一株乳酸菌GF103的分离鉴定及体外益生效果评价

本研究旨在利用分子生物学手段鉴定乳酸菌GF103的菌种属性,并通过体外法评价其作为益生菌的益生效果,筛选出具有益生作用的乳酸菌。试验从北京市大兴种猪场附近土壤中分离得到一株能抑制病原菌大肠杆菌和金黄色葡萄球菌生长的乳酸菌,编号为GF103,经16SrRNA基因序列分析鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。经体外益生效果评价得知,乳酸菌GF103在pH=3的条件下活菌数较高,能够耐受0.3%胆盐。乳酸菌GF103在人工模拟胃液中培养0.5 h活菌数不受影响(P>0.05),培养3 h活菌数降低1 log值(P<0.01);在人工模拟肠液中培养3 h活菌数不变(P>0.05)。结果表明,乳酸菌GF103具备益生菌特性,可进一步研究其作为微生物添加剂在动物上的应用效果。     

高抗菌活性乳酸菌的筛选及菌种鉴定

研究旨在筛选适用于饲料青贮的高抗菌活性乳酸菌,并进行菌种鉴定。以藤黄微球菌、沙门氏菌、大肠杆菌为指示菌,通过牛津杯双层平板法对从玉米、水稻、蔬菜残渣、猪粪、鸡粪等样品中分离出的121株乳酸菌进行抑菌试验。通过生理生化,碳源发酵试验和16S rRNA分子鉴定及recA基因扩增对所选菌株进行鉴定。菌株ZZU 575具有较强抗菌活性,排除酸、过氧化氢干扰后,其发酵上清液对大肠杆菌抑制作用消失,但对藤黄微球菌及沙门氏菌仍有很强的抑制活性;其抑菌活性在酸性条件下较强,在加入蛋白酶K和胰蛋白酶以及100℃以上热处理时明显下降甚至消失;ZZU 575被鉴定为植物乳杆菌。菌株ZZU 575在饲料青贮中具有潜在应用价值。     

健康奶牛阴道乳酸菌分离鉴定及作为候选益生菌株的体外评价

为分离健康奶牛阴道乳酸菌并鉴定其益生特性,本研究采集健康奶牛阴道临床样品并分离筛选到4株乳酸菌,对其抑菌活性、产酸性能、产H_2O_2能力及对抗生素敏感性进行检测,通过16S rDNA序列分析鉴定乳酸菌分离株。结果显示,4株乳酸菌具有较好的抑菌活性和产酸性能,在体外均能够产生H_2O_2,并对万古霉素具有抗性;经鉴定4株乳酸菌分别为唾液乳杆菌1株、黏膜乳杆菌2株、坚强肠球菌1株。本研究分离鉴定的4株乳酸菌均可以作为候选益生菌株用于奶牛子宫内膜炎防治。     

牦牛犊牛益生乳酸菌的分离鉴定及其体外筛选

以牦牛犊牛胃肠道内容物作为菌源,筛选出3株同时对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌起抑制作用的乳酸菌,编号分别为A1、A2和A8。经16S rRNA序列分析鉴定,A1、A2为乳酸片球菌,A8为戊糖乳杆菌。经体外评价其益生特性,在培养液pH=4时,所有乳酸菌的活菌数均较高;培养液胆盐浓度在3 g/L时,菌株的存活率均在50%。筛选的3株具有潜在益生性抑菌特性的乳酸菌,可为青海地区牦牛犊牛预防腹泻复合益生菌制剂的研发提供参考。     

蔬菜废弃物中高抗菌活性乳酸菌的筛选及鉴定

试验应用传统纯培养技术从蔬菜废弃物中分离出62株乳酸菌,并通过牛津杯双层平板法筛选得到4株,对革兰阳性指示菌和阴性指示菌,均具有高效抑菌活性的乳酸菌;应用高效液相色谱法分析发酵上清液中的有机酸成分。经过生理生化试验及16S rDNA序列同源性分析,这4株高抗菌活性的乳酸菌菌株其中2株被鉴定为Lactobacillus plantarum,另外2株为Leuconostoc lactis。试验结果表明,这4株乳酸菌在青贮添加剂,生物防腐剂方面具有良好的应用潜力。     

一株乳酸菌的分离鉴定及生物学特性研究

以鸡肠道和泡菜为分离源,采用常规微生物学方法分离乳酸菌,筛选到一株产酸性能良好的菌株W7。结合对菌株的形态观察、生理生化试验以及16S rRNA基因序列分析,对菌株进行鉴定,并对W7进行特性试验研究。结果表明,W7为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）,在培养22h时,活菌数最高;耐酸效果好,在pH值为2.0时,存活率仍然为100%;在胆盐浓度为0.30%时,仍然可以生长;抑菌效果较好;黏附率为79.9%。     

不同来源乳酸菌的分离与鉴定

Six strains of Lactobacillus were isolated from traditional indigenous dairy products, piglet’s feces and chicken intestine, designated as LS, LT, LJ1, LJ2, LZ1 and LZ2, respectively. Identifications were done according to bacteria morphology, physiological and biochemical properties,16S rDNA sequence homology analysis, and their characteristics were researched. The results showed that LS, LT, LJ1 and LZ2 strains were Lactobacillus brevis, LJ2 strain was Enterococcus faecium, LZ1 strain was Lactobacillus acidophilus. All of the six strains had obvious bacteriostasis effect on Listeria monocytogenes, Salmonella typhimurium, Escherichia coli and Staphylococcus aureus.     

健康奶牛生殖道乳酸菌的分离鉴定及其抑菌活性研究

【目的】从健康奶牛生殖道分离筛选益生乳酸菌,为未来防治奶牛子宫内膜炎提供益生菌菌株并为开发防治此病的微生态制剂奠定基础。【方法】采集10份健康奶牛的生殖道分泌物样品,用MRS培养基进行分离培养,通过形态学观察和16S rDNA序列对分离出的菌株进行鉴定,将所得序列结果与NCBI核酸数据库参考菌株进行相似性比对,确定各分离菌株的种属。利用牛津杯法分离筛选出具有较好抑菌活性的菌株,研究这些筛选出的菌株的生长曲线、产酸能力及抗菌药敏感性,并对其主要抗菌物质进行检测。【结果】从10个样品中共分离出13株乳酸菌,经染色镜检和16S rDNA测序分析鉴定出13株乳酸菌,分别为植物乳杆菌11株、殊异肠球菌和鼠肠球菌各1株。单株抑菌试验得到5株对大肠杆菌抑菌能力较好的乳酸菌,5株乳酸菌生长特性及产酸能力均良好,对氨苄西林、四环素、红霉素、利福平、甲氧苄啶、氯霉素和青霉素7种抗菌药物敏感性较强。其中21和35号菌株的抗菌物质为过氧化氢和细菌素,而25、33和34号菌株的抗菌物质除过氧化氢和细菌素外还包括有机酸。【结论】从奶牛生殖道中分离得到的3株乳酸菌有望作为微生态制剂用于奶牛子宫内膜炎的临床防治,其具...     

一株脱氮细菌的分离鉴定及脱氮活性检测

利用硅胶平板从淤泥中分离到一株脱氮茵FX7,该菌株在好氧条件下具有降解亚硝态氮的能力。亚硝态氮初始浓度为2500mg／L时,该菌株在48h内亚硝态氮降解率为45％。通过形态学特征、生理生化特性及16SrDNA同源性比较对菌株FX7进行鉴定,初步判断其为假单胞菌（Pseudomonassp）。Pb^2＋、Hg^2＋和Cr^2＋对菌株FX7的亚硝态氮降解活性有很强的抑制作用,而低浓度的Zn^2＋和Fe^3＋对其活性有一定的激活作用。     

鸡肠道内乳酸菌的分离鉴定及体外抑菌试验

为获得鸡肠道内抑菌效果好、适应性强的乳酸菌,从健康鸡小肠内容物中分离乳酸杆菌,并对其进行生化鉴定。结果成功从鸡小肠中分离出6株细菌。通过革兰氏染色和生化鉴定,发现这6株细菌分别是微小乳酸菌(L.minor)、约氏乳杆菌(L.johnsonii)、弯曲乳杆菌(L.curvatus)、肠乳杆菌(L.intestinalis)、嗜酸乳杆菌(L.acidlophilus)、植物乳杆菌(L.plantarum)。对分离到的6株乳酸菌进行体外抑菌试验,结果表明肠乳杆菌(L.intestinalis)对大肠杆菌有一定的抑菌作用。该研究为后期开发益生菌制剂奠定了一定的基础。     

不同品牌酸奶活性乳酸菌的检测

本试验以7种品牌的酸奶为菌源,通过检测酸奶中活性乳酸菌数量、鉴定乳酸菌活性,以评价不同品牌酸奶的质量.结果表明:7种品牌的酸奶都达到酸乳国家标准(GB2746- 1999)[2]的规定,其中3号酸奶活性乳酸菌数量最多(乳酸菌数达 7.33×108cfu∕ml),而7号酸奶的乳酸菌数为6.09×108cfu∕ml,乳酸菌含量较少;所含菌种经生化鉴定为乳酸菌,其特点是革兰氏阳性、过氧化氢酶阴性的无芽孢杆菌或球菌.说明这7种品牌酸乳的质量是合格的.     

酸马奶中一株具有高效抑菌活性的乳酸菌的分离与鉴定

乳酸菌作为益生菌对人体健康十分有益,近年来关于益生菌的研究及应用发展较快。为了开发优质乳酸菌资源,试验采用常规的细菌分离鉴定方法,从酸马奶中分离了46株乳酸杆菌和24株乳酸球菌,对抑菌活性较强和生长较快的菌株进行生理生化初步鉴定,并在分子水平上进行保守基因16S rRNA和gyrB基因鉴定。结果表明:分离到的XM-38菌株具有较强的抑菌活性(可抑制大肠杆菌、鼠伤寒沙门菌、单增李斯特菌、枯草芽孢杆菌),XM-48菌株具有生长优势但没有明显的抑菌活性;结合生理生化和分子水平序列聚类分析,发现XM-38为干酪乳杆菌,XM-48为一株新的乳酸菌菌株。     

文蛤抗菌物质的粗提及活性检测

为了分离纯化得到文蛤体内的抗菌活性蛋白,以灭活的副溶血弧菌诱导的方法,通过紫外分光光度计法测定其粗提品的蛋白质含量,并进行抗菌活性检测,同时利用硫酸铵沉淀法对粗提物进一步纯化、SDS-PAGE泳检测纯度。结果显示,文蛤经副溶血弧菌诱导后,产生的抗菌物质在短时间内达到高峰,随后逐渐下降,大约在4h时对大肠杆菌抑制率最高;诱导4h时抑制率与对照相比无显著差异（P〉0．05）。在经过硫酸铵沉淀后,SDS-PAGE电泳显示条带较多;进行SephadexG-50凝胶过滤层析的最佳条件为洗脱流速0．2ml／min、样品浓度3．0mg/ml。     

芒萁黄酮类物质成分鉴定及体外抗氧化活性研究

芒萁是一种在南方地区分布广泛的药用草,但目前利用不广.为充分研究其药理基础,应用超声辅助法提取芒萁黄酮,通过聚酰胺柱层析配合梯度洗脱对其进行分离纯化,鉴定其主要成分后,进行体外抗氧化实验.结果 表明:芒萁黄酮的提取得率为13.42％,纯化所得50％醇洗物部分的总黄酮含量最高,达到76.25％,主要含有阿福豆苷(2.155％)、木犀草素-5-O-葡萄糖(1.462％)、异槲皮苷(0.856).芒萁黄酮对羟基(OH)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)自由基的IC50值分别为:1079.01、248.74和50.14 μg/mL.芒萁黄酮含量高,抗氧化活性优良,极具开发价值.     

一株鸡源乳酸菌的分离与初步鉴定

从饲养青脚土杂鸡的嗉囊和盲肠内容物中作乳酸菌的分离和纯化,将纯化得到的菌株进行不同温度培养、发酵液pH值测定及一系列生化试验。结果表明：所分离的8株乳酸菌为同一菌属。初步鉴定为德氏乳杆菌属,实验室代号为S-5。     

一株优良乳酸菌的分离鉴定与特性研究

利用乳酸菌分离专用培养基-MRS培养基从发酵40 d的酸菜汁中分离得到一株乳酸菌,利用经典分类法对所分离的乳酸菌菌株进行了系统的细菌学鉴定和生物学特性研究。结果该菌株被鉴定为乳杆菌属、植物乳杆菌。对其进行生长曲线、pH及酸度的测定,结果显示分离乳酸菌的对数生长期较长;培养以后pH下降达到稳定;酸度较高的产酸时间为前20 h。抑菌试验表明：该菌株对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均有明显抑制作用。由于该菌具有生长快、产酸量高并具有抑菌活性等特点,因而适合作为微生态制剂的优良菌种开发利用。     

鸡源耐镉乳酸菌株的分离与鉴定

本试验旨在从鸡肠道中分离筛选出耐镉(Cd)的乳酸菌,为将其开发应用于防控家禽饲料重金属Cd污染提供理论基础。取鸡肠道内容物的样品进行乳酸菌分离,以耐受100 mg/L的Cd为标准筛选乳酸菌,采用分子生物学方法鉴定菌株。对筛选出的乳酸菌株进行生长性能、耐Cd性能及Cd吸附性能等测定。结果表明：本试验共筛选出5株耐Cd乳酸菌,分别为1株约氏乳杆菌Cd3-1和4株卷曲乳杆菌Cd1-1、Cd5-2、Cd4-5和Cd8-2。其中Cd3-1、Cd5-2和Cd8-2菌株最高可耐受1 000 mg/L的Cd,而Cd1-1和Cd4-5菌株最高可耐受400 mg/L的Cd。各菌株对50 mg/L Cd的吸附率随溶液pH的升高而增加,在pH为6.0和7.0时Cd的吸附率均显著高于pH为2.6时Cd的吸附率(P<0.05)。5株乳酸菌均可耐受0.3%的胆盐,且可抑制金黄色葡萄球菌的生长。综合上述结果,本试验从鸡肠道中分离筛选鉴定出5株耐Cd乳酸菌,包括1株约氏乳杆菌和4株卷曲乳杆菌,在pH接近中性的条件下,对Cd的吸附率可达30%。     

一株产细菌素乳酸菌的分离和鉴定

从市售3种酸乳中分离得到4株乳酸菌,通过发酵液的抑菌试验确定S1菌株为细菌素产生菌,综合S1菌株的形态学特征、生理生化特征,将其初步鉴定为乳酸乳球菌（Lactococcus lactis）。在排除过氧化氢和有机酸对指示菌的抑制作用后,确定该菌株产生的抑菌物质为细菌素。该细菌素对大肠杆菌具有较好的抑制作用。     

乌鸡肠道中一株乳酸菌的分离鉴定及生物学特性研究

本试验采用添加碳酸钙的MRS培养基作为筛选培养基,从乌鸡肠道中筛选乳酸菌,并对分离到的菌种进行16S rDNA基因序列鉴定以及益生性能研究,测定其生长速率、产酸能力、耐酸和耐胆盐性能、抑菌能力及抗生素敏感性。试验结果表明：分离到的溶钙圈较好的菌株N为乳酸菌,分离菌株N产酸能力强,达到对数期的时间短,在低pH、高胆盐浓度时,仍具有较好生长活性。[关键词] 乳酸菌|乌鸡|益生性能