基于UHPLC-ESI-Q-TOF MS分析灯盏细辛提取物的血浆移行成分

[目的]采用超高效液相色谱-电喷雾-四级杆-飞行时间串联质谱联用(UHPLC-ESI-Q-TOF MS)研究灯盏细辛提取物中的入血成分。[方法]首先采用传统中药煎煮方法,制备灯盏细辛提取物;然后收集健康SD大鼠的含药血浆,分别用甲酸水溶液和甲醇处理样品后,采用UHPLC-ESI-Q-TOF MS并结合对照品,质谱碎片信息和相关文献,初步推测灯盏细辛提取物的血浆移行成分。[结果]通过与对照品比对并分析相关检测数据,在含药血浆中检测到绿原酸、灯盏乙素、灯盏乙素苷元和灯盏甲素4种原型成分。[结论]该研究初步明确了灯盏细辛提取物可被吸收的物质基础,可为该药在大鼠体内的药代动力学研究提供依据。     

LC-MS/MS法测定大鼠血浆中EGCG及其药动学研究

[目的]建立一种LC-MS/MS测定大鼠血浆中EGCG浓度的方法,进而研究其药动学.[方法]选用Agilent SB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-水(90:10)为流动相,等度洗脱,ESI离子源,多反应离子监测,负离子扫描;以香草醛为内标,采用内标法定量.[结果]EGCG和内标不受基质干扰;定量限分别为10 ng/mL(EGCG)和5 ng/mL(香草醛),血浆样品批内和批间精密度(RSD)≤11.5％,准确度在92.0％～118.9％,萃取回收率≥92.7％,基质效应为95.3％～115.3％,大鼠腹腔注射20 mg/kg EGCG后的血浆动力学符合二室模型,消除半衰期较长,表观分布容积(Vd)大于总体水体积.[结论]该方法重现性好、分析时间短,能满足EGCG在大鼠血浆中浓度的检测要求,并符合《中国药典》2015年版对生物样品分析的要求,可用于大鼠血浆中EGCG的浓度测定和药代动力学研究.     

莫西菌素药效学与药动学研究进展

莫西菌素是一种半合成的单一成分的大环内酯类抗寄生虫药,其药代动力学特征与药效密切相关.通常莫西菌素药代动力学会因制剂、动物品种、机体状态以及与其他药物的相互作用而发生改变.综述了莫西菌素药效学和药代动力学,为莫西菌素的临床应用提供参考.     

多西环素原粉与其络合制剂单次给药大鼠的药代动力学比较研究

试验研究了盐酸多西环素原粉和50%盐酸多西环素络合制剂在大鼠体内的药代动力学规律。选取6只健康大鼠,随机分成2组,分别以25 mg/kg灌服原粉和络合制剂,用UPLC/MS/MS分析血浆中多西环素浓度并计算药动学参数。结果表明:络合制剂的峰浓度略高于原粉(2 032±322 ng/mL vs 1 745±328 ng/mL),表明大鼠吸收络合制剂的量大于原粉。还发现络合制剂的AUC_(all)(12 764±1 872 h·ng/L)和AUC_(inf)(18 806±4 405 h·ng/L)均大于原粉的AUC_(all)(9 764±1 047.2 h·ng/L)和AUC_(inf)(16 702±2 004.5 h·ng/L),表明络合制剂在大鼠体内到达全身血液循环的量大于原粉。     

基于大鼠脑缺血再灌注损伤模型建立芍药内酯苷的PK-PD模型

[目的]建立芍药内酯苷的药动学-药效学(PK-PD)模型。[方法]首先采用液质联用法测定大鼠脑缺血再灌注损伤模型给予辛芍组方后的不同时间点所得血浆样本中芍药内酯苷的药物浓度,获得药时曲线;同时采用试剂盒测定不同时间点所得血浆样本中的超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)含量,获得时效曲线。然后用Win Non Lin软件采用房室模型的分析方法对芍药内酯苷的药代动力学参数进行拟合,获得PK参数。在此基础之上,固定相关的药代动力学参数,对时效关系进行拟合,得到相关的PD参数,根据PD参数,建立辛芍组方中芍药内酯苷的PK-PD模型。[结果]当以SOD为药效指标时,可得辛芍组方中芍药内酯苷的PK-PD模型为E=21.04+(7.16×Ce)/(Ce+372.4);当以LDH为药效指标时,可得辛芍组方中代表成分芍药内酯苷的PK-PD模型为E=216.83-(37.31×Ce)/(Ce+0.04)。[结论]SOD和LDH的浓度与芍药内酯苷的浓度存在一定的相关性。芍药内酯苷可通过提高SOD、降低LDH发挥抗氧化作用来实现保护脑缺血再灌注损伤。     

天然产物分析鉴定

HPLC法研究黄连中表小檗碱等五种生物碱的含量;HPLC法测定银黄制剂中绿原酸的含量;降香抗氧化成分的提取及活性研究;苍术挥发油成分GC-MS分析;紫花前胡挥发油的多种组分的结构表征及其保留时间的估计和预测.     

毛细管区带电泳法测定中草药中的有机酸

阿魏酸、绿原酸、咖啡酸是三种结构相似的酚酸类化合物,本研究建立了毛细管区带电泳法测定中草药中的阿魏酸、绿原酸、咖啡酸的分析方法,以pH=8.7的150 mmol/L硼酸为缓冲溶液,在0.5 psi进样8 s,分离电压23 kV,检测波长320 nm,温度25℃的条件下进行测定。阿魏酸、绿原酸、咖啡酸的浓度在0.01~0.2 mg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,线性相关系数分别为0.999,0.997和0.999,其检出限分别为0.2μg/mL、0.4μg/mL和0.2μg/mL(信噪比为3∶1)。该方法用于金银花、蒲公英、蜂胶、感冒止咳颗粒等药物中阿魏酸、绿原酸、咖啡酸含量的测定,其样品平均回收率在96.0%~100.4%之间,取得了满意的结果。     

不同给药方式下恩诺沙星在鲤体内的药动学研究

对两组鲤分别进行腹腔注射、口灌恩诺沙星后,应用高效液相色谱法测定了其组织中的药物浓度,研究了恩诺沙星在鲤（Cyprinus carpio）体内的吸收、分布与消除等药代动力学参数．结果表明：两种给药方式下,鲤血浆、肝脏、肾脏和肌肉组织的药时曲线符合一级消除二室模型．腹腔注射给药血浆动力学参数：AUC为59．1856μg·h·mL^-1、K为75．7627h^-1、t1／2B为96．5456h、T（peak）为0．0730h、C（max）为3．2970μg·mL^-1;灌服给药血浆动力学参数：AUC为600．2961μg·h·mL^-1、Ka为0．1693h～、t1／2β为168．2871h、T（peak）为3．6655h、C（max）为3．2661μg·mL^-1．这说明腹腔注射给药比口灌给药吸收快,血药达峰时间短,达峰浓度高．     

马拉硫磷手性对映体在大鼠体内的代谢研究

用高效液相色谱法建立马拉硫磷手性农药对映异构体的拆分检测方法,以大鼠为研究对象,分为空白对照组(C)和试验组(T)。C组灌胃生理盐水2 mL/只,试验组灌胃马拉硫磷700 mg/kg后,分15、30、60、120 min分别采大鼠血浆、心脏、肝脏等样品,测定所有试验鼠血浆、组织中马拉硫磷对映体含量的变化情况,用EF(对映体分数)表示。通过口服途径对大鼠进行马拉硫磷对映体分析方法的建立及选择性代谢行为研究。结果表明,马拉硫磷对映体在大鼠血浆和组织中代谢存在明显的立体选择性,且R-构型较S-构型活性高。     

二氢杨梅素在小鼠体内的药代动力学研究

采用小鼠灌胃和尾静脉注射方式给药后,不同时间点摘眼球取血,HPLC测定小鼠血浆中二氢杨梅素的含量,运用DAS3.2.1软件计算药代动力学参数。建立小鼠血浆中二氢杨梅素含量的HPLC测定方法,并考察其在小鼠体内的动力学过程。所得回归方程相关系数r=0.999 4,最低检测浓度为0.04μg/mL,日内及日间RSD分别为1.9%~4.8%和2.4%~4.4%,准确度RE为-0.8%~7.2%,方法回收率为74.3%~85.9%。二氢杨梅素的血药浓度-时间曲线符合一级吸收一级消除的一房室模型。说明所建立的方法符合生物样品分析指导原则的方法学要求,能够满足二氢杨梅素在小鼠体内的药动学研究要求。     

盐酸青藤碱在坐骨神经损伤大鼠血浆中的药代动力学研究

以药效学研究为基础,建立简便、灵敏的HPLC-QQQ-MS方法,测定盐酸青藤碱在正常和光化学诱导的坐骨神经损伤模型(PISNI)大鼠体内的血药浓度,探讨盐酸青藤碱在正常和疼痛病理状态下对药动学特征的影响。采用SD大鼠颈总静脉插管注射光敏剂赤藓红B,氩离子激光发射器照射的方法,建立光化学诱导的坐骨神经损伤模型;正常及PISNI大鼠腹腔注射盐酸青藤碱,应用自动采血系统采集血样并进行含量测定。与造模前相比,造模后PISNI大鼠机械痛阈值显著下降,冷痛阈值上升,均与假手术组有显著性差异(P0. 01)。与模型组相比,盐酸青藤碱高剂量(40 mg/kg)在30～180 min作用明显,90 min时效果最显著且好于阳性药加巴喷丁(P0. 05);盐酸青藤碱高剂量给药组冷痛阈值下降极显著(P0. 01)。与正常组相比,模型组浓度曲线下面积(AUC_(0-t))[(581. 98±127. 63)～(1 053. 80±427. 69)](h·μg)/L增加,体内清除率(CL/F)[(62. 27±23. 20)～(30. 37±11. 85)]L/(h·kg)降低,说明盐酸青藤碱的药动学过程可能在PISNI病理条件下发生改变。这说明,建立的HPLC-QQQ-MS方法简便、灵敏、准确,适用于盐酸青藤碱在正常和PISNI大鼠体内血药浓度的测定和药动学的研究。进一步的药代动力学研究表明,盐酸青藤碱在PISNI大鼠体内代谢和吸收速率快,达峰时间短,生物利用度高。神经疼痛病理状态可能影响盐酸青藤碱的体内药代动力学过程。     

长效恩诺沙星注射液在健康猪体内的药动学

为了解长效恩诺沙星在健康猪体内的药动力学,进行了本研究。应用HPLC法测定血浆药物浓度,所得数据用MCPKP药代力学软件处理。实验结果表明,长效恩诺沙星注射剂药物半衰期明显延长,差异显著性P<0.01,生物利用度有所提高。     

白藜芦醇口服自微乳在大鼠体内药代动力学的研究

目的 观察白藜芦醇口服自微乳在大鼠体内药代动力学过程.方法 SD大鼠分别给予50 mg/kg白藜芦醇口服自微乳或混悬液灌胃,用HPLC法测定血浆白藜芦醇含量,DAS 2.1.1软件计算药动学参数.结果 血浆白藜芦醇浓度在(10 ～5 000) μg/L线性关系良好(r=0.996),白藜芦醇提取回收率为83.28％ ～ 86.15％.白藜芦醇口服自微乳、混悬液的药动学过程均符合二室模型,权重因子为1.与混悬液比较,白藜芦醇口服自微乳的血浆峰浓度增加、平均滞留时间延长、曲线下面积增大(P＜0.05),相对生物利用度为131.84％.结论 口服自微乳可促进白藜芦醇吸收,提高生物利用度.     

双峰驼促卵泡素放射免疫测定方法的建立

本试验以羊—羊FSH放射免疫分析方法为依据,建立了测定双峰驼外周血浆中FSH的异源性放射免疫分析方法,通过一系列实验表明,在目前尚难建立驼FSH同源性放射免疫分析方法的情况下,该方法是研究双峰驼生殖内分泌学的可靠手段之一。本研究还用此方法测定了肌肉注射精清诱导排卵前后母驼外周血浆中FSH的变化。     

葛根素在大鼠体内的药动学研究

[目的]研究葛根素在大鼠体内的药代动力学规律。[方法]大鼠灌胃给予葛根提取物4.285 g/kg（相当于葛根素300 mg/kg）后,采用HPLC测定不同时间点大鼠血浆中葛根素的含量,绘制各时间点平均血药浓度-时间曲线,采用3P97药动学软件对数据进行处理。[结果]葛根素在0.11~17.80μg/ml线性关系良好（r=0.999 9）,其在大鼠体内的药代动力学行为符合二室开放模型,主要药动学参数：t1/2（ka）为（9.719±2.765）min,t1/2α为（16.038±4.211）min,t1/2β为（123.222±20.886）min,T（peak）为（30.679±8.305）min,C（max）为（1.178±0.575）μg/ml,AUC为（218.816±81.526）μg.min/ml,CL/F（s）为（1.515±0.492）L/（kg.min）,V/F（c）为（198.197±66.301）L/kg,Ka为（0.076±0.020）L/min,Lag time为（0.655±0.732）min。[结论]该测定方法专属、准确、灵敏,适用于葛根素的药动学研究,为合理利用药用植物葛根提供了参考。     

心衰康颗粒对心衰大鼠心功能的影响

采用缩窄腹主动脉建立大鼠心衰模型、左心室插管术测定心功能指标、放免法测定血浆AngⅡ、NE、ANP浓度的方法观察心衰康颗粒对慢性心衰大鼠的心功能的影响,结果表明:心衰大鼠心功能减退,血浆AngⅡ、NE和ANP水平显著升高;药物组心功能显著改善,血浆AngⅡ、NE水平显著降低,心衰康各组血浆ANP水平差异不显著.心衰康颗粒有改善心衰大鼠心功能的作用,其机制可能与调节AngⅡ、NE、ANP分泌有关.     

金板青颗粒中绿原酸的提取工艺和含量测定

建立金板青颗粒中绿原酸的提取工艺并对其有效成分含量进行测定。选择L9(34)正交表安排试验,用HPLC测定金板青颗粒中绿原酸的含量。结果表明,金板青颗粒中绿原酸的最佳提取工艺为12倍用量水提取3次,每次2.5 h。绿原酸线性范围在10.0~100μg/mL,r=0.9999,平均回收率100.75%(RSD=1.62%,n=6)。试验结果说明,本工艺稳定可行、科学可靠,含量测定方法简便准确,重复性好,可用于控制该颗粒剂的质量。     

HPLC法测定犬血浆及复方麻醉制剂中强痛宁含量的研究

为建立高效液相色谱法(HPLC)-紫外检测器测定犬血浆和复方麻醉制剂(QFM)中强痛宁浓度的方法,本试验采用外标法,以ZorbaxSBC18(4.6mm×250mm,5μm)为固定相,乙腈与去离子水(含0.015mol·L-1的磷酸二氢钠)30:70(v/v)为流动相,流速1.0mL·min-1,紫外检测波长195nm。结果表明,标准曲线在2~100ng·mL-1范围内线性关系良好(r2=0.9975~0.9986),最低检测限浓度为2ng·mL-1,犬血浆和QFM中强痛宁的平均回收率分别为(92.75±3.96)%、(92.50±4.32)%;日内变异系数(4.01±1.38)%、(4.28±1.59)%;日间变异系数(4.60±2.0)%、(44.46±1.87)%。说明本方法简便、准确、检测浓度低,能够满足犬血浆中低浓度强痛宁的测定及临床药代动力学研究的要求。     

重水标记法测定大鼠血浆IgG合成动力学相关参数

为测定大鼠血浆免疫球蛋白G(IgG)合成动力学相关参数,以重水(~(2 )H_2O)为示踪剂,将20只SD大鼠以腹腔注射、日常饮水的形式进行~(2 )H_2O标记,分别于首次标记后第1、3、5、6、10周末,各取4只大鼠,心脏穿刺采集血样,采用蛋白纯化仪纯化大鼠血液中IgG,并用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定,将提纯的IgG水解,分离纯化IgG中丙氨酸及血浆游离丙氨酸,并衍生,用气相色谱-质谱仪(GC-MS)检测血浆IgG中~(2 )H-丙氨酰基丰度和血浆游离丙氨酸中~(2 )H丰度;计算IgG分数合成率(FSR)、合成动力学方程。结果表明:血浆IgG的FSR为14.83%·周~(-1),合成动力学方程为f_t=0.084 1×(1-e~(-0.148 3t))。这一研究提示~(2 )H_2O标记法能有效测定血浆IgG合成动力学参数,可用于长期标记试验。     

热淋清颗粒含药血浆的高效液相色谱分析

[目的]对热淋清颗粒的含药血浆进行分析,为筛选确定热淋清颗粒的药效成分奠定基础。[方法]在建立热淋清颗粒高效液相色谱指纹图谱的基础上,通过比较热淋清颗粒甲醇提取物、热淋清颗粒含药血浆和空白血浆的高效液相色谱指纹图谱,确定热淋清颗粒血中移行成分。[结果]在热淋清颗粒含药血浆中发现了6个入血成分,其中3个为原型成分,其余几个可能为代谢产物。[结论]6个入血成分可能成为热淋清颗粒的体内直接作用物质,对其进行深入研究,将有助于探索热淋清颗粒的药效物质基础。