不同种公牛X／Y精子分离效果及对体外受精能力的影响

本研究首先时比了3头种公牛的X/Y精子分离效果,并通过常规冻精和性控冻精的活力检测,来评价流式细胞仪分离及冷冻处理对不同种公牛精子分离效果的影响.应用体外受精试验,探讨了不同种公牛个体的常规冻精和分离冻精的受精和胚胎发育能力.试验结果表明,不同种公牛个体间除分离准确率外,精子的分离速率(4.1×103/s vs 4.5×103/s vs5.3×103/s,P<0.05)和死精率(19.3%vs 14.5%vs 11.0%,P<0.05)都存在显著差异.三头种公牛的性控冻精在体外培养过程中,精子活力的下降速率要显著快于常规冷冻精液组.不同种公牛个体的分离冻精组在4小时的精子活力也有显著差异(1号种公牛9.1%vs 2号种公牛22.1%、3号种公牛21.5%,P<0.05).此外,常规冻精和性控冻精在受精后的卵裂率和囊胚率存在显著差异(1号种公牛:64.0%vs 41.6%,26.9%vs 19.3%;2号种公牛:67.3%vs 52.3%,29.2%vs26.5%;3号种公牛:60.3%vs 43.1%,27.3%vs 29.9%).上述结果表明,不同种公牛个体间精子的分离速率、死精率、以及对分离冷冻处理的耐受性存在显著差异,造成其解冻后活力和存活时间不同程度的下降;但在体外受精试验中,3头种公牛的分离精子仍具有正常的受精能力,并能支持胚胎发育到囊胚阶段.综上结果表明,选择适宜的种公牛和降低分离及冷冻处理对精子的损伤,对于提高精子的分离效率、分离精液的品质和体外受精效率都有着重要的意义.     

不同种公牛精子分离效果的比较

本研究对使用经流式细胞仪分离的4头种公牛精液的分离速率、死精率以及分离后的雌性准确率进行了比较分析,结果表明,3号种公牛的精子分离速率显著高于1号和2号种公牛(P＜0.05);1号种公牛的死精率显著高于2号和3号种公牛(P＜0.05).但是3头种公牛精液分离后的雌性准确率没有显著差异.4号种公牛的死精率达到32％,所以没有分离.同时对3头种公牛精液分离及解冻后的活率进行了比较,结果表明,3头种公牛精液经流式细胞仪分离后鲜精活率差异不显著,冷冻后0h活率差异不显著,而在冷冻4h后的精子活率差异显著(p＜0.05).     

不同冷冻曲线对种公牛精液冷冻质量的影响

种公牛精液的冻后活力是评定冷冻精液品质好坏的重要指标之一,也是影响牛人工授精受胎率的重要因素.影响冻精解冻后活力的因素包括种公牛个体差异(鲜精品质、耐冻性)、稀释液(甘油浓度、稀释液成分)、生产工艺(稀释方法、平衡、冷冻方法、冷冻曲线)和解冻方法等.而冷冻速度,即精子通过对细胞产生致死性伤害的0～-60℃温度区的速度,是决定冷冻精液冻后品质好坏的关键所在.     

水苏糖对猪精液冷冻保存效果的影响

为了提高猪精液冷冻保存效果．试验采用在传统的ZO稀释液基础上分别添加1％、2％、4％、8％的水苏糖的方法．研究不同浓度水苏糖对猪精液冷冻后精子质量的影响。结果表明,水苏糖相对于ZO稀释液能够显著改善和提高猪精液的冷冻效果,其最佳添加浓度为4％,冷冻一解冻后猪精子活力、活率、质膜完整性以及顶体完整率均显著提高,水苏糖可以明显抑制精子获能,获能处理前精子获能率仅为32．4％,而获能处理后降为28．6％。有利于抑制精子获能,精液稀释液中甘油的适宜添加浓度为3％,说明水苏糖与甘油共同作用能在冷冻一解冻过程更加有效地保护精子。     

不同剂型的种公牛冷冻精液质量检测结果分析

分析不同剂型的种公牛冷冻精液质量检测结果。选择20头公牛作为研究对象,根据冷冻精液方式的不同把20头公牛精液随机均分为两组,一组为对照组选择10头公牛精液进行颗粒冷冻,另一组为观察组选择10头公牛精液进行细管冷冻。根据公牛冷冻精液的质量标准,对两组公牛精液质量指标进行对比分析,分析两组公牛精液冷冻后的活力和精子有效数、精子畸形率及精子存活时间等。观察组与对照组公牛精液按照不同剂型冷冻后,精液质量存在很大差异,观察组精液冷冻的方式明显优于对照组,两组对比差异明显,具有统计学意义(P0.05)。观察组选择细管冷冻的方式更适用于实际工作中,为细管冷冻精液实践工作中提供重要的参考依据。     

甘油浓度冷冻速度脱脂奶稀释液浓度对绵羊精子冷冻效果的影响

试验用15%脱脂奶稀释液(450毫渗摩—毫克分子浓度/公斤水),0～16%甘油浓度和1～100℃/分的降温速度共同对公羊精子冷冻-解冻存活率(活率和活力)的影响。结果表明4～6%甘油浓度和10～100℃/分的降温速度时精子存活率最高.用8%甘油浓度和5～30℃/分降温速度也获得了近似的结果。虽然在每一种甘油浓度中公羊精子能耐受好几种降温速度,但是提高甘油浓度会使最佳降温速度下降.甘油浓度超过8%就对精子有毒性了,使精子存活率显著下降。15%与19%脱脂奶稀释液(600毫渗摩),以4～6%甘油浓度和10～100℃/分降温速度冷冻均获得了很高的冷冻存活率。     

不同甘油浓度对牛鲜精低温保存的影响

对15头荷斯坦种公牛进行采精,将采集的精液分别用6%、4%、2%和0%甘油浓度的卵黄-Tris-葡萄糖-柠檬酸稀释液制成细管鲜精,放在低温(4℃)环境中保存6d并且每天检查其活力。经统计分析得出,4种不同甘油浓度对牛精子低温(4℃)保存的活力影响差异极显著。从而筛选出有利于牛精子低温(4℃)保存的最佳甘油浓度为4%。     

甘油浓度与冷冻速率对鸡细管冻精质量的影响

为提高鸡细管精液冷冻质量,采用2%、4%、6%、8%、11%的甘油浓度,离液氮面9种熏蒸高度,两步冷冻法,5℃水浴解冻3min,离心去甘油等,通过活力与人工输精检测冷冻效果。结果表明:(1)以甘油浓度为主效应,8%~11%各组间差异不显著(P0.05),但11%组效果最优;以冷冻速率作为主效应,6~8高度处各组间差异不显著(P0.05),其中第6高度处效果最优;甘油浓度-冷冻速率交互作用下"浓度"、"速率"、"浓度-速率"对活力有极显著的影响(P0.01);去除甘油前与去除后的精子活力成正相关,去甘油导致活力下降程度达50%左右;(2)以受精率为指标,6%甘油浓度组的最高(77.63%),与4%、8%组差异不显著(P0.05);11%组显著低于4%、6%、8%组(P0.05);(3)采用2%甘油浓度组的黑丝羽乌骨鸡冻精,对白莱航鸡和伊萨鸡母鸡进行人工输精,孵化效果无显著性差异(P0.05),但白莱航鸡略高于伊萨鸡。研究结果提示,采用6%甘油浓度,冷冻装置的第6高度处对鸡精液进行冷冻效果最好。     

公牛精液的保存制度

作者用黑白花和西门塔尔品种公牛进行试验,研究精液冷冻过程中各种处理方法对解冻后精子(在38℃)的活力和存活力的影响。用乳糖—甘油—卵黄培养液稀释精液,在液氮中预冷的氟塑料板上冷冻成容量为0.1毫升的颗粒(某几项专门的试验除外)。用热电偶测定氟板的温度。根据设计要求,每次射精都要分成几分进行试验。从表1可以看出随着稀释比例的增加,解冻后精子的活力和存活力都有提高。可能高倍稀释对精子的部分脱水和玻璃化造成最适宜的条件。试验中,甘油的最终浓度以2％为最好,(表2)。     

平衡时间对牛冷冻精液活力影响

从正常采精的公牛群中，随时选择２～６周岁的种公牛２８头，测试公牛的精液经不同的平稳时间后冷冻，精子活力的变化。结果表明：平衡时间不同，精子的冻后活力表现出不同的差异，以平衡时间４～５小时冷冻为宜     

藏獒精液冷冻过程中pH值及甘油对其活力的影响

为探讨pH值和甘油对藏獒精液冷冻保存前后精子活力的影响,筛选6条种公藏獒在其繁殖季节(9~12月份)以不同pH值梯度(5.5,6.0,6.5,7.0,7.5)稀释液和不同甘油平衡时间(10,20,30,40,50,60,70,80,90 min)对藏獒精液进行冷冻,检查精子活力变化。结果表明,在藏獒精液冷冻过程中,pH值为6.5的稀释液中精子在冷冻前后有较高的活力;甘油平衡时间对藏獒精液活力有较大影响,冻前精子活力随甘油作用时间而下降,在甘油平衡时间为20 min所得藏獒冻后精子活力效果较好。     

不同稀释液对西门塔尔种公牛冷冻精液的影响

稀释液成分是影响冷冻精液品质和母牛受胎率的重要因素.试验比较了不同稀释液对西门塔尔种公牛精液的冷冻效果.结果表明,1号稀释液与3号稀释液在精子活力和A 级精子百分率指标上没有显著差异(P＞0.05),冷冻保护效果均显著优于2号稀释液(P＜0.05),达到了正常水平的要求,能够有效地保证冷冻精液质量.     

猪精液5mL大管冷冻方法的初步研究

以5 mL大管解冻后的精子活力、质膜完整率、顶体完整率以及人工授精结果为判定指标,筛选冷冻液Ⅰ和冷冻液Ⅱ中N-乙酰-D-氨基葡萄糖(N-Acetyl-D-Glucosamine,N-AcGA)、甘油和卵黄的适宜浓度,寻找适宜的平衡时间和冷冻高度.结果显示:(1)在冷冻液Ⅰ中添加0.1%的N-AcGA,解冻后精子的活力和顶体完整率最高,分别为50.00%和56.60%;(2)冷冻液Ⅱ中以4%的甘油浓度最好,解冻后精子的活力、弯尾率和顶体完整率可分别达52.50%、52.08%和77.67%;(3)冷冻液中的卵黄终浓度以10%效果最佳;(4)在4℃中平衡2 h,冻后顶体完整率比对照组(0 h)有显著提高(P<0.05);(5)在冷冻高度方面,距液氮面1 cm处冷冻对精子活力和顶体完整性都有明显的保护作用;(6)在人工授精方面,5 mL大管冷冻精液平均获得了超过80%的受胎率.     

二甲基乙酰氨在鸡精液冷冻中的作用分析

用二甲基乙酰氨（ＤＭＡ）及甘油作为冷冻保护剂，对鸡精液进行冷冻保存，解冻后观察精子活力，并进行输精试验，发现以ＤＭＡ作为冷冻保护剂冷冻的精子解冻后活力及人工输精后的受精率都显著高于以甘油作冷冻保护剂的结果。经过毒性试验、冷冻试验及输精试验，发现ＤＭＡ的确是一种效果较好的冷冻保护剂。它在许多方面比甘油更为理想。本文还叙述了ＤＭＡ的性质及作用机理     

饲料中添加Penergetic-T对种公牛精液品质的影响

试验旨在研究 Penergetic-T 对种公牛精液品质的影响,选择 120 头健康无疾病的西门塔尔种公牛随机分为试验组和对照组,每组 60头,每头牛为 1个重复。对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中添加 0.25 g(/ d 头)Penergetic-T,共饲喂 90 d,检测射精量、精子密度、冻精产量及精子活力、精子畸形率。结果表明:饲料中添加 Penergetic-T 种公牛鲜精的射精量、精子密度、冻后产量、精子活力及畸形率均优于对照组,且差异显著。说明,饲料中添加 Penergetic-T 可显著提高种公牛的精液品质与冻精产量,给种公牛站带来更多的经济价值。     

不同浓度的甘油和DMSO对蒙古羊精子活力的影响

研究由两个实验组成:实验一探讨添加不同浓度的甘油(1%、3%、5%、7%,V/V)对冷冻精子活率的影响,实验二探讨在37℃或5℃下添加不同浓度的二甲基亚砜(DMSO)(1%、1.25%、1.5%、1.75%,V/V)对冷冻精子活率的影响.通过实验组获得蒙古羊的最优的甘油浓度稀释液条件下,测定精子解冻后的活力、直线运动率、成活率及顶体完整率.同样用DMSO代替甘油测定精子活率、直线动动率、成活率和顶体完整率,实验结果显示前一项指标得到显著的改善(P＜0.05),且在37℃添加7%甘油效果最好.但是顶体完整率随着甘油或DMSO浓度的增加而出现下降趋势,也就是顶体完整率在5℃下添加1%的甘油或1.75%的DMSO效果较好(P＜0.05).实验中在37℃中增加DMSO顶体完整率显著下降(P＜0.05),此外,在5℃时添加1%DMSO时精子顶体完整率优于其他实验组.实验中在37℃条件下加入1.75%的DMSO比在5℃下精子活力好,在37℃添加7%的甘油比在5℃下添加7%的甘油效果显著(P＜0.05).研究结果表明,对于蒙古羊甘油仍是较好的精子冷冻保护剂.     

应用塑料大棚改造种公牛运动场的效果初探

为了探讨不同运动场对种公牛生产性能的影响,通过塑料大棚运动场牛舍饲养模式与常规露天运动场牛舍饲养模式对种公牛生产性能影响的比较试验,测试塑料大棚运动场在种公牛饲养中的应用效果。精液品质按照《牛冷冻精液》标准和《牛冷冻精液生产技术规程》进行测定。采用随机分组试验设计,随机选择一幢常规露天运动场牛舍改造为塑料大棚运动场牛舍,并以其中饲养的13头种公牛为试验组,以相邻的常规露天运动场牛舍及其中饲养的13头种公牛进行同比对照试验;以试验组13头种公牛前12个月的采精记录作为环比对照试验。试验结果表明:同比试验处理,试验组种公牛采精量、原精活力、冷冻精液产量和冷冻精液解冻活力均极显著高于对照组(P0.01);环比试验处理,试验组种公牛采精量、原精活力、冷冻精液产量和冷冻精液解冻活力极显著高于对照组(P0.01)。塑料大棚运动场牛舍饲养模式饲养种公牛效果良好,具有推广应用价值。     

奶牛人工授精受胎率的影响因素与提高方法

1影响因素 应用冷冻精液进行人工授精时,由于运输、保存可能造成缺氮,出现2次冷冻等因素使精液活力降低,甚至死亡。因此,必须确认精液品质,镜检精子的活力和数量是否达标,还要考虑这头种公牛精子与其配种母牛的抗原性。     

不同冷冻保护液和解冻温度对猪精液冷冻效果的影响

在BF5稀释液中分别添加不同水平的牛血清白蛋白(BSA)(0.5,1,1.5 g/L)、二甲基乙酰胺(DMA)(0.5%,1%,1.5%)、甲基-β-环糊精载胆固醇(CLC)(1,2.5,5 g/L),对成年健康猪精液进行冷冻保存,于不同温度(37,50,70℃)解冻后分别检测冷冻后精子的活率、活力、质膜完整性、项体完整率、线粒体活性.结果显示,0.5 g/L BSA组冷冻后精子活力、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性均高于其他组,但差异不显著(P0.05).1% DMA组冷冻后精子活率和活力显著优于1.5%DMA组(P＜0.05),同时也高于对照组(3%甘油)冻后精子活率和活力,但差异不显著.不同质量浓度CLC组冷冻后精子的活率、活力、质膜完整性和线粒体活性与对照组相比差异不显著.50℃和70℃解冻组精子的活率和线粒体活性显著高于37℃解冻组的精子;50℃解冻组精子的活力和质膜完整率显著高于其他2组.因此,在猪精液冷冻稀释液中,用DMA可以代替甘油作为渗透性保护剂,且以1%DMA,50℃解冻最佳.     

牛精液新型冷冻保护剂的研究

通过对不同浓度的甘油和乙二醇对牛精液冷冻保存效果的测定,探讨冷冻保护剂乙二醇与传统冷冻保护剂甘油的冷冻效果,并通过对葡萄糖和卵黄及Tris等成分的调整进一步分析了主要营养成分和缓冲体系对牛精液冷冻保存的影响程度。试验表明:1GL和EG对牛精子均有良好的冷冻保护能力,解冻后6h的活力GL组中以GL1.2和GL1.4的活力最高,均为0.50;EG组中以EG0.7的活力最高,达到0.53,高于0.35以上的国标。2其他营养成分的变化对GL和EG保护精子的效果有一定影响,特别是卵黄的作用比较明显;3在同等条件下,GL对精子的冷冻保护效果优于EG,EG组的活力衰竭快于GL组。