稀释次数对辽宁绒山羊细管冻精冷冻效果的影响

传统的山羊冻精稀释液的配方使用甘油作为精液低温保护剂，但是甘油对精子具有毒副作用。在常温添加对冻精质量的影响较大，所以多采用两次稀释低温添加的办法，以减少其负面效应。自从用乙二醇代替甘油作为冻精的保护剂以来，冻精质量有了明显提高。笔者曾使用含有乙二醇的稀释液对辽宁绒山羊精液进行常温添加一次稀释，平衡1．5h即进行冷冻也取得了比较好的效果。一次稀释与两次稀释哪个效果更好？很有必要作进一步的试验，笔者于2003年10月份进行了该项比较实验，现将试验结果介绍如下：     

猪精液常温保存稀释液配方研究

稀释液是影响精液保存质量的主要因素 ,自 5 0年代推广人工授精技术以来 ,人们就开始对稀释液进行研究。猪精液一般采用常温保存 ,常温保存的效果与稀释液配方密切相关。本试验是在前人研究的基础上 ,根据猪精液的理化特性对配方进行改进优化 ,目的是想筛选出适合我地推广的最佳猪精液常温保存稀释液配方。1　材料与方法1 1　稀释液配方Ａ1,Ｂ1,Ｃ1,Ｄ为基础配方 ,Ｅ为湖南农大杨文炳教授研制的 80 60 1稀释液 ;Ａ2 ,Ｂ2 ,Ｃ2 是在Ａ1,Ｂ1,Ｃ1配方基础上进行优化设计而成。详见表 1。表 1　稀释液配方成　　分Ａ1Ａ2 Ｂ1Ｂ2 Ｃ1Ｃ2 ＤＥ葡萄…     

传统稀释液配方中添加不同保护剂对藏羊精液冷冻效果的影响

为探索在传统稀释液配方中添加保护剂对藏羊精子的冷冻保存效果,在传统稀释液配方(果糖-蔗糖-柠檬酸钠-甘油)中,由Tris(三羟甲基氨基甲烷)代替柠檬酸钠,乙二醇代替甘油,在果糖-蔗糖-Tris-乙二醇基础上添加维生素B12、维生素E、维生素C、复合维生素B等,以增强精子缓冲力,减少毒性,提高精子活力、顶体完整率及受精力。结果表明:精液冷冻保存稀释液中添加Tris比添加柠檬酸钠有更好的冷冻保存效果,能有效改善冻后精子活力和顶体完整率;精液冷冻保存稀释液中添加维生素B12对精子有良好的保护作用;用等体积乙二醇代替甘油作为防冻剂,对精子冷冻时的保护作用不亚于甘油;藏羊细管冷冻精液的制作中,用果糖-蔗糖-Tris-乙二醇-维生素B12组合稀释液配方进行2次稀释,8 min冷冻,其冷冻效果最佳,顶体完整率最高。     

辽宁绒山羊细管冷冻精液研究

本实验研究了辽宁绒山羊细管冷冻精液的稀释液及制作工艺。结果表明:离心洗涤去精清可以提高冷冻-解冻后的精子活率,与不去精清的对照组相比差异显著(P<0.05);以等体积乙二醇替代甘油作防冻剂制作的细管冷冻精液,解冻后的精子活率和顶体完整率显著(P<0.05)高于甘油作防冻剂的对照组。实验还证明,含Tris的柠檬酸盐缓冲液对提高冷冻后精子活率与顶体完整率具有良好的作用。     

蔗糖,牛血清白蛋白和锌离子对白绒山羊精液冷冻效果的影响

在传统的甘油－卵黄－柠檬酸盐稀释液的基础上，Ｂ液内分别添加了３种浓度的蔗糖、牛血清白蛋白（ＢＳＡ）、锌离子进行分析比较。结果表明，添加蔗糖的保护液较传统的保护液能更有效地冻存精液，１００ｍＭ组精子活力显著提高（Ｐ〈０．０５）。ＢＳＡ和锌离子对精液冻存无显著影响（Ｐ〉０．０５），但都具有一定的保护作用。改良稀释液的精子活力比传统稀释液的提高３２．７％（Ｐ〈０．０１）。细管精液的冻存效果显著高于颗粒精     

蓝狐细管冻精的研究

实验对蓝狐细管冻精的冷冻工艺进行了筛选。结果表明:4种以Tris-柠檬酸-甘油稀释液作为细管冻精稀释液效果良好,其中以葡萄糖代替果糖的A1配方及稀释方法效果最佳。常温和冷冻保存中结果发现,虽然乙二醇毒性较大,但含有6%乙二醇的防冻剂的精液解冻后活率最高。冻精平衡以0￣5℃和2 h为宜,初冻温度以-110￣-130℃的冷冻速度最好。解冻时,以38℃水浴中存活指数最高。冷冻过程使精子活率、畸形率、顶体完整率等指标受到明显影响。以A1为冷冻液的冻精人工授精受孕率为73.81%,每胎产仔数为5.81,与鲜精人工授精的结果差异显著(P<0.05)。     

山羊精液冷冻过程中影响因素分析

本试验采用三种稀释液配方，三种甘油浓度、三种卵黄浓度及三种始冻温度，按既定的程序对山羊精液进行冷冻解冻，逐步检查精液的活力和活精子百分率（简称活率）。并在采精之后，冷冻前、解冻后对精子进行电镜扫描超激结构观察，所有数据进行单因子差异显著性分析得出：三种稀释液中，Ｃ液最差，Ａ、Ｂ液差异显著（Ｐ＜０．０５），Ａ较好。三种甘油浓度冻精活率差异显著（Ｐ＜０．０５），６％最好。精子顶体损伤率随甘油浓度增加而增加。不同的卵黄浓度和始冻温度差异均不显著（Ｐ＞０．０５）。用含甘油６％的冻精对两只超排母羊输精，发情后第八天冲卵镜检，受精率达９７．０％，胚胎发育率达８７．３％。     

乙二醇对绵羊冻精效果的研究

以含甘油的四组然释液为对照组，以等量的乙二醇替换甘油作为相应的试验组，研究乙二醇对绵羊冻精效果的影响。结果表明，试验组冻后精子活力、顶体完整率显著高于对照组（P＜0．05），并确定了3号试验组稀释液为最适精液冷冻配方，其乙二醇浓度为10％时冷冻保护效果最好。     

混合保护液和冻前处理方法对小鼠胚胎一步冷冻效果的影响

选用Ａ￣Ｅ５种混合保护液：Ａ．二甲亚砜（ＤＭＳＯ）＋乙醇（ＥＧ），Ｂ．甘油（ＧＬ）＋丙二醇（ＰＧ），Ｃ．ＧＬ＋ＥＧ，Ｄ．ＧＬ＋ＤＭＳＯ，Ｅ．ＰＧ＋ＥＦ，以２种冻前处理方法，对小鼠桑椹胚和囊胚进行一步冷冻，冷冻混合保护液中各种保护剂浓度均为２５％。法的冻前平衡液为ＶＳ２的对倍稀释液；法的冻前平衡液中，前一种保护剂浓度为１０％，后一种保护剂浓度为２０％。胚胎于室温（２０℃）下在ＶＳ１中平衡５ｍｉｎ或Ｖ     

辽宁绒山羊冻精稀释液冷冻保存法

目前，人们习惯把辽宁绒山羊冻精稀释液在配制后放于0℃～4℃条件下保存，以备后用。然而这种保存的方法只能保存冻精稀释液1～2d，且配制需大量时间，受温度影响又大，严重影响配种的工作效率。为了延长稀释液的保存时间、方便冻精生产，笔者进行了将冻精稀释液在-5℃～-20℃、-196℃下进行冷冻保存试验及反复冷冻-解冻试验，现将试验结果简述如下。     

几种常规绵羊冻精稀释液配方冷冻效果对比研究

稀释液是精子的保护剂,对精液冷冻效果有着决定性影响.常见的稀释液有柠檬酸—糖类稀释液、奶类稀释液、乳糖类稀释液、加抗氧化剂的蔗糖类稀释液、棉子糖类稀释液、三基类稀释液和添加其他物质的稀释液.本研究对几种常规稀释液配方作了对比试验,试图在现有的绵羊冻精稀释液中找出效果最理想的配方. 　　……     

辽宁绒山羊低温保存精液稀释液配方筛选研究

为了研究辽宁绒山羊精液稀释液对精液低温保存效果的影响，前期试验研制了10个配方，用于绒山羊精液保存，测定了低温保存不同时间的精子活力；根据试验数据，初选了低温保存时间最长、活力最高的精液稀释液配方。以此配方为基础，通过调整三羟甲基氨基甲烷(Tris)、乙二胺四乙酸(EDTA)、柠檬酸(1H₂O)的添加剂量，形成了4组精液稀释液配方，进一步测定了精液低温保存不同时间的精子活力，从中确定了效果最优的精液稀释液最终配方：三羟甲基氨基甲烷(Tris) 2.42 g、柠檬酸(1H₂O) 1.34 g、乙二胺四乙酸(EDTA) 0.20 g、葡萄糖1.00 g、新鲜卵黄20.0 mL、超纯水80.0 mL、青霉素1.0×10⁵ IU、链霉素1.0×10⁵ IU。以最终配方配制辽宁绒山羊精液稀释液，对绒山羊原精进行稀释，低温保存4 d后进行辽宁绒山羊人工输精，统计了母羊的受胎率。结果表明：以最终配方对辽宁绒山羊精液进行稀释，低温保存到第4天时的精子活力为(66.78±5.12)%,用于配种后母羊受胎率达到91.3...     

猪冷冻精液的研究

本试验以甘油、乙二醇为抗冻剂，并添加ATP或安息香酸咖啡因，以解冻后精子活力、顶体完整率、顶体膨胀率、顶体破损率、尾部畸形率和在37℃下的存活时间几个重要评定指标为依据，筛选了几种猪颗粒冻精的冷冻稀释液配方，并优化了其冷冻程序。结果表明，与对照组相比，在冷冻液中添加0．1mg／ml的ATP或2mg／ml的安息香酸咖啡因都能显著提高解冻后精子活力(分别提高0．13和0．18)，降低顶体膨胀率(两者都将近降低了11％)，并能延长其存活时间(分别延长10．5h和11．8h)；甘油和乙二醇两种抗冻剂配合使用，将显著提高冻后精子的活力与存活时间，其较优混合量为甘油3％，乙二醇0．5％。     

种鸡精液冷冻保护剂的确定

以农大褐父母代鸡为材料，以甘油、乙二醇、ＤＭＡ和ＤＭＳＯ为主要冷冻保护剂的试验表明，乙二醇和ＤＭＡ的毒性较小，以Ａ液为稀释液，加抗冷冻剂ＤＭＡ的解冻精子活力为０．５５，且以１０％的ＤＭＡ浓度最佳，精子活力最高为０．６０，显著高于其它组（Ｐ〈０．０５）。以Ｂ液为稀释液的解冻结果表明，应用混合冷冻保护剂的保护效果较好，可获得０．４１￣０．４５的精子活力，差异显著（Ｐ〈０．０５）。     

辽宁绒山羊冻精稀释液冷冻保存法

目前,人们习惯把辽宁绒山羊冻精稀释液在配制后放于0℃～4℃条件下保存,以备后用。然而这种保存的方法只能保存冻精稀释液1～2d,且配制需大量时间,受温度影响又大,严重影响配种的工作效率。为了延长稀释液的保存时间、方便冻精生产,笔者进行了将冻精稀释液在-5℃～-20℃、-196℃下进行冷冻保存试验及反复冷冻—解冻试验,现将试验结果简述如下。1 稀释液在-5℃～-20℃下保存 将配制好的稀释液盛于100～300ml的锥形瓶里,置于冰箱中,用MCT—200超低温温度仪测得冰箱内温度为-5℃～-20℃。待稀释液完全形成冰块后取出解冻,在显微镜下观察稀释液:溶质均匀呈透明状     

不同稀释液配方和冷冻保护剂对贵州黑山羊精液品质的影响

为探究适合贵州黑山羊冷冻精液的稀释液和冷冻保护剂,通过精液质量分析系统比较4种常用的山羊冷冻精液稀释液配方和2种冷冻保护剂对贵州黑山羊精液品质的影响。结果:不同配方中以甘油作为冷冻保护剂对贵州黑山羊精液的保护效果均优于乙二醇,且配方1的精子前进式活力最高(22.73±6.25),配方3次之(20.14±5.25)。结论:经综合评价,在贵州黑山羊冻精生产过程中可选择配方1或配方3作为冷冻精液稀释液,以甘油作为冷冻保护剂。     

两种牛冻精稀释液的对比试验

在影响冻精质量的各项因素中,冻精稀释液可谓是最直接的因素之一。目前,市场上有多种不同配方的进口稀释液浓缩液,笔者就一种进口稀释浓缩液与黑龙江省家畜繁育指导站自制的稀释液进行对比试验。1材料与方法1.1种公牛精液2004年5月10日上午8时,采集6头荷斯坦种公牛的精液,4头肉用公牛的精液。精液各项指标评定合格后,将每头份精液平均分成两等份,按所计算的稀释倍数,分别加入等量的进口稀释液和自制稀释液。1.2稀释液进口稀释浓缩液配方:蒸馏水、果糖、甘油、柠檬酸、磷脂、缓冲液。自制稀释液配方:蒸馏水、葡萄糖、甘油、柠檬酸、卵黄、缓…     

种鸡精液冷冻保护剂的确定

本实验以农大褐父母代种鸡为材料，以甘油，乙二醇，ＤＭＡ和ＤＭＳＯ为主要冷冻保护剂的表明，乙二醇和ＤＭＡ的毒性较小，以Ａ液为稀释液，加抗冷冻剂ＤＭＡ的解冻精子活力为０．５５， 以１０％的ＤＭＡ浓度最佳，精子活力最高为０．６０，显著高于其它组。以Ｂ液为稀释液的结果表明，应用混合冷冻保护剂的保护效果较好，可获得０．４１－０４５的精子活力，差异显著。     

山羊冻精配种效果的观察

<正> 对山羊冻精配种技术的研究报道较少,且进展缓慢,大多效果低而不稳。为了摸索提高山羊冻精配种的效果,我们在制作冻精颗粒的稀释液和解冻液配方,输精次数和方法上进行了探讨,以期获得较好的效果。1983年9月至12月,作了山羊冻精配种66只的观察试验,获得了情期受胎率60.97％,产羔率195.23％的效果,现简述于下: 材料与方法 (1)冻精的制作:经汉中地区牧研所初选后提供的稀释液配方:双馏水100毫升、乳糖5.5克。葡萄糖3.0克,柠檬酸三钠1.5克、卵黄一个、甘油5毫升、青链霉素各5—10万单位。对精液采用平衡前后两步稀释,甘油不参与平衡的方法,自作冻精颗粒。原精和解冻后的精子活力不低于0.8和0.3级。 (2)解冻液:采用西乡县畜牧兽医站生产的2.9％柠檬酸三钠2毫升安瓿解冻液。 (3)冻精颗粒分莎能和本地羊两种,输精对象     

细管冷冻精液试验

<正> 目前世界各国盛行用塑料细管冻制牛精液,我国由于设备条件的限制,再加对细管冷冻精液的规格,型号难以统一,生产中未能推广应用。为了尽快地把细管冷冻精液技术应用到生产实践中,我们对细管冷冻精液的封装,冻制,冷冻稀释液的筛选,以及推广使用等进行了试验。试验方法1.稀释液的筛选:冷冻稀释液的好坏直接关系到冻精质量,我们在冻制细管精液时,筛选了三种稀释液配方:第一种是12％蔗糖液73cc、鲜卵黄20cc、甘油7cc;第二种是将第一种中的12％蔗糖液改为,12％蔗糖液与2.9％柠檬酸钠液按1∶1配制后提取73cc,其它成份同第一种;第三种是在第二种稀释液中以每100cc另加入果糖1克即成。