苏云金芽孢杆菌对甜菜夜蛾幼虫毒力的生物测定方法

甜菜夜蛾的室内人工饲养及不同感染因素对生物测定结果的影响研究表明,用人工半合成饲料在室内可以大量饲养甜菜夜蛾,其生长发育历期、化蛹率、羽化率、雌雄性比和产卵均表现正常。感染时间、幼虫日龄和感染温度对生物测定结果有一定影响,随着感染时间（３、５、７天）的延长,生物测定中致死中浓度ＬＣ５０显著降低,测定结果的重复性增强;而随着感染幼虫日龄（１、２、３天）的升高,ＬＣ５０有显著升高,且测定结果的重复性降低,依次为３２．１、６４．９、１７１．１μｇ／ｍｌ;随着感染温度（２２、２５、２８℃）的升高,ＬＣ５０有较显著降低;饲料的存放时间（４～８天）对生物测定的结果只有轻微影响。     

虫酰肼对苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒的增效作用

研究了以甜菜夜蛾为靶标害虫时,昆虫生长调节剂虫酰肼对苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcNPV)的增效作用.结果表明:虫酰肼在作用于甜菜夜蛾时对AcNPV有显著增效作用,不仅可提高杀虫毒力,而且也能提高杀虫速度.作用于3龄和4龄幼虫时,6.67 mg/L虫酰肼对AcNPV的增效比分别是1.31和3.62,使害虫因表现感染病毒症状而死亡的LT50(致死中时)分别缩短10.8%和6.5%,使害虫因病毒和虫酰肼作用而死亡的LT50分别缩短25%和20.4%.虫酰肼和病毒协同作用还显著抑制了幼虫的生长发育,在协同作用1天后,幼虫体重即显著低于单用病毒或对照,并且随着作用时间的延长,协同作用组幼虫体重与病毒单剂组及对照组的差异越来越大.但6.67mg/L虫酰肼和2.7×105PIB/mL AcNPV协同作用于幼虫期时,其对存活幼虫发育为成虫后的繁殖力无影响,成虫产卵量、交配率、卵孵化率以及卵孵化幼虫数等均与病毒单剂及虫酰肼单剂无显著差异,也与对照无显著差异.     

甜菜夜蛾核型多角体病毒青岛分离株SeMNPV-QD的毒力测定

为评价一株新的甜菜夜蛾核型多角体病毒（青岛分离株SeMNPV-QD）在害虫生物防治中的应用潜力,本文以甜菜夜蛾核型多角体病毒青岛株SeMNPV-QD与美国株SeMNPV-US1为材料,分别测定了病毒对甜菜夜蛾细胞系的感染、对甜菜夜蛾幼虫的室内生物活性以及田间防治效果。研究结果表明,SeMNPV-QD与SeMNPV-US1对甜菜夜蛾细胞系Se-3的感染率分别为92.34%和93.65%,平均每个细胞的病毒多角体产量分别为23.97和24.10 PIB,差异均不显著;SeMNPV-QD与SeMNPV-US1对初孵甜菜夜蛾幼虫的LC₅₀分别为4.43×10⁴和4.35×10⁴ PIB/mL,LT₅₀分别为4.12和4.02 d;SeMNPV-QD与SeMNPV-US1对4龄甜菜夜蛾幼虫的LC₅₀分别为9.25×10⁵和4.44×10⁵ PIB/mL,LT₅₀分别为6.20和5.50 d;SeMNPV-QD和SeMNPV-US1对大葱田甜菜夜蛾幼虫具有较好的防治作用,7 d的校正防效分别达到74.99%和79.04%。研究结果将为新病毒株的深入研究开发以及甜菜夜蛾的生物防治提供理论依据。     

混合病毒在不同宿主中交替繁殖对病毒毒力的影响

研究了混合病毒在不同宿主中交替繁殖对病毒毒力的影响,选用对甜菜夜蛾Spodoptera exigua (Hüber)较专化的苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒(AcNPV)和对斜纹夜蛾Spodoptera litura (Fabricius) 较专化的斜纹夜蛾核多角体病毒(SlNPV),按多角体数量1∶ 1混合后分别连续感染或交替感染甜菜夜蛾和斜纹夜蛾,比较各代病毒对两种夜蛾的活性。测定结果表明:SlNPV中国株和AcNPV混合,起始感染甜菜夜蛾,再在斜纹夜蛾和甜菜夜蛾中交替繁殖后,F4代斜纹夜蛾病毒(由斜纹夜蛾中收集的病毒)对3龄甜菜夜蛾幼虫的致死率极显著高于F2代斜纹夜蛾病毒,F3代甜菜夜蛾病毒(由甜菜夜蛾中收集的病毒)对斜纹夜蛾的致死率也显著高于F1代甜菜夜蛾病毒;混合病毒起始感染斜纹夜蛾,再经甜菜夜蛾和斜纹夜蛾交替繁殖后,斜纹夜蛾病毒对甜菜夜蛾的毒力以及甜菜夜蛾病毒对斜纹夜蛾的毒力也都显著提高。交替传代后的病毒比同代次连续传代后的病毒对非宿主的毒力显著提高,并且它们对原宿主的毒力未有减弱。AcNPV和SlNPV日本株混合病毒在甜菜夜蛾和斜纹夜蛾中交替繁殖后也表现出对非宿主毒力的提高。表明混合病毒在两种不同原宿主中交替繁殖比其在同种宿主中连续繁殖后对非繁殖原宿主的毒力显著提高。     

甜菜夜蛾不同品系对甜菜夜蛾核多角体病毒的敏感性

利用寄主昆虫增殖病毒时，影响病毒产量的因素很多，其中寄主昆虫的敏感性是重要因素之一。尽管国内外在不同寄主对同种病毒敏感性方面进行了较多研究，但在相同寄主不同品系对同种病毒敏感性上的研究，尚未见报道。鉴于此，本文开展了甜菜夜蛾不同品系对甜菜夜蛾核多角体病毒（Spodoptera exigua Nucleopolyhedmvirus，SeNPV）敏感性的研究，以期筛选到高敏感性寄主昆虫，从而实现在甜菜夜蛾幼虫末龄高效增殖甜菜夜蛾核多角体病毒，达到有效提高甜菜夜蛾病毒杀虫剂生产效率的目的。现报道如下。     

甜菜夜蛾核型多角体病毒对宿主种群的控制作用

室内试验表明,甜菜夜蛾核型多角体病毒对宿主种群有明显的控制作用.当饲毒浓度在1.14×108PIBs/mL以上时,能引起97%的甜菜夜蛾幼虫死亡;饲毒后1～8天内,致死中浓度LC50值在8.4718×105～2.6098×10 12PIBs/mL之间;在饲毒浓度范围内,致死中时间LT50在1.98～6.99天之间;感病幼虫每日病死时间分布可用时间-剂量-条件死亡率模型较好地拟合,累计病死时间分布可用Gompertz模型拟合.室内试验还表明,病毒对甜菜夜蛾种群有明显的亚致死作用.免于病死蛹重量减轻,羽化所得雌成虫产卵量下降,产卵期延长;从感病高龄幼虫发育的成虫能将病毒传播至子代,引起20%～48%的子代幼虫死亡,并使子代成虫产卵量下降.田间试验表明,病毒除具有明显的控制作用外,还有一定的后效作用.     

芹菜夜蛾核型多角体病毒毒力的生物测定

利用芹菜夜蛾核型多角体病毒室内感染２龄小菜蛾、棉铃虫和甜菜夜蛾，测得ＬＣ５０分别为２．４７×１０６、７．９６×１０５和２．２２×１０５ＰＩＢ／ｍｌ。以４．２２×１０７和４．２２×１０６ＰＩＢ／ｍｌ两种浓度感染小菜蛾、棉铃虫和甜菜夜蛾等２龄幼虫，测得ＬＴ５０，小菜蛾分别为６．１５和７．３２天，棉铃虫分别为８．２０和１１．３７天，甜菜夜蛾分别为５．５３和７．２０天。致死时间均随感染浓度增加而减少。     

美国收到几个新农药登记申请

<正>美国环保署最近公布其收到几个新农药登记申请。这些申请本应在早些时候提交。瑞士安德马特生物农药公司申请了3个病毒农药的登记:苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(NPV)FV11株,用于防治蔬菜、棉花、花生、烟草、水芹和观赏植物上的甘蓝银纹夜蛾(粉纹夜蛾);棉铃虫核型多角体病毒BV-0003株,用于防治蔬菜、棉花、花生和观赏植物上的玉米棉铃虫/烟青虫/棉花螟蛉;甜菜夜蛾核型多角     

甜菜夜蛾人工饲料中琼脂替代物的研究

研究了卡拉胶，淀粉和海藻酸钠3种凝固剂的凝固特性，采取正交组合方法，获得以淀粉和卡拉胶混配替代甜菜夜蛾人工饲料中琼脂的最优组合方案。试验证明，该饲料饲养甜菜夜蛾幼虫增殖SeNPV的产量与用琼脂作凝固剂相当，但新配方中的成本仅为原来的1／3。     

亚洲玉米螟核型多角体病毒分离株鉴定及其对草地贪夜蛾的室内毒力测定

本文对从湖北省恩施州亚洲玉米螟幼虫上新分离的一种广谱病毒进行了形态学和分子特征鉴定,并以该病毒与另一种广谱杆状病毒对草地贪夜蛾幼虫进行了生物活性测定。结果表明新分离的核型多角体病毒与薄荷灰夜蛾核型多角体病毒和芹菜夜蛾核型多角体病毒具有较高的同源性,但遗传距离分析不支持它与这两种病毒为同一个种。生物活性测定表明,分离的病毒对草地贪夜蛾3龄幼虫的半数致死剂量是甘蓝夜蛾核型多角体病毒的3.86倍。本研究的结果为开发防治草地贪夜蛾的高效病毒杀虫剂提供了依据。     

茶毛虫核型多角体病毒Bt混剂的作用特性

用生物测定的方法,研究了茶毛虫核型多角体病毒(EpNPV)与苏云金杆菌(Bt)配制而成的茶毛虫核型多角体病毒Bt混剂(EpNPV-Bt)的增效作用、速效作用、拒食作用和兼治作用。结果表明,在16～28℃温度范围内,EpNPV-Bt对茶毛虫的作用在整个死亡周期表现为相加作用,协同毒力指数主要分布在-20%～20%之间,其中16、19、28℃的死亡前期表现为增效作用,协同毒力指数大于20%,22℃的死亡中期表现为拮抗作用,协同毒力指数小于-20%。EpNPV-Bt对茶毛虫LT30为5.6天,比EpNPV减少3.8天,幼虫的死亡速度提高了1.8倍。EpNPV-Bt对茶毛虫的拒食效果明显,取食量比EpNPV减少66.2%。EpNPV-Bt对茶刺蛾、用克尺蠖和茶尺蠖等茶树害虫具有兼治作用,其中对茶刺蛾的死亡率达85.8%。     

利用核型多角体病毒防治豆天蛾幼虫的研究

室内试验,豆天蛾核型多角体病毒感染3龄幼虫的致死中浓度(LC_(50))为1.4×10~(4(?)8)个多角体/毫升。田间试验,喷施1.6×10~7多角体/毫升的病虫尸匀浆液,对豆天蛾幼虫的防治效果在70％左右。豆天蛾核型多角体病毒与苏云金杆菌或银纹夜娥核型多角体病毒混用,防治同时发生的多种大豆害虫的总效果明显提高,虫口下降率可达90％左右。     

甜菜夜蛾核多角体病毒的研究与应用进展

本文综述了国内外甜菜夜蛾核多角体病毒的研究和应用进展     

甜菜夜蛾卵和成虫携带核型多角体病毒对种群数量的影响

在室内分别测定了甜菜夜蛾的卵、雌蛾和雄蛾分别携带甜菜夜蛾核型多角体病毒(SeNPV)对其卵孵化率、幼虫存活率及单雌产卵量的影响。结果表明:甜菜夜蛾卵块携带SeNPV后,卵孵化率和幼虫存活率均显著下降。雌、雄蛾分别携带病毒再交尾后,对单雌产卵量、卵孵化率和幼虫的存活率也有显著影响,并且不同带毒量处理间存在显著差异,表现为带毒量越高,单雌产卵量越少、卵孵化率和幼虫存活率越低。同等带毒处理条件下,卵、雌蛾和雄蛾带毒3种处理方式对甜菜夜蛾种群数量的影响没有显著差异。说明SeNPV能通过甜菜夜蛾的卵、雌蛾和雄蛾3种虫态进行垂直传播,可以明显抑制甜菜夜蛾种群数量的增长,为昆虫性诱剂和病毒集成技术在田间的应用提供了理论依据。     

青霉素影响甜菜夜蛾幼虫耐受几种苏云金杆菌晶体蛋白的能力

本文评估了Cry1Ab、Cry1Ba和Cry1Ca蛋白对甜菜夜蛾2龄幼虫的毒力,其LC50分别为0.442 5、0.675 7 μg/cm2和0.150 2 μg/cm2,Cry1Ba毒力最低,其次是Cry1Ab,而Cry1Ca毒力最高。青霉素影响幼虫对晶体毒素的耐受能力;一次添加高剂量(500 μg/cm2)青霉素于饲料中显著提高幼虫的耐受能力,以含低剂量(60 μg/cm2)青霉素的饲料饲养幼虫多代也能达到相似的效果。     

Mb MNPV对不同群体草地贪夜蛾的毒力差异分析

甘蓝夜蛾核型多角体病毒Mamestra brassicae multiple nucleopolyhedrovirus(MbMNPV)是一种广谱昆虫病毒,近年来已被应用于草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda J.E.Smith的防治上,而不同地区的草地贪夜蛾因环境因子的差异导致其对MbMNPV等生物农药的敏感性不同。本研究首先基于COI和Tpi基因对湖南长沙、河南济源、四川成都、广西南宁和辽宁丹东等5个地区的草地贪夜蛾群体进行了生物型鉴定,同时通过饲毒法测定了不同群体草地贪夜蛾幼虫对MbMNPV的敏感性。结果表明,基于COI基因的鉴定结果显示湖南长沙、河南济源和辽宁丹东的草地贪夜蛾均为水稻型,四川成都和广西南宁群体的草地贪夜蛾为水稻型和玉米型的混合群体,而基于Tpi基因的鉴定结果显示5个群体的草地贪夜蛾均为玉米型。5个群体的草地贪夜蛾3龄幼虫在浓度为1×10⁸ PIB/mL和1×10⁷ PIB/mL的MbMNPV处理下7 d校正死亡率均在90%以上,而浓度为1×10⁶ PIB/mL时,湖南长沙、广西南宁和...     

高毒效杀甜菜夜蛾苏云金芽孢杆菌WY-190

从本实验室分离得到的406株苏云金芽孢杆菌中，以甜菜夜蛾为供试昆虫，采用生物测定的方法，筛选出一株对甜菜夜蛾高效的WY－190菌株，确定其发酵原液LC50为0.25μl/ml。对WY－190的形态特征，生理生化特性和伴孢晶体蛋白进行了观察和研究。研究结果表明，WY－190属于H3a3b血清型库斯塔克亚种；具有几丁质酶活性，伴孢晶体主要为大小不一的菱形，小正方形，椭圆形，并具镶嵌结构；SDS－PAGE电泳图谱表明主要由135kD和65kD两种蛋白成分组成，在菌株生长形态，发酵培养特征，生理生化特性方面与生产菌株HD－1的差别不大，共主要差异表现在对甜菜夜蛾的敏感性和杀虫毒力的差别上。     

苏云金芽胞杆菌毒素蛋白和粘虫颗粒体病毒对甜菜夜蛾中肠围食膜的破坏作用

利用扫描电镜和SDS-PAGE技术研究了苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)、粘虫颗粒体病毒(PuGV-Ps)及其增效蛋白(enhancin)对甜菜夜蛾Spodoptera exigua中肠围食膜的影响.电镜观察结果表明,正常的甜菜夜蛾围食膜外壁有韧性,表面较平滑,少皱褶,内壁表面较粗糙,有较厚质感,无孔洞和缝隙;取食PuGV-Ps或增效蛋白后的围食膜外壁皱缩,内壁质薄;Bt单独作用于围食膜同样改变了围食膜结构,但影响程度较小;未发现不同处理对甜菜夜蛾围食膜造成穿孔或裂缝.SDS-PAGE结果表明,取食PuGV-Ps或增效蛋白后,围食膜上150kD蛋白一定程度被降解,27kD蛋白也被部分降解,而29kD蛋白被完全降解;取食Bt后的围食膜上29kD蛋白也被降解.离体降解试验进一步证明PuGV-Ps增效蛋白对甜菜夜蛾围食膜上多种蛋白具有降解作用,甜菜夜蛾围食膜上29kD蛋白是Bt和PuGV-Ps增效蛋白共同作用的靶标蛋白.     

甘蓝夜蛾卵巢细胞系统对核多角体病毒的敏感性

本文研究了甘蓝夜蛾核多角体病毒（ＭｂＮＰＶ）在同源寄主细胞系ＮＥＡＵ－Ｍｂ－９３１１０４（简称Ｍｂ－９３１１０４）中的复制，ＭｂＮＰＶ侵染细胞后病理变化。Ｍｂ－９３１１０４对ＭｂＮＰＶ有一定的敏感性，细胞表现明显的病变，细胞感染率达到３６．５％，感染细胞内产生的多角体数为３８．９％。用离体培养产生的病毒多角体感染甘蓝夜蛾幼虫，共死亡率达到８４．２％。