平贝母愈伤组织和不定芽诱导研究

目的应用组织培养技术对平贝母进行离体培养,从而得到愈伤组织和不定芽。方法以鳞茎为材料诱导愈伤组织与不定芽,采用正交实验设计确定最佳的激素种类与浓度。结果适当的激素组合及配比可诱导出愈伤组织和不定芽,最高的诱导率可分别达到14%以上、86.7%。结论愈伤组织最佳诱导培养基为MS+2,4-D 1.0mg/L+6-BA 0.9mg/L+NAA 0.5mg/L;最佳继代培养基为MS+2,4-D0.5mg/L+6-BA 0.3mg/L;不定芽最佳诱导培养基为MS+KT 0.8mg/L+NAA 0.3mg/L。     

黄精多倍体诱导初报

通过人工诱变,使多花黄精染色体加倍,提高生物产量与品质,为大面积人工种植提供优良品种。种子经过人工打破休眠后,在MS＋6-BA1.0mg/L＋2,4-D0.5mg/L离体培养形成愈伤组织,再转入MS＋TDZ1.5mg/L＋2,4-D1.0mg/L培养15～20d,用脱脂棉球浸泡于添加2%二甲基亚砜的0.05%～0.15%秋水仙素溶液中,在无菌条件下覆盖在愈伤组织上,进行染色体加倍诱导处理,再转移到MS＋6-BA1.0mg/L＋NAA2.0mg/L的分化培养基上,将分化出叶片的小苗转移到1/2MS＋NAA1.0mg/L生根培养基上。结果表明：0.05%质量浓度的秋水仙素处理48h变异株诱导率最高达18.7%,0.1%和0.15%浓度处理24h的诱导率次之,为16.7%,0.1%浓度处理48h变异率虽然只有16.2%,但其变异株倍性稳定性较好,整倍率较高。     

玉竹组织培养技术研究

以玉竹的叶片、根状茎为外植体,采用不同种类、不同浓度的植物生长调剂进行组织培养。结果表明:玉竹的根状茎用0.2%升汞消毒15min最为合适,根状茎诱导愈伤组织最适培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+2.0mg/L 2,4-D,诱导率为81%。MS+3.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA的培养基上诱导不定芽最高,达到87%。MS+2.0mg/L6-BA+0.2mg/LNAA的培养基上诱导不定根最高,达到95%。     

工业大麻高效再生体系的初步研究

选用工业大麻新品种龙麻一号的下胚轴作为外植体进行组织培养,对无菌苗的获得、植物生长调节剂的选择及浓度等影响工业大麻组织培养的关键因素进行研究,愈伤组织诱导的最适植物生长调节剂组合为1.0mg/L 6-BA和0.5mg/L NAA,不定芽分化的最适激素组合为1.0mg/L KT和0.5mg/L NAA,以1/2MS+0.05mg/L IBA+0.05mg/L NAA激素组合生根效果较好。初步建立工业大麻高效再生体系,愈伤组织诱导率达到91.67%,不定芽分化率达到76.67%,生根率达到75%。     

黄皮白肉火龙果快繁体系的建立

黄皮白肉火龙果,又名麒麟果,为建立其快繁体系,本研究选取种子萌发长出的茎段为外植体,研究其不同消毒时间、不同浓度激素配比对其愈伤组织及芽的诱导、增殖继代、根生长的影响。结果表明:用无水乙醇灭菌40 s后,再用5%次氯酸钠溶液灭菌10 min,种子萌发率最高可达97%。愈伤组织及不定芽诱导培养基最佳配方为1/2 MS+2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA,芽的诱导率最高可达97%;利用MS+2.0 mg/L 6-BA+3.0 mg/L NAA培养基进行增殖、继代培养的效果最佳,增值系数最高为4.6;在MS培养基中添加2.0 mg/L IBA,可最大程度地促进根的生长。      

花生不同外植体芽诱导制约因素研究

以花生品种远杂9102成熟种胚发芽12d、4d的幼叶为外植体,对花生幼叶不定芽诱导制约因素进行了研究,结果表明,采用较高浓度的6-BA（8mg/L）、较低浓度的NAA（1mg/L）,不定芽诱导率可达70%以上。最佳诱导培养基为MS＋6-BA8mg/L＋NAA0.5mg/L＋AgNO32mg/L 最佳继代培养基为MS＋6-BA5mg/L＋NAA2mg/L＋AgNO32mg/L。同时试验发现种子预培养4d的幼叶不定芽诱导率较预培养12d的高 花生幼叶近叶柄基部切口处不定芽诱导率较高,是较理想的不定芽诱导部位。以远杂9102预培养2d的子叶作外植体,对愈伤组织诱导及分化进行试验,确定MS＋6-BA4.5mg/L＋2,4-D2.2mg/L为诱导愈伤的最佳培养基,愈伤组织诱导率达79.8%,最佳分化培养基为MS＋KT（0.15mg/L）。     

2个葡萄品系外植体愈伤组织诱导和植株再生

进行了无核白、红地球2个葡萄品系外植体愈伤组织诱导和植株再生的研究。通过葡萄品系无核白、红地球叶片和叶柄外植体的愈伤组织的诱导、再分化,以器官发生途径实现植株再生。结果表明:(1)愈伤组织诱导以MS+BA5mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖40g/L培养基最佳,诱导率为35%;同一葡萄品种的叶片与叶柄诱导愈伤组织的频率基本相同,而红地球外植体诱导愈伤组织的频率高于无核白;(2)不定芽的诱导再生以1/2MS+BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L+CH500mg/L+蔗糖30g/L培养基最佳,平均诱导率达35.4%;叶柄来源的愈伤组织诱导不定芽的频率高于叶片愈伤组织;(3)根系的诱导以1/2MS+KT0.5mg/L+IBA1.0mg/L+AC2g/L+蔗糖15g/L培养基最佳,无核白和红地球来源的不定芽诱导生根频率基本相同,都在80%以上。     

单倍体籼稻无性系微芽的离体调控

 以籼稻单倍体无性系微芽为材料,研究了激素及秋水仙碱等处理对籼稻单倍体微芽的诱导、分化、扩增及加倍的影响。2 mg/L的2,4-D可提高籼稻单倍体微芽的培养力。NAA对籼稻单倍体微芽的扩增有明显影响,0.5 mg/L的NAA可成倍扩增微芽,培养35 d后,其芽数比原始芽数增加了46.21倍,比不加NAA的对照增加了2.8倍,且单芽重仅0.079 mg。籼稻单倍体微芽扩增的适宜培养基为：N6附加MET 2.5 mg/L、NAA 0.5 mg/L、6-BA 2 mg/L。500 mg/L秋水仙碱溶液处理籼稻单倍体微芽48 h,其二倍体得率较高,绿苗率及二倍体率分别为42.9%和60.0%;秋水仙碱处理愈伤组织的效果不佳,虽然提高秋水仙碱处理浓度可提高二倍体率,最高可达100%,但由于绿苗分化率下降,使总的二倍体得苗率比不处理的对照低。     

玉米幼胚培养及植株再生的研究

以不同玉米自交系幼胚为外植体,研究不同2,4-D浓度对愈伤组织诱导、6-BA浓度对愈伤组织分化和6-BA与NAA配合使用对试管苗生根的影响。结果表明:不同2,4-D浓度对愈伤组织诱导率影响差异不明显,但对胚性率诱导有明显影响,其诱导最佳培养基为MS+2,4-D 2 mg/L+水解酪蛋白500 mg/L+脯氨酸500 mg/L;愈伤组织分化的最佳培养基是MS+6-BA0.5 mg/L+水解酪蛋白500 mg/L+谷氨酰胺200 mg/L+PP₃₃₃ 2 mg/L;试管苗生根的最佳培养基是1/2 MS+6-BA0.5 mg/L+NAA2.0 mg/L+PP₃₃₃ 2.0 mg/L+活性炭0.2%。     

蝴蝶兰丛生芽途径的组织培养技术

对蝴蝶兰丛生芽途径的组织培养进行研究,结果表明,不经过愈伤组织直接诱导丛生芽的过程中,6-BA是影响蝴蝶兰丛生芽诱导的重要因素,6-BA浓度达3.0mg/L以上时丛生芽的诱导率就可达100%;在丛生芽增殖过程中,6-BA8.0mg/L处理效果最好,丛生芽增殖率可达304%;6-BA8.0mg/L+NAA0.5mg/L的处理更能促进蝴蝶兰丛生芽的增殖效果,丛生芽增殖率可达506%;生根培养基组合MS+NAA0.5mg/L+10%椰子汁的生根效果较好。     

海南龙血树的组织培养与快速繁殖

以海南龙血树的顶芽和侧芽作为外植体,把其接种于MS＋BA1mg/L＋NAA0．1mgg/L＋PVP100 mg/L＋蔗糖30g／L培养基上培养40-50d可诱导其腋芽萌发,再把萌发后所形成的新芽切割下来接种于MS＋BA 2mg／L＋KT 0．5mg／L＋蔗糖30g／L的培养基上培养25-30d可诱导形成丛生芽,丛生芽在继代培养过程中每25-30d可增殖3～5倍。把丛生芽分割成单株并接种于MS＋BA3mg厂L＋GA,1mg／L＋蔗糖30g／L培养基上培养4周后使其壮苗后再接种于MS＋NAA0．5～1．0mg／L＋蔗糖30g／L培养基上培养4周可诱导小芽形成完整的根系,小植株移栽成活率可达98％。该体系的建立为海南龙血树的工厂化育苗奠定了坚实的基础。     

绿宝石喜林芋叶片培养及植株再生

结果表明：诱导绿宝石喜林芋叶片产生愈伤组织频率最高的培养基是ＭＳ＋ＢＡ０．０５ｍｇ／Ｌ＋２．４－Ｄ１．０ｍｇｇ／Ｌ。最适于愈伤组织分化的基本培养基是Ｎ６；３ｍｇ／Ｌ的ＢＡ、ＺＴ和ＫＪ均能诱导愈伤组织产生不定芽，其中以ＢＡ为好；ＣＨ对愈伤组织的分化有促进作用。Ｎ６＋ＢＡ７ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ对不定芽的增殖效果较好，３０ｄ可增殖９．４倍。１／２ＭＳ＋ＩＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ诱导生根效果好。试管苗     

刚果12号桉愈伤组织的诱导与再生植株快繁体系的构建

以刚果12号桉（Eucalyptus 12ABL）7 d苗龄的下胚轴为外植体,进行了组织培养试验,研究了具分化潜力的愈伤组织的获得、不定芽的分化、增殖培养、生根培养,建立了从愈伤组织到再生植株的快繁体系.结果表明：诱导愈伤组织阶段表现最优的配方是改良H培养基＋6-BA0.5mg/L＋NAA0.5mg/L＋蔗糖40g/L,红色紧密愈伤组织诱导率达65.7%;诱导不定芽表现最优的配方是改良H＋6-BA1mg/L＋NAA0.1 mg/L＋蔗糖40g/L,诱导率达54%;增殖培养中表现最优的配方是MS＋6-BA1mg/L＋NAA0.1mg/L＋蔗糖30g/L,增殖系数达3.4;生根效果表现最优的配方是1/2MS＋IBA0.5mg/L＋蔗糖30g/L,生根率达100%,平均每株萌发的根系数为3.6条.     

龙竹的组织培养

以龙竹的幼枝节段作为接种外植体,采用从腋芽-丛生芽-完整植株的繁殖途径进行繁殖。结果表明:在MS+BA 2 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1+PVP 250 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1培养基上培养10-20 d可诱导其腋芽萌发,新芽接种于MS附加BA 2 mg·L-1+KT 0.5 mg·L-1+CW 100 mL·L-1+蔗糖30 g·L-1的培养基上培养20 d可诱导形成丛生芽,丛生芽在继代培养过程中每20-25d可增殖3-5倍。把丛生芽接种于1/2MS+NAA2mL·L-1+IAA2mL·L-1+蔗糖20 g·L-1培养基上培养4周后可诱导形成完整的根系,小植株移栽成活率可达98％。该体系的建立为龙竹的工厂化育苗奠定了坚实的基础。      

金钱树四倍体的诱导与鉴定

以金钱树块茎为材料,采用秋水仙素溶液处理不定芽生长点,研究秋水仙素浓度和处理时间的诱变效果。结果表明：0.1%的秋水仙素溶液浸泡处理块茎的不定芽48 h效果最好,其诱导率为30%。通过流式细胞仪对金钱树植株DNA相对含量的测定,鉴别出四倍体和嵌合体。四倍体植株与二倍体植株在叶厚、保卫细胞大小、气孔密度等方面存在明显差异,其中气孔的形态及密度可作为鉴别四倍体、嵌合体和二倍体的重要性状。     

二氧化氯对剑麻外植体材料消毒的应用研究

为建立高效、环保的剑麻无菌繁殖技术,以H.11648剑麻的珠芽为外植体,以1 000 mg/L HgCl2溶液对外植体材料浸泡消毒灭菌20 min作对照,以不同浓度的ClO2溶液对外植体材料进行不同时间的浸泡消毒灭菌试验。结果表明,500~3 000 mg/L ClO2溶液对剑麻珠芽外植体浸泡消毒20~50 min,可显著降低培养材料的污染率,外植体生长好,腋芽萌动快,腋芽萌发率在14.175%~47.335%,显著高于对照的4.340%,最初3次继代的增殖率为5.685~11.325倍,显著高于对照的3.040倍。剑麻珠芽外植体材料消毒灭菌的最适宜方法是1 000 mg/LClO2溶液浸泡消毒30 min。     

离体培养橡胶树体细胞诱导纯多倍性无性系方法的研究初报

研究结果表明,用0.5%的秋水仙素处理橡胶树二倍体花药体细胞愈伤组织(浸泡或滴溃)dl可有效地从多倍性的细胞再分化成多倍性胚状体并再生植株。所诱导培育获得的多倍胚状体及植株,通过细胞学鉴定表明具有多倍体表型特征的,其体细胞染色体数为2n一72,未见嵌合现象,对照的2n= 36     

红杨桃胚乳愈伤组织的诱导和三倍体植株再生

以红杨桃成熟干种子为材料,萌发后剥离胚乳进行培养。结果表明,最佳诱导愈伤组织的培养基为MS+2,4-D　2mg/L+BA 0.2mg/L,诱导频率可达93.5％:将淡绿色致密的愈伤组织转至MS+ZT　3mg/L+NAA0.2mg/L的培养基上,经连续继代后,形成芽原基并发育成小植株,壮苗后取茎尖染色体显微观察,证明再生植株多为三倍体,其发生频率可达73.7％。      

秋水仙素对刺葡萄的诱变

以刺葡萄（Vitis dabidii Foex）为试材,利用不同浓度的秋水仙素溶液,采取浸润法与注射法处理生长芽,观察其叶片与枝蔓的变化,测定其气孔、花粉与叶绿素,并进行染色体检测。结果表明：秋水仙素对刺葡萄诱变效果良好,其中以0．3％秋水仙素处理获得最佳效果,变异率为33．3％;染色体加倍的变异枝条叶片增厚26．7％-32．0％,气孔密度减少,保卫细胞增大,花粉粒增大38．4％,节间变短,叶片叶绿素含量显著增加;染色体出现2n=4x=76及非整倍体现象。