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为了选择适用于水稻根部蛋白质组分析的样品制备方法,以水稻苗期幼嫩根尖为材料,采用TCA/丙酮沉淀法、Tris法、尿素/硫脲法对水稻根部总蛋白质进行提取并比对,通过Bradford法、SDS PAGE电泳技术对蛋白质含量和种类进行分析。结果显示,Tris法提取出的水稻根部蛋白质含量和种类明显少于其他2种方法;尿素/硫脲法和TCA/丙酮沉淀法提取的蛋白质种类和含量都较多,其中,尿素/硫脲法的蛋白质图谱中蛋白条带多,染色深而且很清晰,尤其适用于较低分子量蛋白质的提取,TCA/丙酮沉淀法则适于高分子量蛋白质的提取。因此,进行水稻根部总蛋白质组分析时,可选用尿素/硫脲法。 相似文献
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应用高效毛细管电泳仪(CE)测定了生物样品中的胃蛋白酶,卵清蛋白及枯草杆菌细菌蛋白等,经过对波长185mm与214mm条件下的测定结果进行比较试验,得出185mm波长下检测灵敏度大大高于214mm波长的检测灵敏度。 相似文献
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应用高效毛细管电泳仪(CE)测定了生物样品中的胃蛋白酶、卵清蛋白及枯草杆菌细菌蛋白等。经过对波长185mm与214nm条件下的测定结果进行比较试验,得出185nm波长下的检测灵敏度大大高于214nm波长的检测灵敏度。 相似文献
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目前,稻米蛋白质含量低、营养不够全面,满足不了人们对营养的需求。综述了水稻蛋白质改良的研究现状,以及传统育种方法和细胞工程方法在水稻蛋白质改良上的应用,并对今后的研究方向提出建议。 相似文献
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《江苏农业科学》2016,(12)
为建立适合鹅掌楸胚性愈伤大规模蛋白质组研究,比较分析4种蛋白质提取方案:Mg/NP-40-三氯乙酸(简称TCA)/丙酮、TCA/丙酮、裂解液-Clean-up、裂解液-TCA/丙酮,并进行蛋白质的聚丙烯酰腚凝胶电泳(简称SDS-PAGE)和双向电泳分析。SDS-PAGE图谱显示:裂解液-Clean-up、裂解液-TCA/丙酮法分离高分子量蛋白质条带相对于Mg/NP-40-TCA/丙酮、TCA/丙酮法少;Mg/NP-40-TCA/丙酮法和裂解液-Clean up法低分子量提取、分离效果较差。在SDS-PAGE基础上对Mg/NP-40-TCA/丙酮、TCA/丙酮法提取蛋白质样品进行双向电泳,结果表明:TCA/丙酮法得到的凝胶图蛋白质点分布均匀、背景清晰且纵横条纹较少,且TCA/丙酮法相对于Mg/NP-40-TCA/丙酮法来说在小分子量蛋白质、碱性蛋白质分离方面有优势。同时随机选取双向电泳分离的蛋白质进行质谱分析,结果显示,TCA/丙酮法较适合鹅掌楸胚性愈伤蛋白质组的大规模分析。 相似文献
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水稻蛋白质双向电泳分析新方法 总被引:11,自引:0,他引:11
钟伯雄 《浙江农业大学学报》1997,23(2):128-132
通过研究,建立了适合于水稻根蛋白质双向电泳分析用的磷酸缓冲液抽提、TCA沉淀法浓缩蛋白质的新方法。本法用于水稻胚、叶片的蛋白质样品制备,也能获得稳定、清晰的双向电泳图谱。经考马斯亮蓝R250染色,根、叶和胚的清晰可分辨的蛋白质斑点数分别为350、350和400个,用银染色,斑点数分别为600、600和700个。三蛋白质的等电点总在3.0 ̄9.0之间,大多数在5.0 ̄8.0之间,分子量在15 ̄17 相似文献
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水稻蛋白质双向电泳分析新方法 总被引:1,自引:0,他引:1
钟伯雄 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》1997,(2)
通过研究,建立了适合于水稻根蛋白质双向电泳分析用的磷酸缓冲液抽提、TCA沉淀法浓缩蛋白质的新方法.本法用于水稻胚、叶片的蛋白质样品制备,也能获得稳定、清晰的双向电泳图谱.经考马斯亮蓝R250染色,根、叶和胚的清晰可分辨的蛋白质斑点数分别约为350、350和400个,用银染色,斑点数分别为600、600和700个.三者蛋白质的等电点总在3.0~9.0之间,大多在5.0~8.0之间,分子量在15~170kD之间,大多在25~90kD之间 相似文献
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为探索适于烟草根系蛋白质组学研究的样品制备方法,以栽培品种K326生长期根系为材料,比较了常规裂解液法、TCA/丙酮沉淀法、Trizol抽提法和酚法等4种总蛋白质的提取方法。对制备的样品进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及双向电泳(2-DE)检测。结果表明:酚法最佳,所获蛋白在单向SDS-PAGE中形成条带数目多而清晰;经双向电泳分离用银染显色,可检测约548个蛋白点,图谱分辨率较好,蛋白点清晰,主要集中在等电点pH5~8、相对分子量25.0~70.0kD,可有效解析烟草根系的蛋白质组。 相似文献
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红豆杉细胞蛋白质双向电泳样品制备方法的比较 总被引:2,自引:0,他引:2
[目的]探索适用于红豆杉愈伤蛋白质组学研究的样品制备方法。[方法]以红豆杉愈伤组织为材料,分别采角三氯乙酸(TCA)/丙酮沉淀法、Tris—HCl法和酚-甲醇/醋酸铵沉淀法提取其中的总蛋白,通过双向电泳(2DE)检测3种方法对总蛋白的提取效果。[结果]3种方法提取的蛋白样品2DE图谱显示的蛋白点数量均较多。TCA/丙酮沉淀法对蛋白质的提取率较高,2DE图像清晰,条纹少,拖带现象轻;Tris—HCl法提取的蛋白样品2DE图谱个别区域出现较轻的云片状聚集,并有轻微拖带现象;酚-甲醇/醋酸铵沉淀法提取蛋白样品的2DE图谱有条纹和拖带现象。[结论]TCA/丙酮沉淀法提取的蛋白质质量较高,所得图谱背景清晰,蛋白质信息量大。 相似文献
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我们采用4个不同蛋白质含量的水稻品种配制了二个杂交组合,进行稻米蛋白质含量的遗传与选择的研究。旨在获得某些重要的遗传参数,为探讨高蛋白质育种的途径和方法,提高选择效率提供依据。研究结果表明:1.稻米蛋白质含量为多基因控制的数量遺传,杂种后代产生广谱遗传变异。2.稻米蛋白质含量的遗传力和相对遗传进度均较高,早期世代的选择是有效的。3.稻米蛋白质含量与株高、抽穗期及粒重相关显著,与其他经济性状相关不明显。另外,根据试验结果就高产高蛋白质含量品种的选育进行了讨论。 相似文献
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《北京农业大学学报》2008,13(1):5
2008年1月24日,我校生物学院陈文新院士主持的“根瘤菌资源库建立及根瘤菌基础与应用研究”项目通过了教育部组织的专家委员会的成果鉴定。该项目在根瘤菌资源、多样性及应用研究中居国际前沿水平。 相似文献
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浙江省杨梅优株资源库的建立及初步表现 总被引:1,自引:1,他引:1
1988年至1992年间,在浙江省慈溪,余姚和黄岩等7个杨梅主产区开展杨梅良种优株选育工作,共选出荸荠种,东魁和晚稻等8个品种31株优株,经嫁接繁殖和设立收集区,在衢县林场建成浙江省杨梅主要品种相对集中的资源库,并已转化为生产资料,同时为杂交育种和品种改良创造了条件,各优株无性系中荸荠 种结果性能最好,始果期和疸均居首位。东魁始果期迟,初期产量也较低。其他品种优株无性系处于荸荠种和东魁之间,初投产的荸荠种和东魁等各优株无性系平均单果质量均未达到母树水平,但东魁减少并不显著,仍表现为大果形,表明大果形性状稳定,可以遗传,果实暂时趋小是营养问题,各优株无性系果实成熟期比原产地提早5-10d,是该地光,热和湿度等环境因素所致。 相似文献