HPLC法同时测定虎杖中多组分的含量

[目的]建立了同时测定虎杖（Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc.）提取物中白藜芦醇、虎杖苷、大黄素和大黄素甲醚含量的HPLC法。[方法]采用DIKMAC18色谱柱（200.0mm×4.6mm,5μm）,以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,流速为1.0ml/min,波长为303nm,柱温为30℃,进样量为10μl。[结果]白藜芦醇、虎杖苷、大黄素和大黄素甲醚对应的回归方程分别为y=7116169x＋15631（r=0.9999）、y=395313x＋50（r=0.9999）、y=2752869x-2664（r=0.9999）、y=463886x-1413（r=0.9999）,且白藜芦醇在0.026～0.520μg范围内、虎杖苷在0.045～0.765μg范围内、大黄素在0.026～0.520μg范围内、大黄素甲醚在0.026～0.442μg范围内线性关系良好。[结论]该研究建立的方法可行,重复性好,可用于虎杖药材的质量控制。     

红曲霉和虎杖共发酵体系的初步研究

以红曲霉作为发酵菌种,中药虎杖作为发酵基质进行了双向发酵试验。结果表明,虎杖对于红曲霉的生长和次级代谢产物Monacolin K的积累具有促进作用,发酵后虎杖中白藜芦醇苷、结合大黄素含量降低,而白藜芦醇、大黄素含量升高;经过发酵条件的优化,双向发酵的最佳工艺条件为:虎杖用量4%,发酵温度28℃,接种量9%,发酵6 d,发酵后虎杖中白藜芦醇含量达1.29%,大黄素含量0.67%,Monacolin K含量0.48 mg/L,综合得分为0.775。与未发酵组相比,白藜芦醇含量提高了3~4倍,大黄素含量提高了约1倍。     

虎杖苷转化菌的筛选及所产酶的性质研究

利用专一性底物法,以虎杖水提液为初始培养基,经过初筛复筛获得转化菌。根据菌落形态特征对菌株进行初步鉴定,对转化菌产酶的酶学性质进行研究。结果表明,通过筛选得到1株特异性转化虎杖苷为白藜芦醇的菌株,经形态学鉴定为青霉菌。该菌产的酶最适p H值为5. 0,最适温度为60℃; Fe2+、Na+和Ca2+对酶活力有激活作用;虎杖苷是该酶理想的水解作用底物。利用该菌产的酶液转化虎杖原料,虎杖苷的转化率最高可达到100%。     

虎杖-乳香的有效组分配伍对慢性非细菌性前列腺炎NOD小鼠的药效学评价研究

目的 探讨大黄素、虎杖苷、乳香挥发油配伍对非肥胖性糖尿（non-obese diabetic,NOD）小鼠慢性非细菌性前列腺炎发挥治疗作用的最佳配比。方法 正常雄性NOD小鼠220只,按照L8（2⁷）正交表随机分为8组,另设立阳性对照组、模型组、空白对照组,共11组,每组20只。按组别给予相应干预,酶联免疫吸附法（enzyme-labeled immunosorbent assay,ELISA）检测NOD小鼠前列腺组织匀浆中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）、白介素-6（interleukin-6,IL-6）、白介素-10（interleukin-10,IL-10）含量的变化,并结合苏木素-伊红（haematoxylin-eosin,HE）染色法评价前列腺组织病理改变程度,明确大黄素、虎杖苷、乳香挥发油的最佳配比与量效关系。结果 正交实验极差结果显示各因素影响强弱依次为虎杖苷 > 大黄素 > 乳香挥发油,方差分析结果发现虎杖苷、大黄素、乳香挥发油对疗效的影响具有统计学意义（P<0.01,P<0.05）。大黄素、虎杖苷、乳香挥发油的最佳配比为大黄素0.1 g/kg、虎杖苷0.4 g/kg、乳香挥发油0.4 g/kg。结论 大黄素、虎杖苷、乳香挥发油的最优比例配伍具有减轻慢性非细菌性前列腺炎动物模型炎症的疗效,乳香挥发油与虎杖苷之间具有协同作用。     

虎杖中白藜芦醇苷不同检测方法的比较

[目的]分析比较不同方法测定的人工栽培虎杖中白藜芦醇苷的含量差异。[方法]采用高效液相色谱法(HPLC)和毛细管电泳法(CE)对人工栽培虎杖中白藜芦醇苷进行测定,并对这2种方法的线性范围、定量重现性、最低检测限及分离分析时间进行比较研究。[结果]选定HPLC-FD为测虎杖中白藜芦醇苷的最佳检测方法。检测条件:色谱柱为Diamonsil-C18(250 mm×0.46 mm,5μm),激发波长为334 nm,发射波长为408 nm,流动相为浓度25%乙腈,流速为1.0 ml/min,柱温为25℃,进样量为10μl。[结论]高效液相色谱法是测定虎杖中白藜芦醇苷含量较理想的方法。     

HPLC同时测定虎杖多个指标成分的含量

[目的]建立测定虎杖中多种特征成分含量的分析方法,对不同产地的虎杖药材进行品质评价。[方法]建立HPLC色谱法,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(C18柱250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-浓度1%磷酸水溶液按以下梯度洗脱,0～30 min,乙腈20%～38%;30～70 min,乙腈38%～100%;流速为1.0 ml/min;检测波长为284 nm。[结果]白藜芦醇苷、白藜芦醇、大黄素苷、大黄素、大黄酚及大黄素甲醚对照品浓度在一定的范围内与峰面积呈良好线性关系,平均回收率在95.00%～105.00%(n=5)。[结论]该方法操作简便,结果准确可靠,可同时测定中药虎杖类蒽醌及中芪类成分的含量,为虎杖药材的品质评价提供一种简易、可行、特征性强的分析方法。     

超声波辅助提取虎杖中的白藜芦醇的工艺研究

[目的]优选超声波辅助提取虎杖中白藜芦醇的最佳工艺。[方法]采用超声波提取,通过正交试验考察提取时间、提取温度、超声功率对虎杖中白藜芦醇提取率的影响。[结果]虎杖中提取白藜芦醇的最佳工艺为：以无水乙醇为提取剂,超声波的提取温度为80℃,提取时间为45 min,提取功率为200 W。在此条件下,虎杖中白藜芦醇的提取率可以达到0.940%。[结论]用超声波辅助提取虎杖中的白藜芦醇,工艺稳定性好且简便易行,为有效提取白藜芦醇提供了一种安全可靠的方法。     

陇东虎杖化学成分研究

[目的]对陇东地区产虎杖根及根茎的化学成分进行研究。[方法]采用超声波乙醇浸提法和硅胶柱色谱分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定结构。[结果]从虎杖的乙醇提取物中分离鉴定出12种化合物,分别为:大黄素(Ⅰ)、fallacinol(Ⅱ)、大黄素-8-甲醚(Ⅲ)、大黄素-6-甲醚(Ⅳ)、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅴ)、2-甲氧基-6-乙酰基-7-甲基胡桃醌(Ⅵ)、白藜芦醇(Ⅶ)、白藜芦醇苷(Ⅷ)、β-谷甾醇(Ⅸ)、香豆素(Ⅹ)、齐墩果酸(Ⅺ)、2-乙氧基-8-乙酰基-1,4-奈醌(Ⅻ)。[结论]化合物Ι~Ⅻ均是首次从陇东虎杖中分离得到的。     

峨眉山虎杖中大黄素提取工艺及含量测定

[目的]研究峨眉山虎杖（Polygonum cuspidatum Sied.et Zucc.）中大黄素提取物收率及含量。[方法]以大黄素含量和纯度为考察指标,用95%乙醇-含水氯仿回流法提取,pH值梯度碱液萃取分离,HPLC检测含量。[结果]大黄素粗品中大黄素含量为94.90%,虎杖中大黄素收率为0.62%。[结论]95%乙醇-含水氯仿从虎杖中提取大黄素,其工艺稳定,大黄素纯度高,可作为以虎杖为原料制备大黄素的工艺。这可为峨眉山虎杖资源开发利用与质量控制提供科学依据。     

虎杖中大黄素的超声波提取工艺优化

虎杖(Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc.)含有多种生物活性成分,具有独特的药理功效。其中的大黄素具有抗菌、止咳、抗肿瘤、降压等作用,且含量较高,故常利用虎杖根提取大黄素。研究通过单因素和正交试验优化了虎杖大黄素的超声波提取工艺,最佳提取工艺为80%(乙醇+丙酮)、1∶20(g∶m L)料液比、超声提取30 min、提取温度为70℃,测定虎杖药材中大黄素的得率为1.40%。     

酵母发酵虎杖提取白藜芦醇技术初步研究

对酵母发酵虎杖(Polygonum cuspidatum)提取白藜芦醇的原料预处理方式、发酵工艺及提取方法等进行初步研究。结果表明,酵母固态厌氧发酵能有效地提高虎杖白藜芦醇的提取得率,适量添加纤维素酶和木聚糖酶能在一定程度上提高虎杖白藜芦醇得率。较佳的虎杖生物发酵提取白藜芦醇的工艺条件为:虎杖原料粉碎过10目筛,发酵体系含水的质量分数为65%,添加糖化酶Ⅱ和SADY酵母的量分别占虎杖原料质量的0.18%和0.34%,厌氧发酵5 d,发酵后采用体积分数为95%的乙醇水溶液提取。     

酶法提取虎杖中白藜芦醇的工艺优化

[目的]对酶法提取虎杖中白藜芦醇的工艺条件进行优化。[方法]采用单因素试验与正交试验相结合的方法,确定用酶法从虎杖中提取白藜芦醇的最佳工艺条件。[结果]从虎杖中提取白藜芦醇的最佳工艺为:料水比1∶15(V/V),漆酶含量0.30%,纤维素酶含量0.50%,木聚糖酶含量0.40%,β-葡聚糖酶含量0.20%,pH 4.4,在此条件下白藜芦醇的得率达0.592%。[结论]该研究为白藜芦醇的开发及综合利用提供了研究基础。     

1株产白藜芦醇及白藜芦醇苷虎杖内生真菌的分离鉴定

对秦岭山区虎杖内生真菌进行分离、纯化及摇瓶发酵,通过对其发酵液及菌丝的乙酸乙酯萃取液进行HPLC分析,获得1株既产白藜芦醇又产白藜芦醇苷的菌株,产量均在4 mg/L以上.根据该菌株的形态特征及菌丝ITS序列分析,将该株菌确定为半知菌亚门丛梗孢目丛梗孢科青霉属(Penicillium sp.)真菌.     

虎杖中白藜芦醇的吸附特性和稳定性研究

[目的]研究用大孔树脂吸附分离虎杖中白藜芦醇的特性及其稳定性。[方法]分析大孔树脂对白藜芦醇的吸附曲线,分析流速、乙醇体积分数、提取时间、提取温度、pH等因素对大孔树脂吸附白藜芦醇的影响。[结果]AB-8树脂对虎杖中白藜芦醇的吸附更接近单分子层吸附。以1.5 m L/min流速通过层析柱时吸附率更高,用70%乙醇提取虎杖中白藜芦醇时提取率最高,3 h是最佳提取时间;60℃是最佳提取温度;p H为4时白藜芦醇提取率最高。稳定性研究表明,白藜芦醇在酸性条件下保存浓度基本不变。[结论]用大孔树脂吸附分离白藜芦醇具有一定的优势。     

曲霉转化中药材的研究进展

微生物转化已成为中药现代化研究的热点之一,本文对微生物转化中使用频率高的曲霉菌转化中药材的应用进行综述,并对广泛使用的黑曲霉对人参皂苷、黄山药、槐米中的芦丁、虎杖中的白藜芦醇苷、黄芩等的转化应用进行了介绍。     

HPLC法测定芦荟体内芦荟苷、芦荟大黄素含量的研究

通过对比试验探讨了对芦荟中芦荟苷、芦荟大黄素的提取方法。对HPLC法同时测定芦荟体内芦荟苷、芦荟大黄素含量的方法进行了探讨。分别对流动相、检测波长等条件进行了优化,并进行了仪器精密度试验、方法精密度试验以及回收率测定,最终确立了应用HPLC测定芦荟体内芦荟苷、芦荟大黄素含量的色谱条件。     

首乌藤不同部位有效成分含量考察

目的:考察并比较首乌藤嫩、中、老枝不同部位中主要有效成分二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚的含量。方法:采用加热回流提取法制备供试品,采用高效液相色谱法测定首乌藤中二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚的含量。结果:首乌藤嫩、中、老枝中二苯乙烯苷含量分别为0.016、0.147和0.516%,大黄素含量分别为0.112、0.116、0.235 mg/g,大黄素甲醚的含量分别为0.299、0.584、0.747 mg/g。结论:首乌藤不同部位中二苯乙烯苷、大黄素及大黄素甲醚含量有明显差异,老枝中的含量大于中枝与嫩枝。三种成分在首乌藤不同部位含量变化趋势一致。采收时应注意保留老、中枝部分。     

超声波辅助提取虎杖中的大黄素

以虎杖为原料,在超声波的辅助下,采用乙醇回流法从虎杖中提取大黄素,研究了乙醇浓度、料液比、超声时间以及超声功率等因素对大黄蜂得率的影响,在此基础上通过正交试验优化了虎杖中大黄素提取的最佳工艺。结果表明:在乙醇浓度为70%、料液比为1∶14、超声时间为8 min,超声功率为400 W的条件下,大黄素的得率达到0.72%。     

虎杖生物学特性及规范化栽培技术

虎杖 ( Polygonum Cuspidatum Sieb.et Zucc)为蓼科多年生草本或者亚灌木植物 ,又叫斑根、斑杖、紫金龙。常生长在海拔 2 5 0 0 m以下的山沟、溪边、河边、山坡、林下阴湿处 ,主要分布于我国长江以南各地和陕西、湖北、四川等省。虎杖根茎富含如虎杖甙、白藜芦醇、大黄素、大黄     

虎杖中白藜芦醇的超声提取条件优化

以中药虎杖粉末为原料,利用超声波强化提取白藜芦醇化合物,用荧光分析法分析其含量.在单因素试验的基础上,采用正交试验,考察了溶剂、料液比、温度、时间对白藜芦醇提取率的影响.试验结果表明,虎杖中白藜芦醇的最佳提取条件为80％乙醇:80％丙酮1:3(体积比)为提取液、料液比1:6(质量体积比,g:mL)、超声温度70℃、超声时间5 min.在上述提取条件下,白藜芦醇的提取率为2.612％.