猪瘟病毒阳性血清的猪瘟抗体检测与分析

为掌握猪瘟病毒阳性血清的猪瘟抗体水平分布情况,应用美国IDEXX公司的猪瘟病毒抗体检测试剂盒对江苏省农业科学院动物疫病诊断检测中心临床门诊近期收集的经PCR检测为猪瘟病毒阳性的26份血清进行猪瘟抗体水平的检测,以期为猪场猪瘟的有效防控提供科学数据参考。结果显示:猪瘟抗体阳性率为26.9%,阴性率为57.7%,可疑率为15.4%,抗体阻断率平均值为28.0%,且78.6%的猪瘟抗体阴性血清阻断率小于10%,即不同猪瘟抗体水平的血清均可检出猪瘟病毒,但猪瘟抗体阻断率小于10%的血清所占比例最大,达42.3%。因此,猪场在日常的猪瘟抗体检测中,如果发现猪瘟抗体阻断率小于10%的猪只所占比例越大,则预示着猪群中猪瘟带毒的比例越高。     

兔体中和试验用猪瘟病毒阴、阳性血清国家参考品的研制

为制备和标定兔体中和试验用猪瘟病毒阴、阳性血清国家参考品,本试验制备了猪瘟病毒阴性、弱阳性和强阳性血清,通过过滤、分装、冻干、熔封,获得3亚批候选物,并进行了检验、协作标定和定值。结果显示：物理性状、无菌检验、安全检验、支原体检验、真空度测定、均匀性检验和保存有效期试验均合格;剩余水分均小于4％;特异性检验结果均为口蹄疫、伪狂犬病、猪繁殖与呼吸综合征、猪细小病毒病、牛病毒性腹泻／粘膜病抗体阴性,并且弱阳性和强阳性血清能中和猪瘟兔化弱毒而阴性血清不能中和;残余猪瘟病毒免疫荧光和套式RT—PCR核酸检测结果均为阴性;经协作标定定值,其兔体中和效价分别为：阴性、1：100.928±0.103、1：102.928±0.103,表明该候选物可以作为国家参考品。     

两种消毒剂对猪瘟病毒的杀灭试验

采用培养的林氏管PK15细胞和荧光抗体染色法对灭毒净（有机酸类消毒剂）和毒菌清（过硫酸盐消毒剂）杀来猪瘟病毒的效能进行了试验，结果600倍稀释的灭毒净和400倍稀释的毒菌清分别为50倍稀释的猪瘟石门系强毒等量混合，室温作用30min可以完全将病毒杀灭。     

渭南市部分猪场猪瘟血清抗体调查及分析

猪瘟一直被认为是危害猪产业发展的主要传染病之一。为了解渭南市猪场猪瘟免疫情况,制定合理的防控措施,采集周边养殖场猪血清样品363份,采用酶联免疫吸附试验进行猪瘟病毒抗体检测,结果显示猪瘟病毒抗体阳性率82.92%,其中规模化养殖场猪瘟免疫效果较好,抗体阳性率为97.69%,适度规模场和散养户抗体阳性率分别为80.61%和70.37%,均高于部颁标准。同时分类统计不同生长阶段的检测结果,母猪抗体阳性率为91.78%,高于保育猪和育肥猪。从检测结果来看,虽然猪瘟退出国家强制免疫病种,但养殖场户防控并未松懈,猪瘟总体免疫效果较好,这为进一步做好猪瘟科学防控提供参考。     

猪瘟病毒胎儿垂直感染试验

我国自研制成功和广泛推广猪瘟兔化弱毒疫苗以来,我省于1963年前已基本控制猪瘟的流行,效果十分显著,但至今又逐渐回升,并有越来越严重趋势.当前猪瘟的特点是:散发性、慢性、非典型性,一般在一个疫点内发病率不高,且多发于7～35日龄的乳猪,症状不典型,病变呈广泛性,弥漫性出血为主要特征的综合性病变,因此,临床诊断不易区别,只能通过实验室确诊,引起这种变化是否与猪瘟病毒胎儿垂直感染有     

猪瘟强毒单克隆抗体酶联免疫吸附试验对猪瘟血清抗体的检测

应用猪瘟强毒单克隆抗体酶联免疫吸附试验（ELISA）对青海省4个县的免疫猪场629份猪血样进行检测。结果，检出抗体阳性42份，平均阳性率为6.68%。提示经猪瘟疫苗免疫猪群感染了猪瘟强毒。     

免疫压力下猪瘟病毒遗传稳定性研究

本研究利用抗猪瘟病毒高免血清和猪瘟病毒特异的单克隆抗体充当免疫压力,在免疫压力存在下进行猪瘟病毒的细胞传代,对猪瘟病毒在细胞水平传代过程中是否会发生遗传变异进行研究。结果表明：在免疫压力下,猪瘟病毒在细胞水平进行传代（7代）后,未表现出逃逸抗体中和作用的表型,仍能够被高免血清中和,对传代后病毒的Erns、E2、NS5B基因进行扩增及序列分析后未发现氨基酸的变异。本研究为我国现行的猪瘟防疫政策的执行提供了科学数据,为进一步开展猪瘟病毒遗传变异、病毒演化机制研究奠定了基础。     

抗猪瘟病毒IgG的研制

用驴制备抗猪瘟病毒（HCV）免疫球蛋白，预防和治疗猪HCV感染，制备HCV抗原复合物，通过免疫驴，用纯化方法从驴血清中提取特异性抗体（IgG)，经过理化学检定，血清学，动物效力实验。免疫驴均可产生特异IgG,Dot-ELISA效价大于1：640（IgG浓缩浓度为60mg/mL）；可保护猪兔受HCV攻击；室温保存半年，4℃两年效价不变。已成功地应用HCV免疫驴制备出高效价特异性抗HCV-IgG。     

模猪场猪瘟野毒感染情况调查

利用ELISA方法对广西6个规模猪场送检的1626份猪血清进行猪瘟野毒感染情况调查。结果6个规模猪场均存在猪瘟野毒感染,其中母猪感染率为7.86%~29.21%,平均为17.52%,种公猪感染率为0%~23.52%,平均为11.83%,育肥猪感染率为5%~22.45%,平均为15.5%,断奶仔猪感染率为8.24%~18.57%,平均为12.69%。此检测结果与猪场临床发病情况基本一致,病猪多表现为繁殖障碍型、温和型的非典型猪瘟。     

猪瘟快速诊断金标试纸条的研制及应用

运用胶体金免疫层析技术,建立一种操作简单、特异性好、灵敏度高,适合临床诊断的检测猪瘟病毒的方法。本文通过采用柠檬酸三钠还原氯金酸制备胶体金,选择15 nm胶体金标记兔抗猪瘟病毒抗体,组装免疫层析试纸条。用试纸条对猪瘟可疑病料进行检测,结果显示,用试纸条检测猪瘟病毒,15min左右即可显示结果,并与荧光抗体检测方法加以比较,结果表明用此种方法可以检测猪瘟病,并且可以进行推广使用。     

猪瘟病毒增殖特性研究进展

从猪瘟病毒在体内外的增殖特性、病毒蛋白在RNA复制中的作用两个方面对猪瘟病毒的增殖规律进行了阐述,以期为猪瘟病毒致病机理的研究提供参考。     

新型猪瘟疫苗的研究进展

猪瘟是危害猪健康的重要传染病之一,具有急性、热性和高度接触性等特性,给世界养猪业造成了巨大的经济损失。目前,传统疫苗接种仍是预防猪瘟的主要手段,虽然传统疫苗（如C株）在防控猪瘟方面发挥着巨大的作用,但也存在一些缺陷,如无法区分野毒感染和疫苗免疫动物,猪瘟免疫失败时有发生等。因此,研制新型猪瘟疫苗具有重要意义。随着分子生物学技术与重组DNA技术的不断发展及基因工程疫苗研究的不断深入,亚单位疫苗、核酸疫苗、活载体重组疫苗、基因缺失疫苗、全长感染性cDNA标记疫苗和合成肽疫苗6种新型猪瘟疫苗被相继开发。与传统疫苗相比,新型疫苗拥有廉价、安全、高效、易于运输与保存、能区分野毒感染和疫苗免疫等优点。作者对6种新型猪瘟疫苗的研究进展作一综述,以期为猪瘟的防控提供参考。     

鉴别非洲猪瘟病毒和猪瘟病毒野毒株二重TaqMan MGB实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

旨在建立特异、敏感的实时荧光定量PCR（FQ-PCR）方法,用于非洲猪瘟病毒（ASFV）和猪瘟病毒（CSFV）野毒株的快速鉴别检测。针对ASFV的P72基因和CSFV野毒株的5'UTR非编码区序列的保守区域分别设计1对特异性引物和1条探针,经优化反应条件,建立一种基于TaqMan MGB探针技术的FQ-PCR方法,验证方法的敏感性、特异性和稳定性,对50份临床样品进行检测,并与猪瘟国标方法及OIE推荐的非洲猪瘟检测方法进行比较分析。结果显示：建立的鉴别ASFV和CSFV野毒株二重FQ-PCR检测方法在10⁰~10⁶拷贝·μL^-1模板范围内有良好的线性关系;对ASFV和CSFV基因出现阳性扩增信号,但对猪瘟病毒疫苗株、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪乙型脑炎病毒、副猪嗜血杆菌等病原对照未出现扩增;批内、批间试验变异系数在1.18%~2.08%,重复性良好;对ASFV和CSFV的最低检测模板浓度均为10拷贝·μL^-1;利用建立的二重FQ-PCR方法对50份临床样品进行检测,检测结果与猪瘟国标方法及OIE推荐的非洲猪瘟检测方法结果完全一致。本研究成功建立了鉴别ASFV和CSFV野毒株二重TaqMan MGB FQ-PCR方法,为ASFV和CSFV野毒株的鉴别诊断提供了快速、敏感、特异且能满足临床检测需求的检测方法。     

基于RNA-seq对猪瘟病毒感染宿主的转录组学研究进展

对转录组测序(RNA-seq)的技术特点及其发展进行概述,对该技术在猪瘟感染研究中的应用进行详细综述,并对其存在的问题及未来发展做了进一步展望,以期为猪瘟的相关研究提供参考。     

猪瘟病毒非结构蛋白功能的研究进展

近年来,人们对猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)的结构蛋白研究比较透彻,而对非结构蛋白功能的研究相对较少。非结构蛋白对病毒的复制、致病性及对宿主细胞功能的调节均发挥重要作用,这些研究成果对于揭示CSFV的致病机理和新型疫苗的开发具有十分重要的意义。作者全面综述了CSFV非结构蛋白的生物学功能,以期为研究者提供参考。     

猪瘟诊断与防控

近年人们生活水平提高,人们对猪肉的消费水平也随之提高,对猪肉产品绿色健康的品质要求也逐渐升高。由于集约化、一体化养殖规模扩大,猪只相关疾病也逐渐增多。1925年中国首次出现猪瘟疫情,给中国养猪业造成巨大的经济损失。猪瘟兔化弱毒疫苗在中国问世,极大缓解了猪瘟疫情,但仍会出现零星散发的状态。该文将对猪瘟进行全面阐述,以期为临床上预防和治疗猪瘟提供强有力的理论支持。     

猪瘟病毒化学发光抗体检测方法的建立与应用

旨在建立猪瘟病毒(CSFV)化学发光抗体检测方法,本研究以CSFV E2蛋白作为包被抗原,山羊抗猪IgG-HRP抗体作为酶标抗体,鲁米诺为底物溶液,优化检测方法,成功建立CSFV化学发光抗体检测方法.该方法能在室温20 min内完成对CSFV抗体血清特异性检测,灵敏度与商品化CSFV抗体检测试剂盒相当,且与A型口蹄疫病...