应用多重聚合酶链反应检测鸡毒霉形体和滑液霉形体的研究

根据鸡毒霉形体（ＭＧ）、滑液霉形体（ＭＳ）的基因文库,设计并合成了分别与ＭＧ、ＭＳ某段基因序列互补的两对引物,用这两对引物进行多重聚合酶链反应同时检测ＭＧ与ＭＳ。当样品中同时含有ＭＧ和ＭＳ的目的模板ＤＮＡ时,同时得到２条大小与试验设计相符的７３２ｂｐ（ＭＧ）和２０７ｂｐ（ＭＳ）的ＰＣＲ扩增带;而对其它８种禽病病原的扩增均为阴性,敏感性测定结果表明,多重ＰＣＲ技术最低能同时检出１００ｆｇ的ＭＧ、ＭＳ     

PCR检测鸡毒霉形体和鸡滑液囊霉形体的研究

根据禽霉形体16S rRNA的基因序列设计，合成了1对引物，用这对引物对鸡霉素形体（Mycoplasma gallisepticum,MG)和鸡滑液囊霉形体（Mycoplasma synoviae,MS)菌株DNA进行PCR扩增，得到了与预期大小相一致的580bp的PCR产物，而这对引物对其他畜病病原DNA或RNA模板的扩增结果为阴性，PCR方法对MG和MS的最小检出量分别为2pg和3pg，应用已建立的PCR方法检测MG人工感染样品和临床样品，从人工感染样品中均检测到MG，临床样品的MG阳性检出率为10．25％，高于常规分离培养的阳性检出率。     

应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测鸡毒霉形体和滑液霉形体抗体的研究

用 ELISA 检测鸡毒霉形体和滑液霉形体抗体,试验结果表明:用滑液霉形体抗原对人工感染的31份滑液霉形体阳性血清进行 ELISA 检测,结果全为阳性反应,用鸡毒霉形体抗原对18份鸡毒霉形体阳性血清进行 ELISA 检测也全为阳性反应;滑液霉形体和鸡毒霉形体两种抗原对20份鸡毒霉形体和滑液霉形体阴性血清的 ELISA 检测结果皆为阴性反应。符合率为100%。用鸡毒霉形体抗原对野外收集的60份鸡血清进行了检测,33份呈阳性反应,占55%;27份为阴性反应,占45%,用滑液霉形体抗原对63份鸡血清进行检测,37份呈阳性反应,占59%;26份为阴性反应,占41%。用7份人工感染的滑液霉形体阳性血清进行ELISA 与血凝抑制试验的比较结果表明:ELISA 的灵敏度比血凝抑制试验的高4—16倍。在本试验中,用霉形体的菌体抗原和用 SDS 溶解菌体后提纯的膜抗原均得到了相同的结果,本报告主要是报道菌体抗原的结果。作者同时用此法对鸡毒霉形体和滑液霉形体单克隆抗体进行检测筛选,同样取得了令人满意的结果。不足的是,在进行 ELISA 检测时,鸡毒霉形体和滑液霉形体之间存在有交叉反应。     

聚合酶链反应检测鉴别鸡毒霉形体强毒株和弱毒疫苗株的研究

根据鸡毒霉形体(MG)强毒株和弱毒疫苗株基因组结构特点，分别设计合成2对引物XZ1、XZ2和XZ45、XZ16，建立了可检测MG强、弱毒株的PCR方法。以引物XZ1、XZ2对MG强毒株和弱毒株进行的PCR，均可扩增出732bp的特异性片段；而以另1对引物XZ45、XZ46对MG弱毒株进行PCR，可扩增出524bp的特异性片段，但对鸡毒霉形体标准强毒株和野毒株的PCR，则扩增不出任何条带。特异性试验表明，这2对引物对其他种类鸡毒霉形体及其他对照禽病病原核酸模板的扩增均为阴性。敏感性试验结果显示，2对引物PCR均能检出100fg的MGDNA。研究结果表明，通过上述2对引物的2次PCR扩增，在数小时内即可鉴别出MG毒株是强毒株还是弱毒疫苗株。     

应用多重聚合酶链反应检测四种霉形体的研究

根据鸡毒霉形体(MG)、滑液囊霉形体(MS)、衣阿华霉形体(MI)和火鸡霉形体(MM)的基因文库，设计了4对分别与MG、MS、MI和MM某段基因序列互补的引物，用这4对引物对同一样品中的MG、MS、MI和MM的DNA模板进行多重PCR扩增。结果，均同时得到了4条特异性的大小与试验设计相符的732bp(MG)、207bp(MS)、299bp(MI)、850bp(MM)多重PCR扩增带，而对其他6种禽病病原体的PCR扩增结果均为阴性。敏感性测定结果表明，此多重PCR能同时检出1pg的MG、MS、MI和MM DNA模板。     

应用聚合酶链反应检测绵羊肺炎霉形体

参照已发表的绵羊肺炎霉形体特异性引物序列,合成了1对引物,检测广西分离的绵羊肺炎霉形体菌株以及疑似山羊传染性胸膜肺炎病羊的肺组织。结果显示,经细菌学方法鉴定为绵羊肺炎霉形体的4个菌株均扩增出绵羊肺炎霉形体的基因片段。20份疑似山羊传染性胸膜肺炎病羊的肺组织中有10份为PCR阳性。20份病料中经培养有8份阳性,其中绵羊肺炎霉形体阳性6份。     

聚合酶链反应检测绵羊肺炎霉形体的研究

参照基因库中已发表的绵羊肺炎霉形体Y98株的16SrDNA序列，设计合成了1对引物，建立了聚合酶链反应(PCR)检测绵羊肺炎霉形体的方法。结果显示，所建立的PCR能特异扩增绵羊肺炎霉形体的DNA，而对照的菌株均为阴性；其敏感性可达1Pg。经对绵羊肺炎霉形体分离株HD-1的扩增产物进行测序，并与绵羊肺炎霉形体标准株Y98的16SrDNA序列进行比较，发现有6个碱基的差异。     

鸡源霉形体的分离和鉴定

对乌鲁木齐市2个大型鸡场鸡毒霉形体（Mycoplasma gallisepticum,MG）、滑液囊霉形体（M.synoviae,MS）感染情况用血清平板凝集试验（SPA）进行了血清抽样调查。结果表明，凝集抗体的阳性率分别为66.92%和35.90%，其中商品鸡场MG和MS的阳性率分别为82.50%和52.50%。从凝似MG、MS感染鸡的气管、肺、气囊、鼻裂和跗关节腔分离到19株分离物。经初步鉴定，分离物均为霉形体属成员。用生化和血清学及其他生物学方法，对这些分离物进行了鉴定。结果6株为MG，3株为MS，其余10株也属于霉形体。     

用核酸探针诊断鸡败血霉形体和滑液霉表体感染

用鸡败血霉形体和滑液霉形体种特异性核酸探针检测临床样品，不但能检出霉形体感染，还能对ＭＧ感染和ＭＳ感染进行鉴别诊断。对三种鸡非致病性霉形体进行检表明，没有核酸交叉反应。     

鸡毒霉形体控制的新动向

美国对鸡毒霉形体（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａｇａｌｉｓｅｐｔｉｃｕｍ,ＭＧ）的控制开始于６０年代,主要是在美国农业部开始对家禽实行屠体检查后,因气囊炎导致胴体废弃率较高后进行的。此后,在火鸡和鸡育种群的ＭＧ控制方面取得了显著的进展。美国的志愿ＭＧ控制计划是...     

鸡毒霉形体粘附素

随着霉形体研究的迅速发展，国内外对鸡毒霉形体的研究也较为活跃， 特别在鸡毒霉形体的粘附素方面的研究、对鸡毒霉形体膜蛋白的粘附素MGC1、MGC2、GapA的生化特性、基因组分析、及其在免疫逃逸机制诊断探针方面的研究做了较为详细的综述。     

藏鸡鸡毒霉形体的血清学调查

霉形体又称支原体 ,是一类缺乏细胞壁的原核微生物 ,分类学上属于软皮纲成员。在兽医学上是一类重要的病原微生物 ,对禽类等动物具有广泛的致病性。 2 0 0 2年 4月 ,西藏某些地区鸡发生一种以咳嗽 ,鼻炎 ,打喷嚏 ,呼吸有锣音等呼吸症状为主要特征的疾病。另外 ,还可见到鼻分泌物较多 ,部分鸡出现结膜炎 ,眼中伴有泡沫分泌物 ,产蛋量下降并有死亡现象。经血清学快速诊断为鸡毒霉形体。为了摸清鸡毒霉形体在藏鸡中的感染情况 ,我们应用血清学方法对西藏各地区的藏鸡进行霉形体检测。结果显示我区藏鸡的鸡毒霉形体感染率较高 ,对藏鸡的年龄、性…     

一例鸡毒霉形体病的诊断与体会

岱岳区某规模化鸡场发现疑似毒霉形体病鸡,通过病原分离获得鸡毒霉形体（支原体）,体外抑菌试验结果发现鸡毒霉形体对泰乐菌素、红霉素和北里霉素高度敏感。本研究为该鸡场临床准确用药提供科学指导,对鸡毒霉形体病的准确诊断以及治疗提供一定的理论依据。