超长钝顶螺旋藻的选育及形态和生长特性初步研究

用组织匀浆破碎和离心沉降法制备和分离出钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)Sp-Z 的单细胞或少于5个细胞的片段,并用60Coγ射线辐照处理,半致死剂量为1.2 kGy.在2.4kGy的处理组中,筛选出4株藻丝长度、螺旋数、螺旋长分别为Sp-Z的15、10和1.8倍的超长钝顶螺旋藻突变体Sp-Z(E.L).Sp-Z的生长曲线几乎呈直线型,而Sp-Z(E.L)的生长曲线则呈较明显的"S"形.在室外培养时,Sp-Z(E.L)的产量比Sp-Z高11.7%.     

盐碱土稻田施用丁草胺后对泥鳅毒性效应的研究

丁草胺是一种具有选择性的高效、内吸性、传导性芽前除草剂,主要应用在水稻田,通过实验室模拟的方法,探索丁草胺在盐碱土稻田系统中在田水中的降解动态以及对泥鳅的毒性效应。研究表明,丁草胺对泥鳅属于高毒农药,且在最小全致死浓度和最大安全浓度之间,泥鳅对丁草胺反应较为敏感。残留实验结果表明,丁草胺在盐碱土稻田水样中的降解速度高于蒸馏水水样中的降解速度,在施药后的第14天降解率可达到90%左右,因此在按照推荐剂量施用农药丁草胺时,在盐碱土稻田系统中,丁草胺对泥鳅更加安全,对环境的影响较小。     

钝顶螺旋藻的真空干燥工艺条件优化

为提高螺旋藻的藻蓝蛋白含量,针对其真空干燥工艺中3个主要干燥因素（物料厚度、干燥温度和干燥真空度）,利用响应面分析法,对工艺参数进行优化。试验数据采用Design-Expert软件进行多元回归分析,建立了3种干燥因素与藻蓝蛋白含量之间的函数模型。通过脊岭分析,确定钝顶螺旋藻的最佳真空干燥工艺条件为：物料厚度3 mm,干燥温度45 ℃,干燥真空度0.08 MPa,在此优化干燥条件下螺旋藻粉中的藻蓝蛋白含量达12.5000×10-3 mg/mL。     

钝顶螺旋藻的真空干燥工艺优化

为提高螺旋藻的藻蓝蛋白质量浓度,针对其真空干燥工艺中3个主要干燥因素（物料厚度、干燥温度和干燥真空度）,利用响应面分析法,对工艺参数进行优化。试验数据采用Design-Expert软件进行多元回归分析,建立了3种干燥因素与藻蓝蛋白质量浓度之间的函数模型。通过响应面分析,确定钝顶螺旋藻的较佳真空干燥工艺条件为：物料厚度3?mm,干燥温度45 ℃,干燥真空度0.08 MPa,在此优化干燥条件下螺旋藻粉中的藻蓝蛋白质量浓度达12.500×10-3 mg/mL。该研究对于提高螺旋藻粉的干燥品质和产品质量具有参考意义。     

高藻胆蛋白钝顶螺旋藻新品系的选育及RAPD分析

测得可用于工厂化生产的9株钝顶螺旋藻的藻蓝蛋白PC、别藻蓝蛋白APC和藻胆蛋白PBP的含量依次为10.74%~16.26%、3.67%~5.55%和14.42%~21.81%,PC与APC的比值在2.87与3.05之间。以PBP含量最高的Sp-CH为出发品系,用组织匀浆破碎和离心沉降法制得其单细胞或原生质球,并先以0.6%EMS处理30mim再用2.4 kGy的60Coγ射线辐照,经藻丝单体分离培养、PBP含量检测及实验室与生产培殖试验,筛选到1株PC、APC和PBP含量依次比Sp-CH的约高36%、89%和50%,PC/APC为1.91~2.23的突变株,命名为Sp-CH32。RAPD分析结果显示,随机引物S38对该突变株与Sp-CH基因组DNA扩增,得到的扩增产物中显示出多态性差异。Sp-CH32经连续3年的工厂化培殖,表现出生产性状好、PBP高产特性稳定,目前已用于大规模养殖与产业化开发。     

平板式光生物反应器中钝顶螺旋藻高密度培养的工艺优化

螺旋藻作为保健食品或食品添加剂被广泛的人工培养并被制成片状和粉状广泛应用.生物反应器是一个进行涉及到生物或生物活性物质生产的容器.用光生物反应器高密度培养微藻也成为国内外研发的热点.中国养殖的螺旋藻主要为钝顶螺旋藻(Spirulina platensis).本研究中,以钝顶螺旋藻为试材,用三角瓶和平板式光生物反应器培养,并设计不同的培养条件(添加不同浓度的葡萄糖和抗氧化剂,设置不同通气模式和光照条件),探讨其培养工艺参数的优化.结果显示,在三角瓶中,分别适当添加葡萄糖、Na2S2O3和Na2SO3,均可显著提高钝顶螺旋藻的生物量,其最适浓度分别为3、3和2 g/L;光反应器培养下,随着通气处理强度的上升,藻生物量显著增加;而逐步增大通气强度的处理下,藻生物量促进效果则更为明显;单面光源(4 500 lx)培养下的藻生物量要显著高于双面光源(9 000 lx)培养的,但是先单面光源培养,在微藻进入对数期生长时,转变为双面光源培养,其培养产量更高.进一步研究表明,与Na2S2O3相比,Na2SO3与葡萄糖组合效果更好,进一步对各条件优化显示,在葡萄糖浓度4 g/L和Na2SO3浓度3g/L时,藻生物量达到最大值.上述研究表明,添加葡萄糖、Na2SO3、逐步增加通气强度的模式、先单面光源后双面光源培养的光照模式可明显促进钝顶螺旋藻的产量,综合优化的培养条件下,该藻体的平均生长速率和生物量可高达0.85 gDW/(L·d)和10.02 gDW/L.本生物反应器还具有动力消耗小、占地面积小、造价相对便宜、清洗方便、结构简单和容易在室内扩大规模培养等优点.本研究为扩大螺旋藻的培养规模提供了理论依据和技术方法.     

γ射线对钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)的生物学效应

用Cor线照的常状体群体,率是300krud,是示了100krad以下量可以的生长,用超声波把螺单位死剂量是100krad,致,单隹死剂量是100krad,致死剂量是2krad,在100krad对的细总代中,大细长的细胞系,     

螺旋藻辐照杀菌效应研究

本文研究了辐照对螺旋藻的杀菌效果。螺旋藻经7kGy辐照处理后,总带菌量(包括细菌和霉菌)可从初始值105CFU/g数量级水平迅速降至低于102CFU/g,大肠杆菌降为0。辐照后4个月的室温储藏也能保持较高的卫生质量。经同样辐照剂量处理后于37℃、85%RH条件下储藏4周,发现水活度为0.81的样品中微生物(细菌和霉菌)繁殖速度要远大于水活度为0.72和0.66的样品,可见辐照灭菌时较低的水活度是一个关键因素。     

高产多糖钝顶螺旋藻新品系的选育及蛋白质SDS-PAGE鉴定

研究了 1 0株钝顶螺旋藻对60 Coγ射线的辐射抗性及其与多糖含量的关系 ,表明各株系的半致死剂量 (LD50 )与多糖含量间的相关系数高达 0 9873。进而以多糖含量较高的钝顶螺旋藻Sp 0 8为出发品系、用 0 6%的EMS和 2 4kGy的60 Coγ射线处理Sp 0 8单细胞或原生质球 ,并用 7 0kGy左右的γ射线为筛选压力 ,得到了 4株多糖含量分别比Sp 0 8的高 32 8%、1 7 3%、2 3 4%和 42 3%的形态突变体 :Sp 0 8A、Sp 0 8B、Sp 0 8C和Sp 0 8D。蛋白质SDS PAGE分析确定 ,Sp 0 8A、Sp 0 8C和Sp 0 8D为在分子遗传水平发生变异的突变体。综合上述突变体的形态特征和生长速率等生产性状 ,确立Sp 0 8A为高产多糖的钝项螺旋藻新品系 ,目前已用于大规模养殖与产业化开发     

腐植酸对水溶液中丁草胺光化学降解的影响

采用紫外光照射的方法研究了腐植酸对丁草胺光降解特性的影响。结果表明，潮土腐植酸对丁草胺的光降解具有明显的抑制。潮土腐植酸浓度较低（〈10mg·L^-1）时，随腐植酸浓度的增加，对丁草胺光降解的抑制作用越强，丁草胺光降解速率越低；当潮土腐植酸的浓度≥10mg·L^-1时，腐植酸浓度的变化对丁草胺光降解的抑制作用影响不大，20mg·L^-1腐植酸与10mg·L^-1腐植酸对丁草胺光降解的影响相近。不同腐植酸对丁草胺光降解的抑制作用不同，商品腐植酸对丁草胺光降解抑制作用较强，潮土腐植酸和黑土腐植酸对丁草胺光降解的抑制作用则相对较弱。这种现象可能是由腐植酸的纯度和腐植酸本身结构特性的差异造成的。     

基于nanoUPLC-MS/MS的螺旋藻游离肽组成分析

为了研究螺旋藻中的多肽成分,以钝顶螺旋藻为原料,采用超滤法提取螺旋藻中的游离肽,利用nanoUPLC-MS/MS和PEAKS Studio分析谱图信息,结合NCBI数据库进行比对和从头测序分析,获得游离肽的结构组成和百分含量信息。结果表明,利用数据库比对法和从头测序法,分别得到可信的游离肽4 485个和20 597个,匹配到的蛋白质有1 036种。数据库比对结果中的游离肽主要为七肽到二十一肽,少量为二十一肽以上;从头测序结果中游离肽主要为二肽到十六肽,少量为十六肽以上。数据库比对结果中百分含量最高的游离肽是十肽,为15.95%;从头测序结果中百分含量最高的是五肽,达到24.09%。本研究结果为螺旋藻蛋白资源的进一步开发和利用提供了依据。     

苄嘧黄隆及甲黄隆的气相色谱分析方法研究

本文研究了苄嘧黄隆和甲黄隆的气相色谱分析方法。采用（１）５％ＯＶ－１０１／Ｃｈｒｏ－ｍｏｓｏｒｂＧＡＷＤＭＣＳ（０．２５～０．１８ｍｍ）；（２）５％新戊二醇己二酸聚酯／ＣｈｒｏｍｏｓｏｒｂＧＡＷＤＭ－ＣＳ（０．２５～０．１８ｍｍ）的两条色谱柱，邻苯二甲酸二戊酯为内标，氢火焰离子化检测器，标准偏差（ＳＤ）≤０．０６４％，变异系数（ＣＶ）≤２．１％，平均回收率为９６．７％～９８．８％。     

丁草胺和毒死蜱复合污染对稻田土壤细菌群落多样性的影响

采用PCR—RFLP法研究了丁草胺和毒死蜱复合污染对土壤细菌多样性的影响。应用试剂盒提取土壤样品总DNA,以细菌的16SrDNA通用引物27F／1492R扩增16SrDNA片段,将扩增产物与T－载体酶连,转化大肠杆菌,建立16SrDNA克隆文库。阳性克隆子用限制性内切酶HhaI-RsaI消化,获得酶切指纹图。结果表明,通过双酶切分型,对照产生带型最多,有70种类型,其余处理OTU种类均比对照有所减少,分别减少了10、30和41种。在不同处理中其多样性存在差异。对照土壤环境中细菌种类最丰富,多样性最高,且基因型中无明显的优势类群,说明农药的外源喷施会引起土壤细菌多样性降低。处理Ⅲ的Shannon—Wiener指数、Simpson指数和丰富度都低于单一农药的处理,而均匀度非常高,说明这2种农药的复合施用对一些细菌的丧失会起协同作用,造成某些土壤细菌的富集。     

铜与乙草胺对浮萍的联合毒性效应

采用以体数、鲜重和叶绿素为测试指标的浮萍生长抑制试验（ISO20079）,评价了Cu和乙草胺单一和复合污染的毒性效应。结果表明,cu和乙草胺单一污染对浮萍上述指标均具有显著的抑制作用,且Cu的毒性大于乙草胺。Cu和乙草胺对浮萍的联合毒性作用与浓度组合及暴露时间密切相关：当采用浓度1：1进行试验时,暴露时间为24h的相加指数（AI）为0．057,联合毒性为相加作用;暴露时间为48、96、168h的AI分别为0．193、0．509、0．783,为协同作用。而当采用毒性1：1进行试验时,暴露时间为24h的AI为－0．163,为拮抗作用;48h的AI为0．029,为相加作用;96、168h的A1分别为0．471、0．585,为协同作用。总的来说,随着暴露时间的延长,联合毒性表现为协同作用。     

螺旋藻的分离筛选及培养条件的选择

采用选择性Zarrouk无机培养基从北海螺旋藻养殖场水样中富集和稀释平板分离出9株螺旋藻,经对其生长测定,从中筛选出一株生长较快、藻体粗壮的螺旋藻藻种（暂定名SP06）,通过对其形态学观察、培养基优化和最佳生长条件的选择试验,结果表明：该藻螺旋状,细胞为短圆柱形,藻体长50-600μm,径宽30-70μm,螺旋数3-10,在配方为NaHCO3 16.8g／L、KH2PO4 0.4g／L、NaNO3 2.7g／L、NaCl 1.0g／L、FeSO4 0.005g／L、MgSO4 0.1g／L、K2SO4 1.0g／L、CaCl2 0.04g／L液体培养基中,在起始pH8-10,光照强度4000Lx,30℃／25℃光／暗变温条件下生长良好,培养8d每升养殖水可收获湿藻46-48g。     

Sublethal Toxicity of the Herbicide Butachlor on the Earthworm Perionyx sansibaricus and its Histological Changes (5 pp)

Goal, Scope and Background   With the advent of the Green Revolution, there has been a quantum leap in the use of synthetic herbicides and pesticides throughout the world to sustain high-yielding crop varieties. Continuous use of these synthetic chemicals leads to loss of soil fertility and soil organisms. Histopathological studies may signal a damaging effect of organisms resulting from prior or ongoing exposure to toxic agents. A large number of studies have reported general histological changes in earthworms. A fewer studies have reported more specific types of histopathological studies in Eisenia foetida, Dendrodrilus rubidus, Lumbricus terrestris, Lumbricus rubellus and Octolasium transpandanum. However, no reports are available on Perionyx sansibaricus. The aim of the present study is (i) to determine the sublethal effects of the herbicide Butachlor on Perionyx sansibaricus on growth and cocoon production, (ii) to evaluate the histological changes in the exposed worms.Methods   The test substrate, namely powdered, dried cow dung, was contaminated with 0.0657, 0.1315 and 0.1973 mg kg–1 of Butachlor, and a control was maintained. Four groups of each 10-test species of Perionyx sansibaricus were used per concentration level (control, 0.0657, 0.1315 and 0.1973 mg kg–1). Various life history parameters such as biomass, cocoon production and histological changes were measured.Results   Worm growth was observed at various exposures over 60 days. While exposing the earthworm to the herbicide, no mortality was observed, not even at a higher dose. At the end of the experiment, the control group had a mean biomass of 0.0831±0.00 mg and, in the exposed group, at herbicide concentrations of 0.1973, 0.1315 and 0.0657 mg kg–1, the mean biomass was found to be 0.0497±0.00 mg, 0.0628±0.00 mg and 0.0781±0.00 mg, respectively. The mean earthworm biomass was found to be decreased with increasing herbicide concentration. Similarly, cocoon production was also reduced by the increasing herbicide concentration. All earthworms in the exposed group were found to have glandular cell enlargement and to be vacuolated. Conclusion   The results clearly indicate that Butachlor can retard the growth and cocoon production in Perionyx sansibaricus. The effect of the herbicide Butachlor can be assessed by the histological observation of the intestinal region, as evidenced by glandular cell enlargement at all the exposed concentrations, which may massively affect food intake and which in turn may indirectly inhibit the earthworm reproductive capacity.Recommendation and Outlook   Risk assessment is normally aimed at the protection of human health and the ecosystem, and the interrelationship of these two areas of protection is easy to perceive. The use of earthworms in risk assessment is to obtain more information on environmental quality and ensure environmental safety. There is an urgent need to test the chemicals causing toxicity to earthworms, because earthworms play a major role in soil fertility as well as acting as a transferring route from the soil to the terrestrial ecosystem.     

溢油对贝类的毒害效应以及生态风险评价

通过磁力搅拌和超声波乳化等手段模拟海上溢油事故,采用常见的4种原油和4种燃料油开展对贝类的毒害效应以及生态风险评价。结果表明：根据8种油品对褶牡蛎的96h-LC50得出这8种油对褶牡蛎的整体上毒害作用的大小顺序是：F120=F180〉-20#〉F380〉TJ015〉TJ014〉TJ002〉TJ016;根据8种油品对缢蛏的96h-LC50得出这8种油对褶牡缢蛏蛎的整体上毒害作用的大小顺序是：F180〉F120〉-20#〉F380〉TJ002〉TJ015〉TJ014〉TJ016;根据8种油品对褶牡蛎的96h-LC50得出TJ016和TJ002对褶牡蛎属于低毒中风险,TJ015和TJ014对褶牡蛎属于低毒高风险,F380和-20#对褶牡蛎柴油属于中毒高风险,F180和F120对褶牡蛎属于高毒极高风险;根据8种油品对缢蛏的96h-LC50得出TJ016对缢蛏属于低毒中风险,TJ015、TJ014、TJ002和F380对缢蛏属于中毒高风险,-20#、F180和F120对缢蛏属于高毒极高风险。总之,对贝类而言,燃料油毒性比原油更大,缢蛏相对褶牡蛎对油品毒害作用更为敏感。