PCR和斑点杂交检测鸡传染性贫血病毒

通过聚合酶链反应（ｐｃＲ）扩增鸡传染性贫血病毒（ｃＡＶ）ＤＮＡ特定片段，将此ｐｃＲ产物用Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记后作为探针进行斑点杂交，以此检测ＣＡＶ并作流行病学调查。对从江苏省不同地市随机采集的２月龄左右不同疾病的病鸡ＤＮＡ样品进行检测，在被检的５２个不同鸡群来源的病料中，有３６个鸡群来源的病料ＤＮＡ显示ＣＡＶ阳性（群阳性率为６９．２％）；备组织中ＣＡＶＤＮＡ含量有所差异，依次为胸腺＞脾、骨髓、肝＞肾、法氏囊、脑。用ＰＣＲ检测得到的阳性鸡的组织病料感染ＳＰＦ鸡，在感染后第２４天检查，出现贫血症状。初步调查表明，在江苏一些地区ＣＡＶ感染已相当普遍，但它与发病的关系还有待于进一步研究。     

PCR和斑点杂交检测实验感染雏鸡体内鸡传染性贫血病毒的动态分布

鸡传染性贫血病毒(CIAV)自1979年日本学者Yuasa等首先分离以来，世界各地均有报道。该病原以致鸡再生障碍性贫血和淋巴组织萎缩为特征，从而导致免疫抑制，严重影响机体对疫苗的免疫反应，为危害养禽业的重要病原之一。     

应用聚合酶链反应检测鸡传染性贫血病毒

根据鸡传染性贫血病毒（CAV）Cux－1株的基因序列,设计了一对引物,用这对引物对三株CAV的核酸模板进行PCR扩增,结果均能特异性地扩增出420bp的片段,但对其它5种禽病病原体核酸模板的扩增,结果均为阴性,该PCR能检出10fg鸡传染性贫血病毒DNA模板。     

应用PCR方法检测鸡传染性贫血病毒

根据发表的鸡传染性贫血病毒(CAV)序列,选择鸡传染性贫血病毒基因组保守区域。设计一对引物,建立了CAV快速诊断的PCR方法。特异性结果说明,该方法对CAV不同毒株均能扩增出明显的特异性条带,而新城疫病毒(NDV)Lasota株、传染性支气管炎病毒(IBV)M41株、鸡马立克氏病病毒(MDV)和鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)扩增结果均为阴性;PCR反应敏感性结果显示．该方法能检测出的DNA最低浓度为O．001pg／μl,可用于临床感染不同年龄鸡群的CAV的检测。     

PCR方法快速检测鸡传染性支气管炎病毒

本试验建立了一种快速检测鸡传染性支气管炎病毒的通用性ＰＣＲ方法。通过对纯化后ＩＢＶ核蛋白基因进行直接ＰＣＲ及套式ＰＣＲ扩增表明,两次ＰＣＲ产物的大小为０．７ｋｂ和０．５ｋｂ,与实际设计相符。而对照的ＮＤＶ及ＩＢＤＶ的ＰＣＲ扩增产物均为阴性。用 ＩＢＶ ＨＢ株感染 ＳＰＦ鸡后,应用我们所建立的 ＰＣＲ方法去检测不同时期所采集的肾脏、气管、盲肠扁桃体、肺脏和肝脏中的 ＩＢＶ,在 ＳＰＦ鸡感染 ＩＢＶ后的２１天仍然能够检测到 ＩＢＶ的基因组,Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ杂交试验证明了我们获得的 ＰＣＲ产物为ＩＢＶ的核蛋白基因。该ＰＣＲ检测方法比免疫荧光抗体（ＦＡ）法更具敏感、特异、快速等特点,完全适用于不同来源及不同血清型ＩＢＶ的检测。     

鸡传染性法氏囊病病毒的PCR检测法

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术直接检测鸡传染性法氏囊病病毒，可快速、特异及敏感地检出实验毒株和病鸡法氏囊内存在的微量病毒核酸。对病鸡、进口种鸡的实测结果表明，本法对诊断鸡传染性法氏囊病病毒具有重要的实用意义     

鸡贫血病毒DNA的PCR扩增及其分子克隆

用ＰＣＲ方法扩增了国内分离的鸡贫血病毒（ＣＡＶ）ＳＪ１株的含ＶＰ２、ＶＰ３以及部分ＶＰ１的１５００ｂｐＤＮＡ片段。经限制性内切酶酶切分析，该片段与Ｃｕｘ－１株的酶谱相似。同时，以ｐＵＣ１１９质粒载体克隆了这一ＤＮＡ片段。     

鸡传染性贫血病毒的分离鉴定

本试验于１９９２年自东北某地疑似鸡传染性贫血鸡群得到一分离物，该发离物能抵抗７０℃５分钟处理，对氯仿不敏感，不凝集鸡，小白鼠，绵羊红细胞，可引起１日龄ＳＰＦ鸡发病，表现出传染性贫血的特征病变，分离物能被鸡传染性贫血病毒抗血清中和，能在ＭＤＣＣ－ＭＳＢ１细胞上适应增值并与参考毒ＧｉＦｕ－１，ＣＵＸ－１，ＴＫ５８０３在该细胞培养中产生一致的细胞病变，分离物与参考毒感染的ＭＤＣＣ－ＭＳＢ１细胞用间接免疫     

用核酸探针检测鸡传染性贫血病毒

用核酸探针检测鸡传染性贫血病毒许兰菊王丽李慧张书松（河南农业大学牧医工程学院，郑州４５０００２）鸡传染性贫血病（ＣＩＡ）是由鸡贫血病毒（ＣＡＶ）引起雏鸡再生障碍性贫血的一种免疫抑制性疾病。病鸡全身淋巴组织萎缩、皮下和肌肉出血，有较高的死亡率，该病又称...     

鸡传染性贫血病毒的分离鉴定

在山东省从死亡率达７２％,混合感染多种病原微生物的海兰蛋白鸡和艾维茵肉鸡群中分离到３株鸡贫血病毒（ＣＡＶ）这些毒株耐体积分数５０％氯仿和７０℃水浴１５ｍｉｎ,能在ＭＤＣＣ－ＭＳＢ１的细胞内增殖,用分离的细胞毒接种１日龄ＳＰＦ鸡呈现典型的难传染性贫血特征性的临床症状和病理变化;用间接免疫荧光检查感染的ＭＤＣＣ－ＭＳＢ１细胞涂片和鸡组织触片,可见特异的核内荧光,分离毒株能被ＣＡＶ－ＴＫ５８０３株抗血清     

家禽活疫苗中鸡传染性贫血病毒PCR检测方法的建立

为建立不依赖于病毒分离的快速,特异的禽活疫苗中鸡传染性贫血病毒(CAV)监测方法,本研究建立了CAV的PCR检测方法.试验表明:该PCR不仅具有良好的CAV特异性,且检测灵敏度达3.98个TCID50/反应.用该方法监测9份随机抽取的商品禽用活疫苗发现,其中2份活疫苗呈PCR强阳性.以上结果表明,本研究建立的鸡传染性贫血病毒PCR检测方法具有特异、敏感等特点,能用于禽用活疫苗中CAV污染的快速监测.     

鸡传染性贫血病毒荧光定量PCR检测方法的建立

根据鸡传染性贫血病毒基因组保守区域设计1对扩增片段为164 bp的特异性引物,应用SYBR GreenⅠ染料建立了鸡传染性贫血病毒(CIAV)荧光定量PCR检测方法.以本室构建的阳性重组质粒作为模板,制定标准曲线,对CIAV阳性样品进行了敏感性、特异性和重复性、稳定性试验,并应用于临床检测.结果表明引物最佳终浓度为0.2 μmol/L,制作的标准曲线定量浓度范围宽,最低可检测到每个反应相当于10个拷贝的标准品DNA;与IBDV、ARV、MG都不反应;重复性、稳定性试验的变异系数都较小.对保存的25份疑似CIAV样品进行荧光定量PCR检测,结果检出9份阳性.本研究建立的荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可用于临床上鸡感染CIAV的检测.     

鸡传染性贫血病毒、传染性法氏囊病毒与大肠杆菌混合感染的诊治

鸡传染性贫血与传染性法氏囊病是由病毒感染导致的鸡主要免疫抑制病,雏鸡同时或先后感染此2种病原,即会使二者相互促进,增强感染力和致病力,进一步继发细菌感染,造成严重损失。某个体养殖户鸡群发生以消瘦、贫血为主的鸡病。根据发病特点、临床症状、剖检、实验室检查确诊为鸡传染性贫血病毒、传染性法氏囊病毒与大肠杆菌混合感染。采取及时隔离、加强消毒及饲养管理、选用敏感药物、饲料饮水加药控制继发感染等综合防制措施,有效控制了该病。     

鸡传染性贫血与鸡传染性法氏囊混合感染的诊治

鸡传染性贫血(chicken infectious anemia,CIA)是由圆环病毒属的鸡传染性贫血病毒(CIAV)引起的一种以雏鸡骨髓脂肪变性而引发的再生障碍性贫血和胸腺等淋巴组织萎缩为主要特征的传染病,是鸡主要的免疫抑制病之一.     

鸡传染性贫血病毒与大肠杆菌混合感染的诊治

为了查明浦东某鸡场三黄肉鸡发生疑似鸡传染性贫血的病因,临床调查后采集相应病料,实验室研磨处理后备用。对病料进行鸡传染性贫血病毒(CIAV)的PCR检测、细菌分离鉴定及药敏试验。结果显示:3份病料接种鸡胚,收获的尿囊液PCR检测均为CIAV阳性,且细菌分离确定有大肠杆菌感染。药敏试验显示:分离的大肠杆菌对头孢噻呋、大观霉素敏感,对庆大霉素表现为中介,对阿米卡星、阿莫西林等13种药物均表现耐药。因此表明本次疫情为CIAV与大肠杆菌混合感染引起。     

鸡传染性贫血病毒的分子生物学研究进展

鸡传染性贫血病毒(CAV)为圆环病毒科、圆环病毒属,其核酸结构为环状单股DNA、衣壳呈二十面体对称,无囊膜.本文介绍了CAV基因组结构、基因组复制与转录、结构蛋白与功能,以及对该病防治的研究进展,并就该病毒的分子生物学研究前景做了分析.     

鸡传染性贫血病毒研究进展

对鸡传染性贫血病毒的理化特性、基因组结构及其编码蛋白、复制、致病性和免疫预防与控制措施等进行了概述。     

应用间接免疫荧光抗体技术检测鸡传染性贫血病毒抗体

用MDCC－MSB1细胞增殖鸡传染性贫血病毒（CAV）CuX-1毒株制备抗原,建立了检测CAV抗体的间接免疫荧光的方法。应用该方法检测CAV基因工程亚单位苗首免、二免和三免后鸡体内的CAV抗体,结果表明首免一个月后,鸡血清中CAV抗体的滴度很低或几乎测不到抗体;二免一个月后,鸡血甭中可测到较高的CAV抗体;三免一个月后,鸡血清中的CAV抗体滴度更高。另外,应用此方法调查了某禽场3个批次鸡体内的CAV抗体,其中32日龄黄鸡和1日龄乌骨鸡体内的 CAV抗体为阴性,而1日黄鸡体内的CAV抗体为阳性。     

鸡传染性贫血

鸡传染性贫血 (ＣｈｉｃｋｅｎＩｎｆｅｃ ｔｉｏｕｓＡｎｅｍｉａ，ＣＩＡ)是由鸡传染性贫血病毒 (ＣｈｉｃｋｅｎＩｎｆｅｃｔｉｏｕｓＡｎｅｍｉａＶｉｒｕｓ，ＣＩＡＶ)引起的以雏鸡再生障碍性贫血、全身淋巴组织萎缩、皮下和肌肉出血及高死亡率为特征是一种传染病 ,又称为出血性综合症或贫血性皮炎综合症 ,是继鸡传染性法氏囊病之后又一种重要的免疫抑制性疾病。１病原学ＣＩＡＶ属于环状病毒科病毒基因组由１个单链环状ＤＮＡ组成 ,分子量２．３ｋｄ。纯化病毒仅含一个多肽 ,分子量５０ｋｄ。电镜下ＣＩＡＶ呈球形或六角形 ,直径约为…