蛋鸡离体小肠对Gly-L-Leu肽的吸收转运研究

本试验采用离体外翻肠囊法研究了蛋鸡小肠对Gly-L-Leu肽的吸收和转运.将6只206日龄的海兰褐蛋鸡的小肠分割为十二指肠、空肠前、中、后段和回肠5段,分别制备外翻肠囊.每3只鸡的肠囊为1个试验组,将灌注浆膜液(含Ca2+/Mg2+PBS缓冲液)的各肠囊置于相同的二肽培养液(含20mmoL/LGly-L-Leu的Ca2+/Mg2+PBS缓冲液)中进行培养.试验1组培养液添加了肽酶抑制剂(10μmoL/L Bestatin和Amastatin),试验2组浆膜液添加了等量的肽酶抑制剂.培养15分钟后测定培养液、浆膜液、肠组织匀浆液中二肽和游离氨基酸的含量.结果表明,鸡十二指肠、空肠前、中段对Gly-L-Leu有强烈的水解作用,空肠后段和回肠的水解能力相对较弱.鸡各肠段均能迅速吸收Gly-L-Leu,并将其转运到浆膜液中.吸收量和转运量有沿肠道延伸而增强的趋势.     

水解单宁酸对蛋鸡肠道健康的影响

为研究水解单宁酸对蛋鸡肠道pH值、酶活和菌群的影响。选取30周龄海兰灰蛋鸡4 000只,随机分为5组,每组4个重复,每个重复200只。对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别添加0.05%、0.10%、0.15%和0.20%的水解单宁酸,试验期4周。结果表明,试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组可显著降低蛋鸡十二指肠和空肠内容物的pH值(P0.05)。在肠道酶活方面,与对照组相比,试验Ⅱ组对十二指肠和空肠的脂肪酶活性有显著影响(P0.05);试验Ⅱ组对十二指肠和空肠淀粉酶活性有显著影响(P0.05),试验Ⅲ组对回肠的淀粉酶活性有显著影响(P0.05);试验Ⅰ组对十二指肠的蛋白酶活性有显著的影响(P0.05),试验Ⅱ和Ⅲ组对十二指肠、空肠和回肠蛋白酶活性有显著影响(P0.05)。在肠道微生物方面,可以使盲肠内有益菌增殖,抑制有害菌的生长,其中试验Ⅱ和Ⅲ组差异显著(P0.05)。研究表明,蛋鸡日粮中加入适量的水解单宁酸(1 kg/t)可以有效地降低肠道pH值和提高肠道消化酶活性,增殖有益菌并抑制有害菌,从而达到改善肠道健康的作用。     

大豆肽对蛋鸡肠道菌群的影响试验

本试验通过蛋鸡饲养试验,研究了大豆肽对蛋鸡肠道常驻菌群调节的影响。结果表明:添加大豆肽可以促进嗉囊、空肠、盲肠、直肠乳酸菌的增殖,与对照组相比乳酸菌数量增加10倍以上,差异极显著(P<0.01);添加大豆肽明显抑制大肠杆菌、好氧菌总数的增加,与对照组相比细菌数量下降10倍以上,差异显著。大豆肽可以作为良好的蛋鸡肠道菌群调节型饲料添加剂。     

牦牛乳酪蛋白酶解产物二肽基肽酶-Ⅳ抑制活性和特性分析

以牦牛乳酪蛋白为原料,利用碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶制备酪蛋白酶解产物,研究其二肽基肽酶-Ⅳ(dipeptidyl peptidase-Ⅳ,DPP-Ⅳ)抑制活性和理化特性.以DPP-Ⅳ抑制率为指标,研究水解时间和蛋白酶的种类对酶解产物DPP-Ⅳ抑制活性的影响,以水解度、三氯乙酸氮溶解指数(trichloroacetic acid-nitrogen soluble index,TCA-NSI)、溶解性和灰分含量为指标,评价酶解产物的理化特性.结果表明:对于相同水解时间点获得的酶解产物,木瓜蛋白酶酶解产物的DPP-Ⅳ抑制活性显著高于其他2种蛋白酶的酶解产物(P＜0.05).利用木瓜蛋白酶水解0.50 h的酶解产物具有最高的DPP-Ⅳ抑制活性(抑制率可达(53.95±1.57)％)、较高的水解程度以及最低的灰分含量.说明利用蛋白酶水解技术能够使牦牛乳酪蛋白中具有DPP-Ⅳ抑制活性的多肽释放,木瓜蛋白酶酶解产物可作为功能性乳基料用于功能性食品的开发.     

小肽转运载体2在奶牛乳腺小肽摄取中的作用研究

本试验旨在研究2型小肽转运载体(oligopeptide transporter 2,PepT 2)在奶牛乳腺组织吸收利用小肽合成乳蛋白过程中的作用.在体外培养的奶牛乳腺组织培养液中分别添加不同浓度的苯丙氨酸二肽( Phe-Phe)(0和11.7 μg/mL)和/或焦碳酸二乙酯(DEPC)(0、0.01、0.1、0.5...     

水解单宁酸对蛋鸡生产性能及肠道健康的影响

为研究水解单宁酸对蛋鸡生产性能和肠道健康的影响,选取30周龄海兰灰蛋鸡4000只,随机分为试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组和对照组,每组设4个重复,每个重复200只。以玉米-豆粕型日粮为基础日粮,添加不同剂量的水解单宁酸(0.05%、0.10%、0.15%和0.20%),试验期4周。测定不同添加剂量水解单宁酸对蛋鸡采食量、产蛋率、蛋重、料蛋比和肠道菌群的影响。结果表明:0.10%添加组产蛋率显著提高,料蛋比降低;0.10%和0.15%添加组大肠杆菌数量显著降低,同时乳酸杆菌和双歧杆菌数量提高。综上,日粮中加入适量的水解单宁酸(1 kg/t)可以明显提高蛋鸡生产性能,并能增殖有益菌抑制有害菌数量,从而达到改善肠道健康的作用。     

高效液相色谱法评定二肽水解的研究

用高效液相色谱法测定了仔猪小肠刷状缘膜囊(Brush Border Membrane Vesicles,BBMV)孵育体系中甘-L-亮(Gly-Leu)和L-组-L-亮(His-Leu)等两种二肽的含量.分别以水(pH值为5.55)和乙腈-三氟乙酸(三氟乙酸浓度为0.1 %)为流动相,经Phenomennex ODS分析柱(250 mm×4.60 mm,5 μm,C18)分离,检测波长为190～400 nm.结果表明,两种二肽在0～300 μg mL-1的之间,其峰面积(X)对质量浓度(Y,μg mL-1)回归得方程分别Y＝0.000 1 X+0.871 9,R2＝0.999 9和Y＝0.000 06 X+6.631 28,R2＝0.998 2;回收率依次为99.91 %和100.05 %,保留时间依次为2.07和1.01 min;最大吸收波长依次为197和199 nm.该方法快速、简便和准确,结果稳定,重现性好,可以用来评定该两种二肽在动物小肠BBMV体系中的水解状况.     

旋毛虫重组二肽基肽酶1在体外对大鼠外周血单个核细胞增殖、吞噬、凋亡等的影响

本文旨在分析旋毛虫二肽基肽酶1（dipeptidyl-peptidase 1，Dpp1）在体外对大鼠外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells，PBMCs）增殖、迁移、凋亡以及一氧化氮（NO）分泌和吞噬功能的影响。根据GenBank中旋毛虫Dpp1基因序列设计一对特异性引物，RT-PCR获得该基因，将其亚克隆到pET-32a原核表达载体，IPTG诱导后获得重组蛋白rDpp1。将大鼠PBMCs与rDpp1共孵育，用间接免疫荧光试验（IFA）分析rDpp1与大鼠PBMCs的结合情况，分析不同质量浓度（10、20、40 μg·mL^-1）的rDpp1对细胞增殖、迁移、NO分泌、吞噬功能和细胞凋亡的影响。结果表明，40 μg·mL^-1rDpp1极显著促进PBMCs增殖；10 μg·mL^-1rDpp1能显著促进PBMCs迁移，而20及40 μg·mL^-1时表现极显著的促进；20与40 μg·mL^-1rDpp1极显著促进PBMCs分泌NO；10 μg·mL^-1rDpp1能显著促进PBMCs的吞噬功能，而20及40 μg·mL^-1时表现极显著的促进；各质量浓度蛋白均极显著地促进PBMCs的凋亡。旋毛虫二肽基肽酶1在体外能通过多种途径影响大鼠外周血单个核细胞，对调节宿主免疫应答有一定的促进作用。     

肽在瘤胃内的代谢和利用

微生物蛋白降解作用形成的多肽经过一系列肽酶最终转化为氨基酸,其速度取决于多肽的化学组成和N端结构.大多数情况下,瘤胃肽在栖瘤胃拟杆菌分泌的二肽基肽酶作用下,从多肽N未端释放二肽而不是游离氨基酸.通过抑制栖瘤胃拟杆菌的二肽基肽酶活性或该菌对肽吸收率可以减慢混合瘤胃群落对肽的水解速率.肽和氨基酸刺激瘤胃微生物的生长,并且对许多种菌的最佳生长是必需的.纤维分解菌是个例外.当然,细菌蛋白质合成时利用氨与肽和氨基酸的比例也取决于它们的浓度.     

抑制肠道中的氨水平可减少腹水症的发生和死亡

在肉鸡日粮中添加尿素酶抑制剂大大降低了腹水症死亡率。     

二肽在断奶仔猪小肠刷状缘膜囊中水解状况的研究

通过孵育试验研究了甘-L-亮(Gly-Leu)和L-组-L-亮(His-Leu)2种二肽在断奶仔猪小肠刷状缘膜囊(Brush Border Memlorane Vesides，BBMV)中的水解状况。结果表明，孵育液pH值(分别为3．5、4．0、4．5、5．0、5．5、6．0、6．5、7．0、7．5和8．O)、孵育温度(25℃和37℃)、孵育时间(O．5、1、2、5、10、20、30和40min)以及BBMV(二肽酶)的添加量均不影响此2种二肽在断奶仔猪小肠BBMV孵育体系中的水解。结果提示，Gly-Leu和His-Leu2种二肽在断奶仔猪小肠BBMV体系中均不水解。     

丝氨酸蛋白抑制剂与围产期奶牛血钙的关系

本研究旨在了解围产期低血钙奶牛与正常奶牛的血浆Serine peptidase inhibitor(SERPIN)与血钙之间的关系。在分娩当天、产前14～7d和产后7～14d根据血钙浓度将实验牛分为正常对照组(2.20～3.5mmol/L,C)和低血钙组(<2.20mmol/L,T),每组3头。利用Westernblotting检测试验牛血浆SERPIN丰度。结果显示:SPI蛋白在奶牛发生低血钙时,表达上调。结论:本试验首次证明了血浆SERPIN与血钙浓度呈负关联,血钙可能通过SERPIN途径调节机体的凝血过程和免疫功能。     

二肽在仔猪小肠刷状缘膜囊中跨膜转运的动力学特点研究

为研究二肽在仔猪小肠刷状缘膜囊（Brush border membrane vesicles,BBMV）中跨膜转运的动力学特点,采用同位素示踪及体外孵育技术,观察了几种不同条件下Gly-Pro的跨膜转运量。结果表明：（1）在有Na^＋和无Na^＋的条件下,Gly-Pro的转运均受到Leu-Gly、Ala-His、Gly-Leu和His-Leu等二肽的极显著抑制（P〈0.01）,但不受甘氨酸、L-丙氨酸、L-脯氨酸、L-亮氨酸、L-精氨酸、L-谷氨酰胺和L-蛋氨酸的影响;（2）仔猪小肠BBMV对Gly-Pro的转运呈现非线性关系,但是遵从Michaelis-Menten动力学方程,其Kt（亲合常数）值为0.64 mmol/L,而Vmax为7.42 nmol/（min.mg）膜蛋白;（3）仔猪小肠BBMV对Gly-Pro的摄取是由于Gly-Pro直接进入BBMV内部的结果,而不是仅仅结合在BBMV上所引起的。结果提示,Gly-Pro在仔猪小肠BBMV中的跨膜转运具有载体介导的转运特点。     

谷氨酰胺二肽对断奶仔猪生长、免疫、抗氧化力和小肠粘膜形态的影响

本文旨在研究谷氨酰胺二肽(Gln二肽)对断奶仔猪生长、免疫、抗氧化力和小肠粘膜形态的影响,探讨Gln二肽缓减仔猪断奶应激的机理。选用96头平均体重(6.23±0.13)kg杜×(大×长)三元杂交仔猪,按完全区组设计分为4组,每组4个重复,每个重复6头(公母各1/2),各处理仔猪分别饲喂基础饲粮、基础饲粮添加0.125%Gln二肽、基础饲粮添加0.25%Gln二肽和2%血浆蛋白粉的试验饲粮。结果表明,饲粮中添加0.125%和0.25%Gln二肽可以提高断奶仔猪生长性能。其中,断奶后0～10d0.125%Gln二肽组的生长性能与2%血浆蛋白粉组相近;断奶后11～21d0.125%Gln二肽组的生长性能略优于2%血浆蛋白粉组(P>0.05),而每kg增重饲料成本显著低于2%血浆蛋白粉(P<0.05)。随饲粮Gln二肽添加水平提高,断奶后第10天血液中CD4 数量以二次曲线方式升高(二次,P=0.08),第10和第21天血清GSH-Px活性分别以线性(线性,P=0.02)或二次曲线(二次,P=0.10)方式升高,第10和第21天血清SOD活性均以线性方式升高(线性,P=0.10和0.08)。断奶后第21天,0.125%Gln二肽组十二指肠的隐窝深度显著低于基础饲粮组(P<0.05)。总之,Gln二肽可能通过增强断奶仔猪细胞免疫功能、改善抗氧化能力、防止小肠粘膜绒毛萎缩,以缓减仔猪的断奶应激,从而提高生长性能,且以0.125%Gln二肽组仔猪生长性能最好,每kg增重饲料成本最低。     

氰戊菊酯对黄胫小车蝗解毒酶的影响

为了确定氰戊菊酯对黄胫小车蝗(Oedaleus infernalis)解毒酶的影响,利用点滴法进行毒力测定的同时,针对不同虫源黄胫小车蝗测定了增效醚(PBO)、磷酸三苯酯(TPP)和顺丁烯二酸二乙酯(DEM)3种酶抑制剂的增效作用和虫体内解毒酶的活力。结果表明,氰戊菊酯对室内虫源的LD50为4.38×10-3 μg·头-1,对黑龙江地区田间虫源HG、LD和ZY 的LD50分别7.30×10-3、7.21×10-3和2.298×10-2 μg·头-1,与室内虫源相比,抗性比分别为1.67、1.65和5.25倍。PBO对室内虫源和田间虫源ZY的增效比分别为2.16、3.91倍,TPP对室内虫源和田间虫源ZY的增效比分别为2.00、2.15倍。田间虫源ZY体内酯酶及多功能氧化酶活性均显著高于室内虫源(P<0.05)。经氰戊菊酯诱导后,室内虫源和田间虫源ZY体内的酯酶上升比值分别为2.25、1.59倍,多功能氧化酶活性分别上升1.21、1.45倍。以上结果表明,田间虫源ZY黄胫小车蝗对氰戊菊酯的敏感性下降,且其体内酯酶、多功能氧化酶活性提高,说明酯酶和多功能氧化酶参与了氰戊菊酯的代谢作用,推断这两种酶是导致黄胫小车蝗氰戊菊酯抗性的原因之一。     

Effect of HMBi on Slaughter Performance,Intestinal Mucosal Morphology and Intestinal Enzyme Activity of Fujian Yellow Rabbits

This experiment was conducted to determine the effect of HMBi on slaughter performance,intestinal mucosal morphology and intestinal enzyme activity of Fujian Yellow rabbits.100 weaning rabbits (half male and half female) with similar weight were randomly allotted to 4 groups with 5 replicates per group and 5 rabbits per replicate.The control group was fed a basal diet,groups Ⅰ,Ⅱ and Ⅲ were fed the basal diets supplemented with 0.20%,0.40% and 0.60% HMBi,respectively.The pre-test period lasted for 10 days and the trial period lasted for 52 days.The results showed as follows:① Compared with control group,the slaughter weight and dressing percentage in group Ⅱ were significantly and extremely significantly increased (P<0.05;P<0.01),respectively,the carcass weight in groups Ⅱ and Ⅲ were significantly increased (P<0.05).② Compared with control group,the villous height of duodenum and jejunum in group Ⅱ were extremely significantly increased (P<0.01),the villous height of jejunum and ileum in group Ⅲ were extremely significantly increased (P<0.01);The crypt depth of duodenum and jejunum in groups Ⅰ,Ⅱ and Ⅲ were significantly or extremely significantly decreased (P<0.05;P<0.01),the crypt depth of ileum in groups Ⅱ and Ⅲ were significantly increased (P<0.05);The V/C of duodenum and ileum in groups Ⅰ,Ⅱ and Ⅲ were significantly or extremely significantly increased (P<0.05;P<0.01),the V/C of jejunum in group Ⅲ was extremely significantly increased (P<0.01).③ Compared with control group,the amylase activity in groups Ⅱ and Ⅲ were significantly increased (P<0.05).In conclusion,HMBi could enhance dressing percentage,improve intestinal mucosal morphology and increase intestinal enzyme activity of Fujian Yellow rabbits.Under this experiment conditions,the appropriate HMBi level in the diet of Fujian Yellow rabbits was 0.40%.     

蛋氨酸羟基类似物异丙酯(HMBi)对福建黄兔屠宰性能、肠道黏膜形态和肠道酶活的影响

本试验旨在研究蛋氨酸羟基类似物异丙酯(HMBi)对福建黄兔屠宰性能、肠道组织形态和肠道酶活的影响。选取体重相近、健康的断奶福建黄兔100只(公、母各半),随机分为4组,每组5个重复,每个重复5只。对照组饲喂基础日粮,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组在基础日粮中分别添加0.20%、0.40%、0.60% HMBi。预试期10 d,正试期52 d。结果表明,①与对照组相比,Ⅱ组屠体重和屠宰率分别显著和极显著提高(P<0.05;P<0.01),Ⅱ、Ⅲ组胴体重显著提高(P<0.05)。②与对照组相比,Ⅱ组十二指肠和空肠绒毛高度极显著提高(P<0.01),Ⅲ组空肠和回肠绒毛高度极显著提高(P<0.01);Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组十二指肠和空肠隐窝深度显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01),Ⅱ、Ⅲ组回肠隐窝深度显著提高(P<0.05);Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组十二指肠和回肠绒毛高度/隐窝深度比值显著或极显著提高(P<0.05;P<0.01),Ⅲ组空肠绒毛高度/隐窝深度比值极显著提高(P<0.01)。③与对照组相比,Ⅱ、Ⅲ组淀粉酶活性显著提高(P<0.05)。综上所述,HMBi可提高福建黄兔的屠宰率,改善小肠黏膜形态,增加肠道酶活性;在本试验条件下,福建黄兔日粮中HMBi的适宜添加水平为0.40%。     

Comparative adverse cardiac effects of pimobendan and benazepril monotherapy in dogs with mild degenerative mitral valve disease: a prospective, controlled, blinded, and randomized study

BACKGROUND: Pimobendan (PIMO) is an inodilator that may have some beneficial effects in canine degenerative mitral valve disease (MVD). However, little information is available about its cardiac effects in dogs without systolic myocardial dysfunction. HYPOTHESIS: Compared to benazepril (BNZ), an angiotensin-converting enzyme inhibitor, PIMO may worsen valve regurgitation in early canine MVD. ANIMALS: Twelve Beagles with asymptomatic MVD were randomized into 2 groups (n = 6) receiving BNZ or PIMO at dosages of 0.25 mg/kg PO q24h and q12h respectively, for 512 days. METHODS: The study followed a blinded, randomized, prospective, and parallel group design. After day 512, the dogs were necropsied, and cardiac histopathology was performed in a blinded manner. RESULTS: A significant treatment effect was observed as soon as day 15 with increased systolic function in the PIMO group by comparison to baseline value as assessed by fractional shortening (P < .0001) and tissue Doppler variables (P = .001). Concurrently, the maximum area and peak velocity of the regurgitant jet signal increased (P < .001), whereas these variables remained stable in the BNZ group. Histologic grades of mitral valve lesions were more severe in the PIMO group than in the BNZ group. Moreover, acute focal hemorrhages, endothelial papillary hyperplasia, and infiltration of chordae tendinae with glycosaminoglycans were observed in the mitral valves of dogs from the PIMO group but not in those of the BNZ group. CONCLUSIONS AND CLINICAL IMPORTANCE: PIMO has adverse cardiac functional and morphologic effects in dogs with asymptomatic MVD. Additional investigation in dogs with symptomatic MVD is now warranted.     

甘氨酰谷氨酰胺二肽对黄羽肉鸡肝脏脂肪代谢的影响及其机制的研究

选择360只1日龄优质黄羽肉鸡，随机分为4组，分别饮用凉开水配制的浓度为0、0．01、0．05和0．10mg／L的甘氨酰谷氨酰胺（Gly—Gin）二肽溶液，连续饮用41d。用甘油三酯试剂盒测定肝脏总甘油三酯的含量。采用相对定量RT—PCR的方法来检测ACC（acetyl—CoAcarboxylase）和PPAR0a（peroxisomeproliferator—activatedreceptorsa）mRNA的表达水平。试验结果表明：①Glv—Gln二肽能够呈现剂量依赖性的降低肝脏4CCmRNA的表达水平，0．10mg／LGly—Gin二肽处理组较对照组差异显著（P〈0．05）。②Glv—Gln二肽能够显著上调只附R仅基因mRNA的表达水平，其中0．05mg／LGly—Gln二肽处理组较对照组差异显著（P〈0．05）。③Gly—Gln二肽具有提高肝脏甘油三酯含量的趋势，但差异不显著（P〉0．05）。以上结果提示，Glv—Gln二肽能够通过降低肝脏甘油三酯的合成，促进代谢，从而减少脂肪沉积水平。