决问题的方法。     

形态标记与RAPD标记在青蒿种质资源分类中的应用

采用形态学标记和RAPD分子标记,对15份青蒿种质资源材料进行了遗传多样性分析,结果表明:株高、茎粗、茎色、夹角、节间距等形态指标适合于青蒿植物学性状观察记载;RAPD分子标记在供试材料中多态位点多,有效等位基因频率高,因此也适用于青蒿种质资源的鉴定.综合运用两种方法对青蒿种质资源材料进行区分鉴定切实可行,其准确率与所选用的标记种类和数量有关.     

分子标记在茶树种质资源遗传多样性分析中的应用研究

随着现代生物技术的发展,DNA分子标记技术在茶树研究领域的应用越来越多,本文综述了RFLP、RAPD、AFLP、SSR、ISSR在茶树种质资源遗传多样性分析中的应用现状,探讨了分子标记在茶树遗传多样性中应用存在的问题,并提出建议,为分子标记技术更好的应用于茶树种质资源遗传多样性提供参考。     

分子标记及其在核桃种质资源研究中的应用

介绍了分子标记技术的类型,以及目前常用的几种分子标记技术(RFLP、AFLP、RAPD、SSR、ISSR等)的基本原理、特点,综述了分子标记技术在核桃种质资源研究中的应用情况,并对目前分子标记研究存在的问题及前景作了分析。     

江苏省不结球白菜种质资源数量类型及分布

江苏省不结球白菜种质资源数量类型及分布王克娟丁犁平赵桂芬（江苏省农业科学院蔬菜研究所南京２１００１４）江苏省是不结球白菜的盛产区和主要产区，种质资源丰富。由于不同的气候条件，经长期栽培演化，丰富了遗传基因变异，演化出了多种多样的类型和品种。１江苏省不...     

分子标记及其在果树种质资源研究中的应用(综述)

本文就分子标记的类型、特点及其在果树的遗传多样性、分类、起源、进化以及种质鉴定等种质资源研究中的利用进行了简要阐述,同时分析了研究中存在的问题并提出建议.     

大白菜地方种质遗传关系的RAPD分析

对11个大白菜地方种质材料，用改进的CTAB法提取总DNA后进行RAPD(Random Amplified Polymorphic DNA)分析。聚类结果表明，当遗传距离为0．18时，11份材料可分为二个生态类群，第一类群属于直简类型(交叉性气候生态型)，另一类群在0．15时，又分为二个类群，矮桩类型(海洋性气候生态型)和直简与矮桩的过渡类型。同时表明，应用RAPD选择特定引物在同一亚种内不同品种间进行遗传多样性、亲缘关系及品种鉴定等研究是可行的。     

用EST-SSR标记评价21份黄瓜种质的遗传多样性

采用15对EST-SSR引物对21份不同生态类型(华北型、华南型、欧洲温室型和野生种)的黄瓜种质进行了分析,共检测到65个等位基因,平均4.33个,多态性信息量(PIC)值变幅0.177 ～0.748,平均值为0.470,表明12对引物具有高度或中度多态性.NTSYS软件聚类分析表明,21份黄瓜种质可分为2大类,外来种...     

大白菜转基因育种及分子标记研究进展

综述了国内外在大白菜基因工程和分子标记研究方面的最新研究成果,重点从转基因载体选择、受体系统建立、遗传转化与转基因植株鉴定等方面对大白菜转基因研究的原理、方法和关键技术进行了总结。展望了大白菜生物技术研究的应用前景。     

大白菜风味品质评价指标的筛选

【目的】探讨大白菜农艺性状、细胞壁成分及相关酶活性对易煮烂程度的影响,为大白菜风味品质的快速评价和优质育种提供理论依据。 【方法】选用 ‘114城阳青’、‘花273×114城阳青’、‘114福山’、‘卫固’、‘114福山×114城阳青’和‘卫固×114福山’6个质地品质差异明显的大白菜材料,在采收适期取样,进行感官品质评定,调查大白菜的农艺性状,测定大白菜的果胶、粗纤维、木质素含量及多聚半乳糖醛酸酶（PG）和纤维素酶（Cx）活性,研究大白菜农艺性状、细胞壁成分及相关酶活性对易煮烂程度的影响。【结果】大白菜干物质含量为3.39%～7.89%,水溶性果胶含量为14.07～32.67 mg/g,原果胶含量为8.71～23.10 mg/g,水溶性果胶/总果胶为38.02%～78.94%,PG活性为2.88～6.02 U/mg,Cx活性为1.65～4.29 U/mg。相关分析结果表明,大白菜易煮烂程度与干物质含量、原果胶含量、原果胶占总果胶比例呈极显著或显著负相关,与水溶性果胶占总果胶的比例、PG活性呈显著或极显著正相关。【结论】干物质含量、原果胶含量、原果胶或水溶性果胶占总果胶的比例和PG活性可以作为评价大白菜易煮烂程度的主要指标。     

不结球白菜抗芜菁花叶病毒基因的遗传分析及SSR标记

为了找到与不结球白菜抗芜菁花叶病毒(TuMV)基因连锁的分子标记,采用群体分离分析法(BSA法)和SSR标记进行了与抗病基因连锁标记的筛选。通过对亲本、F1、BC1和F2群体进行病毒接种,研究了试验材料对TuMV的抗性遗传模型,结果表明:不结球白菜对TuMV的抗性由显性单基因控制。通过SSR引物筛选,得到在双亲间稳定表现多态性的引物54对。用这些引物筛选抗感池,得到1个与芜菁花叶病毒抗病基因连锁的SSR标记Ra3E05,连锁距离为8.7 cM。将该标记测序,得到1条184 bp的序列,根据该序列重新设计引物,将SSR标记转化为序列特异扩展区城(SCAR)标记SCRa2,用F2群体对其验证,带型与原SSR标记表现一致,可用于分子标记辅助育种。     

主要黄瓜种质资源抗病性评价

采用苗期接种法,对50份黄瓜种质资源作霜霉病、白粉病、棒孢叶斑病及黑斑病抗病性鉴定。结果表明,高抗白粉病材料有6份;高抗棒孢叶斑病材料有9份;高抗黑斑病材料有3份;抗霜霉病材料有11份。通过比较50份材料多抗性,仅50号材料(华南型)抗4种病害;5份材料抗3种病害,分别为16号、28号、31号、36号和38号。其中16号(西方鲜用型)、31号(华北型)和38号(华南型)抗霜霉病、棒孢叶斑病和黑斑病;36号(华南型)抗棒孢叶斑病、黑斑病和白粉病;28号(腌渍型)抗霜霉病、棒孢叶斑病和白粉病。在4种生态类型中,华南型黄瓜多抗性最好。16号、28号、31号、36号、38号和50号材料可作为培育黄瓜广谱抗病品种优良抗病种质资源。     

不同生态型结球大白菜抗寒性的评价

本试验以3种结球生态型，6个大白菜品种为材料，研究其秋冬期间田间抗寒性的差异。结果表明，随田间气温的降低，3种结球生态型大白菜叶片渗透势均先降低后升高；电解质渗漏率呈递增趋势；叶片含水量下降，自由水与束缚水质量比变小，至2001年1月14日自由水与束缚水质量比接近1；叶绿素含量和叶绿素a与b质量比呈降低趋势。但在低温胁迫下直筒型品种的电解质渗漏率较平头型和卵圆型低。叶片含水率和自由水与束缚水质量比较低，而叶绿素含量较高，耐寒性较好。     

不同大白菜品种苗期耐热性的综合评价

用人工气候箱中模拟高温条件,通过测定大白菜5份自交系和4份F1苗期的8个生理生化指标,采用主成分分析、隶属函数法和聚类分析综合评价大白菜的耐热性强弱。结果表明,供试材料的8个指标集约于3个主成分,累计贡献率为0.921;通过隶属函数值D评价耐热性的强弱,并利用聚类分析,将供试品种分为3类:夏秀-1、夏福2号和夏优-1为耐热类型;早杂5号、白阳、早5-1和早熟5号为中度耐热类型;020w-8、德阳01为不耐热类型。     

地黄EST-SSR标记的开发及扩增体系的建立

在转录组基础上批量开发地黄特异EST-SSR标记序列,同时通过优化DNA模板浓度、引物浓度、dNTP浓度、Taq酶浓度,结合正交优化试验建立地黄EST-SSR的PCR最佳扩增体系,为进一步鉴定和开发地黄多态性SSR提供重要的基础资料。结果表明:在地黄87665条转录本序列中,共筛选了1812条不小于18bp的SSR序列,其中二核苷酸数量最多,共有721个(70.8%),其次为三核苷酸和六核苷酸,分别有486、578个。而在所有SSR类型中AG/CT(457个)为最多的重复类型,其次为AC/GT(256个)。EST-SSR体系优化结果表明:最佳反应体系为15μL体系中含80ng模板DNA、0.1μmol/L引物、150μmol/Ld NTPs和1.5U TaqDNA聚合酶,在退火温度55℃进行30个循环。     

转Bt基因抗虫青菜的苗期性状评价

以B t转基因抗虫青菜株系T2、T4及原亲本上海青为材料,对种子与苗期性状进行考察与分析。结果发现转基因株系的种子远远小于对照,发芽速度却快于对照,后期生长明显比对照慢。由此表明,Bt基因的插入对萌芽和苗期性状相关基因的表达有较大影响。