光质、光周期对白桦愈伤组织生长和三萜质量分数的影响

以白桦(Betula platyphylla Suk.)组培苗茎段为研究材料,在IS培养基上附加0.6mg/L NAA+0.8mg/L BA进行愈伤组织的诱导,观察不同光处理条件下白桦愈伤组织的生长状况及其三萜积累的变化.结果表明:在一个继代生长期中,白桦愈伤组织在不同光照条件下的干质量积累呈上升趋势,其干质量增长率依次为:蓝光(48.95%)＞黄光(40.24%)＞绿光(23.28%)＞黑暗(21.14%)＞红光(18.37%);全光照(36.56%)＞14h光照(24.69%)＞黑暗(21.14%).白桦愈伤组织的细胞活力在一个继代培养周期中呈现先上升后下降趋势,其中,愈伤组织的细胞活力在9～15d间达到最高值;白桦愈伤组织中三萜质量分数在0～9d呈上升趋势,9～18d呈下降趋势,18～21d略微回升,于第9d达到最大值.在第9d时,光处理下白桦愈伤组织中的三萜质量分数与对照(黑暗)相比的增长率依次为:蓝光(20.12%)＞红光(17.03%)＞黄光(9.35%)＞绿光(-3.09%);14h光照(12.06%)＞全光照(-3.01%).由此可见,光处理可以调节白桦愈伤组织的生长状态及其三萜等次生代谢物的积累量.     

钙离子在介导SA 诱导白桦悬浮细胞三萜合成途径中的作用

为探讨Ca 2 + 作为信号分子在水杨酸(SA)诱导白桦悬浮细胞三萜合成中的作用,本文用SA、Ca 2 + 及Ca 2 + 阻断 剂对白桦悬浮细胞进行处理,采用紫外分光光度法和高效液相色谱法测定细胞中总三萜及其组分的积累量;同时 利用荧光定量PCR 方法检测了白桦细胞中三萜合成途径关键酶基因(FPS、SS、SE、BPW、BPY、CAS)和钙调蛋白基 因表达变化。结果显示:水杨酸可诱导白桦悬浮细胞三萜物质(总三萜、齐墩果酸、白桦脂醇、白桦脂酸)的合成及 相关基因的上调表达,且Ca 2 + 的加入使得这种诱导效应更为显著,暗示白桦细胞中钙信号分子介导了水杨酸诱导 三萜物质的合成。而对SA 与各种Ca 2 + 阻断剂互作处理结果显示,Ca 2 + 抑制剂的加入抑制了SA 对细胞中三萜合 成的诱导效果,表明Ca 2 + 作为信号分子介导了SA 诱导白桦悬浮细胞三萜物质的合成。      

灵芝保健品中三萜化合物HPLC分离条件的优化

[目的]优化灵芝中三萜化合物HPLC法的分离条件。[方法]用RP-HPLC法,考察不同提取剂、不同梯度洗脱、不同进样量对灵芝中三萜类化合物分离的影响,同时在最佳条件下分离测定4种市售保健品中三萜类组分。[结果]灵芝中三萜化合物提取剂为氯仿;优选出的灵芝三萜组分的HPLC分离条件为：流动相A为0.2%乙酸-水,流动相B为乙腈,梯度洗脱;检测波长为254nm;进样量为10μl;市售的4种灵芝保健品中只有2种保健品的HPLC分离图谱能与灵芝原药材对应。[结论]该试验得到分离灵芝中的三萜类组分的最佳分离条件,同时对4种市售保健品中三萜类组分进行了测定,此法可用于灵芝提取物的质量控制和其保健品的鉴定。     

苏丹草愈伤组织酚类物质提取工艺的研究

[目的]探索苏丹草愈伤组织酚类物质的最佳提取工艺。[方法]以3种不同类型的苏丹草愈伤组织为材料,采用Folin-Ciocalteu比色法研究了超声波破碎时间、乙醇浓度以及抽提次数对酚类物质提取效率的影响。[结果]提取苏丹草愈伤组织酚类物质的最佳工艺条件为:抽提液乙醇浓度50%,超声波破碎时间32 min,抽提次数3次。3种不同类型的苏丹草愈伤组织中,Ⅱ型愈伤组织的酚类物质含量最高。[结论]该研究为苏丹草的综合开发和深度利用提供技术支持。     

厚朴愈伤组织诱导条件的优化

为了优化出厚朴顶芽愈伤组织诱导的最适培养条件,以MS为基本培养基,探讨了6-BA、NAA、2,4-D以及光照对厚朴顶芽诱导的影响。结果表明:厚朴顶芽诱导的最适培养基为MS+2.0 mg/L2,4-D+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂,pH 5.8,培养13 d后,顶芽诱导出愈伤组织。诱导出的顶芽愈伤组织在温度(25±2)℃,光周期为12h/d,光照强度为1 500~2 000 lx条件下进行光培养,其比暗培养[(25±2℃)]差。     

罗田甜柿总三萜的提取条件分析

为了确定罗田甜柿(Diospyros kaki Thunb.)成熟果实中总三萜含量和提取条件,以湖北省罗田县的罗田甜柿果实为试材,从不同的溶剂、乙醇体积分数、提取时间、温度、料液比、提取次数来确定提取罗田甜柿成熟果实中总三萜的最佳条件,结果表明,通过单因素试验确定提取条件为70%乙醇作为溶剂,提取时间3 h,温度85℃,料液比1∶11(m∶V,g∶m L),提取2次,总三萜提取量最高可达51.13 mg/100 g(FW)。     

黄芩愈伤组织诱导条件的优化

本试验以黄芩的子叶、真叶和下胚轴为外植体在不同激素组合的MS培养基上诱导愈伤组织。结果表明：①诱导黄芩愈伤组织的最好外植体为真叶；②在不同配方培养基中，诱导愈伤组织的最适培养基配方为MS 2，4-D(0．5mg／L) 6-BA(1mg／L) NAA(0．5mg／L)。     

大蒜愈伤组织诱导条件的优化

对大蒜愈伤组织诱导条件进行了优化,结果表明：采用带表皮、外植体大小为０．５ｃｍ×０．３ｃｍ×０．２ｃｍ的广州白皮大蒜蒜瓣,在ＭＳ＋３．０ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ＋２．２ｍｇ／ＬＩＢＡ培养基中可促使大蒜愈伤组织大量发生,广州白皮大蒜与大头蒜品种对务组织诱导无显著差异,大蒜外植体４℃低温保藏１８ｄ可降低出愈污染,但对伤组织诱导影响不大。     

半夏疏松愈伤组织诱导条件的优化研究

[目的]建立半夏细胞悬浮培养体系。[方法]以半夏叶柄为外植体,采用正交试验设计研究了2,4-D、NAA、毒莠定和KT 4种植物生长物质及其配比对疏松愈伤组织形成的影响。[结果]2,4-D和毒莠定对半夏叶柄愈伤组织诱导效果最显著,KT和NAA次之。诱导半夏叶柄形成疏松愈伤组织的适宜培养基为MS＋0.5 mg/L 2,4-D＋1.0 mg/L NAA＋1.0 mg/L毒莠定＋1.5 mg/L KT。[结论]为通过半夏细胞悬浮提取有效成分和生产人工种子奠定了基础。     

酶法辅助提取迷迭香中三萜酸的工艺研究

为探讨迷迭香中三萜酸的最佳提取工艺条件,采用纤维素酶法,通过单因素试验和正交设计对迷迭香中三萜酸的提取工艺进行研究.酶解法提取迷迭香中三萜酸的最佳条件为:加酶量6.5 mg/g,酶解时间为2.5h,酶解温度45℃,体系pH值6.5.在此条件下,所得迷迭香中三萜酸干质量为4.58 g.纤维素酶能有效地破坏细胞壁,加速有效物质的释放,纤维素酶酶解条件温和,工艺简单,值得推广应用.     

白桦悬浮细胞蛋白质组学分析体系的构建

[目的]建立一套适合白桦悬浮细胞蛋白质组学分析的双向电泳体系.[方法]以白桦悬浮细胞为研究对象,采用改进的三氯乙酸（TCA）-丙酮沉淀法提取悬浮细胞蛋白,使用17 cm、pH 4.0～7.0的IPG胶条,9.0μg/μl的上样量进行双向电泳.[结果]可得到蛋白质点数目多、分辨率高和重复性好的双向电泳图谱.PDQuest软件分析考马斯亮蓝染色后的凝胶,共得到约1 000个蛋白点.从这些蛋白点中随机选取3个蛋白点经基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）分析后,搜索NCBInr数据库对蛋白进行鉴定.结果显示,这3个蛋白分别为S-腺苷甲硫氨酸合成酶、transposase for IS1330和PadR家族转录调控蛋白.[结论]为利用蛋白组学分析诱导子提高次生代谢物的积累机制奠定基础.     

白桦ISSR-PCR反应体系的优化

以白桦基因组DNA为模板,研究了ISSR的影响因素,建立一套适宜于白桦的ISSR优化反应体系及程序。即20μL反应体系中,Mg2+浓度范围为0.5~3.0mmol·L-1,dNTPs浓度范围为0.10~0.30mmol·L-1,Taq聚合酶浓度范围为1.0~2.0U,模板DNA浓度为30~120ng,同时含有RNA的模板DNA对ISSR扩增也略有影响,引物浓度范围为0.2~0.4μmmol·L-1。通过梯度PCR测验,确定了适宜的退火温度为49℃。反应程序为:第一个循环基因组DNA经94℃预变性5min;30个循环为94℃变性30s,49℃退火30s,72℃延伸30s;最后一个循环完成后,在72℃延伸7min。     

白桦苗期种源试验的研究

对白桦１６个种源的１年生苗高,地径进行方差分析,用各种源的苗高,地径与地理,气候因子做相关分析,结果表明：各种源间的苗高,地径差异极显著,苗高,地径与各种源的地理纬度呈负相关。与经度呈正相关。用１６个种源的苗高,地径聚类分析,结合各种源的地理,气候因素。     

白桦变色菌的分离、纯化与筛选

基于白桦变色菌的存在以及白桦在自然干燥过程中易产生变色的特点,从微生物学的角度,着重进行了白桦变色菌的培养、分离与筛选。研究表明:白桦在自然干燥过程中易受到变色菌的侵染;通过木材接菌试验,筛选出了诱使白桦变色的菌种。     

白桦材12个弹性常数的研究

该文结合木材的正交各向异性特征论述了木材的柔度系数与其工程弹性常数的关系 ,并采用电测法测试了白桦木材的 1 2个弹性常数 .试验结果表明 ,木材作为多孔性材料 ,粘贴应变片时 ,涂胶量不能过多或过少 .涂胶量过多则胶层太厚影响应变片性能 ;过少则粘贴不牢 ,不能准确传递应变 .木材作为正交各向异性材料 ,弹性常数间存在一定的相互联系 ,满足马克斯韦尔定理 ,该试验测定的试验数据基本满足这些联系 .从数据结果的检测来看 ,白桦弹性常数的测量是准确可靠的 ,证明电测法这一测试手段可行 .就剪切弹性模量的测试结果看 ,抗弯弹性模量的倒数与高和跨度之比的平方的线性回归相关系数较高 ,均大于 0 95 .这说明应用三点弯曲试验方法测试的剪切弹性模量值是可靠的     

白桦材LT型裂纹的演化与增长行为的研究

该文以白桦为研究对象,利用数字散斑相关技术对白桦LT型裂纹的演化与增长的力学行为进行了实验研究.记录了裂纹尖端局域场形变信息的散斑图像,经过相关运算得出裂纹尖端的位移场分布图,并对含有LT型裂纹的白桦断裂韧度进行了测定.研究结果表明,将数字散斑相关方法应用于白桦LT型裂纹的演化与增长行为的研究行之有效,可以直观再现其裂纹增长与断裂过程的力学特征.裂纹尖端附近有较大变形,应力集中明显.该试验测定的含有LT型裂纹的白桦试样断裂韧度为39.864 MPa·m1/2.     

不同倍性白桦叶芽中IAA和ABA含量分析

[目的]初步比较二、三、四倍体白桦叶芽中IAA和ABA含量的差异,为研究植物内源激素在不同倍性白桦生长发育过程中所发挥的作用提供参考.[方法]利用HPLC法测定了二、三、四倍体白桦叶芽中IAA和ABA含量.[结果]对不同倍性白桦叶芽IAA与ABA含量的比较发现,多倍体白桦叶芽IAA含量均显著高于二倍体,而ABA含量则显著低于二倍体;单位质量的二、三、四倍体白桦叶芽中IAA/ABA的值分别为0.76、1.45、1.06.[结论]染色体倍数的增加对内源激素含量产生了重要影响.     

白桦不同杂交组合三倍体子代当年生苗木生长性状分析

为了选择白桦三倍体杂种子代的优良杂交双亲和杂交组合,以4株中国白桦四倍体（Q14、Q19、Q33和Q34）为母本,5株杂种二倍体（M1、M2、M3、M4和M5）为父本,按测交系交配设计获得了20个杂交组合的白桦三倍体苗木,对各杂交组合三倍体子代的苗高和地径进行方差分析和配合力分析。结果表明,白桦三倍体家系间的苗高和地径均存在着极显著的差异,苗高和地径的一般配合力和特殊配合力的差异也达到了极显著水平。根据白桦各三倍体家系的生长量、一般配合力和特殊配合力,初步选择Q19和Q34为优良四倍体母本,M1和M2为优良二倍体父本,Q34×M2和Q34×M1为优良杂交组合。      

白桦雄花序发育初期蛋白质的双向电泳图谱分析

对发育初期2个时期的白桦雄花序进行的蛋白质双向电泳(two-dimemional electrophoresis，2-DE)研究结果表明，2个时期的2-DE图谱，有275个蛋白点在表达上有明显的质和量的变化。其中：162个蛋白点在5月31日雄花序2-DE图谱中的表达量均高于5月28日，110个蛋白点的表达量低于5月28日；2个蛋白点为5月28日雄花序2-DE图谱所特有；1个蛋白点为5月31日雄花序2-DE图谱所特有。这些结果为进一步获得与雄花序发育时期的相关蛋白，进而得到相关的特异基因，在分子水平上揭示白桦雄花序发育机理奠定重要基础。     

白桦五个MYB转录因子的生物信息学分析

在白桦(Betula platyphylla Suk.)转录组数据库中获得5个MYB转录因子,将其进行蛋白质分子量与等电点、核定位信号、跨膜结构域和蛋白保守结构域预测,并与拟南芥的MYB蛋白质进行氨基酸序列比对分析和系统树构建。结果表明,白桦的5个MYB转录因子都属于R2R3-MYB类蛋白;系统进化树表明白桦的5个MYB转录因子与拟南芥抗逆相关的MYB转录因子亲缘关系较近,而与非抗逆相关的转录因子亲缘关系较远,说明白桦的5个MYB转录因子可能具有植物抗逆相关功能。