方斑东风螺“翻背症”的病原及初步治疗研究

对海南发生"翻背症"的方斑东风螺进行了病原分离、鉴定,药敏分析及药物治疗试验。结果显示,病原为哈维弧菌,该菌对喹诺酮类、磺胺类药物敏感,对青霉素、阿莫西林等耐药;药物治疗结果显示,试验组诺氟沙星、复方磺胺甲恶唑、苯扎溴铵及对照组的最终存活率分别为39.05%、32.38%、29.52%和14.29%,诺氟沙星的治疗效果较好,可用于治疗方斑东风螺"翻背症"。     

氨氮胁迫对方斑东风螺溶菌酶及3种常见消化酶活力的影响

为揭示方斑东风螺(Babylonia areolata)应对氨氮(NH4-N)急性胁迫时的生理变化,分别于不同NH4-N浓度和时间下测定其体内溶菌酶及3种消化酶的活力。结果表明,实验剂量和实验时间均显著影响这4种酶的活力(P<0.05)。与对照组比较,方斑东风螺经NH4-N胁迫后:1)溶菌酶活力随着胁迫时间的延长总体呈现"抑制–诱导"趋势;2)低质量浓度NH4-N (22 mg·L^–1)对胃蛋白酶活力随时间的延长表现出"诱导–抑制"趋势,而其他质量浓度总体表现为"抑制–诱导"趋势;3)脂肪酶活力随着NH4-N处理时间的延长,总体上呈现抑制作用或与对照组呈相似水平;4) NH4-N处理时间显著影响方斑东风螺淀粉酶的活力,但各处理组的淀粉酶活力相比对照组在处理时间较短的情况下并无太大的诱导或抑制作用。综上,水体中的NH4-N会影响方斑东风螺这4种消化酶的活力。     

盐度胁迫对方斑东风螺免疫酶活性的影响

在水温(26.0±1.0)℃下,将体质量(0.386±0.080) g的方斑东风螺幼螺置于盐度18、23、28、33(对照组)、38的海水中,6、12、24、36、48、72、96 h后观察幼螺行为,测定其体内6种免疫酶的活性。试验结果显示,方斑东风螺保持良好状态的盐度为20～35,盐度和处理时间显著影响方斑东风螺免疫酶活力(P<0.05)。与对照组相比,盐度18和23处理组幼螺过氧化氢酶活性呈"抑制—诱导"的趋势,而盐度28和38处理组过氧化氢酶活性呈"诱导—抑制—诱导"的变化;各盐度处理组碱性磷酸酶和酸性磷酸酶活性具有相一致的变化规律,均为"诱导—抑制";盐度38处理组总超氧化物歧化酶活性与同盐度组的过氧化氢酶活性变化一致,而盐度18、23、28处理组的总超氧化物歧化酶活性均表现出"诱导—抑制"的趋势;各盐度处理组谷胱甘肽过氧化物酶活性和盐度18、38处理组的过氧化物酶活性呈现"抑制—诱导—抑制"的趋势,盐度23和28处理组过氧化物酶活性与同盐度总超氧化物歧化酶活性变化一致。     

氨氮胁迫对方斑东风螺溶菌酶及3种常见消化酶活力的影响

为探究芽孢杆菌 (Bacillus) 是否可替代抗生素在方斑东风螺 (Babylonia areolata) 养殖中的应用,在方斑东风螺早期面盘幼虫到稚螺生长发育过程中,使用芽孢杆菌 [凝结芽孢杆菌 (B. coagulans)、地衣芽孢杆菌 (B. licheniformis)] 和抗生素 (磺胺甲恶唑) 进行人工调控,研究其对方斑东风螺生长、存活、免疫及消化相关酶活性的影响。结果显示,芽孢杆菌和磺胺甲恶唑均促进了方斑东风螺各性状指标的生长,两者之间差异不显著 (P>0.05);芽孢杆菌组成活率在后期面盘幼虫阶段之后均显著高于对照组和磺胺甲恶唑组 (P<0.05);芽孢杆菌能够提高机体碱性磷酸酶 (AKP)、酸性磷酸酶 (ACP)、过氧化氢酶 (CAT)、过氧化物酶 (POD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH-Px)、超氧化物歧化酶 (SOD)、脂肪酶 (LPS) 和淀粉酶 (AMS) 活性,丙二醛 (MDA) 水平和总抗氧化能力 (T-AOC),并且高于对照组和磺胺甲恶唑组。结果表明,在对方斑东风螺进行苗种繁育时适当使用芽孢杆菌 (凝结芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌) 可以提高机体免疫力和抗病性,在一定程度上提高消化酶活性、促进幼体生长和提高成活率,且效果优于磺胺甲恶唑。     

pH急性胁迫对方斑东风螺行为及免疫酶活性的影响

为揭示方斑东风螺(Babylonia areolata)在低pH和高pH胁迫时的急性毒性和生理变化,以pH=8.0为对照组,pH=5.0、6.0、7.0和9.0为试验组,测定方斑东风螺体内4种免疫酶：谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和酸性磷酸酶(ACP)活性。结果显示：不同时间pH胁迫对免疫酶活性有显著影响(P<0.05),而不同pH胁迫对免疫酶的活力没有显著影响(P>0.05);方斑东风螺经过pH急性胁迫后,在低pH和高pH的水体养殖6 h后都出现了活力下降、爬壁缓慢,而在48 h后开始出现死亡;各试验组GSH-PX活性均呈现“抑制-诱导”的变化趋势;随着时间的不断延长,各pH处理组CAT活力均呈现“诱导-抑制-诱导”的变化趋势;POD活性总体表现出了“诱导-抑制”的趋势;低pH处理组(pH=5.0、6.0)ACP活性表现出“诱导-抑制”的趋势。该研究对于方斑东风螺的养殖具有参考意义,同时丰富贝类免疫系统方面的基础资料。     

饲料中添加乳酸菌对方斑东风螺稚螺生长、肌肉组成与免疫功能的影响

为探讨饲料中添加乳酸菌对方斑东风螺稚螺生长、肌肉组成与免疫的影响,在基础饲料中添加三个不同浓度(1.2×10~7 CFU/100g、1.2×10~8 CFU/100g和1.2×10~9 CFU/100g)的乳酸菌,养殖初始体重为0.62g的方斑东风螺10周。结果显示,与对照组相比,饲料中添加乳酸菌对方斑东风螺稚螺的生长性能和肌肉组分均没有显著影响。饲料中添加1.2×10~7 CFU/100g乳酸菌能够显著提高方斑东风螺的超氧化物歧化酶(SOD)活性,但在添加量为1.2×10~8 CFU/100g和1.2×10~9 CFU/100g时SOD活性反而受到抑制;添加1.2×10~9 CFU/100g乳酸菌抑制酸性磷酸酶(ACP)活性;饲料中添加乳酸菌对过氧化氢酶(CAT)和碱性磷酸酶(AKP)活性没有显著影响。结果表明饲料中添加乳酸菌不影响方斑东风螺稚螺的生长性能和肌肉成分,添加量为1.2×10~7 CFU/100g时可一定程度上提高抗氧化活力,但较高的添加量对免疫功能会产生抑制作用。     

养殖模式对方斑东风螺生长及主要环境因子的影响

为研究光因子对方斑东风螺胚胎受精孵化过程的影响,实验采用析因实验设计法研究了光照强度、光质和光周期等不同光条件对方斑东风螺胚胎发育过程中受精率(FR)、孵化率(HR)和变态率(MR)的影响,通过回归模型,优化光条件,找到利于胚胎发育的最佳光质、光强和光周期。结果显示,不同光质条件下,光照强度和光周期一次效应、交互效应和二次效应均呈显著水平,三者存在互作效应。在绿光条件下,光照强度为13.70 μmol/(m²·s),光照时间为15.54 h时,其FR、HR和MR达到最优值,其值分别为91.36 %、88.64 %和92.02 %,优化后绿光促进东风螺胚胎发育效果最为明显,其次是红光和白光。在蓝光条件下,其光照强度和光周期任意组合水平下FR、HR和MR与其他光质比较均较低,且随着光照强度增加和光照时间延长,三项指标值下降越明显,因而表明蓝光对胚胎发育起到抑制作用。实验表明,合适的光照强度和光周期能与光质协同作用,可以提高方斑东风螺育苗效率和苗种品质。     

饥饿及恢复生长对方斑东风螺抗氧化体系的影响

在(25.8±1.7)℃条件下,测定了方斑东风螺(Babylonia areolata)不同饥饿期(7d、15d、25d、40d)后再投喂(30d)过程中足肌、肝胰脏的抗氧化体系相关指标变化。结果显示,分别饥饿25d和40d时幼螺两组织丙二醛(MDA)含量较对照组均显著升高;饥饿25d前,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活力较对照组逐渐增强,当禁食达40d时却显著减弱;谷胱甘肽硫转移酶(GST)活力饥饿状态下先略上升后下降,肝胰脏、足肌中分别于饥饿25d和40d时显著降低;谷胱甘肽还原酶(GR)活力及谷胱甘肽(GSH)含量随禁食延长均呈下降趋势。恢复生长后,除饥饿40d组GR活力及肝胰脏MDA水平较对照呈差异显著外,该组其余指标及其他各处理组相应指标均恢复至或接近对照组水平。结果表明,饥饿胁迫下螺体抗氧化体系虽被激活,但仍处于一定的氧化应激状态,提示幼螺养成中禁食时间不宜超过25d,且SOD、CAT与GPx活性可作为螺体饥饿胁迫状态的指示参数。     

温度与盐度对方斑东风螺胚胎发育及幼虫生长的影响

在水温14～33℃（盐度34）、盐度18-40（水温25．5-26℃）范围内各设12个梯度，采用突变法进行温、盐度对方斑东风螺[Babylonia areolata（Link）]卵囊孵化及幼虫生长实验。结果显示：（1）方斑东风螺胚胎发育适宜水温为23～31℃，最适水温为25-30℃；适宜盐度为28-38，最适盐度为30～38。在适宜水温和盐度范围内，孵化速度随水温和盐度升高而加快，但以水温的影响效应最明显；温度或盐度超过其适宜范围时，孵化率明显下降或幼虫畸形率明显增大。（2）幼虫适宜水温及最适水温与胚胎发育的基本一致；适宜盐度和最适盐度存在向高盐度延伸的现象，其适宜和最适盐度下限分别为30和32。温盐度超过适宜范围时，死亡率明显增大，生长受到抑制。     

不同环境条件对方斑东风螺幼螺生长、存活的影响

本文报道了壳高4.13 mm的方斑东风螺幼螺,在不同密度、换水量、投饵率条件下的生长、存活情况.结果表明,在0.6～4.0万个/m2的密度范围内,在小水泥池(0.9 m×0.6 m×0.6 m),日换水量100～400%条件下,密度0.6万个/m2试验组生长最快,28 d平均体重增长24.4 mg/d,体重日均增长率5.9%,存活率最高,28 d平均存活率95.9%,且换水量达到100%以后,换水量的增大,对幼螺的生长和存活率的提高无明显促进作用.认为合适的条件是:密度0.6万粒/m2或略大于0.6万粒/m2,日换水量100～200%,日投饵率6～7%.     

温度对方斑东风螺生长与摄食影响的初步试验

本文是在小水体、自动控温的条件下,研究不同水温方斑东风螺(B.areolata)的生长、摄食和存活.2种不同时间的对比试验,分别为约1个月和3个月,不同时间的试验结果相近.在22～32℃的水温范围,水温22℃和32℃方斑东风螺的生长速度略有降低.但在此范围内,不同水温方斑东风螺的生长差异不明显.根据试验结果和养殖生产的实际情况,可以认为,方斑东风螺人工养殖适宜水温22℃～28℃,最适水温24℃～28℃.另外,方斑东风螺耐受的高温是34℃,35.5℃出现死亡.能耐受7～8℃的低温.     

密度对养成期方斑东风螺摄食和生长的影响

在水温保持约28℃条件下,方斑东风螺日均摄食率、日均体重增长率,随其生长逐渐下降,而日均体重生长量逐渐上升。在密度300~1500个/m2范围内、小换水量(30%/d)试验条件下,当体重为1~2g、壳高15~20mm时,不同密度组方斑东风螺生长无明显差异,适宜的密度在1500个/m2以内;当体重3~4g、壳高25mm左右时,密度1500个/m2,方斑东风螺生长速度明显低于其他组,认为适宜的密度为900个/m2左右;当体重4~5g、壳高25~30mm时,适宜密度应为600~900个/m2。     

方斑东风螺对海水温度、条件比重适应性的研究

进行了方斑东风螺对海水温度、条件比重适应性试验。结果表明：方斑东风螺所适应的海水的条件比重为1．014以上;其适应的水温为14℃以上,当养殖水温在24℃以上时,方斑东风螺可获得较快的生长速度。     

方斑东风螺对盐度适应性的研究

通过实验生态学的方法,在温度28．2～29．7℃、pH7．6—8．3的条件下,研究了养殖方斑东风螺（Babylonia areolata）的适宜、最适生存盐度及适宜、最适生长盐度,以期为养殖生产提供科学依据。生存临界盐度界定为120h50％死亡的盐度（120hLS50）,其范围为适宜生存盐度;生长临界盐度界定为增长率为最佳一组30％所对应的盐度,其范围为适宜生长盐度;把经过多重比较结果显示无显著差异的存活率或13生长量最高的几个实验组所对应的盐度范围作为最适生存或生长盐度。研究结果表明,方斑东风螺适宜生存盐度为19．18～41．39,最适生存盐度为26．0—34．4;适宜生长盐度为19．28～39．96,最适生长盐度为26．0—31．6。当盐度变化超出最适范围时,养殖方斑东风螺对低盐更为敏感。     

光因子对方斑东风螺胚胎和幼虫发育的影响

为研究光因子对方斑东风螺胚胎受精孵化过程的影响,实验采用析因实验设计法研究了光照强度、光质和光周期等不同光条件对方斑东风螺胚胎发育过程中受精率(FR)、孵化率(HR)和变态率(MR)的影响,通过回归模型,优化光条件,找到利于胚胎发育的最佳光质、光强和光周期。结果显示,不同光质条件下,光照强度和光周期一次效应、交互效应和二次效应均呈显著水平,三者存在互作效应。在绿光条件下,光照强度为13.70μmol/(m2·s),光照时间为15.54 h时,其FR、HR和MR达到最优值,其值分别为91.36%、88.64%和92.02%,优化后绿光促进东风螺胚胎发育效果最为明显,其次是红光和白光。在蓝光条件下,其光照强度和光周期任意组合水平下FR、HR和MR与其他光质比较均较低,且随着光照强度增加和光照时间延长,三项指标值下降越明显,因而表明蓝光对胚胎发育起到抑制作用。实验表明,合适的光照强度和光周期能与光质协同作用,可以提高方斑东风螺育苗效率和苗种品质。     

亚硝酸盐氮对方斑东风螺毒性的研究

用常规的生物毒性试验方法,分别在不同盐度和pH下进行了亚硝酸盐氮对壳高为0.5cm的方斑东风螺(Babyloniaareolata)的急性毒性试验。结果表明,盐度对亚硝酸盐氮的毒性有较大的影响,其24hLC50、48hLC50、72hLC50和96hLC50,在盐度28时均显著高于盐度18和23时,(P<0.05),盐度越高亚硝酸盐氮毒性越弱。其半致死浓度在pH8.5时显著高于pH6.5和7.5时,(P<0.05),较高pH值条件下亚硝酸盐氮的毒性较弱;pH为6.5和7.5时,其半致死浓度差异不显著(P>0.05),低的pH对亚硝酸盐氮毒性的影响不明显。     

南药组方对方斑东风螺病原性弧菌的抗菌作用研究

为探究南药组方对方斑东风螺病原性弧菌的抗菌作用,测定了组方对方斑东风螺内脏团内细菌总数、菌落构成、几种常见致病性弧菌细胞壁的通透性、菌悬液电导率的影响。试验结果显示,质量浓度为1/640的南药组方能减少方斑东风螺内脏团内细菌总数及弧菌数;组方处理的细菌胞外碱性磷酸酶含量增多,菌悬液电导率明显增大。表明一定质量浓度的南药组方可减少方斑东风螺内脏团内细菌总数和弧菌数,破坏细菌细胞壁和细胞膜的完整性,导致细胞膜通透性增加。     

恩诺沙星对卵形鲳鲹消化酶、免疫酶及抗氧化酶活力的影响

为探究采用恩诺沙星药浴方式对卵形鲳鲹生理酶活的影响,设置2个浸泡质量浓度处理组(5、10 mg/L),并以0 mg/L质量浓度组为对照组,在浸泡处理24 h后,对卵形鲳鲹肠、胃、肝、肾的消化酶、免疫酶、抗氧化酶等的活性进行检测。结果显示:采用低质量浓度(5 mg/L)恩诺沙星药浴可提高卵形鲳鲹肾组织中碱性磷酸酶(AKP)的活力,但高质量浓度(10 mg/L)则对AKP的活力有抑制作用,5 mg/L处理组[(5.01±2.06) U/g prot]显著高于10 mg/L处理组[(0.40±0.39) U/g prot](P0.05);肾组织中超氧化物歧化酶(SOD)的活力由对照组的(1.45±0.31) U/mg prot显著上升至10 mg/L处理组的(4.64±1.69) U/mg prot(P0.05);肾组织中丙二醛(MDA)的活力由对照组的(0.53±0.15) nmol/mg prot显著上升至10 mg/L处理组的(3.70±1.21) nmol/mg prot(P0.05);谷胱甘肽过氧化物酶(GST-Px)的活力在肾组织中对照组和5 mg/L处理组均显著低于10 mg/L处理组(P0.05)。研究表明,采用恩诺沙星溶液药浴,质量浓度在10 mg/L以下时不会对卵形鲳鲹造成不可逆的生理损伤,是一种较为安全高效的病害防治方法。     

方斑东风螺的培育及养成技术

方斑东风螺在广东俗称“花螺”，属腹足纲，新腹足目，蛾螺科。在我国主要分布在处于亚热带、热带的东南沿海地区，如福建、广东、广西、海南等。方斑东风螺以其鲜美的肉质、爽滑的口感、丰富的营养在市场上大受欢迎，方斑东风螺的养殖业在近年来发展迅猛，市场潜力巨大。笔者所在的东风螺养殖场近两年也取得不错的成绩，现将方斑东风螺的培育及养成技术略述如下。     

配合饲料中不同蛋白含量对方斑东风螺稚螺生长和体组成的影响

为探讨人工配合饲料中不同蛋白水平对方斑东风螺稚螺生长和体组成的影响。采用蛋白质含量分别是18.58%,24.30%,30.08%,36.44%,42.64%和48.86%的配合饲料进行了试验。试验水温(28.5±1.5)℃,海水盐度1.0178±0.0008,pH值7.9±0.5,试验期6周。结果表明:配合饲料各组中,当蛋白水平高于36.44%(IV组)时,方斑东风螺稚螺壳高和壳宽增长率以及增重率均显著高于18.58%～30.08%组;各组间成活率差异不显著(P0.05)。配合饲料中不同蛋白水平对方斑东风螺肉中水分、灰分和磷的含量均有显著的影响(P0.05),肉中蛋白含量各组间差异不显著(P0.05)。采用折线回归模型分析配合饲料中蛋白水平与增重率的变化关系,通过折线回归方程y1=5.573X-1.84(R2=0.922);y2=2.367X+135.33(R2=0.823)。可见,0.34～1.18 g方斑东风螺稚螺配合饲料中,适宜的蛋白质添加水平为42.78%。