牛血清的研究进展

一、引言1.牛血清的研究进展。随着现代生物技术如基因工程技术、细胞工程技术、酶工程技术等广泛在生物制品的生产、研究中应用,对细胞培养过程中培养基的质量要求越来越高,目前培养基中的主要成分中,动物血清对细胞的生长繁殖发挥着重要的的作用。在动物血清中,牛血清的应用又是最为广泛的,所以牛血清是医药生物技术产品中重要的原材     

应用MTT比色法评价不同牛血清促细胞生长作用

细胞培养过程中血清的选择对细胞的促生长增殖具有重要作用。本试验分别以商品新生牛血清、自制新生牛血清、自制成年牛血清培养成纤维细胞、骨髓瘤细胞、杂交瘤细胞,通过MTT比色法来判断细胞的增殖能力,进而对血清质量作出评价。结果表明,自制新生牛血清具有良好的促细胞生长作用(相对生长率＞0.96),并且3次试验结果比较差异不显著(P＞0.05),具有较好的重复性;而成年牛血清和无血清空白对照组促细胞作用不明显。因此应用MTT比色法能够评价血清质量。     

牛血清中蛋白组分初步分析及其对细胞培养的影响

为探讨牛血清中蛋白组分对细胞培养的影响,应用凝胶过滤层析对不同牛血清进行初步组分分析,并应用MTT比色法衡量不同牛血清的促细胞生长作用.结果表明,蛋白组分大小相对较为一致的新生牛血清、商品血清1、2、5(一个波峰)与蛋白组分差异较大的成年牛血清、商品血清3、4(两个或者两个以上波峰)的促细胞生长作用相比较差异显著(P相似文献   

应用MTT比色法评价不同牛血清促细胞生长作用

细胞培养过程中血清的选择对细胞的促生长增殖具有重要作用。本试验分别以商品新生牛血清、自制新生牛血清、自制成年牛血清培养成纤维细胞、骨髓瘤细胞、杂交瘤细胞，通过MTT比色法来判断细胞的增殖能力，进而对血清质量作出评价。结果表明，自制新生牛血清具有良好的促细胞生长作用(相对生长率＞0.96)，并且3次试验结果比较差异不显著(P＞0.05)，具有较好的重复性；而成年牛血清和无血清空白对照组促细胞作用不明显。因此应用MTT比色法能够评价血清质量。     

几种动物血清作为CEF培养天然培养基的比较研究

测试了６种不同动物血清作为鸡胚成纤维细胞（ＣｈｉｃｋｅｎＥｍｂｒｙｏＦｉｂｒｏｂｌａｓｔＣＥＦ）培养天然培养基的效果。其结果为：所试各血清对ＣＥＦ均具有促细胞贴壁作用。胎牛血清、鸡血清、兔血清促细胞生长作用较强，２４ｈ可使ＣＥＦ长满单层；胎牛血清支持细胞生存期最长（２０ｄ），其次是成牛血清和山羊血清（１７ｄ）。     

新生牛血清促细胞生长活性检测方法的建立与应用

牛血清是医药生物技术产品中重要的原辅材料之一,做好牛血清的质量控制是提高生物制品质量的重要环节。本研究通过应用PK15、BHK21和ST三种兽用生物制品研制中常用的细胞作为载体,选用国内同等价位5个不同厂家生产的新生牛血清作为比较对象,采用细胞倍增时间测定法、细胞克隆形成率测定法、细胞三次连续传代培养法、MTT比色法和微量终点稀释法五种血清质量鉴定的方法进行比较,检测新生牛血清的促细胞生长活性,最终确定了MTT比色法作为便捷高效快速筛选新生牛血清的检测方法。     

牛血清蛋白质多态性检查方法

牛血清蛋白质多态性检查方法中国奶牛协会血型鉴定中心（天津３００２２１）王津原，李明清，黄华祥关于牛血型鉴定的应用情况、检查血型用标准抗血清的制备及国际标准检验、牛血清检查的方法，我们在《牛血型鉴定方法及其应用》（《中国奶牛》１９９４年第４期）中已作了...     

2012年刚察县春季口蹄疫免疫效果监测报告

口蹄疫免疫效果监测,是制定科学免疫程序,进一步控制牲畜口蹄疫发生的重要基础工作和基本依据。为了进一步掌握刚察县口蹄疫的免疫效果,为制定切实可行的免疫程序提供科学依据,有效预防和控制重大动物疫病的发生,根据青海省动物疫病预防控制中心制定的《2012年青海省主要动物疫病免疫效果监测实施方案》,我们于2012年5月对刚察县吉尔孟乡、泉吉乡等五个乡(镇)的牛羊口蹄疫抗体进行了监测,现将监测情况报告如下:1监测地区全县五个乡(镇)的30个养殖户2监测时间2012年5月3监测数量吉尔孟乡牛血清22份、羊血清26份;泉吉乡牛血清羊血清各25份;伊克乌兰乡牛羊血清各25份;哈尔盖镇牛羊血清各25份;沙柳河镇牛血清27份、羊血清30份;全县合计牛血清124份,羊血清131份。     

进境牛血清及相关制品的风险分析及管理模式探讨

生物医药的研发会用到牛血清。由于牛血清及其制品存在携带病毒的风险,因此这些牛血清及其制品应得到有效的管理。本文分析了进境牛血清及其生物制品的危害因子,并提出防范措施,以推动对进境牛血清及其制品的后续监管工作。     

衣原体单克隆抗体在牛羊血清诊断上的应用

采用淋巴细胞亲交瘤技术，研制出的抗衣原体单克隆抗体，应用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）方法，对本地区所采集的１２８份羊血清、９０份牛血清进行检测，结果，羊血清阳性检出率为２５．８％，牛血清阳性检出率为３２．２％，选择５０份羊血清、５０份牛血清用已建立的检测衣原体抗体ＥＬＩＳＡ与间接血凝试验（ＩＨＡ）进行比较，牛血清ＥＬＩＳＡ阳性检出率为３２．０％，ＩＨＡ为２４．０％，ＥＬＩＳＡ比ＩＨＡ试验高出８个百分点；羊血清ＥＬＩＳＡ阳性检出率为２６．０％，ＩＨＡ为２２．０％，ＥＬＩＳＡ比ＩＨＡ高出４个百分点。     

血清淀粉酶与乳成份的相关分析

本文对113头正在泌乳期的西门塔尔牛血清中淀粉酶含量进行了测定。并对乳成份(乳脂、乳蛋白、乳糖和水份)进行了分析。对血清中淀粉酶与乳成份之间的关系进行相关分析。相关分析结果:血清淀粉酶与乳成份相关均不显著。     

60Coγ射线辐照的犊牛血清对细胞培养及病毒增殖的影响

现代生物技术包括基因工程、细胞工程、酶工程和发酵工程,这些技术的发展几乎都与细胞培养有密切的关系。这些技术几乎都是以细胞培养作为载体而发展起来的,特别是在生物医药领域,细胞培养更具有特殊的作用,更是起到了不可替代的基础性作用。犊牛血清是细胞培养中最重要的培养基,它具有促进细胞增殖和诱导细胞分化等生物学功能,犊牛血清中的外源病毒会影响到生物制品的质量与     

兽用生物制品生产用牛血清质量标准研究——牛血清对Sp2/0细胞增殖试验研究

为制定兽用生物制品生产用牛血清对Sp2/0细胞增殖试验的质量标准,将处于对数生长期的Sp2/0细胞分散,配制成50万/mL细胞悬液,用含10%不同牛血清的MEM营养液,在96孔细胞培养板上作对倍稀释,在5%CO2培养箱37℃培养48 h,计数每种血清对Sp2/0细胞的绝对克隆形成率。结果表明,胎牛血清对Sp2/0细胞的绝对克隆形成率为20%-26%,犊牛血清对Sp2/0细胞的绝对克隆形成率为12%-18%。以胎牛血清作为标准参考血清计算不同牛血清对Sp2/0细胞的相对克隆形成率,3批胎牛血清的相对克隆形成率均在80%以上,6批有效期之内的新生牛血清的相对克隆形成率为50%左右。因此,将兽用生物制品生产用胎牛血清对Sp2/0细胞增殖试验的质量标准规定为对标准血清相对克隆形成率不低于80%;新生犊牛血清对Sp2/0细胞增殖试验的质量标准规定为对标准血清相对克隆形成率不低于50%。     

氦氖激光对牛血清中IgG含量影响的研究

氦氖激光对牛血清中ＩｇＧ含量影响的研究王金宝，钟振燕，毕可东，杨品钟，李文烈，任慧英，孙月平，吕永燕，王世成（莱阳农学院动物科学系山东２６５２００）氦氖激光作为一种物理疗法已广泛应用于人类医学及动物医学的研究及临床实践，它可治疗外科炎症￣［１，２］、...     

新生牛血清在动物血清制备中的质量管理

动物血清是医药生物技术产品的重要原料,细胞培养,疫苗制备的天然培养基,全面保障提升动物血清质量水平至关重要。本文从新生牛血清质量的极端重要性,质量管理存在的问题,全面保障提升质量的对策措施方面做了详细阐述。提出质量管理必须坚持以人为中心,以用户满意为目标,树立全面的质量概念,实施全过程、全员参加的质量管理,建立健全质量保证体系和质量控制标准,实现管理现代化。对做好动物血清制备的全面质量管理,稳定提高动物血清产品质量水平,发展壮大企业核心竞争力有所启示。     

发情牛血清对绵羊卵母细胞体外成熟及孤雌胚发育的影响

在动物卵母细胞体外成熟及胚胎体外培养体系中添加一定浓度的发情牛血清可能提高卵母细胞的成熟率及胚胎的发育率。本研究以屠宰场卵巢来源的绵羊卵母细胞为试验材料,探讨了发情牛血清对绵羊卵母细胞体外成熟及孤雌胚发育的影响。结果表明,成熟液中添加10%第1天的发情牛血清能显著提高绵羊卵母细胞的体外成熟率及孤雌胚卵裂率(P＜0.05);孤雌胚体外培养72 h后,向培养液中添加10% 第7天的发情牛血清能显著提高绵羊孤雌胚的桑囊胚率(P＜0.05)。结果表明,发情牛血清能够促进绵羊卵母细胞的体外成熟率及孤雌胚发育率。     

我国部分地区牛羊弓形虫血清流行病学调查

为了解我国牛羊弓形虫病流行情况,应用间接血凝试验（IHA）对河南、山东、山西、内蒙古、云南、贵州6省区151份牛血清、50份奶样、490份羊血清进行了弓形虫病血清流行病学调查。结果显示：151份被检牛血清和50份牛奶样品,弓形虫抗体均为阴性。490份羊血清弓形虫抗体总阳性率5.71％,其中母羊、公羊血清阳性率分别为4.03％和9.79％;山羊、绵羊、杂交羊血清阳性率分别为6.58％、4.81％和5.13％;阳性率最高的为公山羊（13.2％）,最低的为母绵羊（2.96％）。28份阳性羊血清中,75％的抗体滴度为1：64,25％的抗体滴度为1：256。1岁后的羊,随年龄增长,血清阳性率升高。     

衣原体单克隆抗体在规模化牛羊场相关抗体的检测中的应用

采用淋巴细胞杂交瘤技术,研制出的抗衣原体单克隆抗体(McAb),应用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,对本地区所采的1361份牛血清,698份羊血清进行检测,结果:牛血清阳性检出率为9.18%,羊为22.06%。选择牛羊血清各50份用已建立的检测衣原体抗体ELISA方法与传统的间接血凝试验(IHA)进行比较,其敏感性高。牛血清ELISA阳性检出率为32%,IHA为24%,ELISA比IHA试验高出8个百分点。羊血清ELISA阳性检出率为26%,IHA为22%,前者比IHA高出4个百分点。     

我国A群牛轮状病毒感染的血清流行病学调查

为调查A群牛轮状病毒(BRV)在我国不同地区牛群中的感染和流行情况,本研究采用间接ELISA检测2005年～2006年期间在我国12个不同地区收集的1760份牛血清中抗A群BRV抗体。结果显示,其强阳性血清225份(12.8%);中等阳性血清1240份(70.4%);弱阳性血清279份(15.9%);阴性血清16份(1%)。总抗体阳性率高达99%。不同地区强阳性、中等阳性及弱阳性血清所占比例有所不同。结果表明,A群BRV在我国牛群中的感染和流行不但非常广泛,而且极为严重。本研究对我国BRV感染进行了较大规模的血清流行病学调查,其结果可为我国犊BRV腹泻疾病的防制提供重要的依据。     

胎牛血清中牛病毒性腹泻病毒2型毒株分离及脱脂奶粉中抗体的检测

本研究旨在对进口胎牛血清中的牛病毒性腹泻病毒（BVDV）进行分离及鉴定。利用BVDV抗原和抗体检测试剂盒检测,提取胎牛血清中的病毒RNA,用5'-UTR巢式PCR进行扩增,PCR扩增产物连接pMD19-T进行测序分析。胎牛血清样品接种MDBK细胞,进行细胞传代培养,通过细胞分离培养、直接免疫荧光抗体检测对实验室进口胎牛血清样品进行病毒分离及鉴定,应用DNAStar对BVDV 5'-UTR、N^pro与GenBank中公布的瘟病毒参考株进行多序列比对,采用Mega 6.0进行遗传进化分析。同时通过包被脱脂奶粉进行间接ELISA检测其中的BVDV抗体。结果显示,胎牛血清中BVDV抗原和抗体均为阳性,并且从胎牛血清中成功分离到一株新的牛源BVDV,命名为BVDV-GC株,该病毒株在MDBK细胞上进行增殖培养时未能引起细胞病变;5'-UTR与N^pro PCR扩增为阳性,扩增产物大小均与预期相符;直接免疫荧光检测荧光信号为阳性;病毒滴度为10^-3.6TCID₅₀/0.1 mL;遗传进化分析表明,该分离株与USMARC-60779（BVDV-2）株有较近的亲缘关系,同属于BVDV-2型毒株;通过包被脱脂奶粉和商品化的ELISA试剂盒进行检测,结果表明脱脂奶粉中存在BVDV抗体。本研究从进口胎牛血清中分离出1株BVDV-2型非致细胞病变病毒,从脱脂奶粉中检测到BVDV抗体,表明进口胎牛血清和脱脂奶粉中都存在BVDV抗原和抗体污染,本研究为后续试验分析提供参考。