狄高辛标记DNA探针对鸡马立克氏病的流行病学研究

用狄高辛标记的Ⅰ型马立克氏病病毒特异性ＤＮＡ探针，对自然感染鸡羽囊、人工感染鸡羽囊和脏器、同居感染鸡羽囊进行了检测。结果表明，自然感染鸡，其羽囊最早出现阳性的日龄为４２日龄，随日龄增大，羽囊阳性检出率升高，１５０日龄达最高峰（２６．７％）。以后则阳性率显著下降（６月龄为０．４８％，１年以上为０．２４％）。鸡人工感染马立克氏病国际标准强毒（ＭＤＶ－ＧＡ强毒）后３ｄ，就可从５只鸡中３只的心、肝、肺、肾、法氏囊、胸腺、肌胃等脏器检出Ⅰ型ＭＤＶ－ＤＮＡ；２５ｄ，５只鸡的脏器均能检出ＭＤＶ－ＤＮＡ；同时，感染后１０ｄ，就可从羽囊检出ＭＤＶ－ＤＮＡ，１５ｄ羽囊检出阳性率达１００％。同居感染鸡从羽囊排毒的最早时间为同居后３１ｄ，即接触强毒２１ｄ后开始持续排毒，直至死亡。     

PCR和斑点杂交检测鸡传染性贫血病毒

通过聚合酶链反应（ｐｃＲ）扩增鸡传染性贫血病毒（ｃＡＶ）ＤＮＡ特定片段，将此ｐｃＲ产物用Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记后作为探针进行斑点杂交，以此检测ＣＡＶ并作流行病学调查。对从江苏省不同地市随机采集的２月龄左右不同疾病的病鸡ＤＮＡ样品进行检测，在被检的５２个不同鸡群来源的病料中，有３６个鸡群来源的病料ＤＮＡ显示ＣＡＶ阳性（群阳性率为６９．２％）；备组织中ＣＡＶＤＮＡ含量有所差异，依次为胸腺＞脾、骨髓、肝＞肾、法氏囊、脑。用ＰＣＲ检测得到的阳性鸡的组织病料感染ＳＰＦ鸡，在感染后第２４天检查，出现贫血症状。初步调查表明，在江苏一些地区ＣＡＶ感染已相当普遍，但它与发病的关系还有待于进一步研究。     

用狄高辛标记DNA探针从人工感染鸡脏器检出Ⅰ型马立克氏病病毒

用狄高辛标记ＤＮＡ探针从人工感染鸡脏器检出Ⅰ型马立克氏病病毒（ＭＤＶ），检出结果表明，人工感染ＧＡ强毒第三天就可从５只鸡中的三只心、肝、肺、肾、法氏囊、胸腺、肌胃检出Ⅰ型ＭＤＶ，第２５天５只鸡的脏器均能检出Ⅰ型ＭＤＶ。同时从感染第１０天就可从羽囊检出Ⅰ型ＭＤＶ，到第１５天羽囊检出阳性率１００％。     

用狄高辛标记DNA探针从人工感染鸡脏器检出I型马立克氏病病毒

用狄高辛标记ＤＮＡ探针从人工感染鸡脏器检出Ｉ型马立克氏病毒（ＭＤＶ），检出结果表明，人工感染ＧＡ强毒第三就高可从５只鸡只的三只心，肝，肺，肾，法氏囊，胸腺，肌胃检出Ｉ型ＭＤＶ，第２５天５只鸡的脏器均能检出Ｉ型ＭＤＶ，同时从感染第１０天就可从羽囊检出Ｉ型，到第１５天羽囊检出阳性率１００％。     

用digoxigenin标记DNA探针检测鸡贫血病病毒感染

用ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记鸡贫血病病毒（ＣＡＶ）衣壳蛋白基因的重组质粒克隆作为探针对江苏、上海等不同地区随机采集的６０￣１２０日龄病鸡或死亡鸡的胸腺抽提ＤＮＡ，进行Ｄｏｔ ｂｌｏｔ检测ＣＡＶ感染情况。在被检测的８４只鸡胸腺病料中，有２４只鸡的病料显示阳性（阳性检出率为２８．６％），这一结果表明，ＣＡＶ感染在我国鸡群中已很普遍，且引起严重的二重感染。     

应用免疫酶染色法检测鸡病毒性关节炎病毒的研究

用免疫酶染色法检测Ｖｅｒｏ细胞培养物，陈旧石蜡切片和人工感染试验鸡组织中的ＡＶＡＶ，并比较了ＡＶＡＶ强毒和弱毒株在组织中情况，结果发现，试验鸡于感染ＡＶＡＶ弱毒株后１－５天、感染ＡＶＡＶ强毒株后１－９天出现病毒血症；跗关节、跖趾关节、趾关节，趾屈肌健、脾脏、肝脏等组织中病毒的检出最高，存在时间也最长；在感染后３－２０天于感染鸡法氏囊、感染后３－１１天于感染鸡胸腺中检出了强毒株，在这两组织中未检出Ａ     

DNA免疫防制鸡传染性支气管炎的探索研究

ＯＲＦ完整的ＩＢＶ类Ｍ４１株Ｓ１基因ｃＤＮＡ插入真核表达质粒ｐＣＩ ＣＭＶ启动子下游我隆位点，构成ｐＣＩＳ１用于１周龄ＳＰＦ雏鸡的ＤＮＡ免疫试验。试验鸡生疏腿部肌肉注射ｐＣＩＳ１ＤＮＡ１００ｇ，２周后加强免疫一次。二次免疫２周后，代感染ＩＢＶ Ｈ５２株。结果，ＩＢＶ人工感染后第４天气管－泄殖腔棉拭子鸡胚病毒分离阳性者，免疫试验组为１／６，而对照组为６／６，鸡胚病毒中和试验显示，二次免疫后临感染前及     

鸡传染性贫血病毒感染胸腺集落刺激因子对骨髓粒单系祖细胞增殖功…

本文研究了鸡传染性盆血病毒感染鸡胸腺ＣＳＦ对正常鸡骨髓粒单系祖细胞增殖功能的影响。结果表明，雏鸡感染ＣＩＡＶ后１４天胸腺ＣＳＦ对ＣＦＵ－ＧＭ刺激作用与对照鸡比较未见明显异常。感染后２１天，刺激作用较对照鸡明显增强；感染２８天以后，其刺激作用达正常鸡水平。结果证明，ＣＩＡＶ感染引起的骨髓造血机能障碍与胸腺ＣＳＦ活性无关。     

匈牙利从肉鸡分离到鸡贫血病毒

匈牙利从肉鸡分离到鸡贫血病毒１９９１年，通过对１－６周龄的父母代肉鸡进行血清学检验和病毒分离确诊感染了鸡贫血病毒（ＣＡＶ）。肉鸡７周龄时约２５％未达标准体重，至少损失７％－８％。临床症状（生长缓慢、虚弱、皮肤苍白）、肉眼病变（肝和脾有病灶、胸腺和法氏...     

应用单克隆抗体夹心酶联免疫吸附试验检测兔出血症病毒

应用建立的单克隆抗体夹心酶联兔疫吸附试验（ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ）,检测了人工感染兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）ＤＪＲＫ细胞毒、肝毒的兔以及自然感染ＲＨＤＶ的兔的组织样品。结果表明,感染死亡兔的肝、脾、肾、骨髓样品病毒抗原的检出率为１００％,淋巴结和肌肉的检出率分别为９７．５％和７９．５％。ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ能检出肌肉中血凝试验不能检出的ＲＨＤＶ抗原。此外,还用ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ检测了肝毒人工感染兔血中ＲＨＤＶ的动态,并对１０份兔出血症脏器灭活苗的效价作了滴定。     

应用免疫酶染色法检测鸡病毒性关节炎病毒的研究

用免疫酶染色法检测Ｖｅｒｏ细胞培养物、陈旧石蜡切片和人工感染试验鸡组织中的ＡＶＡＶ，并比较了ＡＶＡＶ强毒和弱毒株在组织中的分布情况。结果发现，试验鸡于感染ＡＶＡＶ弱毒株后１～５天、感染ＡＶＡＶ强毒株后１～９天出现病毒血症；跗关节、跖趾关节、趾关节、趾屈肌健、脾脏、肝脏等组织中病毒的检出率最高，存在时间也最长；在感染后３～２０天于感染鸡法氏囊、感染后３～１１天于感染鸡胸腺中检出了强毒株，在这两组织中未检出ＡＶＡＶ弱毒株。感染８小时后的Ｖｅｒｏ细胞培养物和陈旧石蜡切片均被检出ＡＶＡＶ。     

免疫鸡MDV感染后羽毛根HVT的分离及HVT免疫对MDV抗原检测的影响

５只ＨＶＴ免疫鸡,实验感染ＭＤＶ后的第１～１０周期间,分别采用初次细胞分离培养物上清中的自由病毒粒子鉴定,ｄｏｔ－ｂｌｏｔＤＮＡ杂交和常规ＡＧＰ试验等方法,对并发感染鸡羽毛根进行了病毒及病毒抗原的动态检测与比较。结果显示,在上述羽毛根中可同时存在ＨＶＴ粒子和ＭＤＶＤＮＡ。ＨＶＴ可分离时间为ＭＤＶ攻毒后１～７周;ＭＤＶＤＮＡ最早检出时间为ＭＤＶ攻毒后的第１８～２２天,并达到其持续性（２２～７０ｄ）的检出率最高峰（１００％）;而ＡＧＰ法对此期间鸡只羽毛根ＭＤＶ抗原的最早检出时间在第２２天,且检出率很低。因此,羽毛病毒抗原ＡＧＰ检测法,对免疫鸡只或鸡群ＭＤＶ感染的诊断仍然是特异的,但较单纯感染的检测,其检出率更低,因而更难以反映出免疫鸡群中ＭＤＶ感染的真实状况。     

鸡贫血病病毒感染雏鸡细胞周期的研究

用流式细胞仪对雏鸡感染鸡贫血病毒后不同时期胸腺和骨髓细胞的细胞周期进行了分析，结果显示感染鸡骨髓和胸腺发生了Ｇ１阻滞，这表明ＤＮＡ合成抑制，Ｇ２／Ｍ期细胞数量明显减少，这说明增殖性细胞在减少。本实验结果提示增殖性细胞减少是鸡传染性贫血病（ＣＩＡ）中胸腺淋巴细胞和骨髓造血细胞大量减少的重要原因之一，这为阐明ＣＡＶ的发病机理提供了新资料     

鸡贫血因子病全身免疫功能变化的研究

用鸡贫血病毒（ＣＡＶ）感染１日龄ＡＡ雏鸡,以未感染同龄ＡＡ雏鸡为对照,感染后不同时间检测其外周血液Ｔ、Ｂ细胞数量和ＩｇＧ,ＩｇＭ,ＩｇＡ含量,胸腺,法氏囊,脾脏ＩｇＧ,ＩｇＭ,ＩｇＡ抗体生成细胞和Ｔ细胞数量以及Ｔ、Ｂ细胞增殖功能;胸腺和脾脏白细胞介素２（ＩＬ－２）和干扰素（ＩＦＮ）诱生活性等的动态变化。     

鸡实验性成髓细胞性白血病的细胞化学及超微结构

用鸡成髓细胞性白血病病毒（ＡＭＶ）ＢＡＪ－Ａ株鸡传代血浆毒感染１日龄伊莎鸡雏２０只，在接毒后１９￣２５ｄ于濒死期扑杀、采样，进行细胞化学和电镜检查。结果表明，肝、肾、法氏囊、胸腺及血液的成髓细胞来源于骨髓；其成髓细胞胞浆、胞膜及细胞间隙存在带有囊膜的含核心的病毒粒子。     

一日龄雏鸡感染鸡盆血病病毒及鸡呼肠病毒的协同作用

１日龄ＳＰＦ来航鸡经口双重感染鸡贫血病病毒（ＣＡＶ）Ｃｕｘ－１株及鸡呼肠病毒（ＲＥＯＶ）Ｓ１１３３或Ｕｃｈｉｄａ株。于接种后第１４天，检查血细胞压积（ＰＣＶ）、称体重、观察骨髓、胸腺及法氏囊病变。结果，双重感染ＣＡＶ及Ｓ１１３３株ＲＥＯＶ的雏鸡与感染其中之一病毒的雏鸡相比，其体重增重少，病变重，而且比仅感染ＣＡＶ的雏鸡在平均ＰＣＶ上也明显低。双重感染ＣＡＶ及Ｕｃｈｉｄａ株ＲＥＯＶ的雏鸡，不加重发病     

病鸡血清中鸡传染性贫血病病毒DNA的PCR扩增及抗体的ELISA检测

根据鸡传染性贫血病病毒（ＣＡＶ）的基因结构，设计并合成一对限制扩增长度为０．６８ｋｂ的ＰＣＲ引物．直接对临床可疑病鸡的血清进行靶ＤＮＡ的ＰＣＲ扩增．在不同地区的３批样品中，有２批扩增出一二分子量接近０．７ｋｂ的单一特异性ＤＮＡ片段．用限制酶ＢｇｌⅡ消化ＰＣＲ产物．可获得分子量分别为０．３３ｋｂ和０．３５ｋｂ两个ＤＮＡ片段，其酶切位点与靶ＤＮＡ的相吻合．将ＰＣＲ扩增为阳性的病料接种６日龄ＳＰＦ鸡胚，并取其１８日龄胚肝和由接种鸡肛孵出的雏鸡的血清重新进行ＰＣＲ扩增，结果均为阳性，而同期对照胚肝及雏鸡血清为阴性．此外还用胚胎时接种过病料的雏鸡肝、脾和胸腺等组织抽提液作抗原，建立了检测ＣＡＶ血清抗体的ＥＬＩＳＡ方法．研究结果提示，用ＰＣＲ直接对病鸡血清中ＣＡＶＤＮＡ的扩增以及ＣＡＶ抗体的ＥＬＩＳＡ检测是快速和特异的．它为鸡传染性贫血病（ＣＩＡ）的流行病学调查、实验室诊断、ＣＡＶ毒株的分离和鉴定提供了必要的检测手段．     

鸡传染性贫血病的综合防制

鸡传染性贫血病（Ｃｈｉｃｋｅｎ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ａｎｅｍｉａ，ＣＩＡ）是由鸡贫血病毒（Ｃｈｉｃｋｅｎ Ａｎｅｍｉａ Ｖｉｒｕｓ，ＣＡＶ）引起的，其特征性病变为骨髓黄化，胸腺萎缩，出现造血机能障碍和免疫机能损害［１，２］。自 １９７９年从日本发现和分离到 ＣＡＶ以来［３］，德国、英国、美国、澳大利亚、荷兰和以色列都已先后报道了本病的存在。对ＣＡＶ感染的流行病学调查已表明，世界各地鸡群中，对ＣＡＶ的感染率都相当高，甚至在曾经认为是ＳＰＦ鸡群中也有４０％－５０％表现出ＣＡＶ抗体阳性。由此可见商品雏鸡中…     

鸡传染性贫血病毒感染鸡血清对骨髓造血祖细胞增殖功能的影响

本文研究了鸡传染贫血病毒感染鸡血清对正常鸡骨髓ＣＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＭ集落生长的影响。结果发现，ＣＩＡＶ感染后第２１天的鸡血清对骨髓ＣＦＵ－Ｅ生长具有明显抑制作用（Ｐ＜０．０５）；于感染后第７，１４，２１天的血清对ＣＦＵ－ＧＭ呈现明显抑制作用（Ｐ＜０．０５）。说明感染鸡血清中存在对骨髓造血祖细胞增殖具有抑制作用的因子。     

鸡传染性贫血病毒感染鸡血清对骨髓造血祖细胞增殖功能的影响

本文研究了鸡传染性贫血病毒感染鸡血清对正常鸡骨髓ＣＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＭ集落生长的影响．结果发现，ＣＩＡＶ感染后第２１天的鸡血清对骨髓ＣＦＵ－Ｅ生长具有明显抑制作用（Ｐ＜０．０５），于感染后第７、１４、２１天的血清对ＣＦＵ－ＧＭ呈现明显仰制作用（Ｐ＜０．０５）。说明感染鸡血清中存在对骨髓造血祖细胞增殖具有抑制作用的因子．