茶树花药愈伤组织诱导及增殖研究

以茶树花药为外植体,以MS培养基为基本培养基,探究适合花药愈伤组织诱导的花药发育时期,不同光照时间对花药愈伤组织诱导的影响,不同植物生长调节物质对花药愈伤组织诱导及增殖的影响,为建立茶树组织培养体系提供依据。研究结果表明：利于花药愈伤组织的形成的处于单核中期的花蕾直径在0.7～0.8 cm,黑暗条件下较12 h/d光照条件下茶树愈伤组织的诱导率高,茶树花药经过低温预处理24 h后,在培养基MS+6-BA0.5 mg/L+NAA0.4 mg/L+2,4-D1.0 mg/L上愈伤组织诱导率最高,诱导率为84.6%,茶树花药愈伤组织增殖率最高的培养基为MS+NAA1.0 mg/L+6-BA0.5 mg/L+2,4-D0.2 mg/L。     

不同影响因子诱导葫芦花药愈伤组织

为研究葫芦花药愈伤组织诱导的影响因素,筛选出最适宜诱导葫芦花药愈伤组织的培养条件,以3个葫芦品种为试验材料,观察不同低温预处理、热激处理以及激素和活性炭处理对花药愈伤组织诱导率及生长的影响。结果表明,不同基因型愈伤组织诱导率差异显著;最佳预处理方法是4℃低温预处理2 d,33℃高温热激暗培养1 d;MS培养基添加2,4-D和6-BA能诱导出愈伤组织,愈伤组织按外观和质地分为6种类型,随着激素浓度增加愈伤组织诱导率递增,添加1.5 mg/L 2,4-D+2.0 mg/L 6-BA和2.0 mg/L 2,4-D+2.0 mg/L 6-BA的培养基最有利于诱导愈伤组织;MS基本培养基不能诱导愈伤组织,活性炭抑制花药诱导愈伤组织。说明,在添加了适量浓度的2,4-D和6-BA的MS培养基上能成功诱导出葫芦花药愈伤组织。     

冬枣花药愈伤组织的诱导及原生质体分离

[研究目的]研究冬枣花药愈伤组织的诱导,悬浮系的建立和培养及愈伤悬浮系原生质体的分离.[方法]以冬枣花药为试材,通过选择愈伤诱导培养基和原生质体分离所用酶的浓度找到最佳诱导和分离条件.[结论]使用1/2MS基本培养基附加TDZ 0.2 mg/L、NAA 0.5 mg/L和PVP 2.0 g/L,对诱导冬枣花药愈伤组织有较好效果;愈伤组织增殖采用培养基1/2MS+TDZ 0.4mg/L+NAA0.2mg/L;悬浮细胞系培养采用1/2MS+TDZ 0.4 mg/L+NAA0.2 mg/L液体培养基;冬枣花药愈伤组织悬浮系原生质体分离时以0.6M甘露醇+0.1%MES+20～25 g/L纤维素酶.酶解时间为16h时得到的原生质体产量和活力较高.     

不同因素对观赏茄花药愈伤组织诱导的影响

以观赏茄‘金蛋'为材料,研究了不同因素对观赏茄花药愈伤组织诱导的影响.结果表明,花药愈伤组织的诱导受多种因素的影响,最适的诱导培养基组合为MS+2,4-D 0.5 mg/L+KT0.25 mg/L+LH 1000 mg/L+Gln 500mg/L+蔗糖50g/L;低温预处理和短期热激处理都能显著提高花药愈伤组织的诱导率,但2者效应没有叠加作用.     

三七花药培养的研究（I）愈伤组织的诱导

对三七花药愈伤组织的诱导进行了探索.在由不同浓度的2,4-D,BA和IAA组成的16种培养基上对三七花药进行了愈伤组织的诱导试验.结果显示在MS基本培养基中附加2,4-D 2.0 mg/L+BA 1.5mg/L+ IAA 0.5mg/L+蔗糖6%的条件下,花药愈伤组织的诱导率可达41.1%. 本试验为三七花药培养体系的建立奠定了基础.     

牡丹花药培养的初步研究

研究了不同低温预处理和高温预处理时间以及不同浓度激素组合对牡丹花药培养的影响。结果表明，未作任何处理的花药，其愈伤组织平均诱导率明显高于经过低温和高温预处理的花药（P〈0．05）；愈伤组织最佳诱导培养基为：MS＋2，4-D2．0mg/L＋6-BA 1．0mg/L，愈伤组织的平均诱导率最高达36．87％。     

西洋参花药愈伤组织诱导培养条件的优化

为了提高西洋参花药培养的愈伤组织诱导率,试验以吉林省集安西洋参花蕾为材料,初步研究不同浓度2,4-D、6-BA和蔗糖对花药愈伤组织诱导的影响,优化西洋参花药愈伤组织诱导培养条件。结果表明:在MS基本培养基附加2,4-D 2mg/L+6-BA 0.5mg/L+蔗糖60g/L+琼脂5.5g/L+水解乳蛋白0.5g/L的条件下,西洋参花药愈伤组织的诱导率可达37.53%。2,4-D对西洋参花药愈伤组织的诱导必不可少;2,4-D和6-BA的合理搭配能提高西洋参花药愈伤组织的诱导率;60g/L的蔗糖能有效促进西洋参花药愈伤组织的诱导。     

弱光条件下茄子花药培养再生体系的建立

以七叶茄为供试材料 ,在弱光下进行花药培养 结果表明 :弱光下茄子花药愈伤组织诱导的适宜培养基为MS +2 ,4 -D 0 2 5mg/L +ZT 1 0mg/L 愈伤组织分化不定芽的适宜培养基为MS +NAA 0 0 2mg/L +ZT 2 0mg/L 在MS +IAA 0 0 2mg/L的培养基上再生不定根 ,弱光下愈伤组织的诱导与分化需要较高浓度的细胞分裂素 ,培养基中添加AgNO3能促进弱光下愈伤组织的分化     

不同培养基和激素对辣椒花药培养的影响

选用试验前期筛选出的易产生愈伤组织和胚状体的8个不同基因型辣椒进行花药培养,对基本培养基成分、激素种类和浓度、材料基因型等影响花药培养的因素进行研究.结果表明:1)NTH培养基为适宜于辣椒花药培养的最佳培养基,MS和B5培养基次之.2)以NTH为基本培养基培养红艳花药,0.5 mg/L NAA +1.0 mg/L KT + 0.3 mg/L BA +1.0 mg/L 2,4-D是花药愈伤组织诱导培养最适宜的激素组合;0.3 mg/L NAA +1.0 mg/L KT + 0.1 mg/L BA是花药胚状体诱导培养最适宜的激素组合.3)在相同条件下,不同基因型辣椒花药培养后的愈伤组织诱导率和产胚率均不同,愈伤组织诱导率为8.0% ~ 23.5%,胚状体诱导率最高为2%,最低为零.     

柱花草花药离体培养研究

以热研2号柱花草花药为外植体,研究不同植物生长调节剂、培养基以及低温预处理等对柱花草花药培养的影响,以期建立柱花草花药培养体系,获得再生植株,为柱花草倍性、基因组学及分子生物学研究提供材料。结果表明:花药4℃低温预处理24 h诱导效果较好;N6培养基对愈伤组织的诱导效果比MS培养基好;最佳愈伤组织诱导培养基组合为N6+2,4-D 0.5 mg/L+KT1.0 mg/L;分化培养的最佳组合为MS+NAA 0.2 mg/L+6-BA 3.0 mg/L。     

枇杷花药培养诱导愈伤组织的研究

为了寻找枇杷花药愈伤组织诱导的最佳条件及配方。以枇杷花药为试验材料,采用完全组合设计研究了温度、蔗糖浓度、激素对花药愈伤组织诱导的影响。低温处理对愈伤组织的形成没有多大影响,随着低温时间的延长,愈伤组织诱导率低于对照;30 g/L蔗糖诱导花药愈伤组织的效果较好,诱导率为62.5%;在附加1 mg/L 2,4-D和2 mg/L 6-BA的MS培养基上,诱导率最高,为90.00%;MS+0.25mg/L6-BA+1 mg/LNAA最有利于愈伤组织的增殖。高浓度的蔗糖不利于愈伤组织的形成。一定浓度的2,4-D和6-BA对枇杷花药愈伤组织的诱导有较大的影响,且2,4-D起着主导作用。     

甘蓝型油菜花药培养技术研究

[目的]筛选甘蓝型油菜愈伤组织的最佳分化培养基,探讨甘蓝型油菜花药培养技术。[方法]在油菜始花期,取其主茎顶端蕾盘的中圈花蕾,将花药接种于B5+2,4 D 1.0mg/L+KT 1.5mg/L的培养基进行诱导,将诱导出的愈伤组织接种于不同配方的12种培养基进行分化培养。[结果]甘蓝型油菜花药培养取花粉处于单核后期至双核初期,对应于外部特征是蕾盘中圈10～15个花蕾,所产生的愈伤组织百分率最高(16%);12种不同配方的培养基中以B5+KT 2.0mg/L+BA 2.0mg/L+IAA 0.1mg/L或MS+KT 2.0mg/L+BA 2.0mg/L+IAA 0.1mg/L培养基上分化成苗最好,分化率分别为75%和70%,将分化的小苗置于1/2MS培养基上诱导生根,可长成完整幼苗。[结论]花药培养可以加速油菜育种进程。     

不同温度和外源添加物对辣椒花药的培养效果

[目的]探讨不同温度和外源添加物对辣椒花药培养的效果,为辣椒高效育种提供参考依据.[方法]以杂6、辛香8号和20114等3个品种辣椒花药为试材,分别在4℃低温和35℃高温下进行不同时间预处理,诱导其花药胚状体和愈伤组织,并在前期温度处理的基础上,分析不同外源添加物对杂6、辛香8号和8024花药胚状体和愈伤诱导效果的影响.[结果]4℃低温预处理3个品种辣椒花蕾对其花药愈伤组织和胚状体的诱导无促进作用;35℃高温预处理花药7～8 d,可大幅度提高其愈伤和胚状体的诱导率;MS+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L KT+1.0％ AC是诱导辣椒花药愈伤组织和胚状体的最佳培养基组合.[结论]将辣椒花药直接接种于MS+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L KT+1.0％ AC培养基中,经35 ℃高温处理7～8 d可极大提高其胚状体诱导率和愈伤诱导率,诱导出的胚状体可进一步分化出再生植株.     

草莓花药组织培养脱毒快繁技术研究

[目的]研究草莓花药组织培养的脱毒快繁技术,实现草莓无病毒栽培。[方法]在基本培养基中分别添加0.5、1.0、1.5、2.0mg/L的6-BA和KT,研究不同激素浓度对不同发育期的草莓花药愈伤组织诱导和不定芽的诱导、增殖的影响。[结果]单核期花药的诱导率高达78.9%,单核靠边期或接近双核期花药的诱导率只有21.1%。6-BA和KT为2.0mg/L时,愈伤组织的生长状况均最好,细胞间联系致密,表面突起更多、更紧。草莓花药在6-BA中比KT分化出的愈伤组织多。6-BA1.5mg/L的培养基愈伤组织分化率最高,诱导丛芽的效果最好,丛芽多而健壮,丛芽发生率达112.6%,增殖系数达1.95。[结论]6-BA比KT更适合诱导草莓花药愈伤组织。草莓花药愈伤组织的诱导、不定芽的诱导和增殖最适合的培养基均是MS+NAA0.2mg/L+6-BA1.5mg/L。     

草莓花药愈伤组织诱导与分化研究

研究了不同激素浓度组合的培养基对草莓花药愈伤组织诱导增殖和不定芽的诱导及分化的影响。结果表明:单核期花药的诱导率最高,达78.9%左右;MS+NAA 0.2 mg/L+6-BA 1.5 mg/L对愈伤组织的诱导及不定芽的诱导和增殖都是最适合的培养基。     

2～3年生三七花药愈伤组织诱导的比较研究

以盆栽2、3年生三七花药为外植体,在附加不同激素、浓度的MS培养基上进行愈伤组织的诱导试验。结果显示:在MS基本培养基中附加2,4-D 2.0 mg/L+BA 1.5 mg/L+IAA 1.0 mg/L+蔗糖6%+琼脂0.8%的条件下,2年生三七花药愈伤组织的诱导率可达43.0%,三年生三七花药愈伤组织的诱导率可达55.0%。2、3年生三七花药愈伤组织继代培养差别不大。     

牡丹花药诱导愈伤组织

以牡丹品种‘凤丹’的带花丝的花药为外植体,诱导其产生愈伤组织,利用不同发育时期的花药诱导愈伤组织,确定了最佳的花药发育时期为单核中期,利用单核中期的花药,在确定合适激素配比的基础上,从不同的蔗糖质量浓度、4℃条件下不同处理时间等方面对花药愈伤组织诱导的影响进行了系统研究。结果表明:花药诱导愈伤组织合适的激素组合为MS+2,4-D2.0 mg.L-1+6-BA1.5 mg.L-1+NAA1.0 mg.L-1;花药在蔗糖质量浓度为6%、4℃条件下处理8 d时,愈伤组织的诱导率最高可达50.8%,优化了牡丹花药愈伤组织培养组合。     

黑莓松散型胚性愈伤组织的诱导

为了诱导出黑莓松散型胚性愈伤组织,试验采用黑莓试管苗叶片、叶柄和茎段为外植体,在含有不同2,4-D及分裂素的MS培养基上进行愈伤组织的初步诱导,从中筛选出松散型愈伤组织的最佳培养基配方;再将诱导出的黑莓松散型愈伤组织转移到含有不同激素种类和浓度的MS培养基上进行松散型胚性愈伤组织的诱导,从中筛选出最佳培养基配方。结果表明,在1/8 MS+3 mg/L 2,4-D+100 mg/L Vc+10 g/L蔗糖的培养基上可以诱导出松散的黑莓愈伤组织;先在MS+2 mg/L 2,4-D+1 mg/L KT+100 mg/L Vc+30 g/L蔗糖的培养基上进行胚性愈伤的诱导继代2~3次,然后转移到MS+0.5 mg/L 2,4-D+2 mg/L KT+100 mg/L Vc+30 g/L蔗糖的培养基上继续培养并继代3~5次后即可诱导出黑莓的松散型胚性愈伤组织。试验结果将为采用黑莓体细胞诱变育种研究奠定基础。     

不同浓度TDZ和2,4-D组合对草莓花药组织培养的影响

为探究草莓花药离体再生体系最适宜培养条件,以草莓品种“枥乙女”花药为试材,研究细胞分裂素TDZ和生长素2,4-D对草莓花药愈伤组织诱导、分化和增殖的影响,筛选不同阶段最适寅草莓花药组织培养激素配比.结果 表明,TDZ和2,4-D激素组合可成功培养出草莓花药再生植株,最适宜诱导培养基为MS+2,4-D 0.2 mg/L+TDZ 1.5 mg/L,最适宜分化培养基为MS+2,4-D 0.05 mg/L+TDZ 2.0 mg/L,最适宜增殖阶段培养基为MS+TDZ 0.5 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L.     

苜蓿胚性愈伤组织诱导及植株再生研究

以苜蓿5～7 d苗龄无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,研究培养基中不同激素和浓度配比对苜蓿愈伤组织诱导和分化的影响。结果表明,MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L愈伤组织诱导率达100%,且愈伤组织状态良好,增殖速度快。MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L为苜蓿胚性愈伤组织诱导的适宜培养基,诱导率为37.8%。胚性愈伤组织分化成苗培养基为MS+6-BA0.2 mg/L+NAA 0.01 mg/L,生根培养基为1/2MS+NAA 0.02 mg/L+蔗糖10.0 g/L。