影响鸡新城疫和减蛋综合征病毒血凝试验因素的探讨

鸡新城疫(ND)是目前对养鸡业危害最大的传染病之一。鸡减蛋综合征(EDS76）是一种由腺病毒引起的、以产蛋下降及蛋壳形成不全为特征的传染病。目前主要用弱毒疫苗和油乳剂灭活疫苗来预防这两种疾病的发生。ND和EDS76的病毒均具有囊膜，其上有血凝素，能凝集红细胞(RBC)，且两种病毒可通过鸡胚或鸭胚尿囊腔接种来增殖，故可用血凝试验检测尿囊液中病毒的含量。血凝试验具有操作简便、快速和实用性强等特点，但影响因素较多。为了克服不利因素的影响，选择出最佳的试验条件，笔者对几个常见的影响因素进行了初步探讨，现介绍如下。一…     

鸡新城疫-传染性支气管炎-减蛋综合征三联油乳剂苗的研制及应用

用新城疫病毒（克隆H88株。）、传染性支气管炎病毒（JP株和H52株）和减蛋综合征病毒（H91株）分别接种于鸡胚和鸭胚,并收取其含毒鸡、鸭胚尿囊液,用一定浓度甲醛溶液灭活,按一定比例混匀,以7号白油为佐剂制成鸡新城疫（ND）－传染性支气管炎（IB）－减蛋综合征（EDS76）三联油乳剂灭活苗（三联苗）。三联苗免疫30日龄雏鸡,免疫后7天产生免疫应答,免疫后21天保护率达100％。疫苗在4℃～8℃保存期为12个月,10℃～25℃保存期为6月,该疫苗在全省不同地区鸡群应用400余万羽份,取得满意效果。     

鸡减蛋综合征油乳剂灭活苗的研制

用鸡减蛋综合征(EDS)BH_9i毒株接种鸭胚,收获鸭胚尿囊液,用一定浓度福尔马林灭活后加入吐温80制成水相,司班80和硬脂酸铝加入白油中制成油相,二者按一定比例乳化后制成EDS油乳剂灭活苗,该苗接种开产前母鸡,可使接种鸡获得对EDS强毒攻击坚强的抵抗力,该苗安全、稳定,4℃保存可达12个月以上。     

改革鸡产蛋下降综合症灭活苗制备工艺的研究

选用鸡产蛋下降综合症（ＥＤＳ７６）的两个地方毒株为种毒感染９日龄的鸭胚，感染后１２０小时采取鸭胚的尿囊膜制成浸出液，经甲醛灭活后，用以１０号白油为主的油佐剂乳化制成ＥＤＳ７６灭活苗，简称改革法，下同。     

鸡减蛋综合征油乳剂灭活苗的研制

用鸡 减蛋综合征（ＥＤＳ）ＢＨ９１毒株接种鸭胚，收获鸭胚尿囊液，用一定浓度福尔马林灭活后加入吐温８０制成水相，司班８０和硬脂酸铝加入白油中制成油相，二者按一定比例乳化后制成ＥＤＳ油乳剂灭活苗，该苗接种开产前母鸡，可使接种鸡获得对ＥＤＳ强毒攻击坚强的抵抗力，该苗安全，稳定，４℃保存可达１２个月以上。     

鸡新城疫、鸡传染性支气管炎（肾型）、鸡产蛋下降综合症三联灭活苗的研制

采用ND LaSota株、IB肾型株和EDS76株接种鸡胚、鸭胚、收集尿囊液，加甲醛溶液灭活后，按一定比例与油相混合，制成油包水型油乳剂灭活苗，用3-6周龄易感雏以久进行安全性试验，免疫效力试验，注射部位吸收良好，免疫3-4周后，ND和IB的保护率均可达到70%以上，鸡产蛋综合症的HI抗体可达顾7log2以上，并能维持较长时间。     

鸡新城疫和减蛋综合征二联灭活苗的制备及其免疫效果观察

用鸡新城疫(ND)Lasota系N79克隆株和减蛋综合征(EDS-76)GC_2毒株,分别接种鸡胚和鸭胚,收获尿囊液毒,血凝价分别达1:2048和1:10000以上,用一定浓度福尔马林37℃作用16～18小时进行灭活,按一定比例混匀,加入7号白油油相中,制备三批二联油乳剂灭活苗,接种产蛋母鸡,接种后15天产生EDS-76 HI抗体,并在一个月内持续升高,而ND HI抗体产生时间略早,至接种后2～3周达到高峰,两者无干扰性;接种一个月后攻毒,对ND保护率4/4,对EDS-76保护性良好;实际应用时选择肌肉注射或皮下注射,0.5～1毫升/羽。     

鸡新城疫、产蛋下降综合征、传染性支气管炎三联油佐剂灭活疫苗研制

应用鸡新城疫（ＮＤ）Ｌａｓｏｔａ株病毒和产蛋下降综合征（ＥＤＳ７６）病毒、传染性支气管炎（ＩＢ）病毒分别接种鸡胚、鸭胚和鸡胚，增殖病毒，收获感染的胚液，制备抗原液，经甲醛溶液灭活后与油相佐剂乳化，制出三联灭活油苗。对制品的安全性和免疫性进行了测定，具有良好的安全性和免疫效果。     

鸡减蛋综合征的研究──Ⅱ．鸡减蛋综合征病原的分离和鉴定

用某鸡场发生减蛋综合征病鸡的输卵管组织接种１０～１２日龄鸭胚盲传，分离到一株ＥＤＳ－７６·ＥＸＫ２病毒。自第３代起至第１０代，均从鸭胚尿囊液中检出血凝素．凝集鸡红细胞的特性可被ＥＤＳ－７６阳性血清所抑制。鸭胚分离毒不能凝集兔红细胞。应用第３和第４代鸭胚尿囊液混合毒经口腔、鼻腔和眼途径人工感染健康产蛋鸡．成功地复制了ＥＤＳ－７６。攻毒后３５天内１１只试验鸡的总产蛋数无明显变化．产蛋率为８５～９４％，但产各种异常蛋占总产蛋数的２９％。电镜下发现原囊液中病毒颗粒呈球形、大小为７０～８０ｎｍ、无囊膜。     

鸡新城疫、减蛋综合征、传染性支气管炎三联油佐剂灭活苗的研究Ⅰ、三联灭活苗对鸡免疫试验

用新城疫病毒克隆７９株，减蛋综合征病毒ＮＥ＿４株和传染性支气管炎病毒Ｍ＿（４１）株分别接种于鸡胚和鸭胚，并收取其鸡、鸭胚尿囊液毒，经甲醛灭活，按一定比例配比，以矿物油为佐剂制成三联油佐剂灭活苗。本苗接种于产蛋后备鸡，免疫后７天产生免疫应答，免疫后３０天保护率达９０％～１００％，免疫后六个月攻毒，ＮＤ和ＩＢ保护宰为１００％，ＥＤＳ＿（７６）为９５％。１９９２～１９９４上半年，本苗在江苏、安徽、山东等省的一些鸡场免疫十万余只鸡，均获得满意效果。     

鸡减蛋综合征油乳剂灭活苗的研制

采用鸡减蛋综合征(EDS76)K-11株细胞毒为种毒，通过鸭胚连续盲传5代，使其扩增，收获尿囊液作为基础种子毒。基础种子毒在非免疫健康鸭胚上增殖动态的试验结果表明，EDS76病毒在羊水、尿囊膜(包含羊膜)、尿囊液中含量较高，增殖动态趋于一致；接种病毒后120h为最佳收毒时间，突破了传统的只收集尿囊液作为病毒材料的做法，使收获的病毒材料由原来的每胚5．2ml增加到每胚49．4ml，显著降低了研究费用和制苗成本。确定了0．1％甲醛在20℃条件下48h灭活病毒为最佳灭活方法。成功地研制出尿囊膜、羊膜、羊水、尿囊液四元材料混合的EDS76油乳剂灭活疫苗。此疫苗在甘肃省推广试用80万羽份，安全可靠，免疫持续期长，能有效地预防和控制EDS76的发生和流行。     

鸡减蛋综合征的研究Ⅱ.鸡减蛋综合征病原的分离和鉴定

用某鸡场发生减蛋综合征病鸡的输卵管组织接种１０－１２日龄鸭胚盲传，分离到一株ＥＤＳ－７６·ＥＸＫ２病毒。自第３代起至第１０代，均从鸭胚尿囊液中检出血凝素，凝集鸡红细胞的特性可被ＥＤＳ－７６阳性血清所抑制。鸭胚分离毒不能凝集免红细胞。应用第３和第４代鸭胚尿囊液混合毒经口腔、鼻腔和眼途径人工感染健康产蛋鸡，成功地复制了ＥＤＳ－７６。攻毒后３５天内１１只试验鸡的总产蛋数无明显变化，产蛋率为８５～９４％，     

鸡新城疫一减蛋征二联油佐剂灭活苗的研究和应用

用鸡新城疫病毒Lasota株和减量综合征（EDS－76）SG9301毒株，分别接种鸡胚和鸭胚，收获尿囊液毒，血凝价（HA）分别达1：1280和1：1000。用一定浓度福尔马林37℃作用24小时进行灭活，按一定比例混匀，加入10号白油油相中，制备的二职油佐剂灭活苗，用于成都、乐山、绵阳、西昌、雅安等鸡场开产前母鸡，并对二职苗的特征和免疫效果进行观察，获得十分满意的效果。     

NDV不同浓度接种鸡胚后的HA效价比较

鸡新城疫是一种急性高度接触性传染病,为危害鸡群的主要传染病之一.近年来,在生产上出现了高致病性的强毒株,甚至超强毒株,一旦发生,难于控制,往往出现极高的死亡率,给养鸡业带来毁灭性的打击.防制本病的有效方法是对鸡群进行免疫接种,常用的疫苗有弱毒疫苗和灭活疫苗.随着毒株毒力的加强,用弱毒疫苗免疫接种经常出现免疫失败或保护不完全的情况,常常要结合ND油乳剂灭活苗接种才能取得较好的效果.而在强毒力的灭活苗的生产中,目前仍主要采用鸡胚作为病毒的繁殖载体.因此,获得高效价的病毒液（尿囊液）是制苗的关键.试验对如何获得高效价的尿囊液,确定接种时种毒的最佳浓度及鸡胚尿囊液的最佳收集时间进行探讨.     

新城疫（ND）—减蛋综合征（EDS76）蜂胶二联灭活疫苗的研制Ⅰ．制苗工艺、疫苗安全性和免疫原性试验

将新城疫病毒（NDV）Colon-30株和减蛋综合征病毒（EDS76AV）－127株分别接种于非免疫鸡胚和鸭胚，制备抗原液。抗原液经甲醛灭活后，与纯化的天然免疫增强剂蜂胶乳化，制成鸡新城疫（ND）－减蛋综合征（EDS76）蜂胶二联灭活疫苗，对疫苗的安全性和免疫原性进行了测定。对3－6周龄易感雏鸡以2倍使用剂量肌内注射，安全性良好；对1日龄雏鸡接种1个使用剂量进行急性毒性试验。15d生长曲线表明，对雏难 影响。对6周龄雏鸡注射1个使用剂量，每批疫苗免疫10只鸡，免疫后5－32d，鸡血清中EDS76血凝抑制（HI）抗体的几何平均滴度（GMT）为6．5－11．8log2,ND血凝抑制（HI）抗体的几何平均滴度（GMT）为4．8－9．8log2；对ND免疫攻毒试验表明，3批疫苗，每羽份含有的半数保护量（PD50）分别为≥127、≥131和≥127。     

鸡新城疫,减蛋综合征,传染性支气管炎三联油佐剂灭活苗的研究…

用新城疫病毒克隆７９株，减蛋综合征病毒ＮＥ４株和传染支气管炎病毒Ｍ１株分别接种于鸡胚和鸭胚，并收取其鸡，鸭胚尿囊液毒，经甲醛灭活，按一定经例配比，以矿物油为佐剂制成三联油佐剂灭活苗。本苗接种于产蛋后备鸡，免疫后７天产生免疫应答，免疫后３０天保护率达９０％－１００％，免疫后六个月攻毒，ＮＤ和ＩＢ保护率１００％，ＥＤＳ７６为９５％。１９９２－１９９４上半年，本苗在江苏，安徽，山东等省的一些鸡场免疫十万     

鸡产蛋下降综合征的防制

正产蛋下降综合征是一种由禽腺病毒引起的,以产蛋量下降为特征的禽类传染病。病鸡无明显症状,而以产蛋量骤然下降、蛋壳异常(产软壳蛋、薄壳蛋)、产畸形蛋、蛋质低劣和蛋壳颜色变淡为特征。1病原产蛋下降综合征病毒属于禽腺病毒,在7~10日龄鸭胚中生长良好,可使鸭胚致死,其尿囊液具有很     

ND—IB—IBD三联油乳剂灭活苗的研制

用鸡新城疫（ＮＤ）Ｌａｓｏｔａ株、肾型传染性支气管炎（ＩＢ）ＴＫ６株和鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）ＴＦＩ株，分别接种９ｄ龄－－１１ｄ鸡胚，收集鸡胚尿囊液毒，经甲醛灭活后按一定比例加入１０号白油佐剂制成三联油乳剂灭活苗。按种３周龄鸡和产蛋后备鸡群１０ｄ产生免疫力；３０ｄ和１８０ｄ攻强毒保护率１００％，免疫期达６个月上。自１９９６年以来本苗在蓟县等一些鸡场免疫６万余只收到满意效果。     

鸡4种病毒抗原液的浓缩及其四联油佐剂灭活苗的研制

本研究通过超滤浓缩技术对鸡新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、产蛋下降综合征病毒和传染性法氏囊病病毒的尿囊液进行了10倍或10倍以上的浓缩处理，并按一定的比例配比研制成四联油乳剂灭活疫苗，对鸡的最小免疫剂量是0.25ml，免疫接种二周后，鸡新城疫和产蛋下降综合征病毒的HI抗体效价分别达到8log     

用RT—PCR鉴别新城疫病毒不同毒力株的研究进展

本文概述了用RT－PCR技术检测新城疫病毒（NDV）的研究进展。主要介绍了鸡新城疫病毒（NDV）基因组结构以及强弱毒株F蛋白在裂解位点附近的氨基酸差异以及从感染鸡胚尿囊液提取RNA和从组织匀浆直接提取RNA,并用之作RT－PCR以鉴别NDV毒株毒力和诊断ND的研究现状及应用前景。