手掌参组织培养中外植体褐化的影响因素研究

为降低手掌参组培过程中外植体的褐化程度,从表面消毒剂和消毒时间、活性炭和VC的使用、暗培养、光照强度、转瓶间隔时间等方面对手掌参外植体的抗褐化方法进行了探索,以期为建立高效稳定的手掌参再生体系提供依据。结果表明:手掌参的芽部用75%酒精表面消毒20s→无菌水冲洗2次→用0.1%升汞消毒处理10min→无菌水冲洗6次→接种于MS+KT 0.5mg/L+ZT 0.5mg/L+NAA 1.0mg/L+AC 1.0g/L+VC2.0mg/L培养基中→暗培养5～10d(3d转瓶1次)→2 000lx光照条件下培养,其生长良好,褐化程度大大减轻,褐化率由93.33%下降为48.28%。     

苹果组培外植体消毒及培养基优化试验研究

本文主要研究苹果外植体的消毒方法,以及对诱导培养基的优化。结果表明:酒精消毒时间为15 s,升汞消毒时间为8 min时,外植体的污染率、褐化率最低,成活率最高,最适宜的茎尖培养基为2/3MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+20 g/L蔗糖+琼脂6 g/L, p H5.8。     

卫矛属植物‘银翠’离体快繁技术研究

以3年生卫矛属植物新品种‘银翠'鳞芽和带腋芽茎段为材料,研究不同外植体消毒方式、基本培养基和外源激素配比、取材时间对其诱导培养的影响。结果表明:以3月下旬采集的带腋芽茎段为最适宜材料,消毒方式用0.1%次氯酸钠溶液浸泡5~6 min,75%酒精30 s,0.1%升汞一次8 min消毒,污染率最低,且无褐化现象产生。最佳诱导培养基为1/2MS+KT1.0+NAA0.2,诱导率最高达93%。     

铁线莲粉香槟的组培快繁研究初报

对铁线莲粉香槟愈伤组织的诱导试验结果表明,茎段较其他外植体灭菌消毒效果好,0.1%的升汞消毒时间以15 min较为合适,诱导培养基以1/2MS+6-BA 0.5 mg·L-1+NAA 2.5 mg·L-1最佳;同时培养过程中,较强的光照有利于愈伤组织的生长,光照不足时,愈伤组织易褐化或白化。     

茶条槭组织培养中防止外植体褐化的初步研究

[目的] 探索克服茶条槭在组培过程中外植体褐化的最佳方法。[方法] 以茶条槭当年生萌条为试材, 研究不同外植体类型、不同消毒方式、不同取材时间和不同抗褐化剂对茶条槭初代培养过程中外植体褐化的影响。[结果] 取当年生萌条, 其茎段比茎尖褐化严重；先将外植体用1000mg/LVC溶液处理,再用浓度0.1%升汞消毒为最佳消毒方法；外植体的取材时间在5月，茶条槭的污染率、褐变率、死亡率相对较低；在一定浓度范围内, PVP200mg/L与AC2g/L配合使用防褐化效果较好；初代培养时，先进行弱光培养一周，再转入光照培养有利于抑制褐变的发生。 [结论]选用幼嫩的顶芽为外植体, 浓度0.1%的升汞为消毒剂, MS为基本培养基，添加PVP200mg/L和活性炭2g/L进行初代培养, 防止其褐化的效果最佳。     

百蕊草愈伤组织离体培养条件的优化

以百蕊草的幼嫩茎及叶片为外植体,探讨百蕊草外植体的最佳消毒时间、离体培养的培养基适宜配方、p H值以及培养温度。结果表明,最佳消毒时间为酒精消毒11 s后升汞消毒8 min;愈伤组织诱导增殖的最佳培养基为MS+1 mg·L-1 6-BA+0.15mg·L-1NAA+0.1 mg·L-12,4-D;最适p H值为5.8~6.0;最佳培养温度为22~26℃。     

多花紫藤组织培养体系优化研究

以多花紫藤"开东阁"的枝条为外植体,研究不同培养基和不同激素水平对组织培养分化出的植株生长的影响,筛选出适宜繁育多花紫藤的培养基,并进行移栽试验。结果表明,外植体的消毒以75%酒精浸泡30 s和0.1%升汞消毒8 min为宜,初代培养的适宜培养基为WPM+2.0~3.0 mg·L-16-BA,继代培养的适宜培养基为WPM+1.0~2.0 mg·L-16-BA,增值倍数达2.0~2.5,生根适宜培养基为1/2WPM+2.0 mg·L-1IBA,生根率达72%。     

菊叶薯蓣组培快繁中常见的几个问题及对策

试验以菊叶薯蓣带腋芽茎段为外植体建立了其组织培养再生体系,并对培养过程中消毒、培养基优化等问题进行了研究,结果表明:生根培养基中添加少量活性炭可以有效防止褐化,促进芽苗生根。75%酒精+0.1%升汞结合使用消毒效果较好,在其大规模生产中,考虑单独使用0.1%升汞,白砂糖代替蔗糖可降低生产成本,但不可以用自来水代替蒸馏水。为菊叶薯蓣组培工厂化提供了一定理论依据。     

茶条槭组织培养防止外植体褐化的方法研究

为探索克服茶条槭在组培过程中外植体褐化的最佳方法,以茶条槭当年生萌条为试材,进行了不同外植体类型、不同消毒方式、不同取材时间和不同抗褐化剂对茶条槭初代培养过程中外植体褐化的影响试验。结果表明,采用当年生萌条进行组织培养,其茎段较茎尖褐化严重;先将外植体用1 000 mg/L VC溶液处理30 min,再用0.1%升汞溶液消毒为最佳消毒方法;外植体取材时间在5月,其组培污染率、褐变率、死亡率相对较低;在一定浓度范围内,聚乙烯吡咯烷酮(PVP)200 mg/L与活性炭(AC)2 g/L配合使用防褐化效果较好;初代培养时,先弱光培养7 d再转入光照培养,有利于抑制褐变的发生。由此说明,选用幼嫩的顶芽为外植体、浓度0.1%升汞溶液为消毒剂、MS为基本培养基、添加聚乙烯吡咯烷酮200 mg/L和活性炭2 g/L进行初代培养,防止其褐化的效果最佳。     

影响丹尼斯凤梨组培快繁的主要因素探讨

对影响丹尼斯凤梨组培快繁的主要因素包括植株不同部位采集外植体和不同物候期采集外植体、外植体的不同消毒方法、诱导增殖和生根培养基配方、培养条件等的探讨结果表明:采用开花后新长出5片叶的侧芽作外植体,用酒精-升汞消毒法消毒,外植体的成活率高达60%;采用MS 6-BA3mg/L 2ip0.5mg/L IBA0.1mg/L培养基、暗培养10天后,在光照强度1500lx、光照时间由每天8h渐增至14h、培养温度为(28±2)℃条件下培养,增殖倍数达3.1倍;以1/2MS NAA1.0mg/L IBA1.0mg/L IAA1.0mg/L培养基培养的生根效果最好,单株根数达5.5条。     

降低茶树组织培养中外植体褐化程度的研究

为降低茶树组培过程中外植体褐化程度,从外植体表面消毒时间、切割方式、转瓶间隔时间、培养基类型、激素配比、抗褐化剂和吸附剂的使用方面进行了综合试验.结果表明:表面消毒最适时间为7～8 min;接种外植体带腋芽叶片保留2/5,3 d转瓶1次降低褐化的效果较好; 经此处理的外植体培养在1/2MS +BA 2 mg/L+NAA 0.1 mg/L+Vc 1.0 g/L+AC 1.0 g/L的培养基中,生长良好,褐化率由86 %下降为41 %.     

‘凤丹’牡丹组织培养研究

以‘凤丹’牡丹芽为材料,对其外植体消毒、褐化防治、组培苗扩繁和生根技术进行研究。结果表明:用75% 酒精消毒30 s,0.1% 升汞消毒8 min消毒效果最佳,外植体的污染率和成活率分别为32.31%和64.32%;其最适初代诱导和继代增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1和MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1+PIC (毒莠定,Picloram) 1.0 mg·L^-1,增殖系数为4.84;生根培养基为1/2MS+CaCl₂ 220 mg·L^-1+IBA 3.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1,生根率为74.30%;低温结合3 mg·L^-1硝酸银培养可使褐化率降至29.15%。     

彩叶凤梨离体培养中外植体消毒及防止褐化的研究

[目的]研究彩叶凤梨离体培养过程中外植体消毒及褐化的防止措施。[方法]以彩叶凤梨幼苗茎段作为外植体材料,研究其消毒和褐化防止问题。[结果]减少培养基中无机盐浓度,外植体选用0.1%升汞溶液消毒10 min,并在MS诱导培养基中添加200 mg/L的抗坏血酸,能够有效防止褐化,而且不影响愈伤组织的进一步分化。[结论]研究结果为彩叶凤梨离体培养奠定基础。     

大花蕙兰原球茎诱导培养影响因素及褐化防治的研究

[目的]研究大花蕙兰茎尖外植体原球茎诱导及增殖培养、褐化污染的影响因素。[方法]以大花蕙兰茎尖作为外植体,研究无菌系建立、诱导培养的灭菌方法与褐化防治、原球茎诱导培养初始培养基的筛选、原球茎增殖培养的影响因素。[结果]结果表明:解决茎尖内生菌污染及褐化严重的问题,两段式灭菌(75%酒精30 s+0.1%升汞10 min+剥去幼叶+0.05%升汞5 min)优于单一式的灭菌;原球茎诱导培养基为1/2MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA;原球茎增殖培养基为1/2MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+2.0 g/L活性炭+10%马铃薯。[结论]该研究可为大花蕙兰的茎尖快速繁殖及工厂化生产提供技术依据。     

'冬美人'愈伤组织诱导研究

以'冬美人'(Pachyveria pachyphytoides Walth)的外植体进行愈伤组织诱导,从不同外植体、消毒方式、激素浓度、光源等方面研究了'冬美人'外植体在诱导愈伤组织过程中适宜的培养条件与环境因素.结果表明,'冬美人'愈伤组织诱导最适宜的外植体为叶片;在消毒方式上,采用75％酒精中浸泡5s,0.1％HgCl2溶液浸泡10s,1.5％抗坏血酸溶液浸泡10s,可以大幅度减轻外植体褐化的程度,并且污染率也较低;不同类型光源,以日光灯培养效果最好,褐化程度也相对较轻;在激素配比上,最佳愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA1.5mg/L+NAA1.0mg/L,诱导率为64％;在培养基中加入一定量的活性炭,可以少量减轻外植体的褐化程度.     

香港四照花外植体的抗褐化处理与诱导培养

以香港四照花Dendrobenthamia hongkongensis嫩叶、茎段和带芽茎段为外植体,研究外植体类型、消毒时间、基本培养基、预处理方法、抗褐化剂种类及质量浓度对香港四照花褐化的影响以及6-苄基腺膘呤（6-BA）、萘乙酸（NAA）和2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）对3种外植体诱导培养的影响。结果表明:香港四照花外植体的最佳消毒时间为1.0 g·L-1氯化汞消毒5 min;最适基本培养基为木本植物用培养基（woody plant medium,WPM）;用1.0 g·L-1聚乙烯吡咯烷酮（PVP）浸泡3.0 h,3种外植体褐化率明显下降;1.0 g·L-1柠檬酸（CA）是嫩叶的最佳抗褐化剂,褐化率为27.4%;2.0 g·L-1 PVP为茎段和带芽茎段的最佳抗褐化剂,其褐化率分别为13.3%和16.7%;嫩芽的最佳愈伤组织诱导培养基为WPM+1.0 mg·L-16-BA+0.2 mg·L-1NAA+0.1 mg·L-12,4-D;茎段和带芽茎段最佳诱导培养基均为WPM+2.0 mg·L-16-BA+0.5 mg·L-1 2,4-D。     

白羊草成熟种子组织培养影响因素的研究

以白羊草成熟种子为外植体,研究不同表面消毒方法、外界条件及继代对愈伤组织诱导的差异。结果表明:外植体选用酒精浸泡30 s、0.1%升汞处理15 min为理想消毒方法;MSB+2.0 mg/L 2,4-D结合完全黑暗培养,愈伤诱导率达到86.7%;经继代培养基MSB+1.0mg/L 2,4-D继代后,分化率明显提高。     

常绿萱草组培快繁技术研究

以常绿萱草茎尖为外植体,研究了不同消毒方式、培养基配方对于外植体生长的影响,并探索了最适于愈伤组织形成、不定芽增殖和生根的培养基配方。结果表明:在无菌条件下,用75%酒精消毒30S,再转入0.1%升汞溶液浸泡8分钟消毒效果最好;有利于外植体产生愈伤组织的培养基配方是MS+2.0mg/LBA+0.2mg/LNAA;适合愈伤组织诱导生芽培养基配方是MS+1.0mg/L2.4-D+1.0mg/LKT;适合幼苗生根的培养基配方是MS+NAA0.5mg/L+活性炭0.2mg/L。     

克瑞森无核葡萄不同器官的离体培养

以克瑞森无核葡萄不同器官为外植体,通过离体培养,研究了0.1%升汞不同浸泡时间处理葡萄带芽茎段外植体的消毒效果,不同抗褐变剂处理葡萄叶片外植体的效果,并筛选了适合葡萄带芽茎段诱导侧芽和不定根以及分别适合葡萄叶片和卷须诱导愈伤组织的培养基。结果表明:适宜克瑞森无核葡萄带芽茎段外植体的0.1%升汞浸泡时间为6 min;适宜其叶片外植体的抗褐变剂是聚乙烯吡咯烷酮(PVP);适宜其带芽茎段外植体侧芽萌发和不定根诱导的培养基是B5+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA;适宜其叶片和卷须外植体诱导愈伤组织产生的培养基为在B5+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂+1.5 g/L活性炭+0.5 mg/L 6-B基础上分别添加1.0、2.0 mg/L 2,4-D。     

淮山组织培养抑制褐变的研究

以淮山品种桂淮5号为供试材料,研究不同外植体、培养条件、培养基质以及抗褐化剂等对淮山褐变的影响。结果表明,茎段外植体的褐变程度较轻,薯块外植体的褐变程度严重;温度和光照对褐变均有影响;液体培养的褐变程度较固体培养轻;在培养基中添加1.0 g/L活性炭,能够有效抑制外植体的褐化,使褐化率降为70.37%,培养物能正常生长发育。