斑点免疫金测定法检测鸡传染性支气管炎病毒的研究

本文通过制备胶体金标记提事的兔抗ＩＶＢ ＩｇＧ。从而建立一种以微孔滤膜为固相载体，以红色胶体金为标记物，检测鸡传染性支气管炎病毒的斑点免疫金测定法。该法对ＩＢＶ的最小检测量为０．２０３μｇ，与鸡胚培养测定法比较，在１０份自然病例样品中ＤＩＧＦＡ法检出８份，检出率为８０％，而鸡胚培养测定法以盲传３－５天，出现侏儒胚者为阳性，其检出６份。检出率为６０％。．     

鸡传染性支气管炎病毒的免疫研究进展

鸡传染性支气管炎(Avian Infectious Bronchitis,简写为IB)是鸡的一种急性、具有高度接触性的呼吸道传染病。由冠状病毒属(Coronavirus)传染性支气管炎病毒(Infectious Bronchitis virus,简写为IBV)的感染而引起。主要引起呼吸、生殖和消化各系统病变,此外,引起雏鸡肾炎—肾变病的报道也甚多,尤其是在澳大     

鸡传染性支气管炎病毒的快速检测

本试验建立了一种快速检测鸡传染性支气管炎病毒的通用性PCR方法。通过对纯化后IBV核蛋白基因进行的直接PCR及套式PCR扩增表明，两次PCR产物的大小为0.7kb和0.5kb，与实际设计相符。而对照的NDV主IBDV的PCR扩增产物均为阴性。用IBV HB（华北）株感染SPF鸡后，应用我们所建立的PCR方法去检测不同时期所采集的肾脏、气管、盲肠扁桃体、肺脏和肝脏中的IBV，在SPF鸡感染IBV后的21天仍然能够检测到IBV的基因组，Southern blot杂交试验证明了我们获得的PCR产物为IBV的核蛋白基因。对30份自然感染病料的检测表明，本实验所建立的PCR方法检测阳性数为15份，阳性率为50％（15／30）；鸡胚接种检测的阳性数为17份，阳性率为56．7％（17／30）；IFA检测的阳性数11 ，阳性率为36．7％（11／30）。PVR检测法与鸡胚接种方法的阳性符合率为93．3％（14／15），统计学分析表明，P＞0．05，差异不显著，而PCR检测法与IFA的阳性符合率为60％（9／15）。结果证明本实验所建立的PCR检测方法具有敏感、特异、快速等特点，适用于不同来源及不同血清型IBV的检测。     

肾型鸡传染性支气管炎不同脏器中病毒抗原的分布规律

利用分离并鉴定的１株肾型鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）人工感染易感鸡致病采用免疫荧光试验及免疫酶组化染色对病、死鸡的１１种不同脏器进行病毒抗原定位，确定病毒在鸡体的分布。结果为发病早期病毒主要在呼吸的肺和气管组织中复制，随着病程的发展，肾脏中病毒明显升高，进而导致病鸡尿素症。１１种脏器中ＩＢＶ的分布为：肾、气管、肺〉泄殖腔上皮〉睾丸〉肝脏〉胸腺〉法氏囊〉输卵管上皮〉脾脏〉心脏。     

中国鸡传染性支气管炎病毒的变异

同ＩＢＶ参考株比较,中国ＩＢＶ流行株血清型内和血清型间在基因型和组织嗜性上均已发生变异,研究首次表明ＩＢＶ血清型,基因型及组织嗜性间存在有规律的相关性,病毒免疫原Ｓ１基因的点突变在一定程度上影响病毒的免疫原性。     

鸡传染性支气管炎病毒分子生物学研究进展

鸡传染性支气管炎病毒分子生物学研究进展高金新，甘孟侯，杨汉春（北京农业大学动物医学院，１０００９４）鸡传染性支气管炎病毒（ＡｖｉａｎＩｎｆｅｃｔｉｏｕｓＢｒｏｎ－ｃｈｉｔｉｓＶｉｒｕｓ，ＩＢＶ）是冠状病毒科冠状病毒属的代表种之一，可引起鸡的呼吸道症状...     

鸡传染性支气管炎病毒遗传变异研究进展

鸡传染性支气管炎是长期以来困扰养禽业的主要疾病之一。基因突变、重组和免疫压力等因素都可能引起鸡传染性支气管炎病毒发生遗传变异,这给该病的预防和控制带来了很大的困难。文章对鸡传染性支气管炎病毒的分子生物学特性、遗传变异的机理及其研究概况进行了综述。     

鸡传染性支气管炎病毒核蛋白基因免疫的研究

将已经序列测定的鸡传染性支气管炎病毒ＨＢ株的核蛋白基因亚克隆到真核表达载体ｐｃＤＮＡ３的Ｋｐｎｌ酶切位点。快速筛选鉴定出含有ＨＢ核蛋白基因的重组质粒，经酶切、ＰＣＲ及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交鉴定为正向插入的重组ＨＢ核蛋白基因后，将其命名为ｐｃＤＮＡ－Ｎ。对重组质粒ｐｃＤＮＡ－Ｎ进行大量扩增，应用聚乙二醇方法进行纯化，将纯化后的 ｐｃＤＮＡ－Ｎ按 １００／只免疫１４日龄雏鸡，并以ＰＢＳ免疫作为空白艰照。免疫后的攻毒试验结果表明，在基因免疫组的１０只雏鸡中，有４只雏鸡存活，保护率为４０％（４／１０）；而空白对照组的１０只雏鸡则全部死亡，无保护率。本试验认为，ＩＢＶ核蛋白在抗感染和致死方面起着一定的免疫保护作用。     

应用病毒计数仪定量检测鸡传染性支气管炎抗原方法的建立

鸡传染性支气管炎(Infectious bronchitis,IB)是危害养鸡业的主要疫病之一,疫苗质量的提升对于该疫病的防控有着至关重要的意义。目前国内对IB疫苗的生产质量控制主要有鸡胚半数感染量(EID_(50))和动物试验,操作复杂、耗时长、试验受干扰因素多。本研究采用病毒计数仪对IB病毒粒子进行定量检测,同时与EID_(50)检测结果进行对比,本研究方法检测时间只需10min,有耗时短、准确性较高、受干扰因素少的特点,对IB疫苗的生产质量控制提供了较好的方法。     

鸡感染传染性支气管炎病毒的免疫机理

由于鸡传染性支气管炎病毒极易发生点突变、基因缺失、插入及重组,导致病毒不断产生变异,新的血清型和基因型不断出现,使得实际生产中免疫接种失败的现象不断发生。而鸡感染传染性支气管炎病毒的免疫机制一直是国内外研究的热点之一,它的免疫反应包括非特异性免疫和体液免疫、细胞免疫及黏膜免疫,这些免疫反应相互作用、互相补充,各自发挥着重要作用。文章从机体针对该病毒感染的免疫基础、分子基础和其激发的多种免疫反应等角度阐述了该病毒感染机体的免疫机制。     

鸡传染性支气管炎病毒分子生物学研究进展(上)

鸡传染性支气管炎(Infections Bronchitis of chickens缩写为IB)是鸡的一种急性、高度接触性呼吸道和泌尿生殖道传染病.临诊上以气管罗音、咳嗽和打喷嚏为主要特征,幼鸡感染可致死亡,产蛋鸡群感染则导致蛋的产量和质量下降.主要侵害鸡的呼吸系统、泌尿系统、消化系统、生殖系统.传染性支气管炎病毒(IBV)属冠状病毒科,其血清型极为复杂,目前已知IBV有30多个血清型,不同血清型及变异株间抗原性差异很大,且不断变异,这就给IBV的诊断、免疫及IBV血清型分型带来很大的困难.该病对养鸡业危害极大,从而引起了国内外禽病工作者的高度重视.分子生物学研究进展(上).     

中国鸡传染性支气管炎病毒的变异

同ＩＢＶ参考株比较,中国ＩＢＶ流行株血清型内和血清型间在基因型和组织嗜性上均已发生变异;研究首次表明ＩＢＶ血清型、基因型及组织嗜性间存在有规律的相关性;病毒免疫原Ｓ１基因的点突变在一定程度上可影响病毒的免疫原性。     

提高鸡传染性支气管炎病毒血凝抗原滴度途径及抗原灭活

将７株传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）标准株（Ｍ４１、Ｈ１２０、Ｈｏｌｔｅ、Ｇｒａｙ、Ｃｏｎｎｅｃｔｉｃｕｔ、Ｉｏｗａ６０９和Ｔ株）和６株分离株（ＮＩＢＶ、ＧＩＢＶ、Ｍ、ＳＨ、Ｊ和Ｈ株）分别接种于鸡胚，收获尿囊液，经浓缩后，用魏氏梭菌培养液处理，制备血凝抗原。其中，Ｈ１２０株血凝滴度最高，Ｔ、Ｍ、Ｊ和Ｈ株无血凝性。应用含有不同滴度ＩＢＶ母源抗体的鸡胚增殖病毒制备抗原，效价与用ＳＰＦ鸡胚增殖病毒制备的抗原效价一致。尿囊液经反复冻融后再制备抗原会使血凝价降低。抗原分别用甲醛、高碘酸钠、硼氢化钾和ＳＤＳ灭活，其中甲醛灭活效果最理想。抗原对氯仿敏感，对乙醚稳定。适宜浓度的Ｎａ＋、Ｍｇ２＋可显著提高抗原的血凝性