鸡马立克氏病(MD)的特异性诊断 Ⅰ、使用已知阳性血清作免疫扩散试验诊断MD的研究

使用已知抗马立克氏病病毒(MDV)血清进行免疫扩散试验,共检查了1,933只鸡的羽髓材料,其中未感染MDV的健康鸡104只(全部阴性),实验感染MDV的鸡475只(469只阳性,占98.73％),火鸡疱疹病毒(HVT)免疫的鸡56只(全部阴性),实验感染鸡成髓细胞增生性白血病病毒(AMV)的鸡107只(全部阴性),实验感染鸡新城疫(ND)、传染性支气管炎(IB)和传染性喉气管炎(ILT)病毒的鸡各60只(全部阴性),非MD发病鸡场的鸡545只(19只阳性,占3.48％),MD发病鸡场的鸡466只(252只阳性,占54.08％)。在实验感染鸡中,MDV羽髓抗原的最早检出时间大约在感染后的第13～14天,最适检出时间大约在20～30天。临床耐过鸡的羽髓抗原检出率随时间的延长而降低。另外,把在非MD发病鸡场检出的羽髓抗原阳性鸡的抗凝全血接种于5日龄的鸡胚卵黄囊,接种后14天检查绒毛尿囊膜,在大多数接种胚中可见典型的病毒痘斑,说明羽髓抗原阳性鸡的血流中确实含有MDV;也就是说,用已知MDV阳性血清检查羽髓抗原来诊断MD的免疫扩散试验是特异而可靠的。     

纸膜免疫金银染色诊断马立克氏病的研究

本研究建立的纸膜免疫金银染色法(P-IGSS)诊断马立克氏病(MD),既可检测抗原,又可检测抗体.检测抗原的灵敏度为0.39μg/点,检测抗体的灵敏度为1.4μg/点.P-IGSS 和琼脂扩散试验(AGP)对抗体检出率分别为42.44%和37.78%,对羽髓抗原检出率分别为96.67%和90%.与9种鸡传染病阳性血清和3种鸡传染病抗原不发生交叉反应.     

纸膜免疫金银染色诊断鸡马立克氏病的研究

本研究建立了纸膜兔疫金银染色法(P—IGSS)诊断鸡马立克氏病(MD)。以定量滤纸为载体,既可检测抗原,又可检测抗体。检测抗原的灵敏度为0.39μg/点,检测抗体的灵敏度为1.4μg/点。450份鸡血清P—IGSS和琼脂扩散试验(AGP)检出率分别为42.44%和37.78%,30份接种MD病鸡羽髓抗原检出率分别为96.67%和90%。3次重复试验重复率达100%。2批金标抗体检测结果一致。与9种鸡传染病阳性血清和3种鸡传染病抗原不发生交叉反应。用本法3小时内可报告结果,而AGP需24—72小时,试验结果表明该方法用于MD诊断是可靠的。     

羽髓是一种家禽病毒病的抗体来源

羽髓是研究家禽疾病中便于利用的组织。本文使用接种过禽白血病病毒(ALV)RAV—1株的白来航鸡羽髓进行ELISA抗体试验。四只接种鸡各取3份羽髓和血清进行试验,发现羽髓中抗体水平与1:500稀释血清     

鸡大肝和大脾病的流行病学初步调查

对两个鸡场发病鸡群的病理剖检发现，病鸡和死亡鸡肝、脾异常肿大，为正常体积的３￣４倍，肝重为体重的１３．８３％、脾重为体重的１．８７％。病鸡临床上无特异症状。用鸡大肝和大脾病（ＢＬＳ）标准抗原和阳性血清通过琼脂扩散试验对早期发病鸡群进行调查，鸡场Ｉ血清抗体阳性检出率为３／１０，抗原阳性检出率为６／３９；鸡场未查出抗原。证实我国已存在ＢＬＳ病。     

鸡蛋和胎粪禽白血病病毒p27抗原检测试验

本试验选择某品种鸡的快羽系与慢羽系为试验群体,利用ELISA技术检测鸡蛋和胎粪中禽白血病病毒(ALV)p27抗原。试验结果显示:慢羽系鸡蛋中ALV p27抗原阳性率高于快羽系;检测重复鸡蛋数分别为1、2、3枚时,阳性鸡检出比例分别为2.5%、5.0%和6.0%,随着检测鸡蛋数的增加,检出阳性鸡的比例也逐渐增加,检测的准确性也逐渐增加;对慢羽系种蛋3个批次检测时,3批都检出阳性鸡的比例为7.5%,2批检出率为21.4%,1批检出率为39.3%,31.8%的慢羽系在3批中都呈阴性。雏鸡胎粪检测结果显示:慢羽系个体阳性率(5.2%)高于快羽系(1.45%),慢羽系家系后代阳性率(32.0%)高于快羽系(10.9%);当1个家系某批次中检出阳性雏鸡数≥3只时,93.4%的家系会在多批纯繁中都会检出阳性雏鸡。本试验证明了ALV感染鸡只的排毒呈现明显的间歇性,需要多次反复检测才能达到种群净化的目的。     

隐性白鸡快慢羽系及地方土鸡血液生化指标的测定

本实验测定了隐性白快羽系、慢羽系、三黄土鸡和文昌鸡四个品系的血液生化指标,结果表明:四个品系内最突出的是母鸡的血清钙含量均极显著高于公鸡(P<0.01);品系间除了隐性快羽系血清磷、钠、钾含量显著(P<0.05)、极显著(P<0.01)高于其他品系外,其他指标均差异不显著(P>0.05),其他三个品系之间各项指标无明显变化。     

鸡马立克氏病发病年龄与最佳检测法的试验

<正> 鸡马立克氏病(MD),是由B群疱疹病毒所引起的肿瘤性传染病。1985年,笔者对某鸡场有明显临床症状的MD病鸡群,从45日龄开始,分别采用羽囊琼扩检测和血清琼扩检测进行试验,观察了羽囊中沉淀抗原和血清中沉淀抗体的消长规律,得出不同日龄病鸡的最佳     

鸡大肝脾病的流行病学调查

应用琼脂扩散试验调查了我国部分地区鸡场及进口禽类ＢＬＳ的流行情况，检测３个省市２５个鸡场，有１４个出现ＢＬＳ抗体阳性，其中１６个种鸡场的９７２份血样，ＢＬＳ抗体检出率为１２．１％；９个商品代肉鸡场的６７４份血样，抗体阳性率为１．８％，三个发病鸡场通过临床观察、病理剖检及ＢＬＳ抗体、抗原检测，证实 国已存在ＢＬＳ病。检测美国、法国７批种鸡１７８份血样，检出率为７．９％；检测津巴布韦７８只驼鸟，未检出     

琼扩试验检测卵清羽髓血液中鸡白血病病毒gs抗原检出率及符合率的研究

本文应用琼脂扩散试验(AGP)对两组54和32只鸡的三种样品进行了鸡白血病病毒gs抗原的检测。两组卵清、羽髓和血液的检出率合计分别为50%、33.7%和19.8%。两组羽髓与血液的阳性符合率均为100%,而且羽髓还可以从血液阴性中分别检出阳性11.1%(5/45)和29.2%(7/24),羽髓阳性分别是血液的155.6%(14/9)和107.5%(15/8)。两组卵清与羽髓的阳性符合率分别为92.9%(13/14)和66.7%(10/15),而且卵清还可以从羽髓阴性中分别检出阳性20%(6/40)和70.6%(12/17),卵清阳性分别是羽髓的150%(21/14)和146.7%(22/15)。此外,还对卵清一次与三次冻融的符合情况进行了比较,阳性符合率分别为g4.1%(16/17)和95.5%(21/22)。结果是卵清敏感性高于羽髓,羽髓敏感性高于血液,卵清样品一次冻融即可。     

鸡新城疫琼脂扩散试验方法的研究

用新城疫病毒(NDV)La Sota株接种的鸡胚含毒尿囊液,经灭活、透析和浓缩后,研制出琼脂扩散(AGP)抗原。应用AGP和HI试验同步检测不同免疫状态的鸡血清样品977份。试验表明,HI抗体效价≥16的被检血清,AGP阳性率为98.5％(268/272);HI抗体效价=8的,AGP阳性率为79.3％(142/179);HI抗体效价≤4的526份血清,AGP试验均为阴性。抗原经2次冻融,或在4℃和-3℃保存10个月以上,其效价未见降低。AGP抗原可用于ND的免疫监测和流行病学调查。     

一例鸡马立克氏病与沙门氏菌病混合感染的实验室诊断

为确诊思南县某养殖专业合作社饲养的肉鸡发病死亡原因,采集病鸡羽髓、血样及病死鸡肝脏、脾脏进行细菌分离培养、相关病毒琼脂扩散试验和PCR检测。结果:肝脏组织中分离出沙门氏菌;羽髓琼脂扩散试验检测出马立克氏病抗原,血清琼脂扩散试验检测出马立克氏病抗体;肝脏、脾脏PCR检测出马立克氏病病毒核酸。结论:综合诊断为马立克氏病与沙门氏菌病混合感染。     

沈阳地区禽白血病血清流行病学调查

为了解沈阳地区不同品系鸡群禽白血病(AL)流行情况,于2015年7月份—2016年6月份采集了沈阳市5个县(区)28家规模化鸡场72个不同品种、不同代次、不同日龄鸡群的泄殖腔棉拭子1 896份、翅静脉血液4 656份,对采集的样品分别进行了禽白血病病毒(ALV)p27抗原和血清中禽白血病病毒J亚群(ALV-J)抗体的检测。结果表明:沈阳地区不同品种鸡群中存在不同程度的ALV-J亚群感染,平均阳性率为3.39%,p27抗原阳性率平均为5.70%;且肉鸡品种的J亚群抗体阳性率(4.50%)高于蛋鸡品种(2.05%),肉鸡品种的p27抗原阳性率(7.37%)高于蛋鸡品种(3.10%);产蛋初期的鸡群p27抗原阳性率(9.97%)和J亚群抗体阳性率(5.56%)高于其他生长阶段。     

鸡MD琼扩阳性率与肿瘤出现率之间关系的初步研究

对临诊怀疑为马立克氏病(MD)的32只不同日龄和品种的鸡,同时作血清和羽髓琼扩试验,并对所有患鸡进行内脏肿瘤检查。共检出琼扩阳性鸡27只(84.38％),单一血清阳性者6只,单一羽髓阳性者9只,血清和羽髓同时阳性者12只。检出肿瘤患鸡21只(65.63％),其中单一血清阳性者仅2只,单一羽髓阳性者8只,血清和羽髓同时阳者10只,而两者同时阴性者1只。6以单一血清阳性者中有2只发生肿瘤,9只羽髓阳性者中有8只发生肿瘤,12只血、羽双阳性者中有10只发生肿瘤,5只血、羽双阳性者中有1例发生肿瘤。初步结果表明,羽髓琼扩阳性和羽髓、血清双 阳性患鸡中MD肿瘤的发生率相对较高。     

应用BA-Dot-ELISA快速检验旋毛虫病的研究

以旋毛虫肌幼虫层析抗原及国产 BA 试剂建立了快速检验旋毛虫病的 BA-Dot-ELISA。本法采用全血、眼观判定.应用预先制成快诊膜,可在1小时内报告检验结果.BA-Dot-ELISA 检出人工感染猪血清抗体的时间(人工感染后第4天)早于 Dot-ELISA(感染后第7天)和PPA-ELISA(感染后第10天)、与猪囊虫、猪弓形体、猪瘟不发生交叉反应.初步证实了本法具有简、快、敏、特等优点,有助于低水平血清抗体旋毛虫病猪的检测,尤其适合于早期诊断,宰前检查和流行病学调查.     

鸡衣原体病的血清学调查

本调查检测了鲁、豫两省7个地区15个鸡场的552份血清样品,其中14个鸡场有衣原体感染,平均阳性检出率为12.86±9.42%。其中泰安某场阳性检出率最高达32.14%,各场间阳性检出率差异非常显著(P〈0.01);鸡品种间阳性检出率差异著(P〈0.05),其中海科蛋鸡阳性检出率最高为23.81%,蛋鸡与肉鸡阳性检出率无显著差异;本病阳性检出率与禽霍乱阳性检出率有相关性(r_s=0.565);并且两病混合感染率最高为18.31%。鸡衣原体病是由衣原科(Chlamydiaceae)衣原体属(Chlamydia)的鹦鹉衣原体(C.Psittaci)引起的一种人兽共患病。可感染近140种禽类。已发生于约60个国家和地区。我国也有部分地区发生本病,为了查明山东、河南两省本病的感染状况和流行趋势,我们于1989年,结合畜禽疫病调查,对驻两省7个地区部队的15个鸡场进行了血清流行病学调查。     

应用间接ELISA检测鸡病毒性关节炎抗体的研究

用本试验建立的抗鸡病毒性关节炎(AVA)抗体的间接 ELISA 方法检测了实验感染 AVA 病毒(AVAV)的鸡血清、自然感染鸡血清及 IBD,ND 和 MD 病鸡血清,证明其具有较高特异性.通过对鸡实验感染 AVAV 后不同时期的检测表明.间接 ELISA 可在感染后6天检出血清特异性抗体,且不同时期检出率均高于 AGID 法,并可在2小时内报告试验结果.适用于 AVAV 抗体的常规检测.用该法对来自南京、海宁、长春等地鸡场的162份血清进行检测,阳性率为10.5%.     

应用微量血凝抑制试验和气管环中和试验检测传染性支气管炎抗体的研究

应用家兔Ａ型魏氏梭菌培养液处理的鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）作血凝抑制抗原，建立了血凝抑制（ＨＩ）试验方法，监测ＩＢ疫苗的免疫鸡血清ＨＩ效价，结果证明与气管环中和试验测得的中和抗体效价呈正相关，ｒ＝０．５２５，两组抗体效价ｔ检验差异极不显著（Ｐ＜０．０１）。用其监测卵黄抗体、灭活的血清抗体以及用高岭土处理的血清抗体，结果与相应未处理的血清抗体效价一致，用以对江苏、山东两省的７个未作ＩＢ疫苗免疫的鸡场２０个鸡群进行流行病学调查，结果有１８个鸡群ＴＢ阳性，阳性率达８３％。     

GnRH-A免疫对兔去势效果的实验研究

探讨促性腺激素释放激素类似物(GnRH-A)对动物免疫去势的效果和作用机理.用自制的GnRH-A抗原乳剂在30只兔(EG-Ⅰ与EG-Ⅱ组)的颈背部皮下分2～3点注射1.0 mL(100 μg·mL-1)GnRH-A抗原,EG-Ⅱ组3周后加强免疫1次.测定睾丸长度和质量,体质量变化,GnRH抗体效价与血清睾酮浓度.制备的抗原无菌性、安全性和物理性状良好,EG-Ⅱ组睾丸长度与EG-Ⅰ组差异极显著(P<0.01);EG-Ⅱ组的抗体水平也明显高于EG-Ⅰ组;免疫注射后2个试验组与对照组的血清睾酮浓度差异逐渐增加,102 d时EG-Ⅱ组血清睾酮浓度极显著低于对照组(P<0.01),且第28天后EG-Ⅱ组显著低于EG-Ⅰ组(P<0.05);EG-Ⅱ组雄兔的体质量和平均日增质量均最大,显著高于EG-Ⅰ组和对照组(P<0.05).GnRH-A免疫家兔对睾丸发育、血清GnRH抗体效价和睾酮浓度具有显著的影响,加强免疫效果更理想.     

Dot-PAA-ELISA快速检测猪丹毒抗体方法的建立与应用

以猪丹毒CD3004(1a型)和C43-12(2型)菌株为抗原提取菌株,EDTA渗透法提取的抗原作为膜载抗原,建立了Dot-PAA-ELISA检测猪丹毒血清抗体方法,经研究确定了Dot-PAA-ELISA的最佳工作条件.试验制备的诊断膜片特异性强,不与猪瘟、猪伪狂犬病、猪肺疫、猪链球菌病、猪大肠杆菌病、仔猪副伤寒、猪布氏杆菌病、猪衣原体病的阳性血清发生交叉反应;灵敏度高,能够最低检出猪血清中含2.61 × 10-9g的猪IgG抗体;膜片保存期长,在室温可保存4个月,4℃可保存7个月其检测活性不变.用该方法检测了仔猪免疫后抗体变化,并通过猪丹毒三型混合强毒攻毒试验确定了猪能抗强毒攻击的抗体临界保护值为1:32.对336份血清进行猪丹毒抗体检测,阳性检出率为96.13%.试验结果表明,本试验方法操作简便、快速准确、结果可存档、重复性和稳定性好,所用试剂材料均可做到标准化,适合基层检疫单位和养猪企业用于猪群免疫监测和猪丹毒流行病学调查.