陕北白绒山羊精液冷冻稀释液配方优化

为筛选陕北白绒山羊精液冷冻保存稀释液中最适的甘油及卵黄浓度,试验以三羟甲基氨基甲烷(Tris)6.057 0 g,蔗糖5.134 6 g,果糖1.500 0 g,柠檬酸钠3.318 6 g,青霉素10万IU,双蒸水200 m L配制成基础液,采用双因素正交试验研究不同浓度甘油、卵黄对精液冷冻保存的影响;采用一步稀释法冷冻保存陕北白绒山羊精液,复苏后检测活率、畸形率等确定精液冷冻稀释液最佳配方。结果表明:最佳冷冻稀释液配方为基础液80.5%+甘油6%+卵黄13.5%,精液冷冻、复苏后精子活率达到(37.2±0.5)%,精子畸形率为(11.2±0.5)%,质膜完整率为(64.2±0.5)%,均优于其他组,冷冻效果达到最佳,是保存山羊精液的冷冻稀释液最佳配方。     

夏洛莱绵羊精液稀释液冷冻试验

采用A、B、C、D四种不同成份的稀释液对夏洛莱种公羊鲜精低温保存，从中确定D液为低温保存夏洛莱羊精液的最佳稀释液（配方为30g／L葡萄糖、14g／L柠檬酸钠、3g／L乙二胺四乙酸钠、6g／LVE、50ml／L卵黄）；在细管精液冷冻保存试验中，发现c液冻后精液的活力为0．48，为细管精液冷冻保存最佳稀释液（配方为56∥L蔗糖、52g／L乳糖、4g／L乙二胺四乙酸钠、6g／LVE、50ml／L甘油、50ml／L卵黄）。在上述实验基础上，给c液中分别添加催产素（添加浓度为20IU／100m1）、前列腺素（0．1mg／100m1）及催产素＋前列腺素（按原比例加入）进行细管精液冷冻保存，其冻后活力分别为0．55、0．48、0．52，说明C液的冷冻保存效果最好。     

猪精液低温保存运输箱的研制

精液的保存有两种方法,固态保存和液态保存,在生产实践中,因为猪精液低温保存的技术不成熟,所以猪精液主要以常温保存为主。由于常温保存的有效存活时间短,不便于长时间和长距离的保存运输,因此大大限制了人工授精技术的推广。为了延长猪精液的存活时间,保证母猪的受孕率,提高优良种猪的利用率,推动人工授精技术的大力发展,减少本交疾病的发生,本试验对猪精液的低温保存、低温保存稀释液的选择和猪精液低温保存运输箱进行研究。试验结果表明,猪精液低温保存的稀释液以Tris-乳糖稀释液(Tris 3.04g、柠檬酸1.3g、乳糖2.375g、青霉素0.06g、链霉素0.1g、双蒸水100mL、脱脂奶粉)的保存效果最佳(P0.05)。猪精液在低温保存运输箱的有效存活时间为(50.4±2.4)h,精液在冰箱冷藏室的有效存活时间为(59.3±15.1)h,低温保存运输箱与冰箱冷藏室之间差异不显著(P0.05)。猪精液低温保存运输箱中精液低温保存效果基本上与冰箱冷藏室中精子低温保存效果达到了一致水平。     

传统稀释液配方中添加不同保护剂对藏羊精液冷冻效果的影响

为探索在传统稀释液配方中添加保护剂对藏羊精子的冷冻保存效果,在传统稀释液配方(果糖-蔗糖-柠檬酸钠-甘油)中,由Tris(三羟甲基氨基甲烷)代替柠檬酸钠,乙二醇代替甘油,在果糖-蔗糖-Tris-乙二醇基础上添加维生素B12、维生素E、维生素C、复合维生素B等,以增强精子缓冲力,减少毒性,提高精子活力、顶体完整率及受精力。结果表明:精液冷冻保存稀释液中添加Tris比添加柠檬酸钠有更好的冷冻保存效果,能有效改善冻后精子活力和顶体完整率;精液冷冻保存稀释液中添加维生素B12对精子有良好的保护作用;用等体积乙二醇代替甘油作为防冻剂,对精子冷冻时的保护作用不亚于甘油;藏羊细管冷冻精液的制作中,用果糖-蔗糖-Tris-乙二醇-维生素B12组合稀释液配方进行2次稀释,8 min冷冻,其冷冻效果最佳,顶体完整率最高。     

犬精液低温保存稀释液的研究

试验对苏联红犬精液的低温保存稀释液进行了研究。结果表明,犬精液低温保存的稀释液以Tris-葡萄糖稀释液(Tris3.04%,柠檬酸1.7%,葡萄糖1.25%,卵黄20%)为最佳,在4℃保存3 d后,犬精液的精子活率仍可达0.662 5±0.058 2,精子活率>0.1的存活达5.750 0 d±0.462 9 d。在Tris-葡萄糖稀释液中加入0.5%的甘氨酸或1%的牛血清白蛋白并不能明显提高犬精子的低温保存效果,反而添加BSA后,精子活率在0.1以上的存活时间出现明显缩短(P<0.01)。     

无角道赛特公羊精液低温运输对人工授精效果的影响

根据无角道赛特公羊精液在不同稀释液中的保存效果观察,筛选出保存效果较好的A配方稀释液.该稀释液低温保存36 h后精子的活力仍为0.75,用A液稀释精液,常温下细管封装,低温输送到配种点,进行常规人工授精,输配小尾寒羊的情期受胎率78.2%(79/101)、产羔率249%(174/69),与对照组情期受胎率76.7%(69/90)、产羔率238%(186/78),差异不显著(P＞0.05).     

独龙牛精液冷冻稀释液配方的优化实验

稀释液是影响动物精液体外保存效果的重要因素。研究半胱氨酸、精氨酸和甘氨酸;丙三醇、乙二醇和二甲基乙酰胺;果糖和葡萄糖对独龙牛精液冷冻、解冻的效果。优化实验采用正交设计并使用L9(3⁴)正交表安排试验,初选出冷冻保存效果较好的稀释液配方,再用选出的最佳组合稀释液配方进行对比试验,优选出理想的冷冻稀释液。冷冻稀释液中添加适量的半胱氨酸、精氨酸和甘氨酸;丙三醇、乙二醇和二甲基乙酰胺;果糖和葡萄糖有利于独龙牛精子生存和冷冻保存。三种氨基酸以半胱氨酸保存效果最好;抗冻剂中丙三醇保存效果最优;糖类以果糖效果较佳。所实验的6个稀释液配方以A₂B₁₁C₂[即半胱氨酸0.25 g、果糖0.5 g、丙三醇6 mL、三(羟甲基)氨基甲烷2.42 g、柠檬酸1.36 g、卵黄20 mL,双蒸水加至100 mL]效果最好,稀释后精子活力(67.34±3.38)%、解冻活力(38.18±4.39)%、精子解冻复苏率(56.65±5.72)%。     

无角道赛特绵羊精液低温冷冻与保存技术的研究

采用不同成分的冷冻稀释液对无角道赛特种公羊鲜精进行了低温冷冻与保存的实验。结果显示:葡萄糖3.7g+Tris0.02g+柠檬酸钠3.7g+乙二醇5ml+EDTA0.3g+PS20万IU+蒸馏水100ml作为稀释液冷冻并解冻后活力效果最好,解冻后活力为40%,顶体完整率54%;低温冷冻精液在对解冻温度进行了对比试验,42℃解冻活力效果显著(P0.01);对稀释液比例进行试验对比,鲜精与基础液1∶2比例解冻精子活力极显著于1∶1(P0.01)。     

陇东绒山羊品质快速提升模式的研究

为了保存优质的遗传基因,提高优秀种公羊的利用率,提升陇东绒山群体品质,扩充选育品系数量,通过同期发情、人工受精技术,对照研究0～4℃低温保存鲜精与冷冻精液授配陇东绒山羊专门化改良的效果。结果表明:陇东绒山羊同期发情率为95%;0～4℃低温保存精液精子有效存活时间为74h,授配后母羊受胎率达到了93.1%,冷冻精液授配组受胎率为60%,两组差异极显著(P<0.01)。"0～4℃低温保存精液+同期发情"的模式有利用加快育种进展,快速提高陇东绒山羊群体的生产水平。     

稀释液冻干粉剂低温超长时间保存绵羊精液效果

为研究经过冷冻干燥处理的粉剂稀释液与原稀释液对绵羊精液保存的效果,采集6只盘羊与巴什拜羊杂交公羊的精液,分别用粉剂稀释液(A组)和原稀释液(B组)稀释降温后的冰水混合物长期保存,在第0、1、3、6、9和12天分别对精子活率和顶体完整率进行检测,并统计低温保存第9天的精液进行人工授精的受胎率。结果表明:粉剂稀释液与原稀释液低温长时间保存绵羊精子,在保存第9天的精子活率均能达到0.5,顶体完整率均高于65%,粉剂稀释液与原稀释液对精子活率和顶体完整率的保护能力无明显差异(P0.05);粉剂稀释液与原稀释液在低温保存第9天后进行人工授精,受胎率分别为66.9%和67.8%,两者受胎率差异不显著(P0.05)。说明稀释液冻干粉剂与液体稀释液低温保存绵羊精子具有相同效果。     

猪精液4℃低温保存技术的研究

以精子总存活时间、有效存活时间及存活指数为检测指标,用6种稀释液稀释后4℃低温保存,从中筛选效果最好的基础稀释液配方,并进一步探讨保存前不同精液处理方法在猪精液4℃低温保存的效果;最后用筛选得出的基础稀释液和精液处理方法稀释猪精液,4℃低温保存2~3 d,用于低剂量常规部位人工授精试验,通过受胎率来探讨其繁殖潜力。结果表明:6号稀释液显著优于其他5种稀释液(P0.05);精液带精浆直接稀释的效果优于精液离心处理(P0.05);精液以1:2或1:3比例稀释更利于猪精液4℃低温保存(P0.05);低温保存猪精液低剂量常规部位人工授精是可行的。总之,通过试验得到了猪精液低温保存基础稀释液配方及保存前处理方法,该方法适合于低剂量常规部位的人工授精。     

辽宁绒山羊细管冷冻精液研究

本实验研究了辽宁绒山羊细管冷冻精液的稀释液及制作工艺。结果表明:离心洗涤去精清可以提高冷冻-解冻后的精子活率,与不去精清的对照组相比差异显著(P<0.05);以等体积乙二醇替代甘油作防冻剂制作的细管冷冻精液,解冻后的精子活率和顶体完整率显著(P<0.05)高于甘油作防冻剂的对照组。实验还证明,含Tris的柠檬酸盐缓冲液对提高冷冻后精子活率与顶体完整率具有良好的作用。     

不同稀释液对绵羊精液4℃保存效果的影响

本实验旨在比较研究3种不同组成成分的绵羊精液低温稀释液对绵羊精子4℃保存效果的影响,3种稀释液分别是以三羟甲基氨基甲烷（Tris）-卵黄-柠檬酸-葡萄糖为基础配方的稀释液1、以脱脂奶粉-大豆卵磷脂-果糖为基础配方的稀释液2和以Tris-卵黄–柠檬酸-果糖为基础配方的稀释液3。通过假阴道方法采集健康成年绵羊精液,用3种不同稀释液按照精液:稀释液=1:8的比例稀释后在4℃环境进行保存,分别在0、24、72、120 h和168 h后检测分析精子活力、运动参数、顶体完整性、线粒体膜完整性、精子总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）和细胞丙二醛（MDA）浓度。结果表明：精液保存168 h时,稀释液3组的保存效果最好,其总运动精子比例为54.91%、前向运动精子比例为43.27%、快速运动精子比例为19.73%、线粒体完整性为68.03%,均高于稀释液1和稀释液2组（P<0.05）;稀释液3组的顶体完整率为60.55%,高于稀释液2组（P<0.05）。保存120 h时,稀释液3组T-AOC为0.76 mmol/mg prot,高于稀释液2组（P<0.05）;稀释液3...     

鸡精液稀释液缓冲能力与4℃保存鸡精子活力和畸形率的关系

为了建立可应用于生产实践的精液稀释液缓冲容量测量方法,研究不同缓冲容量的稀释液对4℃保存的鸡精液精子活力和畸形率的影响,设计渗透压和pH值接近、缓冲指数(BI)为119.6~1 147.6的10个稀释液配方进行精液保存试验。结果表明:在4℃条件下保存鸡精液时,稀释液的缓冲容量对精子活力无显著影响(P0.05)。鸡精子畸形率与稀释液的BI密切相关,3号稀释液精子畸形率极显著低于其他9个稀释液(P0.01);8号稀释液的精子畸形率极显著低于1号和10号稀释液(P0.01),显著低于2号稀释液(P0.05);4号稀释液的精子畸形率显著低于10号稀释液(P0.05),其他各稀释液间精子畸形率差异不显著(P0.05)。BI过高或过低均不利于鸡精液的低温保存。     

甘肃高山细毛羊细管鲜精低温保存效果研究

为了研究甘肃高山细毛羊种公羊细管精液低温保存的效果.用葡萄糖、柠檬酸钠、鲜奶和卵黄为主要成分配制了3种稀释液,10倍稀释精液,并在4℃保存,分别在12h,24 h,36h,48 h,60h和72 h观测精子活力和人工授精受胎率.结果显示,配方Ⅲ稀释精液后,细管封装,4℃保存,72 h后精子活力可达0.49,与配方Ⅰ和Ⅱ差异显著,而且配方Ⅲ稀释精液后,在远距离输精后受胎率可达78.3％.以柠檬酸钠和葡萄糖为基础,添加卵黄和TCM199,在4℃下,能有效保护甘肃高山细毛羊精液,延长精子寿命,且在3d内可以满足远距离人工授精要求,有效利用种公羊价值.     

甘油、乙二醇对山羊精子形态结构的影响

根据布尔山羊冷冻精液质量监测结果,目前国内山羊冷冻精液解冻后的活力达30%以上。情期受胎率达60%左右,辽宁原种场在此基础上于2004年开始对辽宁绒山羊细管冷冻精液的稀释液、精液处理,冷冻工艺解冻方法及受胎率结果等作了比较系统的研究,取得了较好的结果。本试验通过对最佳基础液的筛远,最佳保护剂种类及含量的筛选,分别用含甘油、乙二醇的最佳冷冻稀释液对山羊的精液进行处理,根据冷冻和解冻的结果,对精子活率、畸形率,顶体完整率进行研究。     

阿拉善绒山羊精液冷冻效果分析

精液冷冻技术实现了家畜精液的长期保存，不受时间和地域的限制，扩大了优良公畜的使用范围，最大限度的提高了种畜的利用率。有关山羊精液冷冻技术的研究也有许多成功的报道，但由于山羊精液冷冻后对精子损伤较大，受胎率下降，从而限制了山羊精液冷冻技术的推广应用。此次使用3种精液冷冻稀释液进行阿拉善绒山羊精液冷冻试验，目的是分析精液冷冻效果，筛选适宜的稀释液配方，为阿拉善绒山羊精液冷冻技术的推广应用提供参考依据。     

鸡精液稀释配方对低温保存精子活力和输精效果的影响

为了完善中国南方地区鸡场公鸡精液的保存技术、提高精液的利用率,本试验研究了在低温(4℃)保存的条件下,不同的保存时间(0、4、8、24 h)、不同的稀释液配方(原精液、配方Ⅰ和配方Ⅱ)对精液的精子活力变化以及人工输精繁殖效果的影响。选用33周龄黄鸡母鸡192只、公鸡42只,192只母鸡依笼号分为12组(3种处理精液×4个保存时间),每组16只母鸡,公鸡不分组。统一采精后用两种不同稀释液稀释、低温(4℃)保存至0、4、8、24 h后观察精子活力,并对母鸡输精,分组收集鸡蛋,对各组受精率、出雏率、健雏率进行比较分析,以原精液低温保存作为对照。结果显示,两种稀释液组的精子低温(4℃)保存4、8、24 h,其精子活力极显著高于原精液组(P0.01),配方Ⅱ组精子的活力高于配方Ⅰ组(P0.05);两种配方稀释液组的精液低温(4℃)保存4 h,输精受精率高于原精液组(P0.05);两种配方稀释液组的精液在低温(4℃)保存8 h,输精受精率极显著高于原精液组(P0.01)。表明这两种精液稀释液更有利于精液保存,经稀释后的精液可以显著提高受精率,可为中国南方鸡场种公鸡精液保存技术的完善提供有力的数据支撑。     

藏獒精液冷冻技术研究

为了确定适合藏獒精液冷冻保存的方法,试验对藏獒精液的形态学指标评价、稀释液pH值、甘油浓度、甘油平衡时间及不同冷冻形态对藏獒精液冷冻及解冻后活力的影响进行研究。结果表明:三羟甲基氨基甲烷(Tris)-柠檬酸稀释液和冷冻液的pH值在6.5~7.0,4%的甘油浓度,甘油平衡时间为60 min,用液氮熏蒸法0.25 mL细管进行藏獒精液冷冻效果最佳。     

山羊精液高倍稀释的受胎效果

山羊精液通常稀释2～3倍，每次输精精子有效数为6000万个，情期受胎率65％以上。为了充分发挥优良种公羊的作用，1997年以来，我们对南江黄羊精液进行了高倍稀释的试验。1 试验公羊。从四川引进的纯种南江黄羊，健康，按常规采精法采取公羊精液，检查测定精子活力、密度，精子活力0． 8级以上，密度18亿／mL以上。2 试验母羊。选健康无病，发情正常的母羊，随机分成5组，每组20只以上。3 试验组的设计。试验组共设置1∶5、1∶10、1∶20、1∶30、1∶40等不同的五个组别，互为对照进行比较。4 稀释液配方。乙二胺四乙酸二钠0．1g，柠檬酸钠0…