粉红粘帚霉67—1厚垣孢子形成与贮存研究

为研制粘帚霉生防剞剂,以粉红粘帚霉67—1为材料,对粉红粘帚霉67—1厚垣孢子的生长过程、孢子结构、贮存介质和制剂含水量以及厚垣孢子和分生孢子的货架期比较进行了研究。结果表明：在特定的培养基中,粉红粘帚霉67—1在培养24h后产生厚垣孢子,厚垣抱子形成于茵丝顶端或中部,并可以脱落游离到培养基中。电镜下可以看到圆形或椭圆形厚垣孢子以及加厚的细胞壁。相同贮存条件下,厚垣孢子的货架期比分生孢子长。低温条件下,10％含水量的贮存介质更利于厚垣孢子的贮存。     

绿色粘帚霉厚垣孢子产生条件及其对柑橘绿霉病的防治效果研究

【目的】以绿色粘帚霉菌株UV-44为对象,研究不同培养基、pH、培养时间和温度对厚垣孢子产量影响及其对柑橘绿霉病的室内防效。【方法】采用摇瓶震荡培养菌株,血球计数板计数厚垣孢子数;室内贮藏时浸果后单果独立包装,以清水和施宝克为对照,研究厚垣孢子悬液、分生孢子悬液和发酵原液对柑橘绿霉病的相对防效。【结果】UV-44厚垣孢子产量最高的培养基、pH、培养时间和温度分别是燕麦片液体培养基、pH 10、13d和30℃,该条件下产生厚垣孢子浓度为1.52×1011个/L;室内贮藏30d、60d和90d后,厚垣孢子相对防效随时间增加,分生孢子悬液和发酵原液低则逐渐降低。【结论】绿色粘帚霉厚垣孢子具有重要的生防价值。     

草菇绿粘帚霉病害的初步研究

报道了草菇上由绿粘帚霉引起的绿霉病并对致病菌的生长温度、ｐＨ范围、需氧等生理特性及寄主范围做了初步研究。     

木霉和绿粘帚霉对柑桔青霉病菌的拮抗作用

通过圆盘滤膜试验，对扣培养试验，孢子萌发试验，菌丝间的相互作用观察，纤维素酶活力的测定以及对病害病情发展的影响等项研究，调查了土壤中分离的木霉和绿粘帚霉菌株对柑桔青霉病菌的拮抗作用。结果表明：有16．1％的黄绿木霉、72．7％的钩状木霉、69．2％的绿粘帚霉的不挥发性代谢产物对柑桔青霉病菌菌丝生长的抑制作用超过了60％；有54．5％的钩状木霉、61．5％的绿粘帚霉对其孢子萌发的抑制率大于90％；木霉和绿粘帚霉产生的挥发性代谢产物对柑桔青霉病菌生长的抑制作用都小于10％。所试验的木霉和绿粘帚霉菌均不同程度地具有分解纤维素的能力。刺伤接种试验表明，木霉和绿粘帚霉对刺伤接种果实的病情发展具有明显的抑制作用。本试验结果表明，木霉和绿粘帚霉对柑桔青霉的拮抗作用表现在抗生和竞争两方面。     

绿粘帚霉抗生生物型GVP的选育

经紫外光和五氯硝基苯(PCNB)复合处理绿粘帚霉(Gliocladium virens)野生菌株Fo51,获得耐PCNB、抗立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)的生物型—绿粘帚霉抗生物型(GVP)。(GVP)的生长、产孢、分生孢子萌发及在平板上对立枯丝菌的抗生作用等均明显优于野生菌株Fo51,25℃,PH5.0,含水量20％—25％及含有机物的土壤最适合于GVP在土壤中的增殖。     

绿色粘帚霉的紫外线诱变和对柑橘绿霉菌的拮抗作用

用紫外光处理绿色粘帚霉菌株G-26的分生孢子,在照射的前两分钟,孢子死亡率显著上升,3min达98.5%,5min则完全致死。在获得的108个诱变株中,有59个对柑橘绿霉菌丝生长的抑制活性得到提高,以UV-44提高最多,与G-26相比,其相对抑制率为42%。本试验对G-26和UV-44的生物学特性进行了研究。结果表明,UV-44较G-26菌丝生长速率下降,产孢能力降低。两菌株生长和产孢的条件基本相同:25～30℃、pH5、全黑暗是它们菌丝生长最适条件;25℃、pH5、全黑暗为最佳产孢条件。然而,它们的孢子萌发条件有所差异。     

绿粘帚霉多菌灵耐药性菌株的筛选

对培养7 d的绿粘帚霉(Gliocladium.virens)F051分生孢子悬浮液用15 W紫外灯,距离为30 cm处进行照射,并结合含药培养基培养,筛选得到了2株绿粘帚霉(G.virens)的多菌灵耐药性菌株。试验结果表明:紫外照射3min时,绿粘帚霉F051分生孢子的致死率达89.3%;当照射时间达到5 min时,孢子的存活率为0,故选择照射3min为本试验的最适诱变剂量;使F051致死的多菌灵最低终浓度为2μg/mL;诱变菌株与亲本菌株相比,抗药性提高了4倍,产孢能力更强,菌丝生长更为密集,这有利于生防真菌更快的抑制植物病原真菌的生长,减少农药的使用量,缓解化学防治对环境的压力。     

绿粘帚霉原生质体制备和再生条件的研究

采取单因素实验对绿粘帚霉(Gliocladiu mvirens F051)的原生质体制备和再生条件进行了研究,结果表明,绿粘帚霉(F051)原生质体制备和再生的最佳条件是:用培养基A培养F051分生孢子24h,MgSO40.6mol/L(再生用蔗糖0.6mol/L),磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液为缓冲系统,纤维素酶:蜗牛酶:溶菌酶=4mg/mL∶2mg/mL∶2mg/mL,在32℃水浴中酶解2h。     

冷杉半帚霉的生物学特性

为了解中国新纪录种冷杉半帚霉(Leptographium abietinum)与松材线虫的关系及其致病机理,研究了冷杉半帚霉的生物学特性.菌丝生长的最适条件:温度为25℃,半光照半黑暗培养,pH=5.9,碳源为蔗糖,氮源为硝酸钾.最适产孢条件:温度为25℃,全黑暗培养,pH=7.0,碳源为蔗糖,氮源为尿素.最适孢子萌发条件:温度为25℃,相对湿度为100%.     

不同发酵条件对绿粘帚霉（RCEF4099）抗辣椒灰霉活性的影响

[目的]为获得初步优化的发酵工艺条件及提高绿粘帚霉的发酵产量提供依据。[方法]通过单因子和正交试验研究了一系列主要培养条件（碳源、氮源、营养性因素、非营养性因素）对该菌株抗茵活性的影响。[结果]菌株RCEF4099最佳液体培养基配方为：40％葡萄糖、0．5％白砂糖、1．5％干酵母、0．02％K2HPO。;最佳培养条件为：装液量40／100ml（V／V）,接种量10％（V／V）,培养时间为5d,摇床转速160r／min。[结论]获得了初步优化的发酵工艺条件。     

稻曲病病原菌生物学特性研究

对稻曲病病原菌生物学特性的研究结果表明.稻曲病菌生长的最佳碳源为蔗糖,最适碳源浓度为2%～3%,黑暗条件、pH4.0～8.0、完全培养基有利于稻曲病菌生长,稻曲病粒浸出液能影响水稻种子的萌发.     

中国主要稻区稻曲病菌的生物学特性及群体遗传多样性

【目的】明确采自中国10个水稻主产省份111个稻曲病菌（Ustilaginoidea virens）菌株的生物学特性、群体遗传多样性与地理区域的关系。【方法】采用生物学方法测定111个稻曲病菌菌株的产孢能力、生长速率和致病力,并采用SPSS 20.0软件对稻曲病菌菌株的产孢能力、菌丝生长速率及致病力进行相关性分析。提取111个稻曲病菌基因组DNA,采用3对特异性引物BOX、REP、ERIC对稻曲病菌菌株的全基因组DNA进行PCR扩增,通过聚类分析对其群体遗传多样性进行研究。【结果】111个稻曲病菌菌株的致病力与产孢量的Pearson相关系数为0.765,显著性概率为0.001;致病力与生长速率的Pearson相关系数为0.035,显著性概率为0.685。采用3对特异性引物BOX、ERIC、REP对稻曲病菌菌株的全基因组DNA进行了PCR扩增,群体遗传多样性值分别为0.73、0.62和0.60。111个稻曲病菌菌株的DNA用BOX引物分别扩增出7-13条不等的带谱,DNA指纹相似性在0.70相似水平上,供试菌株被划分为6种基因类群,其中第1类群为优势类型,有57个菌株,占总数的51.4％;来自安徽、四川、广西、湖北和云南的菌株主要划分在类群1和4,第2类群主要是来自江苏的菌株,有18个菌株,占总数的16.2%;第3类群是来自浙江的菌株,有8个菌株,占总数的7.2%;第5类群是来自黑龙江的菌株,有9个菌株,占总数的8.1%,第6类群是来自辽宁的菌株,有12个菌株,占总数的10.8％。稻曲病菌基因类群与地理区域之间有一定的相关性,与致病力、生长速率和产孢量之间没有相关性。【结论】来自中国10个省份的111个稻曲病菌菌株的致病力与产孢量之间具有显著相关性,相关程度为中等;致病力与菌丝的生长速率没有相关性。根据BOX-PCR扩增的稻曲病菌菌株基因组DNA指纹图谱的多态性进行划分的基因类群与地理区域之间显著相关,推测稻曲病菌属于局域性传播;基因类群与生物学特性之间没有相关性。     

碳源和氮源对绿粘帚霉合成几丁质酶的影响

几丁质是自然界中仅次于纤维素的第二大可再生自然资源,几丁质酶在降解几丁质方面有重要功能,而且在植病防治方面有重要作用。绿粘帚霉(G.virens)是生物防治中具有前途的拮抗菌。本文以胶体几丁质、细粉几丁质、葡萄糖、蔗糖为不同碳源,以KNO3、(NH4)2SO4、蛋白胨、酵母浸粉为不同氮源对绿粘帚霉F051合成几丁质酶进行初步研究,发现绿粘帚霉F051合成几丁质酶的最佳碳源和氮源分别是细粉几丁质和酵母浸粉。     

十种杀菌剂对稻曲病菌无性孢子的毒力测定

选用10种杀菌剂对稻曲病菌无性孢子进行室内毒力测定的结果表明,20.67%万兴乳油和40%福星乳油对稻曲病菌厚垣孢子和分生孢子的萌发均有较好的抑制效果,其EC50分别为2.217 μg·mL-1、2.234 μg·mL-1和3.633 μg·mL-1、2.656 μg·mL-1;10%世高和10%井冈霉素抑制效果相对较差.同一种杀菌剂对稻曲病菌厚垣孢子和分生孢子的抑制效果不同,10%世高对厚垣孢子的EC50为5.612 μg·mL-1,对分生孢子的EC50为20.227 μg·mL-1;而43%好力克对两种孢子的EC50分别为11.659 μg·mL-1和7.185μg·mL-1.     

一株绿木霉的rDNA ITS序列测定及其菌株的培养特性

为了确定试验菌株是否为绿木霉（Trichoderma virens）,对其菌丝体进行了ITS序列测定和Genbank基因库比对,并通过生长速率法研究其室内培养条件.结果表明,试验菌株的ITS序列长度为589 bp;在Genbank核酸序列数据库中比对,试验菌株与绿木霉的相似率为98％,可以确定此菌株为绿木霉,Genbank登录号为HM046564; pH对绿木霉培养菌丝生长的影响根据不同的培养基而不同,其中绿木霉在pH =5 ～7的范围内均能较好地生长;供试最适碳源为葡萄糖和蔗糖,最适氮源为酒石酸铵和蛋白胨,最适生长温度为25℃.