辽宁省猪血凝性脑脊髓炎流行病学调查与分析

从辽宁省各地区采集猪血清样本和HEV感染疑似病例脑组织样品,进行HEV抗体和病原学检测,结果910份样品中有451份呈现HEV抗体阳性反应,阳性率为49.6%;23份疑似病料检测HEV阳性率为73.91%,多与PRRSV等病原混和感染.依据临床样本资料和检测结果综合分析表明,辽宁省各地区普遍存在HEV感染,主要为隐性感染,发病猪均为45日龄以下仔猪.通过检测猪血清HEV抗体效价,可以判断HEV感染状态,为养猪场制定相应的防制措施提供依据.     

猪血凝性脑脊髓炎病毒RT-PCR方法的建立及初步应用

为了建立快速检测猪血凝性脑脊髓炎病毒(HEV)的RT-PCR方法,根据GenBank中HEV的HE基因和S基因设计了1对引物,在优化RT-PCR反应条件的基础上,成功的扩增出323bp的特异性条带。检测与HEV亲缘性较高的牛冠状病毒及猪的伪狂犬病毒均为阴性,最低可以检测到10个TCID50/100μl的病毒,说明该方法的有较好的特异性和敏感性。用此RT-PCR方法对感染HEV的小鼠和猪进行检测,结果能从发病动物的多种组织中检测到病原,其中以脑组织的检出率最高。因此,临床疑似病例检测时以脑组织为最佳检测样本。     

快速检测猪血凝性脑脊髓炎病毒方法的建立

为研究建立快速检测猪血凝性脑脊髓炎病毒的PT-PVR方法。结合GenBank中HEV涉及的HE基因及S基因设计1对引物,整理RT-PCR的反应条件,建立(HEV)RT-PCR方法。结果发现,检测猪血凝性脑脊髓炎病毒(HEV)的RT-PCR方法存在一定的特异性和敏感性,可以检测到猪体内多个组织内含有该病原。表明检测猪血凝性脑脊髓炎病毒(HEV)的RT-PCR方法的建立具有实际意义,可有效检测猪血凝性脑脊髓炎病毒。     

猪血凝性脑脊髓炎病毒HE基因的克隆及真核表达

应用特异性引物,从猪血凝性脑脊髓炎病毒（HEV）中扩增出HE蛋白基因,PCR产物纯化后克隆入pGEM-T载体,得到重组质粒pTHE。用EcoRⅠ和NotⅠ双酶切pTHE,回收目的基因HE片段并将其定向克隆到pPiCZαA中,构建重组质粒pPiCZαA HE。用BstXⅠ酶切pPICZαA HE使其线性化,并电击转化至感受态毕赤酵母细胞GS115。PCR法鉴定阳性重组子,用1％甲醇诱导表达后,进行SDS-PAGE及westem blot分析。结果在酵母菌培养基上清中检测到相对分子量为43kD的重组蛋白,且该重组蛋白可与HEV多克隆抗体发生特异性血清学反应,表明HEV的HE蛋白片段在Pichia Pastoris中获得成功表达。     

禽传染性脑脊髓炎病毒的分离鉴定

通过ＳＰＦ鸡胚连接传代，从自然发病肉鸡脑组织中分离出一株禽脑脊髓炎病毒，命名为ＡＥＶ－Ｌ２Ｚ株。该病毒抗原与标准阳性血清之间出现清晰的沉淀线，在接种的发病鸡胚和病鸡的胰岛细胞和大脑神经细胞的胞浆中可见呈六边形颗业状的病毒粒于聚集或散在，直径２５～３０ｎｍ。该病毒对ｐＨ３，氯仿，乙醚，胰蛋白酶，去氧胆酸钠具有抵抗力，在Ｍｇ＾２＋保护下抵抗热效应（５０℃）对ｐＨ２无抵抗力，２５℃和－８０℃反复冻融３，     

禽脑脊髓炎病毒的鉴定

对分离到的AEV毒株进行氯仿、乙醚、温度敏感性试验等理化性质及血凝性质的鉴定,表明该毒株理化件质稳定,无血凝性;电镜下观察接毒鸡胚的超薄切片可看到AEV病毒颗粒,大小在25～30 nm.参照AEV的基因序列设计了一对引物,对该病毒进行了特异性扩增,得到了目的片段.证明该分离病毒为AEV毒株,暂定名为AEV HD.     

某蛋鸡场禽传染性脑脊髓炎发病情况调查

研究主要观察了禽传染性脑脊髓炎在某蛋鸡场产蛋鸡群中的感染情况,针对禽脑脊髓炎对成年鸡的感染特点采取了相应的治疗措施,并对今后的预防工作提出了建议。禽传染性脑脊髓炎对开产蛋鸡的影响主要是表现在产蛋率上,在观察到产蛋率突然下降后,采用琼脂扩散试验(AGP)法对采集到的血样进行检测,证实了鸡群确实感染禽传染性脑脊髓炎。在鸡群患病期间,除了采取积极的治疗措施,同时还对其生产性状及指标进行了追踪调查与分析,结果表明,禽传染性脑脊髓炎对产蛋鸡的生产性能的影响主要是引起产蛋率的下降,而在死淘率及采食量方面均无明显变化。     

豫北地区猪圆环病毒2型感染的血清学调查

[目的]明确河南省豫北地区PCV2感染的流行情况,以便控制PCV2感染的流行。[方法]从河南省豫北地区安阳、鹤壁、新乡、濮阳4市的猪场采集不同日龄猪群血清样品338份,用间接ELISA方法进行猪圆环病毒2型(PCV2)感染的血清抗体检测。[结果]结果表明:PCV2血清抗体阳性率:哺乳仔猪为16.0%(8/50);断奶仔猪为49.5%(53/117);生长肥育猪为51.4%(36/70);种公猪为18.1%(4/22);后备母猪为20.6%(7/34);经产母猪为54.5%(29/55);阳性率为70.4%(19/27),338份血清总阳性率为40.6%(137/338)。[结论]河南省豫北地区养猪业已受到猪圆环病毒2型的感染,应引起高度重视。     

河南地区猪圆环病毒Ⅱ型抗体血清学调查

应用酶联免疫吸附试验(ELISA),测定了河南省1886份血清样本,对不同地区、年龄和品种猪的血清学数据进行了综合分析。结果为36个猪场中34个PCV-2血清抗体呈阳性；对不同年龄的猪群,1年龄PCV-2血清抗体阳性率为52.75％,2年龄为45.84％,3年龄39.03％,4年龄为1.67％,5年龄为0；土杂猪PCV-2血清抗体阳性率52.54％,与长白猪51.31％差别不大,但明显高于大约克和杜洛克；以上结果表明PCV-2在猪群中的感染非常普遍,不同年龄及不同品种猪对PCV-2的易感性不同。PCV-2的感染可明显降低猪群对疫苗的免疫应答。     

禽脑脊髓炎病毒的分离与初步鉴定

禽脑脊髓炎(ＡＥ)是一种主要侵害雏鸡的病毒性传染病,以共济失调、头颈快速震颤、衰竭死亡为特征。本病1930年最早发现于美国〔1〕,此后,世界所有养禽地区均有发生,我国许多省、市、区均有发生本病的报道〔2〕,山东省对本病的报道多见〔3,4〕,但大都缺乏对ＡＥ病毒分离与?..     

广西猪乙型脑炎血清流行病学调查分析

【目的】了解广西地区猪乙型脑炎（JE）的感染情况及流行态势,为制定广西猪群JE监测和防控体系提供参考依据。【方法】2008～2010年,采集广西边境14市未经JE疫苗免疫的2597份猪血清,采用LAT检测乙型脑炎病毒（JEV）血清抗体,并对不同区域、季节和年龄段等猪群JE流行状况进行分析。【结果】广西受检猪群JEV血清抗体平均阳性率为60.65%;感染率以桂南地区最高（72.15%）,桂北地区最低（35.71%）;夏秋季节（5～11月）是主要流行季节,平均JEV血清抗体阳性率达70.67%,3～4月仅为26.75%;2008～2010年,猪群JEV血清抗体阳性率总体呈上升趋势。【结论】广西受检猪群JE感染较普遍,有一定的地域性及季节性,且感染率呈逐年上升趋势。猪是JEV重要的贮存宿主及传染源,应采取有效的监测与防控措施,杜绝猪JE的流行传播。     

广西猪流感血清学调查

采用血凝抑制试验对广西7个市30个猪场的2156份猪血清样品进行了猪流感病毒H1、H3亚型抗体的检测。结果显示,在被调查的30个猪场中,H1亚型抗体阳性率为96.67%,H3亚型抗体阳性率为86.67%,H1 H3亚型抗体阳性率为86.67%;在检测的2156份血清样品中,H1亚型抗体阳性率为29.04%,H3亚型抗体阳性率为31.54%,H1 H3亚型抗体阳性率为12.15%。表明在所调查的广西猪场中,猪流感病毒的感染较为普遍,大部分猪场都曾被H1、H3亚型感染。     

广西猪流感病毒H1N2亚型的血清学调查

【目的】了解广西猪群中猪流感（SI）的流行情况,为科学防控广西SI提供参考依据。【方法】以猪流感病毒（SIV）HIN2亚型毒株为抗原,采用微量血凝抑制试验（HI）方法,对2009年7月～2011年3月在广西12个市采集的997份猪血清进行SIV的血清学调查。【结果】2009年的H1N2亚型抗体阳性率为33．4％,比2010年和2011年1-3月的高;广西各市的H1N2亚型抗体阳性率为0—83．1％,其中河池和百色两市的H1N2亚型抗体阳性率较高,分别为83．1％和51．1％,崇左市为零,其他市的H1N2亚型抗体阳性为4．0％～32．1％。【结论】广西地区猪群在2009～2011年均受到猪源H1N2亚型不同程度的感染。     

陕西省PCV2感染的血清学调查

2004-01~2005-06,从陕西榆林、宝鸡、西安、渭南、汉中、商洛、安康等7个地区的猪场采集不同日龄猪血清样品237份,用间接EL ISA方法进行猪圆环病毒2型(PCV 2)感染的血清抗体检测,并用阻断EL ISA方法对部分血清样品进行了猪伪狂犬病毒(PRV)gE基因蛋白的抗体检测。结果表明,未断奶仔猪PCV 2血清抗体阳性率为0%(0/40),断奶仔猪为28.6%(2/7),肥育猪为43.7%(31/71),种公猪为7.7%(1/13),后备母猪为15.6%(7/45),经产母猪为60.4%(29/48),临床上有多系统衰竭综合征(PMW S)疑似症状的13头断奶仔猪的阳性率为61.5%(8/13),237份血清的总阳性率为32.9%(78/237);PCV 2与PRV混合感染率为21.7%(5/23)。     

闽西地区猪伪狂犬野毒株感染的血清学调查

美国IDEXX公司生产的PRV-gE(gE-ELISA)酶联免疫试剂盒,能对已免疫PR缺失gE的基因工程疫苗或未免疫的猪群,区分疫苗株和野毒株感染.2005~2007上半年,对闽西地区使用gE-基因缺失疫苗的规模化猪场母猪、仔猪和生长猪,不分健康状况,进行PR野毒株感染的血清学调查,结果显示2005年至2006年上半年,该地区母猪PR野毒感染阳性率较高,达41.5%和43.8%,2006年下半年至2007上半年,该地区母猪PR野毒感染阳性率有较大幅度的降低,且阴性猪场很多,阳性率分别是21.3%和13.3%.同时3年来对54个规模化猪场监测结果分析,各猪场阳性率差异很大,3年来猪场阳性率也呈大幅度下降,2007年上半年猪场阳性率仅为33.3%.对仔猪和生长猪的监测结果显示,阳性率比母猪大大降低,并且也呈下降的趋势.     

2009～2013年广西H1N1和H3N2亚型猪流感病毒血清学调查

[目的]了解广西H1N1和H3N2亚型猪流感病毒(SIV)的存在形势及其流行规律,为下一步有效监测和防控猪流感(SI)提供理论依据和原始溯源.[方法]对2009～2013年于广西11个地级市的屠宰场、规模化养猪场和个体养殖户采集的1170份猪血清进行血凝抑制(HI)试验检测,统计欧洲禽源H1N1 (EA-H1N1)亚型和新型人源重组H3N2(Hu-H3N2)亚型4株毒株(LB 144和BB2、NNXD和JGB4)的抗体阳性率,并分析H1N1和H3N2亚型毒株的存在形势及其流行规律.[结果]2009～2013年,EA-H1N1亚型LB144毒株的平均抗体阳性率高达20.68％,且保持稳定,是广西地区主要的流行毒株;Hu-H3N2亚型JGB4毒株从2010年开始流行,且呈逐渐蔓延的趋势,平均抗体阳性率为19.96％.广西北海、南宁、玉林、贺州、桂林、贵港和柳州市受到EA-H1N1和Hu-H3N2亚型毒株多重感染,且感染程度较严重;百色、河池和防城港市的感染程度相对较低.育肥猪最易感染SIV,尤其是BB2和JGB4毒株,其抗体阳性率分别达66.00％和40.00％.EA-H1N1亚型毒株间的交叉感染阳性率(21.52％)略低于Hu-H3N2亚型毒株间的交叉感染阳性率(27.45％),而两株不同亚型毒株交叉感染时以BB2与JGB4毒株的交叉感染阳性率最高(16.23％),3株交叉感染时以BB2、NNXD和JGB4毒株间的交叉感染阳性率最高(11.60％),4株同时交叉感染阳性率也有6.96％.[结论]广西猪群已普遍存在EA-H1N1和Hu-H3N2亚型毒株混合感染的现象,尤其是地处两省边界上的地级市感染更严重,并以育肥猪和保育猪较易感.因此在SI防控工作中,除做好哺乳仔猪和种猪的日常管理外,还应减少保育猪的外来应激,适当调整育肥猪的饲养密度,以减少新型SIV重组毒株的产生.     

湖北省水牛巴贝斯虫病的综合防治研究Ⅰ.血清流行病学调查

利用胶乳凝集试验对湖北省不同地区的水牛血清进行了东方巴贝斯虫的血清流行病学调查。结果表明,在流行区血清学检查阳性率为71.74%,在非流行区仅为1.19%。统计学检查结果表明,流行区内不同地区间东方巴贝斯虫感染率无差异,随着年龄的增加,阳性率逐渐升高。利用一数学公式对这次调查结果进行分析后认为,该流行区为稳定的流行区。对流行区应采取的防治措施进行了讨论。     

Viricidal activity of several disinfectants against African swine fever virus

Prevention of African swine fever, a disease caused by African swine fever virus (ASFV), requires maintenance of high biosecurity standards, which principally relies on disinfection. Finding the perfect disinfectant against ASFV is difficult because of the lack of relevant data. Therefore, we aimed to find the most effective disinfectant and to optimise its concentration as well as contact time to confirm the viricidal effect against ASFV in vitro. We evaluated the viricidal activity of three concentrations each of six common disinfectants against ASFV using immersion disinfection assay (IDA) and spray disinfection assay (SDA); the concentrations of these disinfectants at which complete viral inactivation occurred were almost same as the manufacturer-recommended concentrations, but the exposure times for viral inactivation are different. The following disinfectants (assay: concentration, exposure time) showed complete inactivation: iodine and acid mixed solution (IDA/SDA: 0.5%, 10 min); compound potassium peroxymonosulfate (IDA: 0.25%, 30 min; SDA: 0.25%, 60 min); citric acid (IDA: 0.25%, 60 min; SDA: 0.5%, 60 min); sodium dichloroisocyanurate (IDA: 0.125%, 60 min; SDA: 0.25%, 60 min); and glutaral ang deciquam (IDA/SDA: 0.2%, 60 min); and deciquam (IDA/SDA: 0.5%, 60 min). However, in the presence of organic material contamination, disinfectants did not show a marked inactivation effect. Therefore, disinfection procedures should be performed in two steps: thorough mechanical cleaning followed by application of disinfectant. In conclusion, all the tested disinfectants can inactivate ASFV; these can be used as alternative disinfectants to enhance biosecurity.     

串珠镰刀菌素对仔猪血清中猪瘟抗体水平的影响

以三元杂仔猪为材料,研究了串珠镰刀菌素对仔猪猪瘟抗体水平的影响。结果表明,试验组在免疫后的第3、4、5、6周猪瘟抗体水平较对照显著降低(P0.01)。说明串珠镰刀菌素可降低猪体内血清中猪瘟抗体水平,抑制机体体液免疫的功能。