肠膜明串珠菌的分离与鉴定

用厌氧培养的方法从酸泡菜中分离出一菌株,经细菌形态学和生理生化特性鉴定为肠膜明串珠菌,再经进一步生理生化特性鉴定为肠膜中珠菌葡聚糖亚种。     

1种肠膜明串珠菌发酵稀奶油的研制

为提高脱脂奶生产副产品稀奶油的利用率,以1株具有良好的产胞外多糖能力的肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)Leuco4为发酵剂,添加10%白砂糖,28℃发酵稀奶油得到涂抹型发酵稀奶油制品。该菌发酵的稀奶油在析水性、流动性(黏度)、涂抹性及感官评定方面均优于对照菌株,7 d保质期内产品状态稳定,几乎不析水,涂抹性好。该发酵稀奶油不含任何稳定剂、增稠剂及乳化剂,但稳定性好、稠度佳、保水性很好,符合清洁标签以及健康自然食品要求。     

肠膜明串珠菌6055合成低聚糖发酵培养基的优化

以MRS为基础培养基,单因素试验分析了碳源、氮源及微量元素对肠膜明串珠菌6055合成低聚糖的影响.并通过正交实验确定了肠膜明串珠菌6055合成低聚糖的适宜发酵培养基配方为：蔗糖100 g/L,麦芽糖50 g/L,酵母浸出物5g/L,大豆蛋白胨5 g/L,FeSO4·7H2O 0.01 g/L,MgSO4·7H2O 0.2 g/L,MnSO4·H2O 0.01 g/L,K2HPO4 3 g/L,CaCl2 0.05 g/L,NaCl 0.01 g/L,Tween-80 2 mL.低聚糖产量达到3.82 g/L,较优化前提高了1.42倍.     

肠膜明串珠菌复合生物保鲜剂 对龙眼果实的保鲜作用

以石硖、东丰龙眼(Dimocarpus longan Lour.cv.Shixia,Dongfeng)果实为试材,采用单因素试验测定龙眼的商品率、果实品质及果皮多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性;采用与L9 (34)正交试验测定果皮SOD的活性,结果显示肠膜明串珠菌dgnkzx002对果皮SOD活性的影响极显著,1.5％乳酸钠影响显著,0.1％壳聚糖+2％柠檬酸影响最小,根据均值分析获得最优复合生物保鲜剂配方为1.72×107CFU/mL肠膜明串珠菌dgnkzx002+(0.1％壳聚糖+2％柠檬酸)+1.5％乳酸钠.复合生物保鲜剂处理果实的商品率优于对照,TSS含量、Vc含量比贮藏初始分别降低了16％、21.22％,与对照存在显著差异;果皮PPO、POD的活性分别为40、565 U/min·g,优于对照的122、1 920 U/min·g.     

肠膜明串珠菌产细菌素最适发酵条件的筛选

为获得肠膜明串珠菌产细菌素的最佳发酵条件,采用琼脂扩散法测定发酵液对革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌的抑菌活性,结果发现:产细菌素的最佳培养基是MRS培养基,最适起始pH值为6.4,最适接种的体积分数和接种种龄分别为3%和24 h,产细菌素最适发酵温度和时间分别为30℃和24 h.通过优化发酵条件提高了细菌素的产量.     

肠膜明串珠菌产细菌素最适发酵条件的筛选

为获得肠膜明串珠茵产细茵素的最佳发酵条件,采用琼脂扩散法测定发酵液对革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌的抑菌活性,结果发现:产细茵素的最佳培养基是MRS培养基,最适起始pH值为6.4,最适接种的体积分数和接种种龄分别为3%和24 h,产细菌素最适发酵温度和时间分别为30℃和24 h.通过优化发酵条件提高了细菌素的产量.     

产D-乳酸假肠膜明串珠菌生长特性分析

研究假肠膜明串珠菌(Pseudomesenteroides leuconostoc)在不同条件下的生长特性,结果表明,假肠膜明串珠菌最适生长温度为35℃,最适p H为6.5;代谢生成D-乳酸的适宜发酵条件为4%初始葡萄糖,6%的接种量,35℃有助于发酵产酸,35℃条件下耗糖速度最快。     

肠膜明串珠菌Leuco4发酵稀奶油的条件优化

以1株具有良好的产胞外多糖能力的肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)Leuco4(CGMCC NO.6432)为发酵剂,添加蔗糖、发酵稀奶油得到涂抹型发酵稀奶油制品。在单因素试验基础上,采用正交试验确定肠膜明串珠菌发酵稀奶油的最佳配方。结果表明,最佳发酵条件为温度29℃、接种量3%、发酵时间55 h、蔗糖添加量60 g/L。该工艺条件得到的产品质量优,可进一步开发利用。该产品不含任何稳定剂、增稠剂及乳化剂,但是稳定性好、稠度佳、保水性很好,符合清洁标签以及健康自然食品的要求。     

假肠膜明串珠菌D-乳酸脱氢酶基因的克隆与表达

利用PCR的方法从假肠膜明串珠菌(Leuconostoc pseudomesenteroides 1159)的DNA中扩增得到D-乳酸脱氢酶基因,构建重组克隆质粒(pMD19-T-DLDH),转化DH5α进行蓝白斑筛选,得到阳性克隆提取质粒双酶切验证。连接pET-32a表达质粒,构建重组表达质粒,提取质粒双酶切、测序验证,测序结果与原序列基本相符。得到重组表达质粒pET-32-DLDH转化BL21大肠杆菌IPTG诱导表达,SDS-PAGE显示有明显大小约为19 ku的特异蛋白条带。     

对1株肠膜明串珠菌生长曲线和世代时间的初步探讨

用添加趋势线的分析方法,对肠膜明串珠菌LA-07在新鲜脱脂牛乳培养基和MRS肉汤培养基中的生长曲线进行了初步研究。结果表明,在2种培养基中,其生长均满足对数生长曲线规律,且世代时间分别为:G乳=114.7 min,GMRS=95.9 min。     

降解亚硝酸盐肠膜明串珠菌的^60 Co γ射线诱变选育

[目的]选育亚硝酸盐降解能力增强的肠膜明串珠菌并探讨其降解机理.[方法]通过^60Co γ射线和出发菌的代谢特性筛选肠膜明串珠菌突变株,分析突变株的生长特性及亚硝酸盐还原酶活力变化,探讨其降解机理.[结果]剂量为800 Gy的^60Coγ射线处理后获得1株遗传稳定好的肠膜明串珠菌突变株LM-S-3,它的亚硝酸盐降解率是出发菌的2.93倍;它的强降解亚硝酸盐能力可能与其耐酸性和高活性亚硝酸盐还原酶有关.[结论]^60C0 γ射线诱变选育的肠膜明串珠菌突变株具有较强的亚硝酸盐降解能力,可作为发酵剂辅助降解泡菜中的亚硝酸盐.     

假肠膜明串珠菌PC胞外多糖对逆境胁迫下水稻种子萌发的影响

为探究乳酸菌胞外多糖对粳稻品种籽粒萌发和耐受胁迫的影响,推进新型粳稻抗逆生长活性物质的研发与应用,试验选择粳稻盐丰47作为供试品种,假肠膜明串珠菌PC为供试菌株,统计盐丰47种子在不同浓度(0、10、100、1 000、2 000 mg/L)PC胞外多糖培养液中恒温培养7 d内的发芽势、发芽率、根长和芽长,并比较分析盐丰47种子在双蒸水和100 mg/L PC胞外多糖分别配制的3种胁迫条件不同培养液中的种子萌发情况,3种胁迫条件为PEG-6000(0、5%、10%、20%)、Cu²⁺(0、20、40、60、80μmol/L)和Zn²⁺(0、2、20、40μmol/L)。结果表明,PC胞外多糖的添加对粳稻盐丰47的发芽势和发芽率并无显著影响,但可以不同程度地促进盐丰47种子根和芽的生长,尤其在100 mg/L浓度下,种子的根长和芽长比对照组分别增加21.50%、6.98%。另外,该胞外多糖的添加可以显著缓解PEG-6000(10%和20%)、Cu²⁺和Zn²⁺胁迫对盐丰47种子根长及20μmol/L ...     

右旋糖酐发酵条件的研究

右旋糖酐广泛应用于医药、食品工业。本研究着重对肠膜状明串珠菌Lm-1226产右旋糖酐发酵条件进行初步的探索。研究了菌株的生长曲线、确定最佳接种龄为36h、最佳接种量为10%;确定最适碳源浓度为18%、最适氮源浓度为0.30%~0.32%、无机盐最适浓度:Na_2HPO_40.22%~0.24%,KH_2PO_40.13%~0.15%;在此基础之上进行四因素三水平的正交试验,确定最适产酶培养基组成:白沙糖20%、接种量10%、蛋白胨0.30%、磷酸氢二钠0.24%、膦酸二氢钾0.14%;最适培养条件:接种龄36h,初始p H7.0,温度25℃,发酵周期32 h。通过对发酵条件的优化使发酵液右旋糖酐达8.5 g·100 mL~(-1),蔗糖的利用率90%。     

肠膜明串珠菌素ZLG85抗菌谱及稳定性的研究

从发酵酸黄瓜中筛选到一株肠膜明串珠菌ZLG85,对其产生的肠膜明串珠菌素的抗菌谱及生物稳定性进行了研究。肠膜明串珠菌素ZLG85除了对单核增生李斯特菌具有较好的抑制效果之外,还能抑制其他食品中常见的致病菌的生长,抑菌普较广。肠膜明串珠菌素在低温,低pH值条件下也能抑制单增李斯特菌的生长;对人体常见的蛋白酶具有很强的敏感性;抑菌活性随着无机盐NaCl、KCl、CaCl2、ZnSO4、MgSO4浓度的升高而降低,一价盐离子Na+、Ka+对其活性的影响小于二价盐离子Ca2+、Zn2+、Mg2+;有机溶剂对其抑菌活性影响不显著。     

不同乳酸菌在荔枝汁中的发酵特性研究

向鲜榨并经巴氏灭菌的荔枝汁中接入不同的乳酸菌(干酪乳杆菌、肠膜状明串珠菌、乳酸链球菌、植物乳杆菌、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌)进行发酵,比较发酵过程中乳酸菌活菌数、pH值、总滴定酸、总糖、还原糖、总多酚、DPPH清除力和色泽等变化.结果表明,荔枝汁营养丰富,上述各种乳酸菌均能在荔枝汁中很好地生长,其中肠膜状明串珠菌的生长速率(对数生长期)略高于其他5种菌;另外,肠膜状明串珠菌相比其他乳酸菌种更能适应发酵后期的酸性环境,对荔枝汁中糖的转化能力最强,转化糖的降幅约为78％;并且,在多酚和色泽保留率方面,肠膜状明串珠菌也明显优于其他乳酸菌种.     

串珠镰刀菌的营养体亲和性

利用氯酸盐对串珠镰刀菌菌株进行诱变并获得ｎｉｔ突变体,所获得突变体中,以ｎｉｔＡ比例最高。采用ｎｉｔ突变体互补型配对技术,测定分离自水稻、玉米、棉花及大豆植物上串珠镰刀菌的营养体亲和群。结果显示,１５７个菌株分属于７１个营养体亲和群;不同群体间的菌株仅测出玉米田群体内的一个菌株和大豆田群体内的两个菌株属于同一个营养体亲和群,其它群体间的菌株则分属不同的营养技术亲和群。菌株ＳＡ１８经抗药性诱变、连续     

黄绿木霉菌发酵液对稻瘟病菌的影响

为了对黄绿木霉菌的利用提供理论依据,利用显微镜观察、紫外分光光度法、电导率法和溶解氧测定等方法,测定稻瘟病菌在黄绿木霉菌PD发酵液作用下的生长和形态变化、稻瘟病菌胞内物质的渗透、菌丝体呼吸强度和胞内酶活性的变化。结果表明:黄绿木霉菌PD发酵液能导致生长中的稻瘟病菌发生畸变,可使菌丝体内蛋白质和无机物质大量渗透出,菌体呼吸强度和呼吸酶活力快速下降。黄绿木霉菌PD发酵液对稻瘟病菌有较好的抑菌和致菌体死亡作用。     

不同寄主上串珠镰刀菌的生物学性状比较

从水稻、大豆、玉米、棉花等病株分离所得的镰刀菌,经鉴定大多数为串珠镰刀菌,而田间水稻种子上的串珠镰刀菌带菌率在５％以下。来源于不同寄主的菌株色素存在差异。各种寄主上不同菌株生长速率的变异系数不同,水稻上的菌株变异系数最大（２１．９０％）,其它菌株则较小,菌株的生长速率在寄主间存在显著差异。不同试剂对菌株产孢能力影响的测定结果表明,培养基中含氨基酸、铵盐和磷酸盐都能促进产孢,而含氯化锂、吐温、脲、乙二醇胺、蛋白胨、甘油、酵母膏等物质则抑制菌株产孢,尤以乙二醇胺抑制效果最明显。菌株培养滤液对水稻种子胚根伸长影响的测定结果表明,处理浓度间差异达显著,而菌株间、寄主间差异则不显著。     

发酵产葡聚糖条件的确定

[目的]研究提高葡聚糖发酵产率的条件。[方法]以蔗糖转化为葡聚糖的转化率作为参考标准,通过单因素实验和正交实验确定了肠膜明串珠菌发酵产葡聚糖的最佳条件。[结果]肠膜明串珠菌发酵产葡聚糖的最适宜培养基配方为:蔗糖100.0 g/L,蛋白胨5.0g/L;最佳发酵条件为:温度25℃,活化液接种量2.5%,发酵罐转速150 r/min,起始pH值7.5。该实验测得的最大蔗糖转化率为70.0%。[结论]蔗糖和蛋白胨是肠膜明串珠菌生长所必需的碳源和氮源,对于葡聚糖的产量有很大影响;发酵温度、发酵罐转速和发酵液pH值对蔗糖转化率的影响很大,而活化液接种量对蔗糖转化率的影响不大。