亚硫酸钠、过氧化氢和尿素对河蟹N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活力的影响

以亚硫酸钠(Na2SO3)、过氧化氢(H2O2)和尿素为效应物,研究它们对河蟹N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)活力的影响.结果表明,Na2SO3、H2O2和尿素对酶活力有不同程度的抑制作用.Na2SO3和H2O2对酶的抑制均表现为可逆反竞争性类型,它们对游离酶的抑制常数(KI)分别为254.00和136.78 mmol.L-1;尿素对酶的抑制表现为可逆的混合型抑制,它对游离酶的KI和对酶—底物复合物的抑制常数(KIS)分别为379.02和1182.00 mmol.L-1.     

过氧化氢酶同工酶KMnO4染色法的初步研究

将电泳凝胶在H2 O2 溶液中浸泡一段时间。在凝胶上有过氧化氢酶的地方 ,由于H2 O2 被该酶催化生成了H2 O和O2 ,也就无H2 O2 与KMnO4反应 ;而在无过氧化氢酶的地方 ,H2 O2 能在中性条件下与KMnO4反应生成棕色的MnO2 沉淀。利用KMnO4可在凝胶的棕色背景上观察到透明的过氧化氢酶同工酶带     

黄孢原毛平革菌茶皂素脱色酶的粗分离及酶学性质

对黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)TS 07发酵液中的茶皂素脱色酶进行粗分离,并对其酶学性质进行了研究。结果表明: 用硫酸铵沉降法所得粗酶粉的酶活力高达52 971 U·g-1;该酶的最适反应温度为40℃,最适作用pH值为45;该酶在常温下具有良好的热稳定性,在pH值30～75环境下都比较稳定;Fe3+、Ca2+和Ni2+对酶活影响不大,Hg2+能强烈抑制茶皂素脱色酶的活性;10%(V/V)有机溶剂丙酮、异丙醇、乙醇和乙腈能保留茶皂素脱色酶大部分的活力;反应体系中H2O2达到5%,茶皂素脱色酶仍能保持较高的活力;而在反应底物不存在的情况下,茶皂素脱色酶与025%的H2O2保温1 h后,酶活残余量仍能达到80%以上。     

重金属铅对鲫鱼血清抗氧化能力的影响

[目的]研究重金属铅对鲫鱼抗氧化能力的影响。[方法]用0、0．01、0．05、0．10、0．50、1．00mmol／L的含铅水溶液处理鲫鱼,比较不同处理鲫鱼血清过氧化氢含量、过氧化氢酶和髓过氧化物酶活力。[结果]低浓度铅（0．01mmol／L）对鲫鱼血清CAT活力具有一定的促进作用,高浓度铅对鲫鱼血清CAT活力具有抑制作用;鲫鱼血清中H2O2含量随铅离子处理浓度的升高呈上升趋势,但1．00mmol／L铅离子处理组鲫鱼血清H2O2含量低于0．50mmol／L铅离子处理组;较低浓度的铅（0．01、0．05mmol／L）能够提高鲫鱼血清MPO活力,高浓度铅则抑制鲫鱼血清MPO活力。[结论]该研究为鱼类生存环境重金属污染的定量分析提供了参考。     

H2O2对Pb胁迫下小麦幼苗抗氧化酶及细胞活性的影响

以小麦(Triticum aestivum L.)为试验材料,采用完全营养液进行培养,外加适当浓度的过氧化氢(H2O2),同时以不加H2O2为对照,再以不同浓度Pb溶液培养进行Pb胁迫,检测小麦幼苗过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性及丙二醛(MDA)含量、根系活力及微核率等指标的变化,以探究外源H2O2对Pb胁迫下小麦抗氧化酶及其细胞活性的影响.结果表明,Pb胁迫下小麦幼苗的生长代谢受到一定程度的抑制,主要表现为根系活力下降,POD、SOD、CAT活性增强,MDA含量和微核率上升;经适当浓度H2O2处理后,Pb胁迫小麦幼苗中POD、SOD、CAT活性及根系活力与对照相比有不同程度地上升,MDA含量及微核率下降,这表明外加H2O2对Pb胁迫小麦所受的伤害有一定的缓解作用,可增强小麦幼苗对重金属Pb的抗性.     

白腐菌(Trametes pubescens MB89)漆酶的培养与纯化

【目的】通过培养白腐菌Trametes pubescens提取胞外漆酶。【方法】以白腐菌T.pubescensMB89为漆酶培养菌,在25℃120 r/min条件下用基础GP液体培养基(300 mL培养基中含40 g/L丙三醇、15 g/L蛋白胨和1 g/LMgSO4.7 H2O)进行胞外漆酶的震荡培养,培养10 d后,添加CuSO4.5 H2O使培养基中Cu2+的最终浓度达1 mmol/L。定时测定漆酶活力,于漆酶活力开始下降时终止培养。将菌体破碎、离心后,用DEAE-Ssepharose对获得的漆酶进行分离和纯化。【结果】在以葡萄糖为碳源的培养基中添加一定浓度的Cu2+,可促进菌体的生长和漆酶活力的增加。培养前10 d,漆酶活力增加缓慢,培养10 d后添加CuSO4.5 H2O,漆酶活力快速增加,并于培养的第19天达到最大,为51.70 U/mL。用超滤方法分离纯化漆酶,可使漆酶纯度达53%。【结论】T.pubescensMB89可作为生产漆酶的菌种,在漆酶培养过程中,Cu2+对漆酶活力的增加有促进作用。     

NaCl预处理对盐胁迫下水稻H2O2含量和过氧化氢酶活力的影响

[目的]通过对水稻苗前期盐的处理后,测定盐胁迫条件下生理指标的变化,确定盐害对水稻的影响.[方法]测定了一种盐敏感水稻品种（丽江新团黑谷）经过低浓度盐胁迫预处理后在盐害条件下叶片和根中活性氧H2O2的产生和CAT活力.[结果]50 mmol/L盐胁迫能导致其叶片和根中H2O2含量显著上升,而CAT活力则显著下降.经过低浓度盐（20 mmol/L）预先处理的水稻在盐胁迫下H2O2含量上升幅度则较小,而CAT活力较高.此外,盐胁迫预处理的水稻在盐害条件下生长情况更好,其叶片中叶绿素含量更高.[结论]活性氧H2O2及其清除酶CAT参与水稻对盐害的应答反应,并且这种预处理能增强水稻抗盐害胁迫能力.     

地鳖肽对H2O2刺激鸡骨骼肌卫星细胞增殖的影响

【目的】探讨地鳖肽对H2O2刺激的肌卫星细胞增殖的影响.【方法】采用两步酶消化法体外分离培养鸡骨骼肌卫星细胞(SCs),培养基中加入不同浓度地鳖肽培养细胞24h后H2O2刺激8h,免疫荧光鉴定SCs细胞,MTT法检测细胞存活情况,荧光实时定量PCR分析增殖调控基因表达水平.【结果】分离培养SCs表达Pax7的阳性细胞率达95%以上,两步酶消化法获得骨骼肌卫星细胞;中浓度H2O2单独处理SCs细胞8h后细胞活力下降为65.16%,而当不同浓度地鳖肽预处理SCs细胞后H2O2致细胞活力下降得到缓解;与正常组相比,H2O2降低了肌卫星细胞中Pax7、Myo D和Myf5基因的相对表达量,不同浓度地鳖肽预处理均能显著缓解H2O2导致的增殖调控基因表达降低.【结论】地鳖肽能显著提高SCs增殖调控因子的转录水平,改善H2O2刺激对SCs增殖的抑制作用.     

地鳖肽对H2O2刺激鸡骨骼肌卫星细胞增殖的影响

【目的】探讨地鳖肽对H2O2刺激的肌卫星细胞增殖的影响.【方法】采用两步酶消化法体外分离培养鸡骨骼肌卫星细胞(SCs),培养基中加入不同浓度地鳖肽培养细胞24h后H2O2刺激8h,免疫荧光鉴定SCs细胞,MTT法检测细胞存活情况,荧光实时定量PCR分析增殖调控基因表达水平.【结果】分离培养SCs表达Pax7的阳性细胞率达95%以上,两步酶消化法获得骨骼肌卫星细胞;中浓度H2O2单独处理SCs细胞8h后细胞活力下降为65.16%,而当不同浓度地鳖肽预处理SCs细胞后H2O2致细胞活力下降得到缓解;与正常组相比,H2O2降低了肌卫星细胞中Pax7、Myo D和Myf5基因的相对表达量,不同浓度地鳖肽预处理均能显著缓解H2O2导致的增殖调控基因表达降低.【结论】地鳖肽能显著提高SCs增殖调控因子的转录水平,改善H2O2刺激对SCs增殖的抑制作用.     

小菜蛾过氧化氢酶和过氧化物酶与耐药性的关系

毒力测定结果表明 ,小菜蛾幼虫对抑太保的耐药力 3龄是 2龄的 2 .65倍 ,4龄是 2龄的 4.0 7倍 .抑太保处理后 5 h,2、3、4龄幼虫过氧化氢酶 (CAT)活力均降至最低 ,分别为对照的 71 .9%、80 .9%和 90 .2 % ;处理后 1 0 -1 5 h,与对照相比 ,4龄幼虫 CAT活力上升程度最大 ,2龄最小 .H2 O2 由 0增加至 1 .1 7m L,CAT活力呈线性关系上升 .抑太保处理后 ,过氧化物酶 (POD)活力除 2龄幼虫在处理后 5 h下降 ,仅为对照的 65 .0 % ,3龄幼虫在处理后 1 h为对照的 99.2 %外 ,3个虫龄幼虫的 POD活力均高于对照 .H2 O2 由 0增加至 0 .1 m L,POD活力呈线性关系上升 .小菜蛾 2、3和 4龄幼虫的 CAT和 POD活力与耐药性存在着一定的相关性     

北固山湿地优势植物氧化酶及环境适应性的研究

对镇江北固山湿地优势植物芦苇、旱苗蓼及虉草的不同器官在不同月份的多酚氧化酶、过氧化氢酶的活性进行了研究。结果表明:3种植物不同月份多酚氧化酶、过氧化氢酶活性差异明显,酶活性在各器官中的分布也不相同;3种植物多酚氧化酶、过氧化氢酶的活性顺序为芦苇>旱苗蓼>虉草,且地下部分的酶活性明显略高于地上部分,酶活性与植物的生长量成正比例关系。酶活性高低反映了湿地植物环境适应性的强弱,多酚氧化酶、过氧化氢酶通过各自的生理作用对植物生理代谢起到了保护作用。结合湿地水文情势调查分析,得出了水文情势对优势植物的分布与扩展有重要的控制意义,湿地植物因水位的脉动变化、环境季节性变化及其自身的生理功能产生了抗活性氧、转化有害酚类、抗涝等生理抗性,形成了很好的环境适应机制。     

模拟水体镉污染对水稻幼苗某些酶类活性的影响

试验采用不同浓度(0.0、0.1、1.0、101、00 mg/L)的Cd2+溶液模拟水体镉污染,研究Cd2+对水稻种子萌发和幼苗生长期间两类酶活性的影响。结果表明,参与物质代谢的3种酶活性受Cd2+抑制,且随Cd2+处理浓度的升高而明显降低,降低的幅度是:淀粉酶(AMY)10.44%~57.14%,脱氢酶(DHG)11.93%~53.39%,硝酸还原酶(NR)14.65%~54.06%。与此相反,Cd2+对抗氧化酶类活性却有明显的刺激作用:超氧化物歧化酶(SOD)活性提高32.84%~133.65%,过氧化物酶(POD)活性提高31.28%~133.66%,过氧化氢酶(CAT)活性提高33.22%~120.62%。抗氧化酶类消除了活性氧的氧化作用,从而避免或减轻了活性氧对细胞结构的破坏。     

干旱胁迫对冷蒿保护酶活性及膜脂过氧化作用的影响

为了探讨冷蒿Artemisia frigida对干旱胁迫的适应机制,以盆栽天然草场冷蒿为材料,采用自然干旱胁迫处理测定了冷蒿叶片和土壤相对含水量,叶片膜透性和丙二醛（MDA）质量摩尔浓度以及保护酶活性。结果表明：在干旱胁迫初期（0 ~ 8 d,土壤含水量大于6.5%）,冷蒿叶片失水较少,超氧化物歧化酶（SOD）活性表现出先升高后降低的变化趋势,过氧化氢酶（CAT）活性表现出先降低后升高的变化趋势,丙二醛保持在稳定水平,膜系统受到的伤害较小;随着干旱胁迫时间和程度的加强,超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和过氧化物酶（POD）酶活性都有不同程度的降低,丙二醛开始大量积累,膜系统受到严重伤害;至第12天,土壤含水量下降至2.7%,冷蒿叶片全部永久性萎蔫。在干旱胁迫下超氧化物歧化酶和过氧化氢酶在活性氧清除过程中起着重要作用。图5参13     

紫丁香多酚提取工艺优化及抗氧化活性的研究

以紫丁香为原料,对紫丁香多酚的提取及抗氧化活性进行了研究,得到最适提取工艺条件为:乙醇浓度55%、料液比1∶50、浸提温度70 ℃、浸提时间50 min,此工艺条件下紫丁香多酚的得率为(1.73±0.05)mg/g。采用生物活性追踪法研究发现紫丁香多酚中抗氧化活性最强组分的极性为弱极性,当这部分样液质量浓度为70 μg/mL时,总还原能力为0.64±0.01,DPPH自由基的清除能力为(79.44±0.67)%。研究发现经人工胃液处理后,紫丁香多酚抗氧化活性最强组分的抗氧化能力上升,而经人工肠液处理后其抗氧化能力下降。      

西瓜不同生长阶段的过氧化氢酶活性研究

[目的]测定不同生长阶段西瓜体内过氧化氢酶活性,为了解某一时期植物体内代谢变化和生长活力等情况奠定试验基础。[方法]提取萌芽期、幼苗期、成苗期、子叶分化期和不定芽生长期西瓜种子的过氧化氢酶,并用紫外分光光度法测定其活性。[结果]西瓜种子萌芽期的过氧化氢酶活性最高,成苗期的过氧化氢酶活性最低,酶活大小依次为萌芽期子叶分化期幼苗期不定芽生长期成苗期。西瓜实生苗在正常生长阶段其过氧化氢酶活性逐渐降低,在子叶分化后不定芽生长阶段的过氧化氢酶的活性也逐渐降低。[结论]该研究结果为植物体内过氧化氢酶活性测定提供了方法,同时为了解自然环境下生物机体的抗氧化防御能力奠定了基础。     

大气污染影响下凯里地区植物过氧化氢酶活性和游离脯氨酸含量的变化

[目的]为凯里地区植物的保护提供理论依据。[方法]以凯里地区的代表性植物(油茶、马尾松、杉树、狗脊蕨和铁芒萁)作为研究对象,采用KMnO4滴定法测定过氧化氢酶的活性,采用磺基水杨酸法测定游离脯氨酸的含量,研究大气污染影响下凯里地区植物过氧化氢酶活性、游离脯氨酸含量的变化情况。[结果]在大气污染环境下,凯里地区不同植物中的过氧化氢酶活性和游离脯氨酸含量存在较大差异。凯里污染区植物与清洁区植物的过氧化氢酶活性、游离脯氨酸含量存在较大差异。前者的过氧化氢酶活降低了46.1%;游离脯氨酸含量升高了23.4%。[结论]大气污染会对植物的过氧化氢酶活性和脯氨酸含量产生影响,导致过氧化氢酶活性下降和脯氨酸的大量积累。     

除草剂甲磺隆·苄嘧磺隆与过氧化氢酶相互作用对其活性的影响

[目的]探讨除草剂甲磺隆和苄嘧磺隆和过氧化氢酶的相互作用。[方法]用油菜作为指示生物,采用高锰酸钾滴定法,通过水培试验研究除草剂甲磺隆、苄嘧磺隆和过氧化氢酶相互作用对其活性的影响。[结果]当固定除草剂浓度为2.5μg/ml,随着过氧化氢酶的浓度不断增大,油菜平均根长反而不断减小。表明过氧化氢酶的存在会促进除草剂甲磺隆、苄嘧磺隆被植物体的吸收,使甲磺隆、苄嘧磺隆与受体作用增强,对油菜类作物毒害作用增强,而且环境中过氧化氢酶的浓度越大,其危害越大。除草剂甲磺隆、苄嘧磺隆对过氧化氢酶活性没有影响,即除草剂甲磺隆、苄嘧磺隆不是过氧化氢酶的抑制剂。[结论]该研究为磺酰脲类除草剂的作用机理研究奠定了基础。     

清水苜蓿土壤浸提液对连作马铃薯根际土壤环境酶活性和微生物群落的影响

为缓解马铃薯连作障碍,以新大坪马铃薯为供试材料进行盆栽试验,设置4年龄清水苜蓿根际土壤浸提液与水5种不同配比(1:1、2:1、3:1、4:1、5:1)混合液作为处理,以浇灌等量水作为对照组(CK),探究不同浓度清水苜蓿土壤浸提液对连作马铃薯根际土壤环境酶活性和微生物群落的影响.结果表明,4:1混合液处理的土壤过氧化氢酶...     

不同水肥条件对土壤酶活性的影响

为探讨不同施肥处理和水分条件对土壤酶活性的影响和土壤酶活性的短期变化规律,设置了不施肥(CK)、化肥(F)、有机肥(M)和有机肥+化肥(FM)等4种不同施肥处理和2种水分状况(田间持水量的70%和90%)的室内培养试验,对不同时间土壤脲酶、过氧化氢酶、蔗糖酶和碱性磷酸酶活性进行了测定分析。结果表明,培养过程中,不同施肥处理土壤脲酶活性呈现先升高后降低的趋势;土壤过氧化氢酶活性呈现先升高—降低—再升高—再降低的趋势;土壤碱性磷酸酶活性则呈逐渐降低的趋势;土壤蔗糖酶活性在整个培养过程处于一种波动变化。与CK相比,M和FM处理能够显著提高土壤脲酶、过氧化氢酶和碱性磷酸酶活性,单施化肥降低这些酶的活性。培养前期,M和FM处理降低土壤蔗糖酶活性,在后期提高其活性;单施化肥在一定程度上提高土壤蔗糖酶活性。与田间持水量为70%相比,过高的田间持水量会显著抑制土壤脲酶、过氧化氢酶和碱性磷酸酶活性。     

缺硼对甘蓝型油菜亲本及其F1代CAT和POD活性的影响

采用水培试验研究了缺硼对甘蓝型油菜亲本及其F1代过氧化氢酶（CAT）和过氧化物酶（POD）活性的影响。结果表明,缺硼降低叶片中CAT活性,而增有中CAT活性,缺硼增强叶片和根中POD活性,甘蓝型油菜利用硼高效品种CAT活性明显高于低效品种,F1代CAT和POD活性多介于双亲之间。