烟草花叶病毒山西番茄分离物的全基因组序列测定及分析

为明确山西省晋中市侵染番茄的病毒种类,采用双链RNA(double-stranded RNA,ds RNA)技术和非序列依赖PCR扩增(sequence-independent amplification,SIA)方法对感病番茄进行分子鉴定。序列测定及分析发现,具有花叶、卷曲症状的番茄为烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)所侵染。进一步克隆TMV番茄分离物(TMV-SXFQ)的全基因组序列,得到TMV-SXFQ(Gen Bank登录号为JX993906)全长为6 394 bp,含4个开放阅读框(open reading frame,ORF)。序列比对分析表明,TMV-SXFQ与烟草花叶病毒属其他分离物的同源性为86.3%~99.6%;系统进化分析表明,TMV-SXFQ与韩国分离物IM聚为一簇、亲缘关系最近。     

中国番茄黄瓜花叶病毒血清组的鉴定

来自我国番茄主产区的 58个黄瓜花叶病毒 (CMV)分离物包含有轻花叶株系、重花叶株系、坏死株系和黄化株系。用分别代表CMV亚组Ⅰ和CMV亚组Ⅱ的两个标准毒株CMV -D和CMV -S的抗血清进行DAS -ELISA鉴定 ,有 56个CMV分离物与CMV -D的抗血清起强烈的阳性反应 ,划归为CMV亚组Ⅰ ,占CMV分离物总数的 96.6% ;有两个CMV分离物与CMV -S的抗血清起强烈的阳性反应 ,划归为CMV亚组Ⅱ ,占CMV分离物总数的 3.4 % ,这是首次从侵染我国番茄CMV中鉴定出属于CMV亚组Ⅱ的分离物。属于CMV亚组Ⅱ的两个分离物 (GD - 14和HN - 11)均为黄化株系。     

重庆地区侵染抱子芥和茎瘤芥的病毒及其株系的分子鉴定

为了明确当前重庆地区抱子芥和茎瘤芥病毒病的病原种类和株系,在重庆13个区县的18个乡镇采集疑似病毒感染的样品进行病毒RT-PCR检测和株系分析。结果表明:在57份抱子芥样品中,黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)、芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)、烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、马铃薯X病毒(Potato virus X,PVX)和芸薹黄化病毒(Brassica yellows virus,BrYV)的检出率分别为31.58%、85.86%、49.12%、59.65%和77.19%,其中87.72%的样品受两种及以上病毒的复合侵染,45.61%的样品受3种病毒的复合侵染;在41份茎瘤芥样品中,CMV、TuMV、PVX和BrYV的检出率分别为36.59%、73.17%、75.61%和70.73%,其中80.49%的样品受两种及以上病毒的复合侵染,51.22%的样品受3种病毒的复合侵染。对各检出病毒分离物CP基因进行扩增、序列测定和系统发育分析,明确抱子芥和茎瘤芥中TuMV分离物归属于TuMV的World-B组;CMV分离物归属于CMV亚组Ⅰ;PVX分离物归属于PVX的X3株系;BrYV和TMV与已报道的病毒株系CP基因核苷酸序列具有很高的相似性,存在一定的地域相关性,BrYV为重庆地区首次报道。     

上海温室番茄黄化曲叶病毒病的发生与防治

病毒病是番茄生产中重要的病害之一.自1909年美国发现第一种番茄病毒--TMV(烟草花叶病毒)以来,世界各地相继报道了近30种可侵染番茄的病毒.在上海番茄病毒病的主要病源为烟草花叶病毒TMV和黄瓜花叶病毒CMV,侵染番茄引起花叶、蕨叶和黑褐色坏死斑等病毒病症状,严重时引起死亡.自2005年10月以来,上海孙桥温室番茄发生了一种新的病毒病,经病样超薄切片电镜观察、酶学检测、分子检测,以及嫁接试验等,结果认定为番茄黄化曲叶病毒病,严重发生田块病株率达95%以上.     

重庆南瓜病毒病病原ELISA 检测及CMV 变异分析

 利用7 种植物病毒的抗体,对采自重庆7 个区县的67 份南瓜病毒病样品进行了抗原直接包被酶联免疫吸附分析（ACP-ELISA）检测。检测结果表明,在这67 份样品中,至少59 份感染了所要检测病毒,其中,感染黄瓜花叶病毒 (Cucumber mosaic virus, CMV)、烟草花叶病毒 (Tobacco mosaic virus,TMV)、番茄花叶病毒 (Tomato mosaic virus, ToMV)、芜菁花叶病毒 (Turnip mosaic virus, TuMV)、蚕豆萎蔫病毒2 号 (Broad bean wilt virus 2, BBWV-2)、马铃薯Y 病毒 (Potato virus Y, PVY)和马铃薯X 病毒(Potato virus X, PVX) 的样品分别为80.60%、77.61%、74.63%、82.09%、76.12%、83.58%和55.22%。在检测呈阳性的59 份样品中有93.22%的样品受到2 种以上病毒的复合侵染,而受7 种病毒复合侵染的样品高达60.00%,表明在南瓜上病毒复合侵染现象相当严重。进一步对54 份受CMV 侵染的南瓜样品检测发现,CMV 亚组Ⅰ (CMVⅠ) 病毒侵染的样品有49 份,占90.74%,CMV 亚组Ⅱ (CMVⅡ) 病毒侵染的样品为11 份,占20.37%;其中6 份（11.11%）样品检测到CMVⅠ和CMVⅡ的复合侵染。以免疫捕获反转录PCR (IC-RT-PCR) 扩增了一个CMVⅠ分离物 (CMV-CQ) 近全长CP 基因并进行序列分析,结果证实其属于CMV 亚组Ⅰ型,其核苷酸序列与国内CMVⅠ型赤豆分离物 (CMV-RB) 的同源性最高,为98.1%。     

广东地区冬瓜感染的小西葫芦黄花叶病毒检测及其外壳蛋白基因多样性分析

小西葫芦黄花叶病毒(Zucchini yellow mosaic virus,ZYMV)是危害广东省冬瓜的常见病毒。摸索了冬瓜叶片总RNA最佳提取方法,通过基于ZYMV病毒外壳蛋白基因(coat protein gene,cp)序列的RT-PCR扩增,检测采集自广东省9个冬瓜产区的76份病毒侵染样品的病毒田间发病率;将扩增产物克隆测序,利用MegAlign软件构建系统发育进化树分析cp基因遗传变异与系统进化。结果表明,24份样品检测为阳性,田间发病率为31.59%;所有参试病毒分离物cp基因全长840 bp,编码279个氨基酸的多肽;测序的16个分离物cp基因的核苷酸序列与推导蛋白的氨基酸序列相似性分别为98.1%~100%与96.1%~100%;所有广东分离物的推导氨基酸序列基序保守,除GD121-9增加2个人类白细胞抗原外,其他均包含5个人类白细胞抗原及1个N糖基化位点,均包含保守potyv_CP功能域及与病毒蚜传相关的结构域DAG三联盒"Asp-Ala-Gly";系统进化分析表明,ZYMV病毒划分为7个基因型,广东分离物均属于同一基因型Ⅰ,包含3个株系;广东地区的16个分离物分为3组,无明显地域选择性。总体上广东ZYMV-cp比较保守,分子变异较小。明确了广东省冬瓜上ZYMV病毒的侵染情况及外壳蛋白基因的变异特点,为对其致病性和抗病毒基因工程等研究提供依据。     

山东省芋花叶病毒病的田间调查及鉴定

为明确芋花叶病毒(Dasheen mosaic virus,Ds MV)在山东芋种植区的发生和遗传进化,在山东潍坊、青岛、烟台、日照和临沂等5个芋主栽区进行调查,对采集样品进行病毒病病原鉴定、序列分析和遗传进化分析。结果显示,芋花叶病毒的检出率为55.9%,在5个地区皆有分布。5个Ds MV分离物cp基因的核苷酸序列相似性为88.5%~91.9%,氨基酸序列相似性为93.4%~97.5%;与国内外已报道代表性Ds MV分离物cp基因的核苷酸与氨基酸的序列相似性分别为74.8%~99.4%、79.7%~99.1%。遗传进化分析显示,Ds MV山东分离物与日本分离物(Ds23)、中国分离物(ND和ZAN)和美国分离物(Ds MV-U2)亲缘关系较近,聚在同一分支。综上,Ds MV在山东省芋主栽区发生普遍,其cp基因序列之间变异相对较大。     

侵染白菜的黄瓜花叶病毒分离物基因组的全序列分析

对浙江省杭州地区白菜（Brassica campestris L. ssp. chinensis var. commuis Tsen et Lee.）上获得的CMV分离物（CMV-CTL）进行了全长克隆和基因组序列分析。结果显示：CMV-CTL的RNA1（GenBank序列号：EF213023）全长为3357个核苷酸（nt）,编码993个氨基酸（aa）的1a蛋白;RNA2 （GenBank序列号：EF213024）全长为3047 nt ,编码858 aa的2a蛋白和111 aa的2b蛋白;RNA3 （GenBank序列号：EF213025）全长为2217 nt,编码278 aa的MP蛋白和218 aa的CP蛋白。序列相似性分析表明,CMV-CTL与CMV亚组IB中株系IA相似性最高,RNA 1、RNA 2和RNA3与该株系的相似性分别为91.3%、91.3%和93.6%。CP基因和RNA 3 的5' NTR核酸序列系统发生树分析表明,CMV-CTL与中国大多数CMV分离物一样,属于CMV亚组IB。     

3种辣椒新病毒的发生与血清学鉴定

病毒病一直是世界各国辣椒上的重要病害,给生产造成巨大的经济损失。近年来,田间病毒病症状日趋复杂,病毒种类日趋繁多,为害日趋严重。据国外报道,侵染辣椒的病毒有35种〔1〕。我国报道辣椒病毒病的毒原种类以黄瓜花叶病毒(CMV)和烟草花叶病毒(TMV)为主,其次有番茄花叶病毒(ToM     

春番茄病毒病毒源检则

1991年～1995年5月下旬～6月上旬,我们对上海近郊11个乡、镇的春番茄主要产区,进行病毒病调查,在露地和保护地分别采集病样,用酶联法(ELISA)测定番茄烟草花叶病毒(TMV)和黄瓜花叶病毒(CMV),以及马铃薯X病毒(PVX)的侵染程度.结果如下:一、田间调查根据病害调查结果,露地番茄病毒病的危害症状,主要是条斑型和蕨叶型,田间感病较重,轻者达30%～50%,重者可达100%,果实失去食用价值.保护地番茄病毒病感病较少,而且以花叶型为主,其次是蕨叶型,个别地区有少量条斑型,发病率仅10%～20%,被调查的栽培品种,均含有Tm-2~(nv)的一代杂种.二、捡测结果检测结果(表1)表明,危害露地番茄病毒病的毒源主要是TMV、CMV复合侵染(40.6%)和CMV侵染(37.7%),而TMV侵染仅9.9%.由于露地番茄病毒病严重,保护地番茄种植面积迅速扩大,为此,我们又检测保护地番茄病毒病的主要毒源种类.1991年以TMV侵染为主(46.1%),其次是TMV、CMV复合侵染(38.3%),CMV侵染仅为7.8%,而1995年,以TMV、CMV复合侵染(46.3%)居首位,其次是CMV侵染(39.0%),而TMV侵染(4.9%)下降(见表 2).上海市近郊番茄病毒病主要毒源除TMV、CMV以     

Effect of salinity and water table on growth and tolerance of plum and peach

The effects of combinations of salinity (no salt, 2000 p.p.m. or 4000 p.p.m. of CaCl₂ and NaCl, 1:1) and water table (30 cm, 60 cm or 90 cm from the soil surface), on the vegetative growth and tolerance of ‘Golden Japanese’ plum and ‘Mit Ghamre’ and ‘Balady’ peaches were studied. The plants were grown in lysimeters. The growth of the trunk, total shoot length, the increase in shoot length per cm and the fresh weight of top, root and total plant were reduced with increasing salinity of the irrigation water. The effect was accentuated when the plants were maintained at high water table level. The salinity treatments resulted in the death of 43%, 73% and 76% of the plants in the plum, and the ‘Mit Ghamre’ and ‘Balady’ peaches, respectively, indicating that the plum is more tolerant to salinity than the peach. The plants of the salinity treatments showed various symptoms of salt injury, such as leaf burn, defoliation, shoot die-back and finally death. In the peaches, salt injury started to occur in the first growing-season, whereas the salt injury appeared in the plum in the second growing-season. The symptoms were more pronounced in the 4000 p.p.m. treatment than in the 2000 p.p.m. treatment and were more pronounced at the high water table level. The salinity level was the predominant factor and the effect of the water table on the vegetative growth diminished with increase in the salinity level of the irrigation water.     

洞庭1号无籽西瓜套种棉花高产高效模式的研究与应用

根据西瓜、棉花两者生长发育特点进行套种试验,研究其高产高效栽培模式。试验示范结果表明,以西瓜行株距4.5m×0.65m,棉花行株距1.5m×0.45m的种植密度,西瓜与棉花之间互颉作用最小,西瓜和棉花的产量和产值在3个套种模式中位居第1,在5个处理中经济效益最高。     

Primary culture and identification of mouse PASMCs and effects of hypoxia on proliferation and apoptosis of PASMCs

AIM：To establish a fast, accurate and economical technique for culturing mouse pulmonary arteriolar smooth muscle cells (PASMCs), and to explore the effects of hypoxia on the proliferation and apoptosis of the PASMCs. METHODS：In sterile condition, the pulmonary artery was isolated from the male BALB/c mice by digesting with collagenase I, and the cells were cultured in fetal bovine serum-coated flask. Centrifugal procedure was not used during the cell passage. The cell morphology was observed under an inverted phase-contrast microscope. α-Smooth muscle actin was identified by immunocytochemistry and immunofluorescence. The effects of hypoxia on the proliferation and apoptosis of the PASMCs were detected by CCK-8 assay and TUNEL assay. RESULTS：PASMCs were identified by the methods of immunocytochemistry, immunofluorescence staining and observation of morphology. Unlike the rat PASMCs with typical subcultured peak-vally pattern, the mouse PASMCs showed a lot different without a peak-vally pattern. The cells could be subcultured after 5 d to 7 d and there was 3 to 5 generations depending on the activity of the cells. CCK-8 assay demonstrated that the A values of PASMCs exposed to hypoxia increased after 24 h (P＜0.05) as compared with normoxia. TUNEL result showed that the apoptotic index of the PASMCs in hypoxia decreased after 24 h (P<0.05). CONCLUSION：This technique for obtaining cultured mouse PASMCs is simple, fast, accurate and economical. The digestion time is easy to control. Hypoxia promotes the proliferation and inhibits the apoptosis of PASMCs.     

小檗碱和壳聚糖抗蔬菜病原真菌活性测定及复合膜制备

研究了小檗碱和壳聚糖对几种常见蔬菜病原真菌的抑制活性,以及以小檗碱和壳聚糖为主料制备复合膜的方法,并测定了该膜的药物释放效果。试验表明:低浓度(0.234 mg/mL)小檗碱即可抑制辣椒炭疽病菌(Vermicularia capsici)等5种蔬菜病原真菌的生长。20 mg/mL浓度壳聚糖对番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)的抑制率高达65%,而对其余4种果蔬病原真菌也有一定的抑制作用。为了集成这2种天然化合物的优点,制备了小檗碱-壳聚糖复合膜,该膜具有缓释功能,在模拟外部环境(磷酸缓冲液,pH 6.8)条件下,20 d小檗碱累计释放率接近25%,提示其在果蔬贮藏抗菌中的应用价值。     

世界及中国鳄梨产销概况与展望

依据联合国粮食及农业组织(FAO)数据库、联合国商品贸易统计数据库(UN Comtrade)中的数据,围绕鳄梨种植面积、产量、迚出口市场、主产国生产情况、主要迚出口国贸易情况等斱面,对世界及中国鳄梨的生产与贸易迚行回顾、分析与展望,幵在此基础上,对中国鳄梨产业的发展提出建议。     

Storability of onion seeds and effects of packaging and storage conditions on viability and vigour

Fresh onion seeds desiccated to 6.0% seed moisture content (SMC) were stored in various packaging materials under different storage conditions. Seeds packed in aluminum-laminated pouches beside those stored with silica gel at 25 °C maintained satisfactory germinability and vigour after 12 months. Desiccated seeds stored in moisture impervious containers produced more vigourous seedlings. Germination potential of onion seeds increased with reduced SMC besides storage in moisture impervious packets along with desiccants as physiological and biochemical attributes are regulated. Seed viability and vigour decreased with accelerated ageing due to increased lipid peroxidation, decreased activities of several free radical and peroxide scavenging enzymes. Electrical conductance of seed leachates also increased with ageing. Thus, adoption of appropriate storage temperature and moisture control techniques would significantly affect onion seed quality, which was due to minimum accumulation of free peroxide radicals and enhanced activity of free radical scavenging enzymes.     

西瓜与粮油菜套种栽培试验

近年来,我省西瓜发展速度较快,到2004年全省西瓜栽培面积已达3万hm^2.由于我省耕地面积有限,大幅度扩大西瓜单种面积,不仅造成我省西瓜与粮油菜争地的矛盾,而且土地也未能得到充分有效的利用.为了解决这一生产中存在的实际问题,我们从2002年开始,进行了西瓜与粮油菜套种的栽培试验.历经4年的试验、示范,取得了显著的经济效益和社会效益.现将试验结果报告如下.     

热处理对果蔬采后品质及病虫害的影响

采后热处理是近年来快速发展的果蔬采后处理技术,广泛应用于改善果蔬贮藏期间的品质、增强抗逆性等 方面。从果蔬贮藏期间的生理生化、采后品质及防治病虫害等方面阐述了热处理的机理,讨论了热处理对果蔬衰老 方面的生理特征如色泽、风味、硬度(软化)、失重、呼吸、乙烯释放、酶活性等变化及与抗逆性有关的诱导蛋白质合成 及基因表达的影响,较全面阐述了热处理防治果蔬贮藏期间病虫害的机理如直接作用于病菌、害虫与提高果蔬的抗 病虫性等。     

陕西冬枣黑斑病和炭疽病病原菌的分离鉴定及特征比较

以大荔县冬枣种植区采集的发病枣果为试材,采用常规组织分离法进行病原菌的分离纯化,通过柯赫氏证病法则、形态学观察及分子生物学分析,研究鉴定了冬枣黑斑病和炭疽病的病原菌种类,并采用田间调查法对2种病害为害特征进行比较分析,以期为田间有效区分冬枣黑斑病和炭疽病为害症状,并快速判断其病原类型,及进一步深入开展精准防控提供参考和指导.结果表明:陕西大荔冬枣黑斑病的病原菌为细极链格孢(Alternaria tenuissima),炭疽病的病原菌为胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides).2种病害均主要为害枣果实,在枣果果腰或果肩上形成黑褐色病斑,可能同时存在且症状相近极易混淆,但在病斑表面、皮下及久置表型3个方面存在明显区别.     

钾肥在小白菜和萝卜上的施用效果

采用盆栽试验方法研究了施用钾肥对小白菜、萝卜生长发育、产量、品质及钾素含量的影响。结果表明 ,施用钾肥对小白菜和水萝卜的株高、叶片数无显著的影响 ,但可提高水萝卜块根的产量 ,提高幅度为 31.0 4 %～ 97.93%。施用钾肥可提高小白菜和萝卜的蛋白质和VC含量 ,降低硝酸盐含量 ,增加植株的钾素含量