黄蜀葵花蕾大小与花粉发育时期关系研究

为在进行有关遗传改良时依据花蕾的大小判断花粉的发育阶段,采用常规石蜡切片法,以黄蜀葵的花朵为试验材料,对其花粉发育不同时期及与花蕾长度相关性进行探讨。结果表明:在黄蜀葵花蕾大小在1.0～1.5cm时,小孢子大多处于单核靠边期。黄蜀葵花粉发育经历了造孢时期、花粉母细胞时期、四分体时期、单核居中期、单核靠边期和二细胞期。     

桃的花粉发育

报道了桃花粉发育的过程，将其划分为３个阶段９个时期。１．单核阶段：①单核中央球形期，②单核中央显沟期，③单核靠边期，④单核趋中期；２．有丝分裂阶段：⑤有丝分裂期，包括前、中、后期；３．二核至二细胞阶段：⑥二核期，⑦二胞期，⑧胞中胞球形期，⑨胞中胞三角球形期。本文还着重讨论了双子叶桃和单子叶禾本科植物花粉发育的差异，提出了正确区分两个“单核中央”的形态学和细胞学的标志，为果树花药培养准确选择采样接种适期，提供了可靠的依据。     

五味子花粉发育时期与花外部形态相关性研究

以生长旺盛的5a生五味子植株中上部的花蕾为试材,研究了花粉发育时期与花外部形态的对应关系及不同发育程度花粉比例的变化.结果表明:花粉的发育时期与花的外部形态具有相关性,当花蕾长7～9mm,花萼与花瓣面积比约为1:2,花萼贴附花瓣或1片花萼展开,1～2片外层花瓣轻微开裂,向内包裹,结构紧凑时,处于单核中后期和单核靠边期的花粉占总花粉量的74.6％～87.1％,花药被花瓣包裹,材料易于处理,此时为采集五味子花粉的适宜时期.     

紫斑牡丹花粉发育的细胞形态学研究

紫斑牡丹花粉具二型性，正常花粉占８４．３％，异常花粉占１５．７％。正常花粉的发育可划分为单核小孢子早期、单核小孢子晚期、花粉第一次有丝分裂期、２－细胞花粉早期和２－细胞花粉晚期（成熟期）等５个时期；异常花粉在单核小孢子晚期开始分化，其中大部分逐渐停滞发育，少数（不超过１％）可在体内启动雄核发育途径，朝着形成孢子体的方向发展。     

番茄小孢子发育时期的检测和活性鉴定

研究了番茄花器形态与花药中单核靠边期小孢子的相关性.不同游离方法和冷激处理对小孢子活性的影响.试验结果表明.4118和AMAL.的单核靠边期小孢子的百分率和花药/花蕾直径之间有显著相关性.番茄花药长度在4.46～6.87 mm,花蕾胸径在2.57～3.31 mm,并且花药与花蕾直径的比值为1.54-2.08时,花蕾含单核靠边期的小孢子比率较高.PI检测到经过消毒和离心处理后的番茄小孢子死亡率约为 79.00%.     

番茄小孢子发育时期的检测和活性鉴定

研究了番茄花器形态与花药中单核靠边期小孢子的相关性,不同游离方法和冷激处理对小孢子活性的影响。试验结果表明,4118和AMAL的单核靠边期小孢子的百分率和花药/花蕾直径之间有显著相关性。番茄花药长度在4.46～6.87 mm,花蕾胸径在2.57～3.31 mm,并且花药与花蕾直径的比值为1.54～2.08时,花蕾含单核靠边期的小孢子比率较高。PI检测到经过消毒和离心处理后的番茄小孢子死亡率约为79.00%。     

葡萄雌能花新种质(‘2004-6-12’)花蕾发育过程中植物内源激素的变化

‘2004-6-12’是南京农业大学从欧亚种‘魏可’自交实生后代中选育出来的雄性不育优良单株。以葡萄雄性不育新种质‘2004-6-12’及其雄性可育亲本‘魏可’为试材,采用酶联免疫(ELISA)检测技术对花药发育不同时期(1.造孢期、2.花粉母细胞期、3.减数分裂期、4.四分体期、5.单核期、6.二核期、7.成熟花粉期)的花蕾组织中的吲哚乙酸(IAA)、赤霉素(GAS)、细胞分裂素(CTK)、脱落酸(ABA)含量进行测定。结果表明,‘2004-6-12’与‘魏可’花蕾中的IAA,GAS的含量在减数分裂期之前差异不显著,在四分体期及单核期‘2004-6-12’显著低于‘魏可’。‘2004-6-12’中的CTK含量在减数分裂期之前显著低于‘魏可’。‘魏可’在单核期ABA含量开始降低,而‘2004-6-12’在二核期才开始降低。‘2004-6-12’的IAA/ABA和GAS/ABA在二核期之前明显高于‘魏可’且比‘魏可’比值变化较大,因此认为IAA,GAS,CTK的亏缺,ABA的延后降低及IAA/ABA,GAS/ABA比例失调与葡萄雄性不育有一定的关系。     

萝卜小孢子不同发育时期的细胞学和花器官形态特征观察

通过醋酸洋红染色和DAPI荧光染色对萝卜小孢子的发育过程进行了细胞学观察,两种染色方法中,后者较前者能更清楚和全面地显示细胞的结构。通过对4份萝卜材料不同发育时期花蕾的细胞学和形态学的观察发现,小孢子的发育时期与花器官形态特征之间存在密切的关系。各材料小孢子不同发育时期的花蕾纵径、花蕾横径、花蕾纵横比、花药长、花药宽、花瓣长和瓣药比均存在明显差异。不同萝卜材料处于单核靠边期的花器官各形态指标也存在明显差异,其中花蕾纵径、花蕾纵横比、花瓣长和瓣药比适合于作为不同材料花蕾取样适期的鉴定指标,各指标的适宜尺度：花蕾纵径在2.991～3.510 mm之间,花蕾纵横比在 1.412～1.480之间,花瓣长在1.889～2.561 mm之间,瓣药比在0.923～1.057之间。此外,适合小孢子培养的花蕾的外观特征为花药被萼片包裹紧密,花瓣和花药等长或接近等长,花蕾饱满,花药浅黄色至黄色。     

桃雄性不育的表现形式及其败育途径

研究了桃［Ｐｒｕｎｕｓ ｐｅｒｃｉｃａ Ｂａｔｓｃｈ（Ｌ．）］２３个品种花粉发生发育和花粉败育过程中细胞形态学上的变化特征。结果表明：桃雄性不育的主要表现形式为空粒花粉和花药空囊及花粉形似发育正常，但生活力极低。导致空粒花粉产生的主要途径：①花粉母细胞减数分裂不正常；②花粉处于单核晚期至二核早、中期绒毡层细胞发生液化、增生现象。空囊产生的主要途径：①四分体至单核早期绒毡层细胞体积发生明显的增大、液化；②绒毡层细胞在四分体至单核早期发生增生；③造胞细胞或花粉母细胞生长发育不良。     

辣椒和甜椒花药培养的新进展

作者为了提高辣椒(Capsicum annuum L.)和甜椒(Capsicum annuum var.Grossum Sendt)花粉胚状体的诱导频率,研究了花粉发育时期、蔗糖浓度及活性炭对花粉形成胚状体的影响。用杂种F_1代和新引进品种为材料,使花药产生胚状体的频率提高到16.5％,得到一批发育正常的植株,在现蕾前,用0.2％秋水仙碱加倍后,大部分都能正常开花结果。 辣椒和甜椒花粉发育成胚状体或愈伤组织,主要通过B途径(花粉第一次分裂形成均等的两个子细胞)和A途径(由营养细胞分裂),两者继续分裂形成胚状体或愈伤组织。生殖核只分裂1～2次或根本不分裂就退化,不参与胚状体的形成。 处于单核靠边期的花粉对诱导胚状体比单核早期的花粉效果较好。 用NT_H培养基,附加 3～6％蔗糖、0.5毫克/升萘乙酸,500毫克/升酪朊水解物,1毫克/升激动素(或1毫克/升6-苄基氨基嘌呤)以及0.5％活性炭,能提高花药产生胚状体的频率。     

梨43个品种花粉生活力及4种测定方法的比较

用花粉离体培养法测定比较了43个梨品种花粉离体萌发率和花粉管生长长度;从中选择花粉相对生活力低、中、高3组6个品种(今村秋和雪花梨、金二十世纪和丰水、青松和满天红)的花粉,采用I-KI染色法、蓝墨水染色法、MTT染色法、过氧化物酶染色法4种花粉生活力测定方法,以花粉离体萌发法为对照。结果表明,花粉培养24h后,43个梨品种的花粉萌发率平均为66.15%,其中花粉萌发率≥60%的品种约占84%,满天红萌发率最高为82.79%;花粉管长度平均为1.77mm,花粉管长度≥1mm的品种约占89%,其中奥萨二十世纪最长为3.25mm,说明多数梨品种花粉生活力较强。与对照相比,4种花粉生活力测定方法中I-KI染色法的测定值极显著偏低,MTT(噻唑蓝)染色法的测定值显著偏高,二者不适于梨花粉生活力的测定;过氧化物酶染色法测定值与对照差异显著,也不适宜用来测定梨花粉生活力;蓝墨水染色法测定值与对照没有显著性差异,可用于梨花粉生活力的快速测定。     

桃92个品种的花粉量及其萌发特性的差异

在离体条件下,以92个桃品种为研究对象,探讨其花粉量及其萌发特性的差异。结果表明：单个花药的花粉量变化范围为0 ~ 3 500粒,可萌发花粉量为0 ~ 2 696粒,花粉萌发率为0 ~ 89.33％,花粉管生长长度为0 ~ 1.56 mm,品种间存在明显的差异。上述指标品种出现频率均不符合正态分布。对上述各项因子分别进行聚类分析,供试品种中可萌发花粉量少且花粉管生长速度慢的品种相对较多,占45.65%,这类品种在生产上应合理配置授粉树。     

不结球白菜波里马胞质雄性不育系温度敏感的特征

不结球白菜Ｐｏｌｃｍｓ的花器官有随不育度的提高而变小的趋势，雄蕊长、♂／♀在不同的不育系中都与不育性表现稳定的显著负相关，不育系温度敏感产生的微量花粉大部分具有活力，但随育性级别的提高，其花粉含量降低，有活力花粉率下降，散粉时间延长或不散粉。     

结球甘蓝花粉膜联蛋白基因的克隆及其表达分析

 对结球甘蓝（Brassica oleracea L. var. capitata L.）花粉总蛋白双向电泳及差异蛋白质谱分析, 发现膜联蛋白在花粉萌发后较萌发前表达下调。通过同源扩增和RACE 等方法首次在结球甘蓝花粉中扩增得到BoAnnexin2 基因的cDNA 序列,该基因cDNA 全长1 157 bp,开放阅读框为951 bp,编码316 个氨基酸残基,预测分子量为36.02 kD,等电点6.33。BoAnnexin2 编码蛋白C 端有4 个膜联蛋白重复序列,共2 个Ⅱ型钙结合区域,在第4 个钙结合区位点包含GXXXGXS（T）/DXXG 基序。实时荧光定量试验表明,BoAnnexin2 在甘蓝成熟未萌发花粉中的表达量是萌发45 min 后表达量的8 倍,表明BoAnnexin2 在甘蓝花粉萌发起始阶段起到重要调控作用。     

番茄花粉保存与生活力测定

以番茄品种世诚116的花粉为材料,采用亚历山大染色法测定成熟花粉粒的数量和活力。将番茄花粉分别贮藏在室温(25℃),4℃和-17℃条件下,测定其活力最强的贮藏温度和贮藏时间。试验结果表明,随着贮藏时间的延长,花粉活力和总萌发数呈下降趋势,室温保存当天的花粉活力最强,贮藏3 d花粉活力降为68.60%;4℃冰箱保存8 d后,花粉活力降为57.00%,保存80 d,花粉总量减少,但其有活力的花粉占花粉总量的58.14%;-17℃冰箱保存1 d的花粉活力最高,为83.10%,保存28 d时,其花粉活力降为48.79%,保存80 d时,其活力在59.38%。而在卡诺依氏固定液中保存80 d的一组花蕾,其花粉活力仍保持在70.55%。     

不同贮藏时间及花瓣张开角度对番茄花粉活力的影响

为了研究不同贮藏时间及花瓣张开角度对花粉活力的影响,采用I2-KI染色法和蔗糖培养基培养法对花瓣张开角度为A(0°~45°)、B(45°~90°)和C(90°~180°)的番茄花粉活力及花粉管长度进行测定。试验结果表明,不同贮藏时间及花瓣张开不同角度间的花粉活力存在显著差异。花瓣张开角度A的花粉活力随着贮藏时间增加呈先升高后降低的趋势,以室温贮藏3 d的花粉染色率最高。花瓣张开角度B和C则以采摘当天活力最强,5 d后所有花粉活力均低于5%,基本丧失萌发能力。新采摘的有活力花粉散落于蔗糖15 g/L+H3BO30.03 g/L+CaCl20.02 g/L+琼脂6 g/L的培养基表面,1~2 min即开始萌动,20 min时,花粉管长度已达到花粉粒直径的2.75倍,60 min时达到7.5倍。花粉管在培养基上相互接触会出现相互作用,抑制部分花粉管生长。     

温度敏感大白菜胞质雄性不育系微量花粉活力研究

 以大白菜[Brassica campestris L．ssp．peldnensis(Lour.) Olsson]的欧洲油菜(Brassica napus L．)胞质雄性不育系CMS3411-7和CMS7311为试材,通过人工低温诱导产生微量花粉,研究了不同育性级别花药中的相对正常花粉率以及1～2级花药中花粉的相对生活力和杂交竞争力。结果表明：诱导产生的1、2、3级花药中的花粉量分别相当于正常花药的73．5％ ～84．4％ 、47．6％ ～51．5％ (半不育)和28．4％ ～32．5％ ,4级花药中均无花粉;1、2级花药中的花粉具有授粉能力, 自交单荚结籽3．9粒,相当于低自交不 亲和;在提前4 h授粉的情况下,1、2级花药中花粉的杂交竞争力仅是紫菜薹(Brassica campestris L．ssp．chinensis L．var．purpurea Bailey)正常花粉的9．1％ ～16．6％ ,即正常花粉的1／6～1／10。最后提出了利用温度敏感胞质雄性不育制杂交种时应注意的问题,讨论了利用人工诱导微量花粉进行不育系自身保持的可行性.     

结球甘蓝花粉蛋白延伸因子基因的克隆及其序列分析

 以结球甘蓝（Brassica oleracea L. var. capitata L.）E1花粉为试材,对萌发前后的花粉总蛋白进行双向电泳及差异蛋白质谱分析,发现延伸因子BoEF-Tu蛋白在花粉萌发后较萌发前表达上调。利用同源克隆得到甘蓝BoEF-Tu基因的全长cDNA序列,其长度为1 728 bp,具有一个完整开放阅读框（ORF）,位于112 ~ 1 473 bp处,编码453个氨基酸残基,预测分子量为49.17 kD,等电点为6.52。生物信息学分析表明：BoEF-Tu蛋白含有9个α–螺旋结构,18个β–折叠结构,不含信号肽和跨膜区,在106 ~ 121位氨基酸残基处有1个GTP结合区域（DKAPEEKKRGITIATA）。氨基酸同源性分析表明,BoEF-Tu与拟南芥EF-TuM同源性较高,达到93%;系统进化分析表明,BoEF-Tu与拟南芥EF-Tu的亲缘关系最近。