兔病毒性出血症,多杀性巴氏杆菌病二联干粉灭活疫苗的研制报告

兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病二联干粉灭活疫苗的研制报告刘毅英，同育英，张青龙，董爱娥，曹益，刘彦川（青海省兽医生物药品制造厂，西宁８１０００６）本文叙述了兔病毒性出血症、兔多杀性巴氏杆菌病二联干粉灭活疫苗（以下简称兔二联干粉苗）的毒（菌）种、制造...     

国家一类新兽药兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病二联灭活疫苗

兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病二联灭活疫苗，由江苏省农科院兽医研究所和南京天邦生物科技有限公司研制申报，经农业部兽用生物制品规程委员会审查通过，2005年11月16日被批准为国家一类新兽药，并颁发新兽药注册证书【证号：（2005）新兽药证字36号】。     

兔病毒性出血症、巴氏杆菌病二联蜂胶灭活苗的研制

用兔出血症毒(RHDV)和巴氏杆菌研制成蜂胶佐剂灭活苗,用1.0mL免疫试验兔,免疫后第5天,对RHDV保护率达100%;免疫后第7天对巴氏杆菌的保护率为72.5%,通过HI法监测兔病毒性出血症抗体水平,结果表明:蜂胶苗产生抗体时间较早,第7天后HI效价25.0,第20天效价显著上升达29.25以上,第30天达到最高峰,可达211.0,60~120 d均可维持在27.0~25.5水平,到第180天时抗体水平面略有下降为25.25,蜂胶苗分别在免疫后4个月、6个月用兔出血症强毒攻击均产生100%保护,在6个月用2个MLD的兔巴氏杆菌攻击保护率可达70%以上,二联苗4~8℃条件下保存期暂定为1年,25℃条件下暂定为半年。     

兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病、产气荚膜梭菌病(A)型三联灭活疫苗研制

对 5批兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病、产气荚膜梭菌病三联灭活疫苗进行了动物试验 ,结果表明该疫苗安全有效。近期效检对兔病毒性出血症的保护率为 1 0 0 % ,对兔多杀性巴氏杆菌病保护率为 92 % ,对产气荚膜梭菌病 (A)型保护率为 88%。在免疫期试验中 ,免疫 6个月后 ,对兔病毒性出血症保护率为 1 0 0 % ,对多杀性巴氏杆菌病的保护率为 79% ,对产气荚膜梭菌病 (A)型的保护率为 88%。在保存期试验中 ,4～ 8℃保存 1年仍有效。     

兔病毒性出血症蜂胶灭活疫苗的研制

以蜂胶为佐剂制备兔病毒性出血症蜂胶灭活疫苗,并对疫苗进行了安全、免疫剂量、免疫保护期、疫苗保存期等的研究,确定疫苗的最适免疫剂量为0.5m L,免疫后7~180天均可提供100%的保护率,疫苗可保存18个月以上。     

兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病二联灭活苗的研制和效果试验

兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病二联灭活苗由甘肃省畜牧兽医研究所中试车间生产3批,共计生产40万头份.疫苗效力试验对兔出血症的保护率为100%;对兔多杀性巴氏杆菌病的保护率为86.7%.疫苗在甘肃省的平凉、庆阳的几个区县进行区域试验,经抽样检测抗体水平和走访调查,结果表明疫苗安全有效,确认本疫苗的生产工艺成熟、可行.所生产的二联苗能有效预防该两种病的发生.     

鸡多杀性巴氏杆菌病、大肠杆菌病二联灭活疫苗研制初探

将鸡多杀性巴氏杆菌菌液、大肠杆菌菌液分别经甲醛灭活,加氢氧化铝胶,弃去部分上清液,将二者按3:1的比例混合制成二联灭活疫苗.疫苗接种鸡安全;接种21 d后对免疫鸡攻毒,免疫鸡对两种疫病的免疫保护均达到3/4以上,说明将鸡巴氏杆菌、大肠杆菌制成二联灭活疫苗是完全可行的.     

肉兔病毒性出血症并发巴氏杆菌病的诊断与防治

兔病毒性出血症,俗称兔瘟,是由兔瘟病毒引起的一种急性、热性和高度接触性败血性传染病。本病以呼吸系统出血、肝坏死、实质脏器水肿、淤血及出血性变化为主要特征,是危害养兔业最严重的传染病之一。兔巴氏杆菌病,又称兔出血性败血症,是由多杀性巴氏杆菌引起的兔传染病。2005年     

兔出血症-巴氏杆菌病蜂胶二联灭活苗保存期试验

研制兔出血症-巴氏杆菌病蜂胶二联灭活苗2批,分别在4-8℃和室温条件下保存6个月、12个月后进行免疫保护试验。结果显示：蜂胶二联苗在4～8℃和室温条件下保存6个月、12个月,对兔出血症的保护率均为100％;4～8℃保存6个月对巴氏杆菌病的保护率为100％,保存12个月对巴氏杆菌病的保护率为90％;室温保存6个月对巴氏杆菌病的保护率80％,保存12个月对巴氏杆菌病的保护率为70％。据此可以确定蜂胶二联苗的保存期为4～8℃一年或室温半年。     

兔病毒性出血症兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病二联蜂胶灭活疫苗最小免疫剂量的研究

利用实验室试制的200903001批兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病二联蜂胶灭活疫苗,对健康易感兔进行最小免疫剂量测定。采用将疫苗以0.25m L/只、0.5m L/只、1.0m L/只3种不同剂量组免疫健康易感兔,同时设置非免疫对照组,免疫14日进行攻毒保护试验。试验结果表明:0.25m L/只剂量组对兔病毒性出血症和兔多杀性巴氏杆菌分别为8/10、9/10保护;0.5m L/只、1.0m L/只剂量组对兔病毒性出血症免疫保护均为10/10,对兔多杀性巴氏杆菌病分别为9/10、10/10免疫保护。试验结果证实该疫苗的最小免疫剂量为0.5m L/只。     

兔多杀性巴氏杆菌和兔出血症病毒双重PCR检测方法的建立及初步应用

为建立兔多杀性巴氏杆菌(Pm)和兔出血症病毒(RHDV)的双重PCR检测方法,本研究根据Pm kmt1基因和RHDV VP60基因保守区域,设计2对特异性引物,经PCR分别扩增Pm kmt1基因和RHDV VP60基因保守区域,构建重组质粒p MD-Pm和p MD-RHDV,并经菌液PCR和测序鉴定后作为重组质粒标准品。经各反应条件优化后初步建立了检测Pm和RHDV的双重PCR方法。反应条件优化结果显示,该方法的最适退火温度为59℃,扩增kmt1和VP60基因的最优引物浓度均为0.5μL (10μmol/L)。对Pm和RHDV及其他病原包括兔源支气管败血波氏杆菌、产气荚膜梭菌等20种相关病原的特异性试验结果显示,除Pm和RHDV有特异性扩增条带外,其余相关病原均无扩增条带,特异性较强。将两种重组质粒标准品分别10倍倍比稀释并等体积混合后作为模板,经该双重PCR方法扩增。结果显示,该方法对p MD-Pm的检测限为17.9拷贝/μL,对p MD-RHDV的检测限为1 260拷贝/μL,敏感性较高;对两种病原的DNA和cDNA混合物的批内和批间重复性试验结果均一致,重复性较好。对100份临床...     

长毛兔病毒性出血症引发巴氏杆菌病的诊治

兔巴氏杆菌病是由多杀性巴氏杆菌引起，无明显季节性，但以冷热交替、气候多变的春秋季节以及多雨闷热潮湿的季节多发，呈散发或地方性流行。该病菌是条件性致病菌，即30％～70％的健康家兔鼻腔黏膜和扁桃体内带有病菌，平时不发病，当条件恶化或家兔的抵抗力下降时发病。2009年5月，笔者在临床遇到一起长毛兔病毒性出血症引发巴氏杆菌病，现将诊治情况报告如下。     

兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病二联蜂胶灭活疫苗最小免疫剂量测定的试验

利用实验室试制的200903001批兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病二联蜂胶灭活疫苗,对健康易感兔进行最小免疫剂量测定。将疫苗以0.25、0.5、1.0ml/只三种不同剂量组免疫健康易感兔,同时设置非免疫对照组,免疫14d后进行攻毒保护试验。试验结果表明:0.25ml/只剂量组对兔病毒性出血症和兔多杀性巴氏杆菌病均达不到免疫保护标准;0.5、1.0ml/只剂量组对兔病毒性出血症、兔多杀性巴氏杆菌病免疫保护均为10/10。试验结果表明该疫苗的最小免疫剂量为0.5ml/只。     

兔出血症-巴氏杆菌病二联灭活苗的研制

本试验筛选出了具有良好免疫原性的兔瘟强毒株GMH881和兔巴氏杆菌C51-17株,研制出了兔出血症-巴氏杆菌二联灭活苗。确定出二联苗免疫剂量为1.0mL;二联苗在免疫后5d对兔病毒性出血症强毒的保护率达到100%,二联苗免疫后7d对兔巴氏杆菌的保护率均达到80%以上;二联苗免疫家兔后7d兔病毒性出血症HI抗体可达22.75,15d明显上升,二联苗HI效价30d达到最高峰,可达28.0,二联苗在60～120d均可维持在27.0～25.5水平,到180d时抗体水平略有下降,为25.25,二联苗分别在免疫后4个月、6个月用兔出血症强毒攻击,均产生100%保护,在6个月用2个MLD的兔巴氏杆菌攻击,保护率可达70%以上;二联苗4~8℃条件下保存期暂定为1年,25℃条件下暂定为半年。     

兔出血症-巴氏杆菌病二联灭活苗的研制

筛选出了具有良好免疫原性的兔瘟强毒株GMH881和兔巴氏杆菌C51-17株,研制出了兔出血症-巴氏杆菌二联灭活苗,对疫苗进行了免疫剂量、免疫产生期、兔出血症抗体测定、免疫保护期、保存期等试验：确定出二联苗免疫剂量1.0 mL;二联苗在免疫后5 d对兔病毒性出血症强毒的保护率达到100%,二联苗免疫后7d对兔巴氏杆菌的保护率均达到80%以上;二联苗的兔病毒性出血症抗体测定,结果表明,二联苗免疫家兔后7d HI抗体均可达22.75,15 d明显上升,二联苗HI效价30 d达到最高峰,可达28.0,二联苗在60~120 d均可维持在27.0~25.5水平,到180 d时抗体水平面略有下降为25.25,二联苗分别在免疫后4个月、6个月用兔出血症强毒攻击均产生100%保护,在6个月用2个MLD的兔巴氏杆菌攻击保护率可达70%以上,二联苗4~8℃条件下保存期暂定为1年,25℃条件下暂定为半年。     

兔多杀性巴氏杆菌病的诊治

2000年4月，本地某养兔场饲养的2月龄肉兔发生一种急性猝死或以呼吸道卡他性炎症和斜颈为主要特征的传染病，发病率和死亡率均较高，综合流行病学，临床症状，病理剖检以及实验室诊断，确定为兔多杀性巴氏杆菌病。     

兔病毒性出血症灭活疫苗的研究

以三株本室分离的病毒作为种毒，研制了免病毒性出血症油乳剂灭活疫苗和氢氧化铝灭活疫苗。所研制的两种疫苗无菌及理化检验均合格。将疫苗大剂量接种实验兔无任何不良反应，两种疫苗免疫实验兔后用强毒攻击，均获得保护，免疫持续期至少5个月。     

兔病毒性出血症灭活疫苗的研究

以3株本室分离的病毒作为种毒，研制了兔病毒性出血症油乳剂灭活疫苗和氢氧化铝灭活疫苗。所研制的两种疫苗无菌及理化检验均合格，将疫苗大剂量接种实验兔无任何不良反应，两种疫苗免疫实验兔后用强毒攻击，均获得保护，免疫持续期至少5个月。