甘蓝型油菜小孢子胚状体诱导的主要影响因素研究

对基因型、小孢子发育时期、高温起始培养、培养基等甘蓝型油菜游离小孢子培养诱导胚状体的主要影响因素,研究表明：基因型和小孢子发育时期起决定性的作用,不同品种间甚至同一品种内的个体间,诱导频率差异显著;适宜培养的小孢子发育时期为单核晚期;培养基中加入活性炭可提高胚状体诱导频率;起始培养高温热击促进胚状体诱导。成熟胚状体在无激素Ｂ５培养基中,直接再生出植株或经次生胚继代培养再生植株。     

荔枝幼胚的离体培养

把3个不同胚胎发育类型荔枝(Litchi chinensis Sonn.)品种乌叶、兰竹、绿荷包的幼胚置于含有不同生长调节剂的MS培养基上进行培养。结果表明:授粉后15d的胚胎人工培养十分困难,而授粉后30-40d的幼胚,在MS基本培养基附加一定浓度的BA,NAA,GA以及ABA等的不同组合培养基上,均可诱导形成细胞团,并能进一步形成胚状体或芽状体,部分败育型品种兰竹,在胚胎败育早期但未死亡的幼胚,以及完全败育型品种绿荷包,在授粉后30d的胚珠,经培养亦能形成胚状体,胚状体在MS或1/2MS附加低浓度的细胞分裂素及生长素等的培养基上,增殖能力甚强,甚至不加任何附加物的情况下亦能增殖。高浓度的附加物则不利于胚状体的增殖。从胚状体诱导成苗有待进一步研究。     

（南京航空航天大学英文学报）征稿简则

以大蒜体细胞胚胎发生不同阶段的培养材料为试材进行组织学研究,结果表明:体胚形成过程中,表层薄壁细胞首先经脱分化恢复分生能力,形成愈伤组织,随后在其表面形成许多瘤状突起—胚性细胞团,胚性细胞团继续发育成球形胚、盾形胚最后发育成熟形成完整植株。从实验结果可以初步认为由大蒜体细胞培养而获得的体细胞胚在结构上也具有类似合子胚的基本结构。     

萝卜离体小孢子培养中的胚胎发生及发育途径

[目的]观察萝卜离体小孢子培养中的胚胎发生及发育途径。[方法]以中国萝卜品种山东花叶心里美为试材,研究其离体小孢子培养中的细胞核分裂特征及发育途径。[结果]离体小孢子培养过程中出现2种细胞核分裂特征的差异：①进行配子体发育的不均等分裂,即分裂形成2个大小不等的营养核和生殖核,该类小孢子形态与正常发育中双核期的小孢子相同;②进行孢子体发育的均等分裂,即形成2个大小相等的营养核。对小孢子发育进一步进行观察发现,均等分裂的细胞继续发育形成四细胞结构、多细胞团、球形胚、心形胚、鱼雷形胚及子叶形胚。[结论]该研究结果为萝卜游离小孢子培养技术提供细胞学依据。     

龙牙(木忽)木体细胞胚状体发生及植株再生

龙牙(木忽)木叶柄培养诱导胚性愈伤组织,进一步分化形成体细胞胚状体,并发育成完整植株。初代培养以MS BA NAA培养顶芽,当芽萌发后取幼嫩叶柄在含有2,4-D的MS培养基上进行愈伤组织诱导,将胚性愈伤组织继代培养,成熟的体细胞胚状体经分化形成完整植株。     

萝卜离体小孢子培养中的胚胎发生及发育途径（英文）

[目的]观察萝卜离体小孢子培养中的胚胎发生及发育途径。[方法]以中国萝卜品种山东花叶心里美为试材,研究其离体小孢子培养中的细胞核分裂特征及发育途径。[结果]离体小孢子培养过程中出现2种细胞核分裂特征的差异：①进行配子体发育的不均等分裂,即分裂形成2个大小不等的营养核和生殖核,该类小孢子形态与正常发育中双核期的小孢子相同;②进行孢子体发育的均等分裂,即形成2个大小相等的营养核。对小孢子发育进一步进行观察发现,均等分裂的细胞继续发育形成4细胞结构、多细胞团、球形胚、心形胚、鱼雷形胚及子叶形胚。[结论]该研究结果为萝卜游离小孢子培养技术提供细胞学依据。     

龙牙忽木体细胞胚状体发生及植株再生

龙牙忽木叶柄培养诱导性胚性愈伤组织,进一步分化形成体细胞胚状体,并发育成完整植株。初代培养以MS＋BA＋NAA培养顶芽,当芽萌发后取幼嫩叶柄在含有2,4－D的MS培养基上进行愈伤组织诱导,将胚性愈伤组织继代培养,成熟的体细胞胚状体经分化形成完整植株。     

长期继代柑橘愈伤胚状体诱导后的扫描和透射电镜观察

长期继代的伏令夏橙愈伤组织经扫描电镜和透射电镜观察显示,在MT基本培养基中培养20 d后,细胞之间连接紧密,有少量纤丝相连,贮藏物质和细胞器丰富,细胞表面形成皱褶;50 d后,细胞表面仍有山脉状皱褶,但皱褶幅度减少,细胞团表面的纤丝消失,细胞内游离核糖体增加,淀粉粒的体积减小.在胚状体诱导培养基中培养20 d后,出现疣突状和纤丝结构,有的纤丝形成网络状,细胞质形成一团,没有明显的细胞器的分化,但内质网发达,游离核糖体丰富,未发现淀粉粒和胞间连丝;50 d后,细胞表面的纤丝消失,细胞体积增大,彼此之间的间隙也变大,细胞器重新形成,细胞核出现,核糖体丰富并形成多聚体.     

小麦(Triticum aestivum L.)游离小孢子发育及花粉胚发生的初步研究

本文研究了小麦(Triticum aestivum L.)游离小孢子启动、多细胞花粉和愈伤组织形成、以及胚状体发生的过程。结果发现:1.小麦游离小孢子第一次有丝分裂的方式与小孢子发育时期有关;2.游离小孢子不等分裂后营养细胞的再分裂过程与小孢子均等分裂非常相似,两者的命运也非常相似;3.小麦游离小孢子能够形成胚状体,其主要是由三细胞原胚或“胚性多细胞团”发育而成。     

籼稻离体胚培养中体细胞胚胎发生的研究

成熟稻胚在含2,4-D的MS培养基上产生胚性愈伤组织以及在胚性愈伤组织表面形成许多瘤状突起的原胚状体,组织学研究表明在诱导培养的不同时期,胚性愈伤组织的细胞分裂产生单核胚性细胞、2细胞、4细胞、多细胞及球形胚。随后移到不含2,4-D的分化培养基上培养,胚性愈伤组织产生与水稻合子胚结构相似的成熟体细胞胚状体。结果表明:2,4-D是胚性愈伤组织诱导的必要激素,但抑制球形胚的发育成熟。不同激素处理结果:Br明显抑制植株再生。研究生理生化指标结果表明:在愈伤组织生长分化过程中不同激素处理Br抑制氧化物酶活性;体细胞胚状体在形成、成熟阶段,酶活性及酶带相应增强和增多;当胚状体萌发形成植株时,酶活性及酶带相应下降和减少,随诱导培养时间延长植株再生率降低。     

国庆1号温州蜜柑原生质体培养再生植株

通过对国庆1号温州蜜柑Guoqing No．1(citrus wnshiu)原生质体培养获得的愈伤组织，经体细胞胚发生途径再生植株的研究。结果表明，两步法建立的国庆1号胚性愈伤组织悬浮系，分离的原生质体产量高、活力强，在MA培养基上培养20d时，可获得颗粒性强，具有体细胞胚发生能力的细胞团。这些细胞团在甘油(MT 质量分数2％甘油)培养基上可以获得最好的胚状体诱导效果。但诱导出的小胚状体不能进一步发育，需及时转入液体乳糖(MT 质量分数5％乳糖)培养基上振荡培养20～30d。然后将长至1.0～2.0cm的胚状体转入固体乳糖培养基上，可促使其进一步发育成墨绿色的正常胚状体，最终在生芽培养基上诱导其再生植株。     

芜菁小孢子培养及其胚状体离体发育过程

为提高芜菁小孢子培养的产胚率,以新疆柯坪县当地农家品种‘阿恰芜菁’为供试材料,通过DAPI染色进行荧光显微观察芜菁花蕾长度与小孢子发育时期的对应关系,了解其对胚诱导的影响,并利用倒置显微镜技术观察了解小孢子培养过程中胚状体离体发育过程。结果表明:花蕾长度为1.5~2.0mm时,仅有6.45%的小孢子处于单核靠边期,培养未得到胚状体;当花蕾长度为2.0~2.5mm时,56.55%的小孢子属于单核靠边期,此时产胚率最高,每蕾达8.32个;当花蕾长度为2.5~3.0 mm时,单核靠边期的小孢子降至36.15%,此时可以得到胚状体,但每蕾仅有0.72个。可见,大部分处于单核靠边期至双核早期的小孢子最适合芜菁的小孢子培养。芜菁小孢子培养过程中胚状体的发育过程为:热激处理→膨大→均等分裂或不均等分裂→小细胞团→球形幼胚→心形胚→鱼雷形胚→子叶期胚→胚再生植株,且在此过程中胚胎发育存在不同步性。     

烟草未授粉子房单倍体诱导及影响因素的研究

研究结果表明,诱导出的烟草单倍体植株起源于大孢子或卵细胞,并以胚状体的方式出苗;不同基因型的烟草品种产生胚状体的能力有很大差异;当蔗糖的质量浓度为２０,４０ｇ·Ｌ－１时,胚状体诱导率较高;活性炭能促进胚状体的生长;椰胚乳只能促进子房本身的膨大;当光照强度为３０μｍｏｌ·ｍ－２·ｓ－１时能促进胚状体的形成     

辣椒单倍体培养主要影响因素研究进展

介绍了辣椒花药培养、游离小孢子培养及子房培养的研究概况;对影响培养的各主要因素,如供试材料基因型、培养条件、小孢子发育、胚状体或愈伤组织的发生及植株再生等进行综述;并讨论了辣椒3种单倍体培养方法存在的问题及未来研究的方向,为开展辣椒单倍体培养提供了借鉴.     

茶树组织培养的研究——Ⅰ. 胚状体和胚性细胞团的形成及植株再生

本文报道了茶树组织培养中,采用种子子叶柄为材料,分化形成大量胚状体。胚性细胞团和植株再生的方法和结果。并筛选出了加速小苗生长和发根培养的较理想的培养基。     

松花菜小孢子发育的细胞学观察

以松花菜F1代杂交种为材料,分别观察自然发育和游离培养条件下小孢子的发育过程。结果表明,自然条件下,四分体释放小孢子后,单核小孢子经历2次分裂,从双核期到三核期,最后发育为成熟花粉粒,是配子体发育途径;在游离培养条件下,小孢子经过热激(33℃)处理后,发生均等分裂或者不均等分裂,之后经过一系列的细胞增殖,最终发育成为胚状体,小孢子发育途径是从配子体向胚胎发育转换的途径。同时发现,并不是所有发生了分裂和增殖的细胞都能形成胚状体,只有极少数小孢子最终形成正常胚。     

荔枝幼胚的离体培养

把３个不同胚胎发育类型荔枝，品种乌叶，兰竹，绿荷包的幼胚置于含有不同生长调节剂的ＭＳ培养基上进行培养，结果表明：授粉后１５ｄ的胚胎人工培养十分困难，而授粉后３０－４０ｄ的幼胚，在ＭＳ基本培养基附加一定浓度的ＢＡ，ＮＡＡ，ＧＡ以及ＡＢＡ等的不同组合培养基上，均可诱导形成细胞团，并能进一步形成胚状体或芽状体，部分育型品种兰竹，有胚胎败育早期但未死亡１／２ＭＳ附加低浓度的细胞人裂素及生长素等的培养基上，     

欧洲丁香杂交胚和胚乳发育过程的形态研究

采用常规石蜡切片技术研究欧洲丁香杂交授粉后胚和胚乳的发育过程。结果表明：欧洲丁香胚的发生类型为茄型。合子分裂通常发生在初生胚乳核分裂之后,其卵细胞受精后,合子经过一段时间的休眠,于授粉后15d左右分裂形成3-细胞原胚,后经线状原胚、棒状原胚、球形原胚、心形胚、鱼雷形胚、子叶状胚,至授粉后60d左右发育为完全成熟胚。球形胚时期胚柄最为发达,此后逐步退化。胚乳发育类型为核型,授粉后9 d左右初生胚乳核先于合子分裂形成游离核,并且游离核细胞分裂较快;授粉后21 d左右,珠孔端游离核开始细胞化;授粉后33 d左右,早期球形原胚周围的胚乳细胞开始解体;授粉后36 d左右,球形原胚周围形成空腔;此后未被降解的胚乳细胞则发育为营养丰富的大型细胞。     

外源添加物对西葫芦胚状体诱导效果研究

以6个基因型的西葫芦未授粉子房为试材,于MS培养基中分别添加不同质量浓度6-BA(1.0,1.5,2.0mg/L)和TDZ(0.04,0.05,0.06mg/L),筛选最适培养基与出胚材料;获得最适培养基后再分别添加不同质量浓度的NAA,AgNO3或相同质量浓度(20mg/L)秋水仙碱不同时间培养,分析其对西葫芦未授粉子房胚状体诱导的效果。结果表明:1西葫芦未授粉子房在培养基(P5)MS+30g/L Suc.+8g/L Agar+0.05mg/L TDZ上胚状体诱导效果最好,XH13-7为出胚率最高材料;2在P5培养基中添加0.25 mg/L NAA有利于出胚并可适当降低玻璃化率,胚状体诱导率高达10.53%;3添加20mg/L AgNO3显著减少胚状体玻璃化,对出胚影响不明显,玻璃化率仅为11.63%;4添加20mg/L秋水仙碱抑制胚状体发生。     

甘蓝游离小孢子培养中影响胚状体形成的主要因素

以甘蓝的19个基因型为试材,对影响甘蓝游离小孢子培养诱导胚状体形成的3个主要因素进行了研究。结果表明:供体植株基因型是影响小孢子发生胚状体的关键因素,不同材料之间的诱导频率差异显著;两种激素以不添加6-BA和NAA或只添加6-BA 0.05 mg/L为甘蓝游离小孢子培养的最适激素浓度;高温处理能显著提高小孢子培养的出胚率,供试材料经33℃热激处理后出胚率最高,出胚率高达6.10胚/蕾。