犬瘟热研究进展

犬瘟热是由犬瘟热病毒引起的一种高发传染病,宿主范围包括大部分食肉目动物。犬瘟热病毒可以感染不同器官和组织的上皮细胞、间质细胞、神经内分泌细胞及造血干细胞,引发全身型或神经型的临床过程,并在中枢神经系统和淋巴组织中形成持续感染,免疫抑制和脱髓鞘性脑脊髓炎是代表性的病症,而淋巴细胞介导的细胞毒性作用的缺乏则与病毒在中枢神经系统的持续感染有关。犬瘟热发病机制与病理学的研究对于犬瘟热的免疫预防和临床诊治有重要的意义。     

传染性法氏囊病病毒超强毒感染SPF鸡免疫器官中CD4+和CD8+T淋巴细胞动态分布

利用免疫组织化学染色对传染性法氏囊病病毒（IBDV）超强毒LX株感染SPF鸡免疫器官中CD4^ 和CD8^ T淋巴细胞的动态分布进行了研究。超强毒LX株接种2周龄SPF雏鸡，在其法氏囊、脾脏、胸腺、盲肠扁桃体、骨髓和哈氏腺中均可检出IBDV抗原的存在和CD4^ 与CD8^ T淋巴细胞的数量改变。在法氏囊中，CD4^ 淋巴细胞主要存在于淋巴滤泡间隙和滤泡皮质，而CD8^ T淋巴细胞则丰在于整个淋巴滤泡和滤泡间隙，并且CD8^ T淋巴细胞数量明显多于CD4^ T淋巴细胞，在接种后14d仍未见CD4^ 和CD8^ T淋巴细胞数量减少。脾脏中CD4^ T淋巴细胞主要存在于外周小动脉淋巴鞘或散在，而CD8^ T淋巴细胞则多存在于外周小动脉淋巴鞘和红髓。接种后胸腺中CD4^ 和CD8^ T淋巴细胞在皮质中减少，但在髓质增多，尤其是CD8^ T淋巴细胞数明显多于CD4^＋T淋巴细胞。盲肠扁桃体中CD4^ 和CD8^ T淋巴细胞主要存在于发生中心，尤其是CD8^ T淋巴细胞数比CD4^ T淋巴细胞明显多。骨髓和哈氏腺中也可见CD4^ 和CD8^ T淋巴细胞，而且CD8^ T淋巴细胞更多。在这些淋巴器官中，病毒损伤部位出现CD4^ 和CD8^ T淋巴细胞的迁入聚集，表明T淋巴细胞可能参与IBDV超强毒的免疫致病过程。     

中药复方连翘对感染法氏囊病毒雏鸡免疫功能的影响

160只7日龄健康岭南黄鸡随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组,每组40只,Ⅰ为正常对照组、Ⅱ为感染病毒组、Ⅲ为中药复方治疗组、Ⅳ为中药复方制剂组,Ⅱ、Ⅲ组均于8日龄感染传染性法氏囊病毒（IBDV）,Ⅲ、Ⅳ以20g·kg^-1单剂量灌服中药复方连翘汤。分别于试验后第7、14、21、28日龄采外周血及免疫器官法氏囊和脾脏,测定血细胞的吞噬能力、外周血T淋巴细胞的百分率和T淋巴细胞的转化率,流式细胞仪测定鸡外周血和脾T淋巴细胞亚群CD3^＋、CD4^＋和CD8^＋T细胞的含量;放血致死称体质量、脾和法氏囊质量,计算免疫器官指数。在感染IBDV7d后取脾脏和法氏囊组织,制备组织样品进行组织学及透视电镜观察。结果表明：中药复方连翘制剂可使雏鸡外周血细胞的吞噬能力、T淋巴细胞的百分率和T淋巴细胞的转化率、法氏囊和脾脏的质量明显提高,对感染IBDV后免疫器官法氏囊和脾脏有明显的改善和恢复作用,提高外周血和脾淋巴细胞中CD3^＋、CD4^＋和CD8^＋T细胞百分率,改变CD4^＋／CD8^＋比值促进对机体免疫系统的调控。感染病毒组的上述指标显著下降,中药复方连翘治疗组与感染病毒组相比能显著提高上述指标。     

RT-PER技术快速诊断犬瘟热

犬瘟热感染机体后，病毒首先在上呼吸道巨噬细胞和淋巴细胞中复制，然后扩散到系统各淋巴结及多种淋巴器官包括脾、胸腺、骨髓和胃肠淋巴组织等，造成淋巴组织退行性病变从而引起免疫抑制。     

犬瘟热病毒自然感染犬淋巴组织中T、B细胞变化的研究

为了调查患犬瘟热病犬淋巴组织中T、B细胞变化的特点及淋巴细胞减少的发病机制,试验通过免疫组织化学的方法观察了T细胞(用CD3和CD45RO检测T细胞)、B细胞(用IgG、IgM抗血清检测B细胞)和犬瘟热病毒(抗犬瘟热病毒抗体)在病犬淋巴组织中的分布。结果表明:在淋巴组织中的淋巴细胞、淋巴小结中树突状细胞和巨噬细胞中均检出了抗病毒阳性反应细胞。在骨髓组织的前髓细胞中也发现抗病毒阳性反应细胞和嗜酸性胞浆内及核内包涵体的存在。与对照组相比,CD3和CD45RO阳性细胞主要存在于T细胞的分布域;但CD3和CD45RO阳性T细胞的数量较少。位于淋巴组织中的巨噬细胞有的被CD45RO染成阳性。在B细胞分布的区域中,IgG、IgM阳性细胞的数量明显减少;一些位于淋巴组织的浆细胞也被IgG或IgM染成阳性。在淋巴组织中淋巴细胞减少的顺序为:IgG阳性细胞减少最明显,其次为IgM和CD45RO阳性细胞,再次为CD3阳性细胞。依据试验结果,作者认为病犬淋巴组织中淋巴细胞减少主要是由B细胞缺乏所引起的;淋巴细胞的增殖能力减弱是引起淋巴组织中淋巴细胞减少的重要原因。     

雏鸡接种超抗原SEB和MDV后免疫细胞TNF-α的体外诱生

超抗原由某些细菌、病毒、支原体和寄生虫产生，其中金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)中SEB具有代表性；已知超抗原(SAg)可大量激活人和小鼠T细胞(CD4^ 和CD8^ )和抗原递呈细胞(APC)，并诱导IL-1、IL-2、IL-6、TNF、IFN-γ等Th-1细胞因子，乃至免疫无反应、细胞凋亡和免疫抑制；超抗原SEB诱导CD8^ T细胞成为细胞毒性T细胞，启动NK细胞的细胞因子产生，有研究发现，SEB具有双相激活作用，高剂量诱导迅速，低剂量诱导长期而长期的激活状态。     

金属蛋白酶及其抑制物 在脱髓鞘犬瘟热脑炎中的表达

犬瘟热病毒是负链单股RNA病毒，属于副粘病毒科麻疹病毒属。犬瘟热病毒可引起中枢神经系统多病灶性脱髓鞘。犬瘟热病毒引起的脱髓鞘脑炎是研究其他脱髓鞘疾病病理进程的动物模型。在犬瘟热免疫抑制阶段，其脱髓鞘的机制尚不完全清楚。在急性脱髓鞘犬瘟热脑炎病灶，轻度的神经胶质增生和局部的空泡是其主要变化，在亚急性病灶主要表现为脱髓鞘，或仅仅伴有少量的血管周围炎性浸润。慢性脱髓鞘犬瘟热脑炎的特征为显著的血管周围单核细胞袖套。     

雏鸡感染毒害艾美耳球虫后免疫器官T细胞亚群的动态变化

采用ABC法检测了毒害艾美耳球虫（Eimeria necatrix）初次、二次感染雏鸡后，其免疫器官T细胞亚群的动态变化。结果发现：雏鸡初次感染E．necatrix后，其胸腺和脾脏的CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞于感染后4～21d不同程度高于未感染的对照雏鸡，14～16d达峰值，随后缓慢下降。其中CD4^＋T细胞较CD8^＋T细胞增殖辐度大，持续时间也较长。Enecatrix二次感染雏鸡后，上述免疫器官的CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞数量在感染后2～7d呈下降趋势，随后回升，至10～14d明显高于对照和初次感染雏鸡。其中CD8^＋T细胞在二次感染后降幅较小，回升更迅速，增殖幅度也较大。表明鸡CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞在抵抗E．necatrix感染的不同时期发挥不同的作用。     

猪感染圆环病毒Ⅱ型的流行特点和预防

1.1感染率高PCV(圆环病毒)对猪具有较强的易感性。可经口腔、呼吸道感染不同年龄的猪,部分怀孕母猪感染PCV2后,经胎盘垂直传播给仔猪。用PCV2人工感染后,其他未接种猪同居感染率达100%。可经鼻液、粪便等废物中排出病毒。PCV2常与细小病毒和PRRS混合感染。1.2PCV2感染的猪具有免疫抑制特性如淋巴细胞缺失,B细胞和T细胞的数量下降,淋巴器官中的T、B淋巴细胞数量减少。淋巴组织巨噬细胞浸润,外周血和淋巴组织中的巨噬细胞、单核细胞数量升高,因此PCV2感染的猪群免疫功能下降,使猪群对其他病体的抵抗力大大降低。研究发现,PCV2感染…     

猪圆环病毒2型免疫抑制机理研究进展

猪圆环病毒2型(PCV-2)致病的一个主要原因是使感染的个体产生免疫抑制,感染猪体免疫细胞受到不同程度的损伤.PCV-2可以在单核细胞、巨噬细胞等抗原递呈细胞中存在,影响这些细胞对于抗原的递呈.PCV-2也可在T淋巴细胞及B淋巴细胞中增殖,引起机体体液免疫及细胞免疫反应能力的下降.调节免疫的各种细胞因子在感染PCV-2后也有一定程度的改变,PCV-2感染可引起IL-10分泌的增加,PCV-2与猪天然干扰素分泌细胞相互作用,可使这些细胞分泌干扰素的能力下降.PCV-2造成免疫抑制也与病毒ORF3分泌的功能蛋白有一定的关系,ORF3可诱导免疫细胞凋亡,主要是激活caspase-8途径而不是caspase-9途径.     

四君子汤发酵液的抗肿瘤作用及其对荷瘤小鼠免疫功能的影响

本试验研究了四君子汤发酵液对S180肿瘤模型小鼠的抗肿瘤作用和对免疫功能的影响。采用血清溶血素法检测荷瘤小鼠体液免疫功能;MTT比色法检测淋巴细胞的增殖和流式细胞术检测T细胞亚群。结果表明,四君子汤发酵液具有明显的抑制肿瘤生长的作用,并且可以增强环磷酰胺（CTX）的抗肿瘤作用,降低CTX免疫抑制的副作用。四君子汤发酵液可以提高免疫器官指数;对肿瘤小鼠脾淋巴细胞转化、血清抗体产生都有促进作用;可以明显提高模型小鼠CD3^＋和CD8^＋T淋巴细胞水平,降低由于肿瘤引起的CD4^＋/CD8^＋T淋巴细胞比值的升高,与模型组比较差异显著（P〈0.05）。研究表明四君子汤发酵液的抗肿瘤作用和增强机体免疫调节功能有关。     

猪圆环病毒2型感染裸鼠及BALB/c小鼠的研究

用猪圆环病毒2型（PCV2）经腹腔注射BALB/c小鼠及裸鼠各15只,每隔2周1次,共感染3次.BALB/c小鼠初次、再次感染后均未出现明显的临床症状,仅有2只小鼠出现病理变化;从血清中可检测到PCV2核酸及其ORF2抗体;同时淋巴细胞增殖反应显著增强,NK和CTL细胞杀伤率显著升高;CD4^＋、CD8^＋、CD3^＋T淋巴细胞及CD19^＋B淋巴细胞数量显著减少.裸鼠也未出现明显的临床症状,从血清中可检测到PCV2核酸,但未检测到PCV2 ORF2抗体;除NK细胞杀伤率显著升高外,其余免疫学指标无显著改变.结果表明,BALB/c小鼠比裸鼠对PCV2易感,各项免疫学指标变化与PCV2感染猪一致,但不表现临床症状,仅个别BALB/c小鼠出现病理变化,说明BALB/c小鼠对PCV2不如猪易感.     

猪链球菌2型两代表性分离株感染小型猪后对部分免疫指标的影响

为探讨致病性猪链球菌2型（SS2）感染后对猪外周免疫系统的影响,作者选用SS2两代表性分离株（即四川分离株ZY05719和江苏分离株HA9801）建立具有典型症状和病理组织特征的小型猪感染模型,分析感染后不同时间猪血液中细菌含量和白细胞变化,以及相关免疫指标的变化。结果表明,猪链球菌2型感染会引起小型猪的急性死亡、亚急性感染和慢性迁延。急性死亡猪的血液中细菌含量高达10^4CFU／mL。感染后的12h即可见IL-1、IL-8、TNF—α、IFN-γ分泌量显著增加,其中以TNF—α增幅最显著。同时可见CD4＋T细胞的水平明显下降,CD8＋T细胞的水平上升,急性死亡猪出现CD4＋／CD8＋T细胞比值倒置,即感染猪处于免疫抑制状态。急性死亡猪血液中的淋巴细胞转化能力变化无规律,亚急性感染猪的淋转指数在下降1周后逐渐恢复。结果提示：ZY05719和HA9801菌株的致病性有差异;外周血中各相关免疫指标和SS2感染进程有-定相关性。     

禽白血病病毒J亚群(ALV-J)免疫抑制特性研究

本研究人工接种1日龄及7日龄SPF雏鸡禽白血病病毒J亚群(ALV-J),模拟先天感染及早期感染,检测ALV-J不同感染时间对机体的影响。对感染鸡体质量、免疫器官质量、组织病理学、血细胞、CD4+及CD8+T淋巴细胞进行了检测。结果发现,ALV-J对免疫器官抑制显著,尤其是中枢免疫器官,1日龄感染组的抑制程度显著高于7日龄感染组。免疫器官的抑制是产生体质量抑制的根源。病理学观察发现,1日龄感染组中枢免疫器官淋巴细胞流失严重,间质结缔组织明显增生;而7日龄感染组在3周前表现为免疫细胞增殖,在3周以后淋巴细胞逐渐坏死流失,其他器官主要表现炎性浸润及出血,未见肿瘤增生灶。血细胞检测发现,ALV-J感染组粒细胞、淋巴细胞和红细胞均有下降,但对粒细胞的影响更加明显,1日龄感染鸡更为严重。对胸腺和脾脏CD4+及CD8+T淋巴细胞检测发现,CD4+细胞数量明显下降,而CD8+细胞数量明显升高,说明机体的免疫抑制和这两种细胞的变化高度相关。无论是1日龄还7日龄感染,均在4周龄时达到免疫抑制最低值,因此可以确定ALV-J感染在体内潜伏期约为3～4周的时间。ALV-J造成机体免疫力极其低下,为肿瘤的形成及混合感染创造了条件。     

Foxp3结构、功能及其在机体免疫抑制中的作用

Foxp3特异性表达于胸腺、脾脏和淋巴结等淋巴器官和组织中的CD4＋CD25＋调节性T细胞（regulatory T cells,Treg）表面,在诱导CD4＋CD25＋Treg发育、分化与功能发挥中起重要的作用,它通过调控Treg的转录和蛋白表达参与机体稳态机体,在感染免疫、肿瘤免疫及自身免疫病中发挥重要作用。本文就Foxp3分子结构、功能及其在免疫抑制中的作用机制作一综述。     

泰山马尾松花粉多糖对ALV-J不同接种途径诱导的鸡群免疫抑制的免疫调理作用

分别经口服、点眼、腹腔注射、肌肉注射模拟水平传播感染J亚群禽白血病病毒(ALV-J),同时连续10d口服给予泰山松花粉多糖(TPPPS),分别对各组试验鸡体质量及免疫器官指数、带毒、排毒及抗体、相关免疫学指标进行检测比较。结果显示,饲喂多糖组与接毒组相比,试验鸡体质量及免疫器官指数抑制程度得到改善,血液带毒及泄殖腔排毒量降低,抗体分泌提前、分泌量增加,而IL-2、IL-4细胞因子分泌水平提高,T淋巴细胞转化率、CD4+和CD8+T细胞数增加,其中以腹腔注射和肌肉注射组TPPPS的免疫调理作用最显著,而健康对照组饲喂TPPPS后试验鸡相关免疫指标水平提高。本研究结果表明,TPPPS对健康雏鸡具有一定的免疫增强作用,口服TPPPS对不同水平传播途径感染ALV-J引起的免疫抑制具有免疫调理作用,TPPPS可以作为免疫增强剂用于防控ALV-J的早期水平感染,降低其免疫抑制程度,减少经济损失。     

鸡食管扁桃体的组织学和免疫组织化学研究

本研究通过组织学和免疫组织化学方法,观察鸡新型肠相关性淋巴组织-食管扁桃体的组织结构特征。并研究其中T淋巴细胞及其亚群和抗体生成细胞的定位分布。研究发现,食管扁桃体的粘膜形成数目和结构与食管一致的皱襞,粘膜固有层中分布大量的淋巴组织,并存在于前胃腺;在隐窝固有层中,抗体生成细胞以IgM^＋和IgA^＋细胞为主,并主要分布在生发中心中,而CD3^＋、CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞也有大量分布,主要存在于生发中心周围的滤泡间区域;在皱襞固有层中,各种淋巴细胞都分布在上皮下固有层中,数量明显少于隐窝固有层中的相应阳性细胞,抗体生成细胞以IgA^＋细胞为主,T淋巴细胞则以CD3和CD4为主。研究表明：食管扁桃体位置特殊,将接触到大量的外界未消化抗原,并且它具有参与粘膜免疫的组织基础和细胞基础,此研究结果对食物过敏、免疫耐受和肠道感染的研究具有重要意义。     

贫血病雏鸡Lasota疫苗免疫后免疫器官组织T细胞亚群变化

应用微波间接酶标抗体染色法(WIEAS)对鸡贫血病毒(CAV)感染雏鸡Lasota疫苗免疫后免疫器官组织的CD4^ 、CD8^ T细胞数量及CD4^-与CD8^ T细胞比值的变化进行了动态研究，结果发现，CAV感染1日龄雏鸡Lasota疫苗免疫后，其胸腺、脾脏和盲肠扁桃体的CD4^ 、CD8^ T细胞数量及CD4^ 与CD8^ T细胞比值均程度不同地低于CAV未感染Lasota疫苗免疫对照雏鸡。表明，CAV感染雏鸡免疫器官组织对Lasota疫苗的细胞免疫应答机能降低或减弱。     

米糠多糖对雏鸡T细胞免疫功能的影响

为探讨米糠多糖（RBS）对不同免疫状态雏鸡免疫功能的影响,本试验采用流式细胞技术检测了健康雏鸡、环磷酰胺（CTX）处理雏鸡和人工感染IBDV雏鸡等三种免疫状态雏鸡在服用米糠多糖（剂量150mg／kg·d））和不服用米糠多糖情况下,外周血CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞亚群数量的动态变化。结果显示,口服米糠多糖能够提高健康雏鸡外周血中CD4^＋T淋巴细胞比率,对CD81淋巴细胞作用不明显;米糠多糖对CTX和IBDV引起试验雏鸡外周血中CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞亚群减少具有一定的抑制作用。     

雏鸡淋巴细胞变化规律的流式细胞仪检测研究

为进一步研究鸡在出孵1个月左右时间内T、B淋巴细胞及其亚群的发育状况，将SPF雏鸡分别在3、5、7、9、11、14、17、22、27、32日龄时取血液、脾脏、法氏囊及胸腺，分离并制成淋巴细胞悬液，流式细胞仪双染色法检测Bu-la^＋B淋巴细胞、CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋和TCRγδ^＋CD3^＋T淋巴细胞含量及血液淋巴细胞的凋亡规律。结果：在出孵1个月内T、B细胞处于分化发育阶段的初期，除胸腺外，呈上升趋势，但T细胞亚群的变化无规律，B细胞在法氏囊中和T细胞在脾脏中3～9日龄发育最快；血液淋巴细胞凋亡趋于下降，尤其是在9日龄以后：此间不断有成熟的淋巴细胞产生，不断进入血液和脾脏，使其数量有上升趋势。但是，血液中第7日龄时Bu—la^＋B淋巴细胞和CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞数量均最低，说明体液免疫和细胞免疫水平第7日龄时都最低，并在17日龄时进入水平较高的又一个低谷。TCRγδ^＋CD3^＋T细胞则变化幅度不大。