植物激素常用提取分离和鉴定方法(续)及在茶树上的应用

2 3　物理化学方法物理化学方法可分为光谱和色谱法两类。光谱法专一性较差 ,已较少使用。但吲哚乙酸能与醋酸酐反应生成具荧光性的吲哚吡喃酮 ,可利用荧光法测定[4 0 ] ,灵敏度较高。赤霉素中ＧＡ3与浓硫酸作用形成三环芳烃衍生物 ,在紫外光激发下 ,呈现出绿色荧光 ,因此也可利用荧光法测定[4 5] 。色谱法是利用物质在不同介质中的分配原理 ,包括纸层析、薄层层析 (ＴＬＣ)、气相色谱 (ＧＣ)、高效液相色谱 (ＨＰＬＣ)、以及气 -质联用 (ＧＣ -ＭＳ)和ＨＰＬＣ -ＭＳ联用 ,其特点是将分离和测定结合起来。由于纸层析和ＴＬＣ的分离效率和…     

高速逆流色谱法制备分离库拉索芦荟中的2’-对香豆酰芦荟宁

采用高速逆流色谱法分离纯化库拉索芦荟中的2’-对香豆酰芦荟宁。以正己烷-乙酸乙酯-丙酮-水(1∶5∶1∶5,V/V/V/V)为溶剂体系,上相为固定相,下相为流动相,线圈转速为860 r/min,流速为2 mL/min,紫外检测波长为300 nm,一次进样85 min内从487.5 mg库拉索芦荟丙酮提取物中分离得到19.5 mg单体组分,经高效液相色谱分析,测定纯度为95.6%(峰面积百分比),通过质谱、红外、紫外和核磁技术进行结构鉴定,确定组分为2’-对香豆酰芦荟宁。该法具有操作简便、速度快、样品制备量大、节省溶剂及回收率高等优点,可为芦荟宁类化合物的分离提供高效、稳定及可靠的方法。     

用固相萃取—高效液相色谱法测黄皮中的异菌脲残留量

样品用乙腈提取,固相萃取后浓缩,采用高效液相色谱法,测定了黄皮中的异菌脲残留量。测定结果表明∶异菌脲的浓度范围在1~50g血L内,其峰面积与进样质量的线性相关系数为0.990,其回收率为83.6%~96.9%,相对标准偏差RSIⅡ n=5）在0.53%~6.21%之间,检出限为0.002mgkg。该法具有灵敏、准确,前处理简单易行等优点。     

液相色谱测定甘蓝中的吡虫啉

用高效液相色谱测定吡虫啉在甘蓝中的残留动态及最终残留量。样品用乙腈提取,V甲醇∶V二氯甲烷=5∶95,经氨基柱净化,过0.45μm膜,经液相测定。结果表明,吡虫啉在甘蓝中的半衰期T(1/2)∶海南4.14d、4.86d;北京T(1/2)3.03 d、4.48 d。该方法的添加回收率为87.9%、88.6%、107.9%,在样品中的最小检出浓度为0.005 mg/kg。     

微波水解-柱前衍生-高效液相色谱法测定叶面肥中的氨基酸

建立微波水解-柱前衍生-高效液相色谱法测定叶面肥中氨基酸含量的方法。叶面肥样品在温度为160℃、微波功率为600 W下水解15 min,再与异硫氰酸苯酯进行衍生,并采用反相液相色谱法-紫外检测器对其进行分析,外标法计算样品中17种氨基酸的含量。17种阴离子在12 min内可完全分离,方法加标回收率在72.83%~98.67%之间,6次重复的相对标准偏差在3.17%~12.21%之间,方法检出限(S/N=3)在0.05 mg/L至0.15 mg/L之间。该方法操作简便、灵敏、选择性高,适用于常规样品分析。     

高效液相色谱法测定香蕉防霜剂中三氯卡班的含量

采用高效液相色谱法,色谱条件为：Symmetry十八烷基键合硅胶柱,流动相：乙腈∶水=7∶3（V∶V）,检测波长：265 nm,流速：1 mL.min-1。建立了测定香蕉防霜剂中三氯卡班含量的方法,线性方程为：Y=5.02×10-4X＋1.27×10-3（Y为三氯卡班含量,X为色谱峰面积,R=0.9997）,线性范围为0.8-15 mg.L-1,检测限0.2 mg.L-1,方法回收率为99.08%-99.32%（RSD=1.08%-2.03%,n=5）。可用于香蕉防霜剂和相关产品中三氯卡班定量测定。     

甘蓝型油菜叶片硫甙含量的杂种优势研究

用高效液相色谱法测定了甘蓝型油菜品种及杂交后代叶片的硫甙含量及组份，研究了两个低硫杂交组合不同时期油菜叶片硫甙总量及组份的杂种优势，进行了油菜叶片硫甙组份相关性分析，结果表明：普通油菜中油821叶片硫甙苗期含量最高，达33.15μmol/g，随后持续下降；而低硫油菜品系从越冬到现蕾逐渐升高，薹期降低，初花期又升高，盛花时降到最低；6098/1008和6098/M1两个杂交组合在薹期和花期叶片硫甙含量表现较高的负向优势，硫甙含量显著下降；两个杂交组合叶片硫苷组份中2-羟-3-丁烯、4-甲亚砜丁基、5-甲亚砜戊基、3-丁烯基、4-戊烯基等脂肪族硫苷均表现出负向优势，而芳香族硫甙和吲哚类硫甙在不同组合中优势表现不同，在6098/1008组合中仅3-吲哚甲基硫甙表现为负向优势，其他成分均表现为正向优势，在6098/M1组合中所有芳香族硫甙和吲哚类硫甙成分均表现为负向优势。     

HPLC法测定红麻青贮饲料中的有机酸

运用高效液相色谱法对红麻青贮饲料中乳酸、乙酸、丙酸和丁酸4种有机酸的含量进行同时测定。采用0.02 mol/L NaH_2PO_4(pH=2.70)与甲醇作为流动相,在Dionex Ultimate 3000液相色谱仪,色谱柱为Thermo Hypersil BDS C18柱,流速1 mL/min,柱温30℃,检测波长210 nm,进样体积20μL条件下对青贮样品有机酸含量进行定性分析。结果表明,4种待测有机酸在预定检测范围内线性关系良好(R2≥0.9982),精密度变异系数5%,样品回收率在98.73%~102.79%之间。该方法操作简单准确,重复性好,可用于红麻青贮饲料中有机酸的测定。     

HPLC法测定菠萝果实中8种维生素含量的研究

优化了利用高效液相色谱法测定菠萝果实中脂溶性维生素（VA、VE）和水溶性维生素（VC、 VB3、 VB12、 VB6、 VB2、 VB1）的方法; 脂溶性维生素以甲醇 ∶ 乙酸乙酯（V甲醇 ∶ V乙酸乙酯=95 ∶ 5）溶液为流动相, 流速为1.0 mL/min, 柱温25 ℃, 检测波长275 nm。 水溶性维生素以0.005 mol/mL己烷磺酸钠（pH3.2）∶ 甲醇（V乙烷磺酸钠∶ V甲醇=7∶ 3）为流动相, 流速为1.0 mL/min, 柱温30 ℃,于254 nm处测定吸光值。试验结果表明： 其线性相关系数在0.999 7～1.000 0之间, 线性关系良好。VA、 VE的峰面积RSD分别为1.48％、1.31％;VC、 VB3、 VB12、 VB6、 VB2和VBl的峰面积RSD分别为1.35％、 1.78％、 1.50％、 1.52％、 0.93％和1.10％。VA、 VC、 VB3、 VB6的平均加样回收率分别为94.2％、 102.3％、 91.0％、 95.2％。     

高效液相色谱法对西瓜和香蕉中甲霜灵残留的测定

建立用自动固相萃取/高效液相色谱法测定西瓜和香蕉中的甲霜灵残留的方法,样品经乙腈提取,过滤,自动固相萃取,采用高效液相色谱检测,色谱柱: SunFireTM C18;流动相：乙腈-水-甲醇(体积比25∶40∶35);流速：1.0 mL/ min;检测波长：220 nm;进样量：10 μL。该方法在西瓜和香蕉中添加0.02、0.2、1.0 mg/kg 3个不同水平加标,回收率分别为94.3%～101.0%和81.5%～99.6%,相对标准偏差在1.30%～5.29%和2.66%～6.67%。该方法的最低检     

Production and optimization of indole acetic acid by indigenous micro flora using agro waste as substrate

Indole Acetic Acid (IAA) producing bacterium was isolated from the Rhizosphere soil and identified as Rhizobium sp. and Bacillus sp., Optimization of Indole acetic acid production was carried out at different cultural conditions, such as pH, temperature and substrate with Rhizobium sp., Bacillus sp. and Rhizobium sp., produced higher amount of Indole acetic acid (6.1 mg mL(-1)) than the Bacillus sp., (4.4 mg mL(-1)) at pH 7 and 37 degrees C in the Bengal gram substrate. Partial purification of Indole acetic acid was done by Thin Layer Chromatography (TLC). In conclusion Rhizobium sp., appear to be a suitable soil microorganism for high level of IAA production.     

橡胶树胶乳中几种植物激素的提取及其高效液相色谱测定法

对胶乳中玉米素（ZT）、赤霉素（GA）、生长素（IAA）和脱落酸（ABA）等4种植物激素进行分离和纯化,用80％预冷甲醇浸提,离心,离心后的上清液减压蒸发至水相,调节pH后用固相萃取柱进一步纯化,首先洗脱下GA、IAA和ABA,再洗脱下ZT。对ZT采用等度洗脱,流动相为甲醇和0.5％的乙酸（20/80 v/v）,分析时间为10 min, ZT在等度洗脱条件下的出峰时间（min）是5.426,回收率是87％;对GA、IAA和ABA采用梯度洗脱,流动相为甲醇和0.5％的乙酸（20/80 v/v）,分析时间为34 min,GA、IAA和ABA在梯度洗脱条件下的出峰时间（min）分别为：13.377、16.581和18.988,回收率分别为70％、82％和92％。由于对这4种激素分别检测,从而降低了每份样品中杂质的浓度,取得了良好的分离、检测效果。研究结果表明,试验重现性好,整个提取流程简便,适合胶乳中内源激素的分离与测定。     

茶红素分离及稳定性研究

采用茶汤有机试剂萃取分离,并分别经过反相C_(18)柱层析纯化,制备出乙酸乙酯层、正丁醇层和酸性正丁醇层三部分茶红素。根据紫外可见光波扫描计算出色价,并研究了茶红素在不同条件下的稳定性。结果表明,30%、50%和70%甲醇梯度洗脱,纯化后3类茶红素液相检测发现无咖啡碱和茶黄素,仅有少量儿茶素杂质。纯化后色素色价分别为乙酸乙酯层128.04,正丁醇层91.04,酸性正丁醇层76.16。遮光处理,p H=3酸性条件,45℃以下贮藏,有利于茶红素的稳定性。     

菠萝蜜果醋发酵工艺的优化及香气成分分析

为了提升菠萝蜜的产品附加值,进一步丰富市场中果醋种类,本研究以菠萝蜜为原料,对菠萝蜜果醋发酵工艺进行优化并分析其香气成分。通过单因素试验探讨醋酸菌接种量、发酵温度、乙醇体积分数、初始pH 4个因素对菠萝蜜果醋产酸量的影响,然后采用4因素3水平的响应面设计优化得到最佳发酵工艺。结果表明,菠萝蜜果醋的最佳发酵工艺条件为醋酸菌接种量11%、发酵温度32 ℃、乙醇体积分数5%、初始pH 3.3,在此条件下菠萝蜜果醋的醋酸含量达(44.20±0.41)g/L。采用顶空固相微萃取法（head space-solid phase microextraction, HS-SPME）结合气相色谱-质谱联用技术（gas chromatography-mass spectrometry, GC-MS）,对菠萝蜜果醋的香气成分进行分析,检测出香气成分67种,主要成分是乙酸（26.15%）、乙酸异戊酯（12.78%）、异戊醇（11.01%）、乙酸乙酯（10.99%）、苯乙醇（4.72%）、正癸酸（3.61%）、苯甲醛（3.34%）、乙酸苯乙酯（3.12%）、辛酸（3.08%）、异戊酸（1.31%）、月桂酸乙酯（1.07%）。通过菠萝蜜果醋发酵工艺的优化和香气成分分析,制备出符合相关国家标准和行业标准的新型果醋,初步探明了果醋中香气成分的种类。     

顶空气相色谱法测定绿茶提取物中乙酸乙酯残留量

采用顶空气相色谱法对绿茶提取物中乙酸乙酯残留溶剂的分析方法进行了研究。试验采用大口径HP-快速GC残留溶剂柱为分离柱,对顶空平衡温度、平衡时间对残留有机溶剂乙酸乙酯测定的影响进行了分析研究。结果表明：乙酸乙酯在0.0765~0.612μg/ml内线性关系良好,相关系数为0.9993;方法精密度试验RSD(n=6)为3.60%;平均回收率范围95.42%~97.88%,RSD 1.95%~3.09%;检测限(S/N=3)为0.005μg/ml。本方法快速、灵敏、准确、无污染,适用于绿茶提取物中乙酸乙酯残留量的测定。     

茶树新梢内源激素的HPLC分析及日变化

研究了茶树新梢内源赤霉酸（ＧＡ３）、吲哚乙酸（ＩＡＡ）、吲哚乙醛（ＩＡＡＤ）、脱落酸（ＡＢＡ）和玉米素（Ｚｅａｔｉｎ）等激素的ＨＰＬＣ分析方法。在ＯＤＳ（Ｃ１８）反相柱上，ＧＡ３、ＩＡＡ、ＩＡＡＤ和ＡＢＡ用甲醇—乙腈—ＫＨ２ＰＯ４缓冲液系统为流动相、Ｚｅａｔｉｎ用甲醇—乙腈—磷酸缓冲液系统为流动相得到满意的分离，它们与相邻峰间的峰高分离度均在０．６５以上。在紫外波长λＧＡ３＝２１０ｎｍ，λＩＡＡ、ＩＡＡＤ、ＡＢＡ＝２８０ｎｍ和λＺｅａｔｉｎ＝２５４ｎｍ、灵敏度０．００３ａｕｆｓ（ＧＡ３）和０．００１ａｕｆｓ（ＩＡＡ、ＩＡＡＤ、ＡＢＡ和Ｚｅａｔｉｎ）条件下，各种激素得到定量。ＧＡ３、ＩＡＡ、ＩＡＡＤ、ＡＢＡ和Ｚｅａｔｉｎ的平均标样添加回收率分别为７６．２４％，８９．６９％，８４．３３％，９０．９６％和８２．０９％。茶树新梢内源激素含量在一天内有明显的变化，其高峰值均出现在１３时左右。一天内以１０—１６时取样进行内源激素测定较适宜     

直读显色快速检测绿茶中的茶氨酸

本研究首先基于溶胶-凝胶方法成功构筑了茚三酮/纳米二氧化钛纳米材料,将其作为纳米显色剂打印在高效薄层板上茶氨酸所对应的比移值（R_f）处。以乙醇：冰乙酸展开体系对适当脱色处理后的茶叶浸出物进行快速薄层直读显色分析。结果表明,在优化后的展开条件下该直读条带能够有效地分离茶叶提取物中多种氨基酸,所构筑的新型纳米显色剂对目标氨基酸茶氨酸实现了灵敏的直读显色,自显色后条带色斑均匀清晰,其颜色深浅度与其浓度之间有明确的半定量关系。本研究构建的直读显色条带具有安全、简便快捷、成本低等优点,在农产品品质鉴定与现场快速检测氨基酸等领域有着广泛的应用前景。     

辣木籽仁的化学成分分析

为确定辣木籽仁的化学成分,采用无水乙醇和乙酸乙酯萃取辣木籽仁以及气相色谱-质谱联用技术分析其化学成分,并用总离子流色谱峰面积归一化法计算各成分的相对含量。结果表明：无水乙醇萃取率为3.566 7 %,乙酸乙酯萃取率为16.433 %;无水乙醇和乙酸乙酯萃取辣木籽仁共鉴定出41种化学组分,这2种方法萃取辣木籽仁提取物中最主要的化学成分是油酸、异油酸、反油酸、甘油单油酸酯和棕榈酸。     

Potato disc bioassay and cytotoxic effect of Leptadenia pyrotechnica: comparative study of diverse extracts

Comparative acute toxicity studies of the latex and sequential extracts of Leptadenia pyrotechnica (Forsk.) Decne (Asclepiadaceae) were recorded using brine shrimp. The higher toxicities were exhibited in latex; methanol, methanol/dichloromethane (1:1), defatted methanol/dichloromethane (1:1), defatted methanol and dichloromethane extracts. The other extracts; aqueous, alkaloids, ethyl acetate and n-butanol exhibited less toxicities compared with the other extracts. The estimated LC50 and its 95% confidence limits for these extracts expressed in ppm were: methanol, latex 18.84 (11.22-31.61), methanol/dichloromethane 19.95 (7.76-53.70), defatted methanol/dichloromethane 21.38 (7.24-63.10), defatted methanol 28.19 (16.27-48.81) and dichloromethane 30.90 (11.75-79.43). The anti-tumor activities; potato disc assays of methanol, ethyl acetate and alkaloids extracts showed good activities as anti-tumor agent which represented-49.30,-43.20 an -33.60%, respectively. While latex and aqueous extract represented-30.80 and-28.17%, respectively.     

超高效液相色谱-串联质谱法测定香蕉中吡虫啉和高效氯氰菊酯

建立了香蕉中吡虫啉和高效氯氰菊酯多残留分析方法。样品经1%乙酸乙腈提取,N-丙基乙二胺(PSA)和石墨化炭黑(GCB)净化,以甲醇和2mmol/L乙酸铵水溶液为流动相,进行梯度洗脱分离,采用电喷雾正离子源模式(ESI+),多反应监测(MRM)采集数据,基质匹配外标法定量。吡虫啉和高效氯氰菊酯在0.001～0.1mg/L范围内线性关系良好,相关系数r> 0.9991,方法检出限(LOD)为1 pg,定量限(LOQ)为0.01 mg/kg。在0.01、0.05、0.10 mg/kg3个添加水平下,吡虫啉和高效氯氰菊酯在香蕉中的回收率为84.91%～104.78%,相对标准偏差(RSD)为1.23%～9.69%。该法操作简单、灵敏度高、重现性好,适用于香蕉中吡虫啉和高效氯氰菊酯的残留量测定。