中华绒螯蟹的致病菌及抗菌药物的筛选

对河蟹育苗场各期蚤状幼体(Z1～Z5)、大眼幼体至Ⅴ期幼蟹进行了病原菌的分离采样。采用"细菌生化鉴定编码"对育苗期的中华绒螯蟹的致病菌进行鉴定,主要为溶藻弧菌(V.alginolyticus)、霍乱弧菌(V.cholerae)、荧光假单胞菌(P.fluorescens)、豚鼠气单胞菌(A.caviae)和梅氏弧菌(V.metschnikovii)。采用扩散法(K-B法)对上述菌株进行了药物敏感性试验,结果表明:上述各菌株对庆大霉素、氟哌酸、头孢哌酮、丙氟哌酸、氟嗪酸、复方新诺明、环丙沙星具有较高的敏感性,抑菌直径>16mm。同时选择氟哌酸和环丙沙星对荧光假单胞菌、溶藻弧菌进行了最小抑菌浓度(MIC)与最小杀菌浓度(MBC)的测定。氟哌酸对荧光假单胞菌和溶藻弧菌的MIC分别为25μg/mL和0.78μg/mL;环丙沙星对荧光假单胞菌和溶藻弧菌的MIC分别为6.25μg/mL和0.025μg/mL。氟哌酸对荧光假单胞菌和溶藻弧菌的MBC均为6.25μg/mL;环丙沙星对荧光假单胞菌和溶藻弧菌的MBC分别为50μg/mL和0.1μg/mL。     

中华绒螯蟹细菌性疾病感染途径的研究

利用注射、口服、创伤浸泡和非创伤浸泡4种方法研究了腐败假单胞菌等4种致病菌对中华绒螯蟹的感染情况,结果表明:河蟹细菌性疾病以创伤感染为主。因此在养殖过程中要尽量避免蟹体受伤,尤其是在蜕壳及气候、水质条件变化等易感染期更要加强管理。     

五种中草药对河蟹腐败假单胞菌的抑菌作用

分别采用钢环法和试管法研制了大黄、乌梅、五倍子等五种中草药对河蟹腐败假单胞菌的抑菌和杀菌效果。结果表明，乌梅对该菌有一定的抑制作用，五种中草药在供试浓度范围内对该菌均均杀灭作用。     

一株中华绒螯蟹病菌鉴定及其致病机理的研究

确定了一株蟹源致病菌(HX-1)为恶臭假单胞菌Pseudomonasputida。该菌对小鼠和河蟹致死率分别为100%(8/8)和87.5%(7/8)。对小鼠的半数致死量LD50为2.9×107/只。同时,该菌还具有凝集鸡、小鼠、牛、鲫、鲢、兔、家鸽的红细胞和粘附Hela细胞的能力。此外,在25℃培养条件下细菌产生的胞外产物(ECP)具有溶血性,但无酪蛋白酶活性;对河蟹有致病性,致死率为60%。     

河蟹细菌病病原分离与鉴定

1999～2004年对安徽省巢湖市境内8个乡镇的1300 hm2池塘、稻田养殖的中华绒螯蟹细菌性疾病进行了研究。结果表明:中华绒螯蟹细菌性疾病主要出现“颤抖”、“黑鳃”、“肝腺糊化”、“腹水”和“烂肢或腐壳”等5种常见病症;从患病蟹体内分离、鉴定出嗜水气单胞菌、粪产碱菌、少动假单胞菌、反硝化产碱菌、产吲哚黄杆菌、产碱假单胞菌和苏云金芽孢杆菌等7株病原菌。     

血鹦鹉铜绿假单胞菌病原菌鉴定和药敏试验

对从患病血鹦鹉(Cichlasoma var.)肝、眼部脓肿处分离到2株细菌,对该分离菌进行人工感染实验、鉴定和药敏实验。结果显示:通过人工感染实验证明其对血鹦鹉有较强的致病性。分离菌革兰氏阴性杆状,氧化酶阳性、接触酶阳性、甲基红阴性,能够利用枸橼酸盐、丙二酸盐,发酵葡萄糖。综合分离菌的表型特征及分子生物学结果,鉴定分离菌为假单胞菌属(Pseudomonas)的铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)。药敏试验结果显示头孢哌酮、头孢他啶、壮观霉素、阿米卡星、阿奇霉素、氨噻酸单胺菌素和阿洛西林抑菌效果显著。     

铜绿假单胞菌YY24的异养硝化—好氧反硝化功能基因的研究

为研究铜绿假单胞菌YY24硝化、反硝化功能基因及催化过程,分别对关键酶基因(amoA、napA、narG、nirK、nirS、cnorB、qnorB、nosZ、nifH)进行PCR扩增、鉴定及测序,通过琼脂糖凝胶电泳确定目的基因片段。研究结果表明,amoA基因为铜绿假单胞菌YY24硝化关键酶氨单加氧酶的编码基因;铜绿假单胞菌YY24存在膜结合硝酸盐还原酶;亚硝酸还原酶的类型为细胞色素cd1型亚硝酸盐还原酶nirS;铜绿假单胞菌YY24存在一氧化氮还原酶norB,能够将NO催化转化为N2O,其基因类型为qnorB;铜绿假单胞菌YY24中存在nosZ基因。     

固定化浓缩光合细菌对河蟹的促生长影响

根据昆山巴城地区以河蟹为主要养殖品种的特点,我们应用固定化浓缩光合细菌(PSB)对其进行了促生长试验。试验使用的菌种主要由红假单胞菌属的球形红假单胞菌和荚膜红假单胞菌组成,培养方法参照Weaver等(l975)的方法,扩大培养至菌体密度达5×l09个/毫升时收获,6000转/分离心,弃去上层清液,收获PSB浓缩菌体密度达5×l010个/毫升,作为试验用菌液。PSB的固定化采用吸附法,将离心后收集的l0倍浓度PSB浓缩液以硅藻土为吸附剂吸附在表面使其固定化。使用前将固定化浓缩PSB在营养液中活化24小时,使硅藻土内PSB的活性得到恢复和强化。试验分…     

EM菌对中华绒鳌蟹抗氧化性能及非特异性免疫的影响

为了解EM菌对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)免疫力的影响,本研究以中华绒螯蟹为研究对象,在成蟹养殖过程中定期使用EM菌,探究了水体中添加EM菌对中华绒螯蟹抗氧化酶系统和非特异性免疫的影响.结果 显示:EM菌能提高特定发育阶段河蟹血清中过氧化氢酶(CAT)活力,降低丙二醛(MDA)的含量,增强河蟹抵抗...     

广西沿海文蛤及其生境中细菌菌群的初步调查

对广西沿海文蛤及其养殖场的细菌菌群用ＶＩＴＥＫ微生物自动分析仪进行了初步检测，发现文蛤体内有腐败假单胞菌（Ａｌｔｅｒｏｍｏｎａｓｐｕｔｒｅｆａｃｉｅｎｓ）、河弧菌（Ｖｉｂｒｉｏｆｌｕｖｉａｌｉｓ）、副溶血弧菌（Ｖ．ｐａｒａｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ）、溶藻弧菌（Ｖ．ａｌｇｉｎｏｌｙｔｉｃｕｓ）、非发酵性革兰氏阴性芽胞菌（ＮｏｎｆｅｒｍｅｎｔｉｎｇＧｒａｍ－ｎｅｇａｔｉｖｅＢａｃｉｌｌｕｓ）、假单胞菌属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐｐ．）以及一些未知菌。从海水中亦经常检测到腐败假单胞菌、溶藻弧菌、河弧菌、温和气单胞菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓｓｏｂｒｉａ）等细菌。分析表明，副溶血弧菌可能为文蛤的一种病原菌。药敏试验显示．上述所有细菌几乎都对环丙沙星、庆大霉素和氯霉素敏感。     

Desalted Cod Spoilage Flora Inhibition by Citric Acid and Potassium Sorbate Combination

ABSTRACT

Desalted cod spoilage isolates were tested in culture broth for growth inhibition by citric acid and potassium sorbate. Preservative effect was also evaluated in refrigeratedcod juice and desalted cod spiked with Shewanella putrefaciens and Pseudomonas fluorescens orputida. Combination of 0.15% citric acid and 0.1% potassium sorbate inhibited growth of approximately 60% of isolates, including the former two strains. Total inhibition was observed for S. putrefaciens and partial inhibition was noticed for P. fluorescens or putida, in both treated juice and desalted cod. Preservatives delayed growth of halotolerant bacteria in cod. Citric acid plus potassium sorbate addition lowered the pH to extend desalted cod shelf life.     

冷藏大黄鱼SSO希瓦氏菌致腐能力差异机制初探

为探讨特定腐败菌(SSO)希瓦氏菌(Shewanella)致腐能力的差异机制,采用生化和16S rDNA鉴定冷藏大黄鱼货架期终点的产H2S菌,在灭菌鱼汁和无菌鱼块筛选4株致腐差异的希瓦氏菌,扩增氧化三甲胺(TMAO)还原酶基因及分析其表达量,并预测其蛋白质的理化性质。结果显示,22株产H2S菌均为希瓦氏菌属,其中 S.baltica占54.5%,为S. putrefaciens占40.9%,S. hafniensis占4.5%。希瓦氏菌在灭菌鱼汁中致腐能力存在显著差异,其中S. balticaXH2和XH8的缺点评分和TVB-N最高,S. putrefaciensXH14和XH17菌最低。接种无菌鱼块的4株希瓦氏菌中XH2的样品在72h出现腐败气味,48h细菌高于107cfu/g,产生较高的TMA、TVB-N、尸胺和腐胺和,XH8菌次之,XH14和XH17菌最慢。四株希瓦氏菌都扩增出2490bp的torA基因,且torA基因的表达量与致腐能力密切相关,S.balticaXH2最高。预测的TorA蛋白中S.balticaXH2的分子量和不稳定指数最大,理论等电点和总平均疏水性最小。可见,S. baltica XH2为冷藏大黄鱼的SSO,其强致腐能力与torA基因高表达量和TorA蛋白理化性质有关。研究为阐明希瓦氏菌致腐机制奠定了良好的基础。     

养殖大黄鱼加工和冰藏过程中鲜度和细菌类型的变化

通过对养殖海水以及捕获、加工、流通和冰藏等整个供应链过程养殖大黄鱼的温度履历、感官、化学、微生物的品质监测,评估养殖海水、碎冰和加工过程中大黄鱼细菌卫生状况,分析其在整个过程鲜度和细菌相变化。结果表明,养殖海水和碎冰的菌落总数分别为4.99±0.41 lg cfu/g和3.90±0.32 lg cfu/g,大肠菌群数分别为30~450 MNP/100 g和低于30 MNP/100 g;新捕获养殖大黄鱼的菌落总数为3.82±0.38 lg cfu/g,假单胞菌数为3.13±0.58 lg cfu/g,嗜冷菌数为2.82±0.60 lg cfu/g,大肠菌群数为低于30 MPN/100 g;冰藏第18天时TVBN含量为28.62±0.51 mg/100 g,菌落总数、假单胞菌数、嗜冷菌数和大肠菌群数分别为6.24±0.06lg cfu/g、6.01±0.25 lg cfu/g、5.68±0.21 lg cfu/g和30 MPN/100 g。养殖海水和新捕获鱼中细菌种类繁多,革兰氏阴性菌分别占其总菌株数的64.9%和56.8%;革兰氏阳性菌分别占其总菌株数的27.0%和42.0%;优势菌群为黏性威克斯菌、腐败希瓦氏菌和假单胞菌属。加工结束后,假单胞菌(34.9%)、玫瑰小球菌(32.6%)和缺陷短波单胞菌(14.0%)成为主要菌群。冰藏第4天时仅分离出4种不同类型的细菌,腐败希瓦氏菌比例上升明显,冰藏第10天和第18天时,所占比例分别为63.5%和69.1%,是冷却链养殖大黄鱼产品的优势腐败菌。     

不同选育品系中华绒螯蟹形态特征的比较分析

以不同选育品系(“江海21”“长江1号”“诺亚1号”和“申江1号”)中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)为试验对象,通过单因素方差分析、逐步判别分析和主成分分析等方法对4个品系中华绒螯蟹的形态特征进行比较分析。结果显示：(1)单因素方差分析中,各品系雌、雄个体的32项形态特征指标均不存在显著性差异(P>0.05);(2)逐步判别分析中,各品系雌、雄个体的判别准确率普遍较低,仅为40%～70%;(3)主成分散点图显示,各品系个体之间频繁交叉出现,主成分分析难以区别各品系的雌、雄成蟹个体。综合分析结果表明,中华绒螯蟹各品系之间的形态特征差异较小,难以将形态学特征作为鉴别各选育品系的特定指标。     

河蟹对水葫芦生长的影响

利用河蟹的杂食性和对水葫芦新根、新茎的喜食性，进行河蟹对水葫芦生长的影响试验。结果表明，河蟹对水葫芦的叶面增宽减少近39.1%，叶柄变矮达75%，植株分蘖控制率达25%。河蟹对控制水葫芦的疯长、保持生态平衡具有重要意义。     

两品系褶皱臂尾轮虫种群增长及投喂河蟹苗效果的研究

采用实验生态学方法对两品系褶皱臂尾轮虫(内蒙品系和盘锦品系)的种群增长和投喂蟹苗的效果进行了比较研究。结果表明,两品系轮虫的种群增长差异不显著,两者平均瞬时增长率分别为0.42 d-1和0.40 d-1。在投喂蟹苗的效果方面,褶皱臂尾轮虫内蒙品系好于盘锦品系。用内蒙品系轮虫投喂的蟹苗,幼体变态至大眼幼体的存活率为71.65%,用盘锦品系轮虫投喂的蟹苗,变态至大眼幼体的存活率为62.50%。     

欧、美中华绒螯蟹源于中国长江水系中华绒螯蟹的遗传证据

用包括Z2和Opp17两个10碱基随机引物在内的10个引物,对来自荷兰斯科克莱（Skodely)、美国加州圣何塞（San Jose)的中华绒螯蟹群体与中国长江水系中华绒螯蟹群体进行RAPD遗传比较分析。结果发现：（1）中华绒螯蟹群体特有的Z2引物扩增的700bp标记带（Z2^700bp）,在荷兰与美国2个中华绒螯蟹群体中同时出现,而不出现日本绒螯蟹南流江种群中特有的880bp标记带（Z2^880bp）,表明欧洲、美国中华绒螯蟹与中国中华绒螯蟹为同种Eriocheir sinensis,而非日本绒螯蟹Eriocheir japonicus;（2）Opp17引物扩增的947bp片段在中国长江、荷兰及美国3个中华绒螯蟹群体内的出现频率均达100%。结合Z2引物扩增结果,欧洲与美国中华绒螯蟹群体极可能是从中国长江水系中华绒螯蟹引入繁衍的。     

中华绒螯蟹小核糖核酸病毒病及其组织病理学

本文对所谓“抖抖病”的中华绒螯蟹病蟹病因进行了分析研究。经电镜观察,病蟹的心脏、了、鳃、肠和肝脏胰腺中存在着球状病毒粒子,病毒无囊膜,直径为２８－３２ｎｍ左右,分布在细胞浆内,不形成包涵体。从病毒形态和染色反应特性确定该病毒为小ＲＮＡ病毒科病毒。经人工注射病蟹组织浆除菌上清液,被感染的健康蟹出现在自然发病蟹足严重抖动等一样的症状,表明病囊中的小ＲＮＡ病毒为该病原。病蟹病理特征为：细胞肿大,核溶解七