大叶蒲公英耐盐突变体的筛选与植株再生

为获得大叶蒲公英耐盐突变体再生植株,以其叶片为外植体,将诱导出的愈伤组织经过不同浓度耐盐胁迫处理,经过筛选与随机扩增多态性DNA(RAPD)检测,确定了耐盐愈伤组织突变体。再分别通过诱导突变愈伤组织形成不定芽和不定根,获得了耐盐突变体的再生植株。结果表明,大叶蒲公英愈伤组织诱导最适培养基为MS+0. 5 mg/L 6-BA+0. 04 mg/L 2,4-D,耐盐突变体不定芽发生的最适培养基为MS+0. 2 mg/L 6-BA+0. 01 mg/L NAA,最适生根培养基为1/2MS+0. 3 mg/L NAA。     

枇杷胚乳愈伤组织诱导和不定芽发生的研究

以枇杷人工授粉 5～ 8周的幼果为材料 ,取细胞形成期的胚乳进行培养 ,结果表明 :低温处理的幼果的胚乳形成愈伤组织的频率有所提高 ;来自预培养在MS分别附加 6 -BA ,GA3 ,2 ,4 -D的 3种培养基中 2～ 4d的胚乳愈伤组织诱导频率明显提高 ;6 -BA、2 ,4 -D、GA3 对愈伤组织诱导频率有显著影响 ,其中 2 ,4 -D是诱导胚乳愈伤组织的主导因素 ,在 3种激素的共同作用下 ,诱导率最高达 33 3%。经 1～ 2代增殖的愈伤组织在培养基MS +ZT2mg/L+NAA 0 1mg/L和MS +ZT 3mg/L +NAA 0 1mg/L中分化芽苗数最多 ,芽苗分化率最高达 18 0 4 %。     

弱光条件下茄子花药培养再生体系的建立

以七叶茄为供试材料 ,在弱光下进行花药培养 结果表明 :弱光下茄子花药愈伤组织诱导的适宜培养基为MS +2 ,4 -D 0 2 5mg/L +ZT 1 0mg/L 愈伤组织分化不定芽的适宜培养基为MS +NAA 0 0 2mg/L +ZT 2 0mg/L 在MS +IAA 0 0 2mg/L的培养基上再生不定根 ,弱光下愈伤组织的诱导与分化需要较高浓度的细胞分裂素 ,培养基中添加AgNO3能促进弱光下愈伤组织的分化     

大叶蒲公英愈伤组织耐盐突变体诱导与鉴定

为获得大叶蒲公英耐盐突变体,以其叶片为外植体,进行了愈伤组织耐盐突变体的筛选。结果表明,愈伤组织诱导和增殖的最佳培养基分别为MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 0.04 mg/L与MS+6-BA 0.4 mg/L+2,4-D 0.02 mg/L+NAA 0.2 mg/L。将继代培养5次的愈伤组织接种在含有不同质量浓度盐的诱导培养基上,经过4次耐盐胁迫,筛选出了耐盐的愈伤组织突变体。通过RAPD检测发现,在NaCl质量浓度为8、10、12 g/L的培养基上愈伤组织扩增条带与不含NaCl的培养基(对照)有差异,证明耐盐的愈伤组织中确实产生了DNA的突变。     

马铃薯叶片愈伤组织再生体系的建立

以8个马铃薯品种(系)为试材,进行叶片离体再生研究。结果表明,云薯501愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 3mg/L+NAA 0.3 mg/L+GA310 mg/L,愈伤诱导率为100%,诱导不定芽分化的优化培养基为MS+6-BA 3 mg/L+GA310 mg/L,芽的分化率为86.3%;会-2的愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 3 mg/L+NAA 0.5 mg/L+GA310 mg/L,愈伤诱导率为95.7%,诱导不定芽分化的优化培养基为MS+6-BA 3 mg/L+NAA 0.02 mg/L+GA310 mg/L,芽的分化率为65.4%。上述2个品种适宜用作马铃薯转基因实验的载体,其他6个马铃薯品种(系)的愈伤诱导率很低,有的品种(系)没有愈伤组织产生,不能作为马铃薯基因转化的载体。     

双单倍体马铃薯DM再生体系的构建

以双单倍体马铃薯(Solanum tuberosum)DM1-3-516-R44的无菌茎段、叶片作为材料,构建马铃薯离体再生体系。结果表明,茎段愈伤组织适宜的诱导培养基BI为MS+0.5 mg/L IAA+2.5 mg/L 6-BA,叶片愈伤组织适宜的诱导培养基BN为MS+1 mg/L NAA+0.5 mg/L 6-BA,愈伤的平均诱导率均达95%以上,甚至可以全部诱导愈伤形成;愈伤组织分化不定芽适宜的培养基BZ为MS+3 mg/L 6-BA+0.5 mg/L ZT,分化率也达到90%左右。     

枸杞胚乳离体培养技术体系的建立

以宁杞1号为试验材料,探讨枸杞胚乳离体培养中不同果期、不同激素组合、低温预处理、不同蔗糖浓度、接种密度、不同光照培养方式及胚因子对胚乳培养的影响.试验结果表明,最佳培养果期为色变期果;4℃下低温预处理3～4d可明显提高愈伤组织诱导率;激素组合1.0 mg/L2,4-D+0.5 mg/L KT诱导率最高,达63.3％,0.5 mg/L2,4-D+0.5 mg/L KT激素组合中诱导率较高,达58.3％,且愈伤组织质地较好;培养基中蔗糖适宜浓度为5％;接种密度在6～8块/瓶时,诱导率较高;光培养优于暗培养,胚存在可明显提高愈伤组织诱导率,在GA3代替胚的培养下,愈伤组织诱导率也较高.愈伤组织转入分化培养基(MS +0.2 mg/L6 - BA +0.01 mg/LNAA)中分化出绿色小芽,转入生根培养基(1/2MS +0.01 mg/L 6 - BA +0.1 mg/L NAA)中诱导生根.     

枸杞花药离体培养技术体系的建立

以宁杞1号为试验材料,探讨枸杞花药离体培养中不同激素组合、不同活性炭及蔗糖浓度、低温预处理或热激处理、不同光照培养条件对花药培养效果的影响.试验结果表明:最佳激素组合为2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 2.0 mg/L,花药愈伤组织诱导率达11.7%;4 ℃低温预处理5 d和32 ℃高温预培养2 d,均可显著提高愈伤组织诱导率;添加活性炭能提高胚状体的诱导率;培养基中适宜的蔗糖浓度为3%;暗培养优于光照培养和弱光培养.愈伤组织转入分化培养基(MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L)分化出大量绿色小芽,分化芽转入生根培养基(MS+NAA 0.1 mg/L)中,20 d后得到完整植株.     

苜蓿胚性愈伤组织诱导及植株再生研究

以苜蓿5～7 d苗龄无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,研究培养基中不同激素和浓度配比对苜蓿愈伤组织诱导和分化的影响。结果表明,MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L愈伤组织诱导率达100%,且愈伤组织状态良好,增殖速度快。MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L为苜蓿胚性愈伤组织诱导的适宜培养基,诱导率为37.8%。胚性愈伤组织分化成苗培养基为MS+6-BA0.2 mg/L+NAA 0.01 mg/L,生根培养基为1/2MS+NAA 0.02 mg/L+蔗糖10.0 g/L。     

彩色马铃薯叶片再生体系的研究

以云南省农科院马铃薯研究中心选育的4个彩色马铃薯品系为试验材料,进行了叶片离体再生的研究.结果表明,DE02-24-24的叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 2.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L;DE02-24-39的叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;JC02-27-1的叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;JC02-27-2的叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.15 mg/L.愈伤组织的诱导率均可达到100%.愈伤组织诱导不定芽分化的最佳培养基分别为DE02-24-24为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA3 3.0 mg/L;DE02-24-39为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA0.05 mg/L+GA3 2.0 mg/L;JC02-27-1为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+GA3 2.5 mg/L;JC02-27-2为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA32.0 mg/L.其不定芽分化率分别为83.3%、100%、93.3%、100%.     

青钱柳愈伤组织诱导与增殖的研究(英文)

[目的]对青钱柳愈伤组织的诱导与增殖进行初步研究。[方法]以青钱柳茎段和叶片为外植体,利用MS、WPM、改良DKW3种基本培养基,添加不同浓度配比的6-BA和IBA,来探讨愈伤组织诱导和增殖的最佳培养基配方。[结果]诱导茎段和叶片愈伤组织产生的最佳培养基配方分别为:MS+4.0mg/L6-BA+2.0mg/LIBA和MS+2.0mg/L6-BA+0.5mg/LIBA;愈伤组织增殖时的最佳培养基为:MS+1.0mg/L6-BA+1.0mg/LIBA。200mg/LVc对抑制青钱柳愈伤组织褐化效果最好,褐化率仅为5.71%。[结论]为青钱柳组培快繁体系的建立和分子育种研究的开展奠定了一定理论基础。     

青钱柳愈伤组织诱导与增殖的初步研究

[目的]对青钱柳愈伤组织的诱导与增殖进行初步研究。[方法]以青钱柳茎段和叶片为外植体,利用MS、WPM、改良DKW 3种基本培养基,添加不同浓度配比的6-BA和IBA,来探讨愈伤组织诱导和增殖的最佳培养基配方。[结果]诱导茎段和叶片愈伤组织产生的最佳培养基配方分别为:MS+4.0 mg/L 6-BA+2.0 mg/L IBA和MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA;愈伤组织增殖时的最佳培养基为:MS+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L IBA。200 mg/L Vc对抑制青钱柳愈伤组织褐化效果最好,褐化率仅为5.71%。[结论]为青钱柳组培快繁体系的建立和分子育种研究的开展奠定了一定理论基础。     

旱半夏组织培养技术的优化研究

以旱半夏无菌苗的叶片、叶柄和块茎为外植体,在不同温度及激素组合的条件下,进行了愈伤组织诱导、芽分化和生根的研究。结果表明:愈伤组织诱导的最适温度为25℃;MS+KT 1.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L对块茎的愈伤诱导效果最好,诱导率达96.7%。温度对芽分化的影响不明显;最佳的芽分化培养基为MS+KT 3.0 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L。MS+IBA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L对单芽增殖效果明显。MS+KT 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L最有利于生根。     

辣根叶片的离体培养

以辣根(Armoracia rusticana (Lam.)Gaertn)叶片为外植体进行离体培养,考察了叶片采集时间、培养基中添加激素的种类和浓度对组织培养的影响.结果表明,2月份采集辣根叶片,组织培养污染率较小,为15％.愈伤组织诱导的适宜培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,出愈率为100.0％;叶片分化不定芽的适宜培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA,分化率为80％;不定芽增殖的适宜培养基为MS+.0.2 mg/L KT;适宜的生根培养基为MS+0.2 mg/L NAA.     

基于AFLP标记的河八王种质资源遗传多样性分析及分子身份证构建

以广西地区的15份河八王无性系为材料,采用AFLP标记结合毛细管电泳进行分析,计算多态性引物的总扩增条带数、多态性条带数和多态性条带比率。进行遗传相似系数和UPGMA聚类分析,并建立分子身份证。25对AFLP引物组合在15份河八王种质资源中共扩增出2 208个位点,其中多态性位点1 914个,多态性比率(PPB)为87.11%。UPGMA聚类分析表明,供试的15份河八王种质资源其遗传相似系数变化范围在0.656~0.878,在相似系数为0.706时,可划分为3个类群。结合特征带和不同引物组合方法可有效建立河八王种质资源特异分子身份证,置信概率达到99.99%。所供试河八王种质具有较丰富的遗传多样性水平,基于3对AFLP引物组合104条谱带构建的15份河八王种质分子身份证具有唯一性,AFLP标记是在分子水平上鉴定河八王种质的有效方法。     

东北刺人参愈伤组织诱导和继代的研究

[目的]研究东北刺人参愈伤组织的诱导和继代方法。[方法]以取自长白山的刺人参植株为材料,研究不同外植体、培养基、激素对刺人参愈伤组织诱导的影响。[结果]叶片为刺人参组织培养的最适宜外植体;5月为外植体的最佳取材时期;以MS为基本培养基,并添加1.0 mg/L 2,4-D和1.0 mg/L 6-BA的培养基中愈伤组织诱导率最高;最佳继代培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2mg/L。[结论]东北刺人参的最适愈伤诱导培养基和继代培养基分别是:MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L和MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L。     

红掌组织培养再生体系的建立研究

[目的]建立红掌的组织培养再生体系。[方法]以红掌幼嫩叶柄为材料,筛选红掌愈伤组织诱导、不定芽分化、生根时的最佳激素配比。[结果]红掌叶柄愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L 2,4-D,此时愈伤组织诱导率可达80.0%;不定芽分化的最佳培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L KT,此时分化率可达96.7%;生根的最佳培养基为MS+1.0mg/L IBA,此时生根率可达86.7%。[结论]为红掌的快速繁殖提供了技术依据。     

噻苯隆对月季芽增殖及月季叶片愈伤诱导的影响

为研究噻苯隆( TDZ)对月季的影响,以皇家巴西诺月季的茎段和叶片为外植体,MS为基本培养基,添加一定浓度的细胞分裂素和生长素及不同浓度的TDZ,对其芽增殖和叶片愈伤组织诱导进行了研究.结果表明:促进侧芽增殖的最佳培养基为MS+NAA 0.lmg/L+6BA1.0mg/L+TDZ 2.0mg/L,诱导月季叶片形成愈伤的最佳培养基为MS+NAA 0.5mg/L+2,4D5.0 mg/L+ TDZ 1.0mg/L,0.5 cm×1.0 cm的切块有利于愈伤组织的产生.     

番茄与茄子嫁接接合部组织的悬浮培养

对番茄与茄子嫁接接合部组织进行了悬浮培养.结果表明,将切取的嫁接接合部组织接种在含有1.0 mg/L 2,4-D和0.5 mg/L 6-BA的MS液体培养基上没有褐化死亡且能形成黄色颗粒状的愈伤组织,但将愈伤组织接种在含有2.0 mg/L 6-BA、0.2 mg/L IAA和0.1 mg/L NAA的分化培养基上,不能分化出芽;将嫁接接合部组织刮下接种在含有0.5 mg/L 6-BA,1.0 mg/L 2,4-D或2.0 mg/L 6-BA,0.1 mg/L IAA两种液体培养基上,均能促使愈伤组织的增殖,将愈伤组织接种在含有2.0 mg/L 6-BA、0.2 mg/L IAA和0.1 mg/L NAA的分化培养基上,可以分化出芽,且在分化的芽中获得了变异.     

茶树花药愈伤组织诱导及增殖研究

以茶树花药为外植体,以MS培养基为基本培养基,探究适合花药愈伤组织诱导的花药发育时期,不同光照时间对花药愈伤组织诱导的影响,不同植物生长调节物质对花药愈伤组织诱导及增殖的影响,为建立茶树组织培养体系提供依据。研究结果表明：利于花药愈伤组织的形成的处于单核中期的花蕾直径在0.7～0.8 cm,黑暗条件下较12 h/d光照条件下茶树愈伤组织的诱导率高,茶树花药经过低温预处理24 h后,在培养基MS+6-BA0.5 mg/L+NAA0.4 mg/L+2,4-D1.0 mg/L上愈伤组织诱导率最高,诱导率为84.6%,茶树花药愈伤组织增殖率最高的培养基为MS+NAA1.0 mg/L+6-BA0.5 mg/L+2,4-D0.2 mg/L。